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LABORATORIO N.º 02
DOCENTE:
- RAMOS MATÍAS, Pedro
INTEGRANTES:
- ARTETA LAYMITO, Jhosep 20162549B
- FERNÁNDEZ SORÍANO, Luis 20161213K
- MIGUEL DIAZ, Dennis 20161268J
- RONCEROS AGÜERO, Miguel 20164519C
- SILVERA PECHE, Anthony 20164543A
- VEGA VEGA, Daniel 20161177D
ÍNDICE
RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS 3
RESUMEN 4
INTRODUCCIÓN 5
OBJETIVOS 6
MARCO TEÓRICO 6
MATERIALES Y METODOLOGÍA 7
MATERIALES 7
METODOLOGÍA 8
RESULTADOS Y DISCUSIÓN 8
RESULTADOS 8
DISCUSIÓN 9
OBSERVACIONES 10
CONCLUSIONES 11
RECOMENDACIONES 11
APÉNDICE 12
DIAGRAMA DE FLUJO 12
ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS 16
RESUMEN 17
OBJETIVOS 19
MARCO TEÓRICO 19
MATERIALES Y METODOLOGÍA 21
MATERIALES 21
METODOLOGIA 22
RESULTADOS Y DISCUSIÓN 22
RESULTADOS 22
DISCUSIÓN 23
OBSERVACIONES 24
CONCLUSIONES 24
RECOMENDACIONES 24
CUESTIONARIO 25
BIBLIOGRAFÍA 27
APÉNDICE 28
DIAGRAMA DE FLUJO 28
3 Laboratorio N°2: Las enzimas son proteínas
RECONOCIMIENTO
DE PROTEÍNAS
4 Laboratorio N°2: Las enzimas son proteínas
RESUMEN
INTRODUCCIÓN
Las proteínas son las moléculas orgánicas más abundantes en animales y plantas,
azufre y fosforo. Las proteínas son macromoléculas formadas por la unión de unas
Las proteínas de todos los seres vivos están determinadas en su mayoría por su
Las proteínas son unos de los compuestos alimenticios más importantes ya que son las
responsables de suministrar al organismo con las energías que este utilizará cuando
encuentran en una gran cantidad de alimentos que provienen tanto animales como de
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Identificar la presencia de las proteínas y comprobar el funcionamiento de las enzimas
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
a) Reconocer diferentes tipos de proteínas.
b) Reconocer el funcionamiento de la amilasa, la papaína y la catalasa
MARCO TEÓRICO
Las proteínas son moléculas biológicas que constan de uno o más polipéptidos, o
cadenas de aminoácidos polimerizados, sus propiedades químicas y físicas dependen
de estos. Una célula puede contener docenas de distintos aminoácidos, pero sólo 20 de
ellos, los aminoácidos “estándar”, suelen encontrarse en las proteínas. Un aminoácido
es una molécula pequeña que contiene un grupo amino (–NH3+) y un grupo carboxilato
(–COO–), así como una cadena lateral de estructura variable, llamada grupo R. Los
aminoácidos difieren en sus características químicas según el grupo radical R, entre
estas tenemos:
● Aminoácidos hidrófobos: Tienen cadenas laterales esencialmente no polares
que interactúan de manera muy débil o no lo hacen con el agua. casi siempre se
localizan en el interior de la molécula, entre otros grupos hidrófobos Y dado que
carecen de grupos funcionales reactivos, las cadenas laterales hidrófobas rara
vez participan en la mediación de reacciones químicas.
● Aminoácidos polares: Pueden interactuar con agua porque contienen grupos
formadores de enlaces de hidrógeno.
● Aminoácidos con carga: Son cuatro, el aspartato (Asp) y glutamato (Glu), que
portan grupos carboxilato, tienen carga negativa. Lisina (Lys) y arginina (Arg)
tienen carga positiva. Suelen situarse en la superficie de la proteína, donde los
grupos con carga pueden rodearse de moléculas de agua o interactuar con otras
sustancias polares o iónicas.
● Simples: Cuando sólo está formado por aminoácidos. Ej: Tubulinas, albúminas,
actinas.
● Conjugadas: Referido a las que poseen otro compuesto denominado prostético.
Ej: Hemoproteínas, metaloproteínas.
Las funciones que las proteínas desempeñan en la biología son diversas y esenciales
entre ellas tenemos:
● Estructural: Son parte fundamental de las membranas celulares y de las
estructuras de sostén de estas.
● Transportadores: Sirven como transporte de nutrientes y diversas sustancias. Ej:
Hemoglobina, hemocianina, permeasas.
● Catalíticas: Las proteínas que funcionan como enzimas, permiten acelerar
reacciones químicas. Ej: Catalasas, peroxidasas.
● Hormonales: Son proteínas que regulan actividades celulares. Ej: Insulina,
glucagón, parathormona.
● Inmunológicas: Proteínas con funciones de defensa. Ej: Inmunoglobulinas y
anticuerpos.
● Contráctiles: A nivel muscular que permite la locomoción de múltiples seres. Ej:
Actina, miosina.
MATERIALES Y METODOLOGÍA
MATERIALES
Tabla 1 Material, Equipos y Reactivos
Materiales
Materiales Equipos Reactivos
Biológicos
● Tubos de ensayo ● Claras de ● Mechero ● Acetato de plomo
● Pinzas (con o sin huevo de Bunsen al 5%
dientes) y de gallina ● Cámara ● Ácido nítrico
madera ● Ácido acético concentrado
extractora
● Gradillas (vinagre) (HNO3)
● Vasos de 200 y ● Alcohol
250 ml ● Almidón
● Pipetas ● Hidróxido de sodio
● Trípode de metal al 20%
● Frascos gotero ● Hidróxido de sodio
al 40%
● Sulfato cúprico al
1%
8 Laboratorio N°2: Las enzimas son proteínas
METODOLOGÍA
➢ Experimento Nº 01: Reacción de Biuret
✓ Colocar en un tubo de ensayo 3 ml de solución de la muestra (clara de
huevo en suspensión)
✓ Añadir 2 ml de solución de hidróxido de sodio al 20%
✓ Colocar a continuación 4 a 5 gotas de solución de sulfato cúprico al 1%
✓ Se produce una coloración. ¿En qué momento la reacción es positiva?
✓ Observa, dibuja y explicar.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
RESULTADOS
➢ Experimento Nº 01: Reacción de Biuret
DISCUSIÓN
➢ Experimento Nº 01: Reacción de Biuret
Cuando la clara de huevo que vendría a ser una proteína se le agrega un
álcali, esta forma la sustancia denominado Biuret, el cual se puede observar
que dio una reacción positiva debido a la coloración violeta indicando la
presencia de enlaces peptídicos, el cual confirma la presencia de proteínas.
OBSERVACIONES
➢ Experimento Nº 01: Reacción de Biuret
En la prueba de biuret se observó una coloración violeta lo que nos indica
que es una reacción positiva.
CONCLUSIONES
➢ Experimento Nº 01 y N° 02: Reacción de Biuret y Reacción de
Xantoproteica
Se comprobó que tanto la reacción de Biuret como la reacción de
xantoproteica fueron eficaces para identificar la presencia de enlaces
peptídicos (presencia de proteínas) en la clara de huevo.
RECOMENDACIONES
• Cuando se vaya a trabajar con el acetato de plomo tener sumo cuidado y ponerlo en
una cámara extractora ya que es un ácido fuerte y si inhalamos, tenemos contacto
directo con esta sustancia o entra en contacto con los ojos, este podría causar
severos daños a nuestra salud.
• Controlar de manera adecuada las cantidades de reactivo añadidas y la velocidad a
que aumenta la temperatura una muestra, debido a que puede generar alteración
en los resultados obtenidos.
12 Laboratorio N°2: Las enzimas son proteínas
APÉNDICE
DIAGRAMA DE FLUJO
➢ Experimento Nº 01: Reacción de Biuret
Reacción de Biuret
suspensión,
Colocar a continuación 4 a 5
← añadir 2 mL de hidróxido
gotas de solución de sulfato
de sodio al 20%
cúprico al 1%
Reacción de xantoproteica
suspensión,
Añadir 1 ml de
HNO3 concentrado
← Añadir 5 gotas de ácido ← Añadir 5 gotas ← Añadir 5 gotas de ácido ← Añadir 5 gotas
acético de alcohol 96 % acético de alcohol 96 %
suspensión,
← añadir 3 mL de hidróxido
Añadir 10 gotas de solución
de sodio al 20%
de acetato de plomo al 5%
ACTIVIDAD DE LAS
ENZIMAS
17 Laboratorio N°2: Las enzimas son proteínas
RESUMEN
INTRODUCCIÓN
Las enzimas son compuestos proteicos muy importantes ya que permiten que se
realicen una serie de reacciones químicas en los seres vivos de los cuales depende la
vida y salud, a través de los procesos bioquímicos que ocurren en el organismo. Estas
llevan a cabo funciones relacionadas con la salud y la enfermedad.
En la presente práctica de laboratorio realizaremos diferentes pruebas y reacciones que
nos ayuden a conocer el funcionamiento de las enzimas, con un comportamiento
generalmente de catalizador. Las enzimas nos ayudan a degradar sustancias muchas
veces para que no sean toxicas en el organismo como la catalasa que degrada el
peróxido de hidrogeno en agua y oxígeno, o la papaína y que degrada los polipéptidos
ayudando a asimilar mejor los alimentos y los nutrientes que contiene, y por último la
amilasa que nos ayuda a degradar los carbohidratos que consumimos.
19 Laboratorio N°2: Las enzimas son proteínas
OBJETIVOS
➢ Objetivo General
Identificar la presencia de las proteínas y comprobar el funcionamiento de las enzimas
➢ Objetivo Especifico
Reconocer el funcionamiento de la amilasa, la papaína y la catalasa.
MARCO TEÓRICO
LAS ENZIMAS
Los enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas en los seres vivos. Los
enzimas son catalizadores, es decir, sustancias que, sin consumirse en una reacción,
aumentan notablemente su velocidad. No hacen factibles las reacciones imposibles,
sino que solamente aceleran las que espontáneamente podrían producirse. Ello hace
posible que en condiciones fisiológicas tengan lugar reacciones que sin catalizador
requerirían condiciones extremas de presión, temperatura o pH.
Prácticamente todas las reacciones químicas que tienen lugar en los seres vivos están
catalizadas por enzimas. Los enzimas son catalizadores específicos: cada enzima
cataliza un solo tipo de reacción, y casi siempre actúa sobre un único sustrato o sobre
un grupo muy reducido de ellos. En una reacción catalizada por un enzima:
Las propiedades de los enzimas derivan del hecho de ser proteínas y de actuar como
catalizadores. Como proteínas, poseen una conformación natural más estable que las
demás conformaciones posibles. Así, cambios en la conformación suelen ir asociados
en cambios en la actividad catalítica. Los factores que influyen de manera más directa
sobre la actividad de un enzima son:
a) PH
Los enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -NH2;
tiol -SH; imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus aminoácidos. Según el pH
del medio, estos grupos pueden tener carga eléctrica positiva, negativa o neutra.
Como la conformación de las proteínas depende, en parte, de sus cargas eléctricas,
20 Laboratorio N°2: Las enzimas son proteínas
b) TEMPERATURA
En general, los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas: por
cada 10ºC de incremento, la velocidad de reacción se duplica. Las reacciones
catalizadas por enzimas siguen esta ley general. Sin embargo, al ser proteínas, a
partir de cierta temperatura, se empiezan a desnaturalizar por el calor. La
temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima.
Por encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de la reacción debido a
la temperatura es contrarrestado por la pérdida de actividad catalítica debida a la
desnaturalización térmica, y la actividad enzimática decrece rápidamente hasta
anularse.
c) COFACTORES
A veces, un enzima requiere para su función la presencia de sustancias no proteicas
que colaboran en la catálisis: los cofactores. Los cofactores pueden ser iones
inorgánicos (Fe++, Mg++, Mn++, Zn++, etc.). Casi un tercio de los enzimas
conocidos requieren cofactores. Cuando el cofactor es una molécula orgánica se
llama coenzima. Muchos de estas coenzimas se sintetizan a partir de vitaminas.
Cuando los cofactores y las coenzimas se encuentran unidos covalentemente al
enzima se llaman grupos prostéticos. La forma catalíticamente activa del enzima,
es decir, el enzima unido a su grupo prostético, se llama holoenzima.
Las enzimas al ser un grupo de gran importancia se ha dividido en tipos respecto a
la función que realizan.
ÓXIDO-REDUCTASAS
Estas enzimas están vinculadas con las reducciones y oxidaciones biológicas que
intervienen en los procesos de fermentación y de respiración. Estas son esenciales en
ciertas cadenas metabólicas como por ejemplo la escisión enzimática de la glucosa y
en la producción de ATP.
TRANSFERASAS
Estas enzimas son las encargadas de catalizar la transferencia de una porción de
molécula a otra. Además, estas enzimas son las que actúan sobre distintos sustratos,
transfiriendo glucósido, sulfató, amina, aldehído, entre otros grupos.
21 Laboratorio N°2: Las enzimas son proteínas
HIDROLASAS
Estas enzimas actúan sobre las moléculas de protoplasma, tales como las de grasas,
de glicógeno y de proteínas. El acto de catalizar es realizado en la escisión de los
enlaces de los átomos de nitrógeno y carbono o bien, de carbono y oxígeno. Al mismo
tiempo se adquiere la hidrólisis de las moléculas de agua de la que devienen las
moléculas de hidrógeno y oxidrilo, que se unen a las moléculas resultantes de la ruptura
de enlaces de las moléculas mencionadas. Dentro de estas enzimas se encuentran
proteínas como la quimiotripsina, la tripsina y la pepsina que son esenciales en la
digestión ya que son las que hidrolizan enlaces estéricos, glucosídicos y pépticos.
ISOMERASAS
Estas son las que actúan sobre ciertas sustancias a las que transforman en otras
isómeras, lo que significa que tienen la misma fórmula empírica pero un desarrollo
diferente.
LIASAS
Estas enzimas son las que actúan sobre los enlaces entre los átomos de carbono,
carbono y oxígeno, carbono y azufre o carbono y nitrógeno, escindiéndolos.
LIGASAS
Estas enzimas en cambio, son las que permiten que dos moléculas se unan. Esto se da
al mismo tiempo en que el ATP se degrada y libera energías que son las necesarias
para que dichas moléculas puedan unirse.
PAPAINA
La papaína es una potente enzima digestiva que frecuentemente se encuentra en la
fruta de la papaya y se extrae de ella. También es conocida como proteinasa de papaya.
La enzima de la papaya, la papaína, desempeña una función fundamental en el proceso
digestivo al participar en la descomposición de fuertes fibras de proteína. Por este
motivo en América del Sur, de donde es originaria, los beneficios de la Papaína se han
utilizado comúnmente como apoyo digestivo para la ingestión de carne. (Dr. Edward
Group DC, 2013)
MATERIALES Y METODOLOGÍA
MATERIALES
METODOLOGIA
➢ Experimento Nº 01: Actividad de las amilasas
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
RESULTADOS
➢ Experimento Nº 01: Actividad de las amilasas
Tabla 5 Resultado obtenidos de la prueba con el Lugol
Muestras Lugol
Almidón al 1% (2 ml) Azul violeta
Almidón al 1% (2 ml) + 2 ml de saliva Color del lugol
DISCUSIÓN
➢ Experimento Nº 01: Actividad de las amilasas
El cambio de color de la muestra de lugol con almidón se debió a que es un
polisacárido que al reaccionar con el reactivo cambia de coloración mientras
que en la muestra de almidón con saliva la saliva contiene una enzima
amilasa que tiene la función de hidrolisis y hace que el almidón forma
azucares simples lo cual al reactivo de lugol da una nuestra negativa.
OBSERVACIONES
➢ Experimento Nº 01: Actividad de las amilasas
En la muestra de almidón se presenció que al reaccionar con el lugol se
cambió a un tono azul oscuro mientras que la saliva más almidón el color
sigue siendo el del lugol.
CONCLUSIONES
➢ Experimento Nº 01: Actividad de las amilasas
El lugol al reaccionar con la muestra de almidón cambio de coloración a un
tono azul oscuro (azul violeta) lo que nos dice una reacción positiva de la
prueba y negativa (mantuvo el mismo color del lugol) a la muestra que tiene
el almidón más la saliva.
RECOMENDACIONES
• Es necesario dejar el tiempo adecuado para que la enzima papaína actué, 25
min mínimo, de esta manera se pobra obtener el resultado esperado.
• Tener en cuenta la fecha del lugol ya que lo preferible es un máximo de 4 meses
de duración de ahí volver a hacer el reactivo ya que se deteriora y puede
malograr la prueba a realizar.
25 Laboratorio N°2: Las enzimas son proteínas
También ver cuánto es la concentración del reactivo del lugol ya que si está muy
concentrado no se podrá apreciar el cambio de coloración de la muestra y tendrá que
destilarse con agua.
CUESTIONARIO
1. ¿Qué se produce la reacción de Biuret?
Al estar en contacto la proteína de la clara de huevo con un reactivo químico, como el
de hidróxido de sodio al 20% y solución de sulfato cúprico al 1% se da un cambio de
estructura en la clara de huevo, dando la consistencia y color que se observa en un
huevo cocinado, pero al inicio es lento, observándose primero la formación de una capa
de color blanco y luego una coloración violeta, indicando una prueba positiva.
2. ¿Qué tipo de proteínas son las que dan reacción xantoproteíca positiva?
El tipo de proteínas que responde a una reacción xantropoteica positiva son aquellas
que poseen grupos aromáticos derivados del benceno como la tirosina y el triptófano,
cuando las proteínas son tratadas con ácido nitrico concentrado, esta reacción al ser
positiva responde a la formación de un compuesto aromático nitrado de color amarillo,
la intensidad del color amarillo se intensifica cuando la reacción ocurre en una solución
básica. Podemos notar está reacción en proteínas como la ovoalbumina y caseina.
3. ¿A qué se denomina coagulación de las proteínas y cómo se produce?
La coagulación de proteínas o desnaturalización es un proceso por el cual se altera el
orden de las estructuras cuaternaria, terciaria y secundaria de organización de las
proteínas, al romperse los enlaces e interacciones (fuerzas intermoleculares de Van der
Waals) entre ellas. Este es un proceso irreversible y se produce al someter a las
proteínas a altas temperaturas y/o hacerlas reaccionar con ácidos, alcoholes y
soluciones salinas.
4. ¿En qué lugar se encuentra la amilasa?
La amilasa es una enzima que ayuda a digerir los carbohidratos. Se produce en el
páncreas y en las glándulas salivales. Cuando el páncreas está enfermo o inflamado,
se libera amilasa en la sangre.
5. ¿Cuál es la enzima que se encuentra en el hígado?
Tabla 8 Enzimas encontradas en el Hígado
interconversiones de azucares, de
aminoácidos, etc Transaminasas
Verifican reacciones de hidrólisis con Glucosidasas
la consiguiente obtención de
monómeros a partir de polímeros. Lipasas
Suele ser de tipo digestivo, por lo que
Hidrolasas normalmente actúan en primer lugar Peptidasas
Esterasas
Fosfatasas
Actúan sobre determinadas moléculas Isomerasas de azúcar
obteniendo de ellas sus isómeros de
Isomerasas función o de posición. Suelen actuar Epimerasas
en procesos de interconversion
Mutasas
Realizan la degradación o síntesis
(entonces se llaman sintetasas) de los Aldolasas
enlaces denominados fuertes sin ir
Liasas
acoplados a sustancias de alto valor
energético. Decarboxilasas
Actualmente caso del aporte de las enzimas digestivas es pobre, debido a que la
mayoría de alimentos están en cocción, esto hacen que pierdan sus propiedades
catalíticas. Ante su gran importancia en distintos factores, existes suplementos de
enzimas que pueden ayudan las deficiencias, sin embargo, el consumo excesivo de las
enzimas puede generar cierto perjuicios (dolores de la cabeza, hinchazones, los gases,
acné, etc).
Por lo tanto sin estas intervenciones de las enzimas en el cuerpo humano, este dejaría
de funcionar.
8. ¿Cuáles son las principales propiedades de la papaína y para qué se utiliza?
La papaína es una enzima digestiva la cual rompe los enlaces peptídicos de las
proteínas y las convierte en compuestos más simple (monómeros) como los son los
aminoácidos.
Entre sus propiedades encontramos:
Propiedad digestiva al descomponer las proteínas en aminoácidos hace que aumente
la absorción de nutrientes de alimentos a base de proteínas. Además sirve como apoyo
enzimático para órganos como intestino, estómago y páncreas.
Propiedad antisépticas y antiinflamatorias, se realizan estudios para su aplicación en la
curación de quemaduras, irritaciones y heridas.
Ayuda al sistema inmune en el tratamiento de cáncer.
Resistente a la inflación puede ayudar a reducir la inflamación de articulaciones y de la
próstata.
Se utiliza en los procesos industriales para ablandar la carne y también en la
clarificación de cervezas.
BIBLIOGRAFÍA
Dr. Edward Group DC, N. D. (2013). Los Beneficios de la Papaína. Global Healing Center.
(https://www.globalhealingcenter.net/salud-natural/beneficios-papaina.html)
Díaz, A. (2003). La Estructura de las Catalasas. Índice General del Quinto Quinquenio, 76-84.
Oswaldo, G. V., Roberto, L. C., Isabel, O. P., Lariza, S. P., Cruz, G. M., & Karina, P. C. (3 de Abril
de 2011). El Higado. Obtenido de Blogger:
http://elhigaditoomesa2sextod.blogspot.com/2011/04/las-enzimas-mas-importantes-
en-el.html
Pratt, C., & Conerly, K. (2012). Metabolismo de los Lipidos. En C. Pratt, & K. Conerly,
Bioquímica, primera edicion (págs. 433-450). El Manual Moderno, S.A. de C.V.
28 Laboratorio N°2: Las enzimas son proteínas
APÉNDICE
DIAGRAMA DE FLUJO
➢ Experimento Nº 01: Actividad de las amilasas
Lugol
Muestra de Muestra de
almidón almidón con
lugol
29 Laboratorio N°2: Las enzimas son proteínas
Actividad de la papaína
En un tubo agregar
4 gotas de reactivo
Biuret
En un tubo agregar
2ml de líquido de
semillas de papaya y
dejar reposar durante
25 min y luego agregar
4 gotas de reactivo
30 Laboratorio N°2: Las enzimas son proteínas
← Separar en
Tubo de ensayo
← añadir 2 mL de
Agua oxigenada
← a cada muestra