UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PRACTICA Nª 4

CATÁLISIS ENZIMATICA E INORGÀNICA

OBJETIVOS:
1. Comparar la acción catalítica de la enzima catalasa, con la de un
catalizador inorgánico como el bióxido de manganeso (MnO 2) al
descomponer en peróxido de hidrógeno (H2O2) a temperatura ambiente.
2. Observar el efecto de la temperatura sobre la acción catalítica de una
enzima y comparar el mismo efecto de temperatura sobre un catalizador
inorgánico.
3. Observar la acción de un inhibidor sobre la actividad catalítica de una
enzima.

ASPECTOS TEÓRICOS
Las enzimas son catalizadores biológicos de estructura proteica y producidos
por los mismos organismos que las utilizan para realizar sus propios procesos
metabólicos. La acción catalítica de una enzima está sometida a la influencia
de factores físicos como son, el calor, las radiaciones o de factores químicos
como cambios en el pH y en la concentración de la enzima, sustrato y la
presencia de inhibidores. En cambio los catalizadores inorgánicos, en algunos
casos, no son afectados por factores físicos como el calor, por tanto, pueden
catalizar una determinada reacción pese a cambios en la temperatura.
La reacción que se presenta en la experiencia a realizar se puede describir en
la siguiente forma:

catalasa
H2O2 H2O + O2

MnO2
H2O2 H2O + O2

MATERIALES REACTIVOS
6 tubos de ensayo Peroxido de Hidrógeno (H2O2) al 3%
2 pipetas de 5 y 10 ml Bióxido de Manganeso (MnO2)
Beaker de 400ml Cianuro de Sodio (NaCN)
Calentador Papas como fuente de catalasa (traer)
Pinza para tubos de ensayo Sangre como fuente de catalasa (extraerse)
Gotero Agua destilada
Probeta de 100ml Hielo (traer de la casa).
Espátula Gradill
Mortero con mano
Cuchilla (traer de la casa) Gasa (traer).
PARTE EXPERIMENTAL

1. Rotular tres tubos de ensayo y agregar a cada uno las siguientes sustancias:

Tubo Nº1 1ml de sangre al 10%

Tubo Nº2: 1 ml de extracto de papa.
Tubo Nª3: Una pequeña porción de MnO2

2) Agregar a cada uno de los tubos 2ml de H2O2 al 3%. Observar la intensidad
de la reacción por el burbujeo del oxígeno y la liberación de calor. Compare el
nivel alcanzado por las burbujas en cada uno de los tubos y registre en orden
creciente la actividad catalítica con base en este parámetro.

3) Prepare 3 tubos de acuerdo al numeral 1 y Colóquelos en un baño con

agua a ebullición durante diez minutos, retirarlos y dejar en reposo dentro de
un baño de agua a temperatura ambiente durante 10 min. Adicionar a cada
tubo 2ml de H2O2 al 3%. Compare el nivel alcanzado por las burbujas en cada
uno de los tubos y registre en orden creciente la actividad catalítica con base a
este parámetro.

4) Prepare nuevamente 3 tubos de acuerdo al numeral 1 y colóquelos en un

baño de hielo durante 10 min. Adicionar a cada tubo 2 ml de H2O2 al 3%.
Compare el nivel alcanzado por las burbujas en cada uno de los tubos y
registre en orden creciente la actividad catalítica con base en este parámetro.

5) Prepare nuevamente 3 tubos de acuerdo al numeral 1, adicione a cada tubo

uno 6 gotas de NaCN y dejar en reposo durante 5 min, luego adicione 2ml de
H2O2 al 3% a cada tubo. Compare el nivel alcanzado por las burbujas en cada
uno de los tubos y registre en orden creciente la actividad catalítica con base
en este parámetro.

Resultados:
 A temperatura ambiente
1- Tubo Nº1 1ml de sangre al 10%
2- Tubo Nº2: 1 ml de extracto de papa.
3- Tubo Nª3: Una pequeña porción de MnO2

A los tres tubos se le va adicionar peróxido de hidrogeno, se deja a

temperatura ambiente para ver qué pasa se producirá un burbujeo en las tres
muestras.

La reacción de la sangre Fue de un 5% de burbujeo

En la papa Tuvo un 3% de burbujeo en la reacción
En el dióxido de Tuvo un 4% de burbujeo de la reacción
manganeso
  A temperatura alta
1- Tubo Nº1 1ml de sangre al 10%
2- Tubo Nº2: 1 ml de extracto de papa.
3- Tubo Nª3: Una pequeña porción de MnO2

A estas tres muestras se calientan en el baño de maría y se espera 5 minutos

para ver qué pasa, después se le adiciona peróxido de hidrogeno y se va a dejar
para ver que reacción tiene.

La papa y la sangre se le vieron afectada su estructura enzimática y por eso

tuvieron un 2% de burbujeo de su reacción
El dióxido de El contrario el dióxido de manganeso no se vio afectado y
manganeso tuvo como un 5% de burbujeo en su reacción

 Temperatura baja
1- Tubo Nº1 1ml de sangre al 10%
2- Tubo Nº2: 1 ml de extracto de papa.
3- Tubo Nª3: Una pequeña porción de MnO2

Se colocan las tres en un baño de hielo por 5 minutos luego se le

adiciona peróxido de hidrogeno y luego se ve a que altura llega el
burbujeo.

La sangre Tuvo la máxima altura que fue de 4% de

burbujeo
La papa Tuvo un 1% de altura y de burbujeo
El dióxido de Tuvo un 3% de altura y de burbujeo
manganeso


1- Tubo Nº1 1ml de sangre al 10%
2- Tubo Nº2: 1 ml de extracto de papa.
3- Tubo Nª3: Una pequeña porción de MnO2

Se les agrega a las tres muestras cianuro de sodio que es

veneno se deja en reposo 2 minutos y después se le adiciona
peróxido de hidrogeno y se ve la reacción o el burbujeo que hubo.

En la sangre y en la papa Se vio afectada la actividad enzimática

En el dióxido de manganeso Fue lo contrario no se vio afectada su actividad
enzimática porque es un catalizador inorgánico
 PREGUNTAS

1. Explique por qué el captopril y el enalopril son ejemplos de

inhibidores competitivos de la enzima conversora de la
angiotensina.

Los inhibidores de la enzima convertidor de angiotensina (IECA) son una clase de

medicamentos que se emplean principalmente en el tratamiento de la hipertensión
arterial, de la insuficiencia cardíaca crónica y también de la Enfermedad renal
crónica y forman parte de la inhibición de una serie de reacciones que regulan la
presión sanguínea: el sistema renina angiotensina aldosterona. Los inhibidores
ECA como el captopril, el enalapril y sus sustancias derivadas tienen una
estructura similar a la del péptido BPP5a o péptido potenciador de la bradiquinina.
Se ha descubierto que la secuencia tripartida de triptófano-alanina-prolina formada
por tres aminoácidos y que aparece en el BPP5a es uno de los componentes
activos en las propiedades de estas moléculas. Puesto que el cuerpo elimina con
mucha rapidez el BPP5a y el tripéptido, se han llevado a cabo numerosas
modificaciones en la molécula para prolongar la duración del efecto, entre ellas, se
ha cambiado la secuencia del triptófano- alanina-prolina por una secuencia similar
pero más estable de fenilalanina-alanina- prolina. La aportación de una estructura
análoga al ácido succínico o al ácido glutárico proporcionó más estabilidad y
reforzó las propiedades inhibidoras en la enzima de conversión de la angiotensina.
 2. Las granadas son fabricadas por la industria militar con un
dispositivo especial de seguridad para que no exploten en el sitio
donde son fabricadas, si no durante el combate, ¿Qué tipo de
enzimas son fabricadas por ciertos órganos que tienen un
comportamiento similar al de las granadas? De ejemplos.

Las transformaciones que experimentan los alimentos en el sistema digestivo

están asociadas a un tipo específico de enzima. Esas son las llamadas enzimas
digestivas. Cada tipo de enzima involucrada en la digestión de los alimentos
trabaja en condiciones concretas de acidez. En los casos donde no existe este
contexto no se producen adecuadamente las reacciones químicas de los procesos
digestivos y los alimentos quedan parcialmente degradados.

3. Por qué carece de importancia la lipasa gástrica en los procesos

digestivos del estómago de los adultos y en cambio es importante
en el estómago infantil?

En la semana 14 de gestación se habrán desarrollado glándulas gástricas, un

esbozo del píloro y el fundus, para la semana 20 el estómago tiene señales de
motilidad y secreción. En el estómago distinguiremos cuatro capas: · Peritoneo o
capa sensoria · Capa muscular que contiene tejidos longitudinales, circulares y
oblicuos · Capa submucosa · Capa mucosa propiamente dicha Estas capas
segregan: líquidos gástricos, como el ácido clorhídrico (ClH), pepsina, lipasa
gástrica, gastrina, factor intrínseco, resina y moco. La lipasa gástrica, es para la
disgregación y digestión de las grasas, este proceso se efectúa través de la lipasa
sublingual, la enteraza pre gástrica y la lipasa gástrica propiamente, son
glicoproteínas de bajo PH, muy bajo, que inhiben las sales biliares con autonomía
de la acción colipasica pero de alta acción sobre los triglicéridos en la grasa
Láctea. Por el hecho de la lipasa ser la enzima que degrada las grasas para
obtener nutrientes, en la etapa de vida para el niño es lo más primordial la cual lo
lleva a la adaptación de una nueva forma de nutrición.

4. Cuál es la importancia médica de las enzimas? De por lo menos un

ejemplo concreto.

Sin enzimas, no sería posible la vida que conocemos. Igual que la bio-catálisis que
regula la velocidad a la cual tienen lugar los procesos fisiológicos, las enzimas
llevan a cabo funciones definitivas relacionadas con salud y la enfermedad. En
tanto que, en la salud todos los procesos fisiológicos ocurren de una manera
ordenada y se conserva la homeostasis, durante los estados patológicos, esta
última puede ser perturbada de manera profunda. Por ejemplo, el daño tisular
grave que caracteriza a la cirrosis hepática puede deteriorar de manera notable la
propiedad de las células para producir enzimas que catalizan procesos
metabólicos claves como la síntesis de urea. La incapacidad celular para convertir
el amoniaco tóxico a urea no tóxica es seguida por intoxicación con amoniaco y
por ultimo coma hepático. Un conjunto de enfermedades genéticas raras, pero con
frecuencia debilitantes y a menudo mortales, proporciona otros ejemplos
dramáticos de las drásticas consecuencias fisiológicas que pueden seguir al
deterioro de la actividad enzimática, inclusive de una sola enzima. Después del
daño tisular grave (por ejemplo, infarto del miocardio o pulmonar, trituración de un
miembro) o siguiendo a multiplicación celular descontrolada (por ejemplo,
carcinoma prostático), las enzimas propias de tejidos específicos pasan a la
sangre. Por lo tanto, la determinación de estas enzimas intracelulares en el suero
sanguíneo proporciona a los médicos información valiosa para el diagnóstico y el
pronóstico.

5. Defina que son: Zimógenos, Isozimas, Inhibidores acompetitivos.

 Los zimógenos: Son proteínas precursoras sin actividad enzimática, su

activación es un proceso catalizado por encimas promoviendo la hidrólisis de uno
o más enlaces peptídicos específicos en el zimógeno. Muchos procesos biológicos
están regulados por esta ruptura proteolítica como la digestión o la coagulación
sanguínea. La síntesis de los zimógenos en forma inactiva permite almacenarlos
de forma segura hasta que son requeridos y evitar así que las proteínas ejerzan
una actividad peligrosa en un lugar y momento equivocado.

 Isozimas o Isoenzimas: Son proteínas con diferente estructura pero que

catalizan la misma reacción. Con frecuencia, las Isoenzimas son oligomeros de
diferentes cadenas peptídicas, y usualmente difieren en los mecanismos de
regulación y en las características cinéticas. Desde el punto de vista fisiológico, la
existencia de Isoenzimas permite que haya enzimas similares con diferentes
características, “personalizadas” de acuerdo a los requerimientos específicos del
tejido o a determinadas condiciones metabólicas. Un ejemplo de las ventajas que
ofrecen las Isoenzimas al permitir un ajuste “fino” del metabolismo, en diferentes
condiciones metabólicas

 Los inhibidores ó sustractos enzimáticos son moléculas que se unen a enzimas y

disminuyen su actividad. Puesto que el bloqueo de una enzima puede matar a un
organismo patógeno o corregir un desequilibrio metabólico, muchos
medicamentos actúan como inhibidores enzimáticos. También son usados como
herbicidas y pesticidas. Sin embargo, no todas las moléculas que se unen a las
enzimas son inhibidores; los activadores enzimáticos se unen a las enzimas e
incrementan su actividad. La unión de un inhibidor puede impedir la entrada del
sustrato al sitio activo de la enzima y/u obstaculizar que la enzima catalice su
reacción correspondiente. La unión del inhibidor puede ser reversible o
irreversible. Normalmente, los inhibidores irreversibles reaccionan con la enzima
de forma covalente y modifican su estructura química a nivel de residuos
esenciales de los aminoácidos necesarios para la actividad enzimática. En
cambio, los inhibidores reversibles se unen a la enzima de forma no covalente,
dando lugar a diferentes tipos de inhibiciones, dependiendo de si el inhibidor se
une a la enzima, al complejo enzima-sustrato o a ambos.
 6. Qué diferencias hay entre inhibidores orgánicos e inorgánicos?

Pues los orgánicos son compuestos que tienen en su estructura átomos de

carbono y los inorgánicos no los poseen.

7. Qué función cumplen las vitaminas hidrosolubles en las reacciones

catalizadas por enzimas?.

Vitaminas hidrosolubles: Son de naturaleza polar y por lo tanto solubles en agua,

su exceso no resulta toxico ya que se eliminan por la orina. Actúan como
coenzimas o forman parte de ellos. Se convierten en el organismo en cofactores
de enzimas (grupos prostéticos o coenzimas) del metabolismo. Como coenzimas
actúan en las reacciones Enzimáticas como dadores o receptores de dichos
grupos químicos; pueden intervenir en las reacciones de óxido reducción o
intervienen en reacciones de transferencia de grupos químicos.

8. Explique cómo se da el proceso de regulación de la actividad

enzimática en el organismo?.

En los humanos, la concentración del sustrato depende en la fuente de comida y

usualmente no es un mecanismo fisiológico importante para la regulación de rutina
de la actividad Enzimática. Por otro lado, la concentración de la enzima es
modulada continuamente en respuesta a las necesidades fisiológicas. La síntesis
y degradación de las enzimas son mecanismos relativamente lentos para regular
la concentración de las enzimas, con respuesta de horas, días o aun semanas. La
activación de pro enzimas es un método más rápido para incrementar la actividad
Enzimática pero, como mecanismo regulador, tiene la desventaja de no ser un
proceso reversible. Generalmente la pro enzimas se sintetizan en abundancia, se
almacenan en gránulos secretorios y se activan covalentemente luego de que han
sido liberadas de su sitio de almacenamiento. Algunos ejemplos de pro enzimas
importantes son el pepsinógeno, tripsinógeno, y quimiotripsinógeno, que dan
origen a enzimas proteolíticas digestivas. De manera similar, muchas de las
proteínas involucradas en la cascada de la coagulación se sintetizan como pro
enzimas. Otras proteínas importantes, como las hormonas peptídicas y el
colágeno, también se derivan por modificaciones covalentes de sus precursores.
Otro mecanismo para regular la actividad Enzimática es secuestrar las enzimas en
compartimientos en donde el acceso a sus sustratos es limitado. Por ejemplo, la
proteólisis de proteínas celulares y de los glicolípidos por las enzimas
responsables de su degradación se controla secuestrando a estas enzimas dentro
de los lisosomas.
 BIBLIOGRAFIA:
 http://es.wikipedia.org/wiki/Inhibidor_de_la_enzima_convertidora_de_an
giotensina
 http://www.emagister.com/curso-lactancia-materna-beneficios-leche-
materna/digestion-bebes-boca-saliva-estomago
 https://es.answers.yahoo.com/question/index?qid=20110413092603AAt 26hb
 http://ysandrea.lacoctelera.net/post/2007/05/08/enzimas-y-vitaminas
http://www.almeriastella.es/imagenes/noticias/documentos/609.pdf
 http://themedicalbiochemistrypage.org/es/enzyme-kinetics- sp.php#regulation