A partir del cultivo de E.
coli,
después de 12 horas de
incubación a 37°C realizar
diluciones seriadas con 500
µl de hasta 10^-8.
Mezclar 2000 µl del
cultivo de E. coli con
2000 µl del caldo BHI
con glicerol al 50 %
(v/v)
Realizar el recuento de las
cajas sembradas después del
periodo de incubación
Sembrar en superficie 10 µl
de agar BIH de las diluciones
10^-4 - 10^-8.
Distribuir la mezcla
anterior en 3 eppendorf
de 1500 µl.
Descongelar rapidamente los
cultivos a las diferentes
temeparutas
Incubar por 24 horas a 37°C
y realice recuentos.
Rotular para las 3
temperaturas de -20°C, -
7°C y temperatura
ambiente
Sembrar en la superficie 100
µl de los cultivos de cada
temperatura usando la
dilucion con los resultados
mas favorables de la
población inicial.

A parir del cultivo de
Streptomyces sp en agar
ISP2.
Bajo condiciones de esterilidad
en la caja que contiene el
cultivo de Streptomyces sp y
adicionar 10 ml de solución
salina al 0.85% con Tween 80 al
0.1% (v/v).
Realizar recuento en la camara
de Newbauer de la
concentrada. Conservar está
suspensión en temperatura de
refrigeración. Posterior a la
refrigeración.
Obtener una muestra
utilizando la papeta
pasteur invertida
obteniendo un disco con
el microorganismo
Con ayuda de las perlas y una
aguja de disección desprender
las esporas y transferir esto
nuevamente al tubo de 16x150
mm.
Sembrar en el centro de la caja
de e agar ISP2 el disco
conservado en aceite mineral.
Bajo condiciones de
estarilidad, depositar en
el tubo eppendorf,
taparlo y guardarlo en
refrigeración.
A partir de este tubo realizar
diluciones decimales de 10-1 y
10-2.
Realizar siembra de esporas
conservadas. Incubar por 24 h,
30°C. Observar si se recupera el
microorganismo.