Revista 2014 V18 N1

Año 2014 Volúmen 18 Número 1
BioTecnología,
ISSNAño 2014, Vol.
0188-4786 18 No. 1 1
COMITÉ EDITORIAL
MESA DIRECTIVA Dr. Sergio Sánchez Esquivel

Editor en Jefe
Dr. Gerardo Saucedo Castañeda Instituto de Investigaciones Biomédicas,
Presidente UNAM
Dr. Cristóbal Noé Aguilar González Dr. Luis Bernardo Flores Cotera
Vice-Presidente CINVESTAV
Dra. Romina Rodríguez Sanoja Dr. Fernando Luis García Carreño
Secretaria CIBNOR
Dr. Mauricio Trujillo Roldán Dr. Mariano Gutiérrez Rojas
Tesorero UAM-I
Dr. José Adelfo Escalante Lozada Dra. Romina Rodríguez Sanoja
Subsecretario Instituto de Investigaciones Biomédicas,
UNAM
Dr. Manuel Alejandro Lizardi Jiménez
Vocal Profesional Dra. Sara Solís Pereira
Instituto Tecnológico de Mérida
M. en B. María Teresa Torres Mancera
Vocal Estudiante Dra. Elizabeth Langley McCarron
Instituto Nacional de Cancerología
Dr. Víctor Manuel Loyola

Centro de Investigación Científica de
Yucatán
DISEÑO GRAFICO E IMAGEN
Lic. Nayeli Quinto (SODIO NET)
ISSN 0188-4786, revista cuatrimestral publicada por la Sociedad Mexicana de Biotecnología y

Bioingeniería, A.C. incluida en PERIÓDICA, índice de Revista Latinoamericanas en Ciencias (CICH-
UNAM). Certificado de Licitud de Título en trámite y Certificado de Licitud de Contenido en trámite.
Reserva de derechos de Título04-1999-082516265000-101. Los Conceptos que en ella aparecen son
responsabilidad exclusiva de los autores. Se prohíbe la reproducción total o parcial de su contenido
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BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 2

EDITORIAL
Análisis del Gene ARNr 16S para Rastrear Fuentes de
Contaminación Microbiana en Vegetales
J. Santos García A. 4
INSTRUCCIONES PARA AUTORES 7
ARTÍCULOS
Módulos de Unión a Carbohidratos como Plataformas de
Evolución
Armenta-Jaime Silvia, y Rodríguez-Sanoja Romina 12
Contról Biológico del Chapulín en México

Antonio J. Huerta, Fernando Espinoza, Alejandro Téllez-Jurado,
Alma P. Maqueda Gálvez y Ainhoa Arana-Cuenca 28
EDITORIAL

Análisis del Gene ARNr 16S para Rastrear Fuentes de
Contaminación Microbiana en Vegetales
México es uno de los 10 principales productores de alimentos en el mundo. Con

una variedad de ecosistemas, el país cultiva más de 500 especies vegetales. La
mayor parte de sus tierras de cultivo son de temporal, y sólo un 26 % usan riego,
aunque éstas últimas producen cerca del 60% del valor de la producción. De sus
exportaciones de alimentos, casi dos terceras partes están constituidas por frutas y
verduras frescas, seguida de cárnicos, pescados, café y animales. Nuestro país es
tercero en el mundo después de China y España en la exportación de vegetales, sin
embargo, es número uno en el mundo como exportador de tomate, aguacate, sandía,
y cebolla, número dos como exportador de chiles, pepinos, limón y garbanzos, y
número tres como exportador de vegetales congelados, entre otros productos.
Después del tratado de libre comercio con Estados Unidos y Canadá, las
exportaciones de muchos vegetales a esos países se duplicaron como en el caso del
tomate y en otros se triplicaron como en el caso del chile.
Así, México se ha consolidado como el principal exportador de frutas y verduras a
EUA, el cual representa nuestro principal mercado de exportación para este rubro. Del
2001 al 2011 hubo un incremento del 11% con una tendencia a la alza en la actividad
económica hacia ese país por este rubro. El país exporta a EUA tomate, aguacate,
chiles, uvas, pepinos, melones, fresas, cebollas, espárragos, limones, brócoli y otras
frutas y verduras. Lo anterior representa una fuente de ingresos de gran importancia
para el país.
Desafortunadamente, en EUA se han presentado en años anteriores diversos
brotes de enfermedad causados por productos vegetales de origen mexicano. Estos
brotes han sido originados por varios patógenos. Como ejemplo de estos brotes están
los ocurridos en 1997 causado por el consumo fresas contaminadas con virus de la
Hepatitis A, en 1998 causado por Shigella sonnei y Escherichia coli enterotoxigénica
en perejil, en 2000-2002 por Salmonella Poona en melón, en el 2003 por Hepatitis A
en cebollas, en el 2008 por Salmonella Saint Paul en chile, en el 2011 por Salmonella

EDITORIAL
en papayas y en el 2013 por Cyclospora en ensaladas. Lo anterior no es un indicativo

de que nuestros productos sean de mala calidad, de hecho en estudios realizados en
EUA y Canadá, se ha demostrado que nuestros productos son de igual o mejor
calidad que los producidos en esos países. Sin embargo, el hecho de que ocurran
brotes de enfermedad causados por esos microbios, genera una mala percepción y
ha incidido en el intercambio comercial afectando a nuestros productores.
En general podemos decir que la gran mayoría de los patógenos que causan
enfermedades alimentarias causadas por el consumo de frutas y verduras son
entéricos (fecales). Muchos de estos microbios contaminan esos alimentos a través
de suelo y agua contaminada, heces de animales (ganado, pájaros, reptiles), pobre
higiene y malos hábitos sanitarios de los trabajadores, fertilización inadecuada, y uso
de aguas residuales, entre otros.
Habiendo varias posibles fuentes de contaminación, es necesario rastrear cual es
la causa, para así tomar medidas correctivas y evitar el problema. En años recientes
se ha desarrollado una técnica llamada rastreo de fuente microbiana (microbial source
tracking) utilizada principalmente para determinar la fuente de contaminación fecal de
aguas. Éstas técnicas analizan secuencias de ácidos nucleicos que son únicas en
microorganismos que solo se encuentran en los intestinos de huéspedes específicos
(humano, ganado vacuno, reptiles, etc.)
Una de éstas técnicas involucra el análisis de la orden de Bacteroidales. Estos
microorganismos se pueden considerar como indicadores de contaminación fecal y
rastreables, porque mediante el análisis de marcadores del gen ARNr 16S de
Bacteroidales se puede proporcionar información del tipo de animal huésped que
contaminó el producto, ya que se detectan marcadores específicos del
microorganismo asociado. Los marcadores de Bacteroidales son fácilmente
detectables en muestras ambientales por su abundancia en heces. Otra ventaja que
se tiene al analizar estos microorganismos es que no necesitan cultivarse.

EDITORIAL
Recientemente en un estudio binacional, hemos logrado identificar y cuantificar

genes 16S rDNA de Bacteroidales por qPCR en muestras de suelo, de agua utilizada
para irrigar el campo y lavados de las manos de agricultores y en la superficie de
frutas y verduras, demostrándose la potencialidad del uso de la técnica en productos
frescos bajo un entorno de producción agrícola.
Así las técnicas de biología molecular de DNA están siendo aplicadas para la
mejora de la inocuidad alimentaria de esos productos, funcionando como una
herramienta muy útil para rastrear el origen de la contaminación y así poder reducir
riesgos potenciales, diseñar estrategias para el control de los procesos y evitar la
proliferación de microorganismos patógenos. La aplicación de estas tecnologías en
vegetales podrá servir para aumentar la calidad de los productos vegetales que
nuestro país produce y la mejora de la calidad de vida de quienes los consumen.
Dr. J. Santos García A.

Facultad de Ciencias Biológicas, UANL
santos@microbiosymas.com
http://www.microbiosymas.com/sgarciaenglish.html

Guía de Autores
La revista puede recibir trabajos de investigación original así como de revisión en los campos de la
biotecnología y bioingeniería. Todos los manuscritos serán sujetos a revisión por al menos dos
miembros del Comité Editorial y deberán contar con una recomendación de aceptación para ser
publicados.
Los idiomas de la revista son el Español y el Inglés.
Los trabajos se escribirán en hoja tamaño carta (21.6 cm x 27.6 cm). Los márgenes aplicados a todo
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revisiones en la revista Biotecnología están exentas de costo para los autores.
Cuando corresponda, se recomienda el uso de abreviaturas para referirse a unidades de tiempo (h,
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literatura científica.
Los trabajos de investigación original pueden tocar cualquiera de los diversos campos que cultivan
la biotecnología y la bioingeniería, desde sus aspectos fundamentales hasta las aplicaciones de los
mismos, incluyendo: microbiología, bioquímica y biología molecular, procesos y proyectos, así como
biotecnología marina y biotecnología aplicada a la salud, alimentos, agricultura, veterinaria, enzimas y
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Los trabajos de investigación original serán divididos en las siguientes secciones: Introducción,
Materiales y métodos, Resultados, Discusión, Referencias y Agradecimientos. Las secciones de
Resultados y Discusión pueden presentarse combinadas.
Los trabajos de revisión incluirán el tema y subtemas que a juicio de los autores sean necesarios
para la mejor presentación de la información. Estos trabajos pueden cubrir los siguientes contenidos:
1. ¿Qué es y para qué sirve la Biotecnología?. Es decir: descripciones que ilustren y divulguen los
distintos campos de la biotecnología, sus alcances y limitaciones, su historia y sus perspectivas.
2. Las fronteras de la biotecnología: revisiones de nuevos campos o nuevas aplicaciones de la

biotecnología. Por ejemplo: las perspectivas del uso de los genomas para el desarrollo de nuevas
drogas o para el tratamiento de enfermedades metabólicas. Las perspectivas de la genómica
(estudio sistemático de los genes y sus aplicaciones), la proteómica (predicción de la expresión de
los genes en proteínas funcionales) y la fenómica (predicción de fenotipos o conductas de los
organismos, en base a sus genes y a sus proteínas). El uso de la ingeniería genética para hacer
ingeniería metabólica. Los nuevos tipos de reactores biológicos y los fenómenos de transporte
implicados. Los nuevos esquemas de reacción, separación y control en procesos biotecnológicos.

3. Aplicaciones de la Biotecnología para resolver problemas o atender necesidades de la sociedad,
con especial atención a sus aplicaciones ya vigentes en México. Esta sección será dedicada a una
empresa o institución (pública o privada) que desee difundir los logros obtenidos en algún campo
de la biotecnología. Por ejemplo: empresas productoras de antibióticos o productos biológicos,
empresas de ingeniería ambiental que usen procesos biotecnológicos, empresas agropecuarias,
forestales o de acuacultura que usen tecnologías biológicas avanzadas, o empresas de
transformación de alimentos que utilicen enzimas, cultivos de microorganismos, etc. Esta lista es
indicativa pero no exhaustiva.
4. Problemas de bioseguridad, bioética y biodiversidad relacionados con las aplicaciones de la

biotecnología a la sociedad. Por ejemplo: análisis y comentarios sobre los debates acerca del uso
de semillas transgénicas, los problemas de conservación y explotación de la biodiversidad
mediante la biotecnología, los riesgos del uso de organismos transgénicos en diversos campos de
la industria, los problemas de bioseguridad del uso de antibióticos y otros productos
biotecnológicos.
5. La educación, la cultura y la difusión tecnológica en relación con la biotecnología. Por ejemplo:

comentarios de planes y programas, de estilos y necesidades de la enseñanza, del enfoque
interdisciplinario, en carreras o planes de estudio directamente ligados con la biotecnología.
También necesidades y modalidades sobre programas de extensión educativa para la industria,
para el público consumidor o para grupos selectos de personas interesadas en la biotecnología
(políticos, funcionarios de empresas, líderes de opinión). El uso de la informática en la difusión de
la biotecnología, y en general, el análisis de necesidades, métodos y alternativas para difundir los
conocimientos de la biotecnología.
6. Oportunidades y propuestas para mejorar la cooperación y el desarrollo biotecnológicos. Por

ejemplo: Análisis de las oportunidades vigentes de intercambio académico o comercial en
biotecnología. Propuestas de nuevas formas de cooperación entre los sectores de investigación y
la industria biotecnológica. Análisis y propuestas del uso óptimo de recursos humanos, financieros
o materiales para mejorar la cooperación o el desarrollo de la biotecnología. En esta sección se
dará espacio a los análisis, críticas o propuestas de los aspectos legales y fiscales que afecten e
incluso puedan mejorar el desarrollo de la biotecnología en México. Tales como: la propiedad
industrial, el régimen fiscal de las empresas, el costo del desarrollo biotecnológico y los subsidios o
estímulos económicos para el desarrollo de la biotecnología.
Tanto los trabajos de investigación original como las revisiones deberán apegarse al siguiente
formato:
1. El título del manuscrito será puesto en negritas con letra Arial o equivalente tamaño 14. El título
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Estas palabras deberán de incluirse en Español y en Inglés (Key words:).
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(1999) han demostrado que...”, o bien, “Datos recientes (Martínez & García, 1999) han demostrado
que...”. Si la cita posee varios autores se escribira como sigue: “Gutiérrez et al. (2003), han
demostrado….” O bien: “Datos recientes (Gutiérrez et al., 2003) han mostrado…” Si la cita es es
una página de Internet, ésta deberá ponerse completa entre paréntesis directamente en el texto
donde se mencione. La lista de Referencias se deberá escribir con el mismo tipo de letra del texto
principal (Arial tamaño 10) de acuerdo al siguiente formato:
Para revistas:
García-Carreño F, Cota K & Navarrete del Toro MA (2008) Phenoloxidase activity of hemocyanin in
whiteleg shrimp, Penaeus vannamei: conversion, characterization of catalytic properties, and role in
postmortem melanosis. J. Agric. Food Chem. 56: 6454-6459.

Para libros y capítulos de libros:
(Libro)
Ullrich M (2009) Bacterial Polysaccharides: Current Innovations and Future Trends. Horizon Scientific
Press, Norwich.
(Capítulo de libro)
Sánchez S & Demain AL (2009) Metabolic regulation and overproduction of primary metabolites. In:
Encyclopedia of Industrial Biotechnology. Bioprocess, Bioseparation, and Cell Technology (EIB).
Flickinger MC (ed). John Wiley & Sons, Inc. Hoboken, NJ. pp. 396-458.
Para patentes:
Fenical WH, Jensen PR & Kwon HC (2009) Polyol macrolide antitumor-antibiotics from the marine
actinomycete strain CNQ140. US patent 7,521,414.
Para congresos y reuniones: Se aceptarán un máximo de dos citas de este tipo.
Reyes N, Domínguez RM, Islas I & Solis S (2007) Inducción diferencial por pH y temperatura del
Complejo pectinolítico producido por células inmovilizadas de Aspergillus HL. XII Congreso
Nacional de Biotecnología y Bioingeniería. Morelia Mich. México. OIII-12.
Para citas provenientes de internet: Se aceptará un máximo de dos citas de este tipo.
Van Deuren J, Wang Z & Ledbetter J (1997) Remediation Technologies Screening Matrix and
Reference Guide. 3ª Ed. Technology Innovation Office, EPA. Disponible en: http://www.epa.gov/tio/
remed.htm.
Revistas electrónicas:
Sun J, Lu X, Rinas U, & Zeng AP (2007) Metabolic peculiarities of Aspergillus niger disclosed by
comparative metabolic genomics. Genome Biol. 8: R182.
Para tesis de pre y posgrado:
Cárdenas C (2009) Evaluación del uso biotecnológico de la semilla de Ditaxis heterantha para la
Producción de safranal. Tesis de Maestra en Ciencias Bioquímicas. Universidad Nacional
Autónoma de México. México D.F. pp. 1-78.
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Módulos de Unión a Carbohidratos como Plataformas de Evolución.
Armenta-Jaime Silvia, y Rodríguez-Sanoja Romina*.
Departamento de Biología Molecular y Biotecnología. Instituto de Investigaciones

Biomédicas, Universidad Nacional Autónoma de México. México D.F. 04510. E-
mail: romina@biomedicas.unam.mx
RESUMEN
Los módulos de unión a carbohidratos (CBM, Carbohydrate-Binding Module) son

proteínas especializadas en el reconocimiento de azúcares, estos módulos pueden estar
asociados a enzimas multimodulares como las glucósido-hidrolasas u otras enzimas
relacionadas con el metabolismo, reconocimiento y transporte de carbohidratos. Con base en
su secuencia y similitudes en el plegamiento, se clasifican en 68 familias
(http://www.cazy.com). En todas estas proteínas la interacción CBM-carbohidrato está
mediada por interacciones hidrofóbicas y puentes de hidrógeno, donde los aminoácidos
aromáticos participan de forma relevante en el reconocimiento. Sin embargo, esta información
no explica la especificidad y selectividad de estos dominios hacia los diferentes sustratos. Una
opción para generar información relevante acerca de las bases moleculares que rigen el
reconocimiento es la generación de diversidad en los dominios de unión a través de la
ingeniería de proteínas. En este trabajo se revisa la principal estrategia utilizada en la
diversificación de estos módulos para entender y optimizar su especificidad y afinidad,
potenciando sus aplicaciones para la industria y la investigación.
Palabras clave: Módulos de unión a carbohidratos, ingeniería de proteínas, interacción
proteína-carbohidrato.
ABSTRACT
The carbohydrate-binding modules (CBM) are specialized proteins in the
recognition of sugars, these modules can be associated with multimodular enzymes
such as glycoside hydrolases and other enzymes related to metabolism, transport and

recognition of carbohydrate molecules. Based on sequence and folding similarities,
they are classified into 68 families. In all these proteins CBM-carbohydrate interaction
is mediated by hydrophobic interactions and hydrogen bonds, where the aromatic
amino acids play the most relevant role in recognition. However, this information does
not explain how these domains recognize and bond specific carbohydrates. One
alternative to generate relevant information about the molecular basis of recognition is
the generation of diversity in the binding domains by protein engineering. In this paper,
we review the strategy used to diversify these modules to understand and optimize
their specificity and affinity to carbohydrates, enhancing their applications for industry
and research.
Key words: Carbohydrate binding module, protein engineering, CBM-carbohydrate
interaction.
INTRODUCCIÓN
La interacción proteína-carbohidrato como las glucósido-hidrolasas u otras

regula muchos procesos biológicos; como enzimas relacionadas con el metabolismo
el reconocimiento celular, el metabolismo de carbohidratos. Funcionalmente estos
primario de carbono, la respuesta del dominios permiten la interacción entre los
sistema inmune, los mecanismos de sustratos, generalmente poco accesibles o
señalización celular y los procesos insolubles, con el sitio activo del dominio
patológicos. Tal diversidad de funciones catalítico de las enzimas (Rodríguez-
sugiere que el reconocimiento ocurre por Sanoja et al., 2005).
diversos mecanismos que justifican la Los CBMs están agrupados en 68
selectividad de carbohidratos dentro de familias (http://www.cazy.org), que incluyen
matrices tan complejas como son el dominios de reconocimiento para
glucocálix o la pared celular de plantas, prácticamente todos los carbohidratos
hongos y bacterias. existentes en la naturaleza; desde
Existen proteínas especializadas en el polisacáridos estructurales y de reserva,
reconocimiento de carbohidratos, como los hasta factores de virulencia (Guillén et al.,
módulos de unión a carbohidratos (CBM, 2010). Muchas de estas familias tiene la
Carbohydrate-Binding Module) que pueden capacidad de reconocer inequívocamente
estar asociados a enzimas multimodulares

un ligando específico; por ejemplo, las las condiciones más parecidas a las
familias CBM1, CBM3a, CBM5 y CBM10 naturales.
sólo reconocen celulosa (Boraston et al., Una opción es conocer el efecto que
2004), mientras que las familias CBM4, pueden tener mutaciones en residuos
CBM6, CBM15, CBM22, CBM35 y CBM36 específicos, que han demostrado su
reconocen principalmente xilano (cadenas importancia por estudios estructurales en
de D-xylose unidas por enlaces b-1,4) pero presencia de sustratos solubles (Czjzek et
también se unen a b-1,4-glucano, b-1,3- al., 2001; Boraston et al., 2006; van Bueren
glucano, manano, y xiloligosacáridos et al., 2007; Gregg et al., 2008; Cid et al.,
sustituidos, como el xiloglucano y 2010). Extender esta idea sería llevarla a la
arabinoglucano (McCartney et al., 2006). mutagenesis simultánea y al azar de varios
Es difícil explicar la diversa capacidad residuos de aminoácidos simulando el
de unión de estos dominios y su proceso de evolución. Por lo que en este
promiscuidad, puesto que la interacción trabajo se muestra como los dominios de
entre el glucósido y el sitio de unión de la unión a carbohidratos pueden ser
proteína ocurre a través de un mecanismo utilizados como una base o plataforma
en común, el cual depende principialmente evolutiva para entender la especificidad y
de la complementariedad, orientación y selectividad de estos dominios por sus
conformación de aminoácidos aromáticos, sustratos.
mismos que interaccionan por fuerza de
van der Waals con los carbohidratos. CONSTRUCCIÓN DE BIBLIOTECAS
Además, la interacción es estabilizada por COMBINATORIAS
puentes de hidrógeno entre algunos En general, la generación de variantes
residuos polares con los grupo hidroxilo de proteínas puede ser de forma racional o
(-OH) del mismo sustrato (Quiocho, 1989; combinatoria; en ambas es necesario tener
Bewley et al., 2013). conocimiento de la estructura
El estudio de la interacción de los tridimensional y de las propiedades
dominios de unión a carbohidratos con sus fisicoquímicas de la proteína de interés. En
sutratos insolubles no es realizable a la primera se modifican algunos
través de técnicas clásicas de bioquímica aminoácidos mediante mutagénesis dirigida,
estructural como la cristalografía o el RMN, lo cual limita el número de variantes que se
por lo que deben buscarse alternativas que pueden obtener. Por otro lado, en la
permitan aproximarse a estos sistemas en estrategia combinatoria, la secuencia y

estructura proteica es sometida a diversidad en una proteína (Gunnarsson et
mutaciones al azar, generándose un al., 2004; Binz et al., 2005). La figura 1
amplio repertorio de variantes que, a través ejemplifica el proceso a seguir para la
de un riguroso proceso de selección, construcción de una biblioteca
permite obtener proteínas con propiedades combinatorial de CBMs. El primer paso
bioquímicas novedosas, por lo tanto es la para construir una biblioteca combinatoria
estrategia más usada para generar
Fig. 1. Estrategia experimental para la obtención de variantes de los dominios de fijación al

almidón con características bioquímicas mejoradas.
es elegir el procedimiento metodológico forma inespecífica dentro del gen que

para mutagenizar (Figura 2). Es posible codifica para el dominio de interés,
introducir mutaciones aleatorias en usando condiciones que disminuyan la
posiciones de aminoácidos específicos a fidelidad de la enzima TaqDNA
través del diseño de oligonucleótidos polimerasa durante el PCR, técnica
degenerados (Zoller et al., 1987) o bien, conocida como error-prone PCR
llevar a cabo mutaciones al azar de (Caldwell et al., 1992). También es

posible crear diversidad por recombina- fácil en comparación con el diseño de
ción de dos o más genes, mediante el una adecuada estrategia de selección y
método de DNA shuffling (Stemmer, el posterior análisis requerido para
1994). De esta manera, se llegan a encontrar variantes con características
obtener bibliotecas de miles de millones optimizadas en función del sistema de
de variantes, lo cual es relativamente interés.
Oligonucleó9dos$ DNA$shuﬄing$
degenerados$ Error/prone$PCR$
Fig. 2. Métodos comúnmente utilizados para generar diversidad durante la construcción de

bibliotecas combinatorias (Stahl et al., 2013).
MÉTODOS PARA LA ELECCIÓN DE la transformación de la biblioteca de ADN

VARIANTES A PARTIR DE UNA en un huésped, por ejemplo: en la
BIBLIOTECA COMBINATORIA presentación en fagos (Smith, 1985;
La selección de un fenotipo, McCafferty et al., 1990), en la superficie
modificado por ingeniería, está bacteriana (Fuchs et al., 1991; Francisco
relacionada con el sistema de expresión et al., 1993) o en levaduras (Boder et al.,
de la biblioteca. Los sistemas de 1997) y (2) los sistemas que implican la
despliegue de bibliotecas se pueden traducción in vitro de proteínas, como en
dividir en dos: (1) sistemas que requieren el despliegue en polisomas/ribosomas

(Mattheakis et al., 1994; Hanes et al., de fagos se expone al ligando
1997) o en mRNA (Nemoto et al., 1997; inmovilizado sobre un soporte sólido; que
Roberts et al., 1997). pueden ser columnas para cromatografía
De los anteriores, el despliegue en (McCafferty et al., 1990), superficies de
fagos o “phage display” fue el primer polipropileno de placas de 96 pozos
sistema desarrollado y es el más (Barbas et al, 1992), o partículas
utilizado hasta el momento, en este paramagnéticas (Hawkins et al., 1992).
sistema las proteínas recombinantes se Después de un tiempo de incubación
expresan en la superficie de bacterió- adecuado y sucesivas etapas de lavado
fagos filamentosos como el M13 (Smith, para eliminar los fagos no unidos; los
1985). La superficie del fago M13 está fagos que se unen selectivamente son
constituida por cinco proteínas (pIII, pVI, eluidos. La elución puede llevarse a cabo
pVII, pVIII y pIX) de once codificadas a por diversos medios, incluyendo la
partir de su genoma. Las proteínas pIII incubación a pH bajo (Charles-Niño et
(con cinco copias) y pVIII (con aproxima- al., 2011) o la elución competitiva
damente 2700 copias) han sido las más (Gunnarsson et al., 2006). Los fagos
utilizadas para el despliegue de proteínas eluidos se utilizan para infectar cepas de
recombinantes. El tener menor número E. coli con fenotipo F’ donde se
de copias representa encontrar variantes amplifican para su uso en sucesivos
con mayor afinidad hacia un ligando ciclos de selección o con fines de
específico, ya que el fenómeno de avidez identificación y de caracterización.
se reduce. Sin embargo, una alta
afiniddad podría no ser siempre el IDENTIFICACÓN Y CARACTERIZA-
principal objetivo de la selección, debido CIÓN DE VARIANTES SELECCIONA-
a que un despliegue multivalente DAS A PARTIR DE BIBLIOTECAS
favorece la identificación de variantes COMBINATORIAS
raras y/o de baja afinidad (Qi et al., El proceso de selección permite aislar,
2012). bajo ciertas condiciones, diversas
El proceso de bioselección o variantes de proteínas con la capacidad
“biopanning”, se basa en la selección por de reconocer ligandos, como
afinidad hacia un sustrato o ligando carbohidratos; sin embargo, es necesario
específico, por ejemplo: polisacáridos u caracterizarlas para conocer sus
oligosacáridos. Típicamente, la biblioteca

propiedades bioquímicas. Los ensayos No todas las proteínas pueden ser
de ELISA (Enzyme Linked sujetas a procesos de evolución in vitro
Immunosorbent Assay) son una forma como “protein scaffolds”. Algunas de las
rápida y específica de obtener características indispensables para que
información acerca de la especificidad y una proteína pueda ser utilizada como
afinidad de las variantes seleccionada una plataforma evolutiva son: (1)
(McCafferty et al., 1990; Mattheakis et presentar una estructura estable con
al., 1994). En esta metodología los regiones o loops expuestos al solvente
sobrenadantes de fagos recombinantes relacionados con la funcionalidad de la
seleccionados interaccionan con ligandos proteína; (2) tener una estructura o core
inmovilizados en la superficie de placas, bien definido y altamente conservado
donde la detección se realiza a través de entre los diferentes miembros de una
anticuerpos específicos acoplados a familia de proteínas; así como, (3) tener
enzimas como la peroxidasa, estabilidad conformacional intrínsica
produciendo compuestos que se pueden (Skerra, 2000a).
monitorear midiendo la absorbancia Hasta el momento se conoce la
(McCafferty et al., 1990), usando estructura de más de 90 000 proteínas
ligandos biotinilados (Malabarba et al., (http://www.rcsb.org), de las cuales sólo
2001) o fluorescencia (Starwalt et al., se han utilizado, aproximadamente, 50
2003). como plataformas evolutivas (Binz et al.,
2005; Gebauer et al., 2009). Las
PROTEÍNAS COMO PLATAFORMAS proteínas que han sido utilizadas son
DE EVOLUCIÓN diversas en tamaño, topología, modo de
El término de plataforma evolutiva o acción y funcionalidad. Algunos ejemplos
protein scaffold se refiere a utilizar una notables de proteínas que han funciona-
estructura proteíca como una base o do como scaffold son la fibronectina tipo
cimiento a la cual se pueden introducir III (glicoproteínas presentes en la matriz
mutaciones al azar sin comprometer la extracelular de tejidos animales; Koide et
estabilidad de la proteína, pero sí dando al., 1998) y las lipocalinas (proteínas
como resultado cambios en las involucradas en el transporte y almace-
propiedades bioquímicas y funcionales namiento de moléculas hidrofóbicas), de
(Skerra, 2000a). las cuales se ha modificado su afinidad

para reconocer una amplia variedad de altamente conservada, en la cual el sitio
ligandos (Skerra, 2000b). de unión se localiza, hacia el lado
concavo de una de las hojas beta,
CBM COMO SCAFFOLDS aunque, también puede ser localizado
Los dominios de unión a carbohidratos hacia alguno de los extremos de la
(CBMs) adoptan principalmente una estructura (Figura 3) (Boraston et al.,
estructura tridimensional de -sandwich 2004).
Fig. 3. A) Esquema que muestra la ubicación de los sitios de unión a carbohidrato de un CBM
típico (estructura en β-sandwich). Boraston et al., (2004) realizaron la superposición de los
carbonos α de diferentes CBM en complejo con el ligando para corroborar que en la mayoría de los
casos el sitio de unión se localiza hacia la hoja β cóncava, y en menos casos hacia el extremo de la
estructura. B) Se muestra la forma de ranura o hendidura característica de un sitio de unión que
reconoce como sustrato al xilano.
La forma o conformación espacial del sitio de unión es clave la presencia de

sitio de unión es el reflejo de los sustra- aminoácidos aromáticos.
tos que son capaces de reconocer; Hay varios reportes donde se desta-
además, es importante señalar que en el ca la participación de estos residuos

hidrofóbicos durante el reconocimiento de 3 residuos aromáticos; las tirosinas 18, 20
los sustratos. y el triptófano 32, siendo el residuo de
Por ejemplo, Abbott y Boraston (2011), aminoácido W32 indispensable para la
proponen que el residuo de aminoácido función, ya que su sola mutación provoca
W935 del dominio CBM32 presente en la la pérdida total del reconocimiento del
endo-β-1,4-N-acetylglucosamidasa de ligando. Sin embargo, aunque estos
Streptococcus pneumoniae, es residuos aromáticos están conservados en
indispensable para la fijación de ambos dominios, la orientación espacial de
carbohidratos; este residuo se localiza en cada residuo se predice diferente (Figura
un loop extendido y expuesto al solvente 4) (Rodríguez-Sanoja et al., 2009).
donde interacciona directamente con el La contribución de residuos de
sustrato. aminoácidos vecinos a aquellos que
Así mismo, en la estructura participan en el reconocimiento también ha
cristalográfica del dominio CBM26 de la α- sido analizada. En el dominio CBM2b de la
amilasa de Bacillus halodurans C-125, se xilanasa 11A de Cellulomonas fimi se
muestra que tres aminoácidos aromáticos evaluó el efecto que producía la mutación
(W36, Y23 y Y25) son importantes para el R262G en la orientación espacial del
reconocimiento de maltooligosacáridos. La triptófano 259; el cual interacciona
unión se da básicamente a través de directamente con xilano. Los autores
interacciones tipo van der Waals entre el observaron que la mutación mencionada
triptófano 36 y la tirosina 25 con los anillos modificó la orientación de triptófano 90º
de piranosa de una molécula de maltosa, y con respecto a su posición original en el
mediante puentes de hidrógeno formados sitio de unión. Tal mutación provocó que
por la tirosina 23 y otros residuos como la no se reconociera mas al xilano como
glutamina 71, la glicina 76 y el glutamato ligando, modificándose la especificidad
77 (Boraston et al., 2006). Por otro lado, hacia celohexosa (Simpson et al., 2000).
mediante estudios de mutagénesis dirigida Estos datos confirman la importancia de la
realizados con un dominio CBM26 de la α- posición estructural y la orientación de los
amilasa de Lactobacillus amylovorus, se aminoácidos involucrados en el sitio de
confirmó que la principal contribución para unión durante la interacción CBM-
que ocurra el reconocimiento está dada por carbohidrato.

Fig. 4. Gel de electroforesis no desnaturalizante en ausencia (A) o presencia (B) de almidón. Los
carriles muestran las proteínas correspondientes a un CBM26 de la α-amilasa de L. amylovorus y sus
mutantes derivadas: 1) Y85L, 2) Y20L, 3) Y18L, 4) Y16L 5) W11-32L, 6) W32L, 7) W11L, 8) CBM26
silvestre y 9) Albúmina. Lo anterior muestra como la mutación W32L abate por completo el
reconocimiento del dominio hacia almidón. (C) La imagen muestra la superposición de los residuos de
unión del dominio CBM26 de la amilasa de B. halodurans C-125 (AP 2C3G; en rojo) y los residuos del
modelo de Rosetta de un módulo CBM26 de la amilasa de L. amylovorus (en negro), lo que indica
como aminoácidos conservados en ambos dominios presentan diferente conformación y orientación, lo
cual es determinante en el mecanismo de reconocimiento del ligando (Modificado de Rodríguez-Sanoja
et al., 2009).
Existen pocos reportes donde se

utilizan a los módulos de unión a colaboradores en el 2000. En este
carbohidratos como plataformas de trabajo se utilizó un dominio de unión a
evolución. Sin embargo, sus celulosa de la celobiohidrolasa Cel7A de
características estructurales (una Trichoderma reesei como plataforma
estructura conservada, estable, funcional para la búsqueda de nuevas propiedades
y con sitios de unión al sustrato funcionales. La modificación de 11
accesibles al solvente) los hace un residuos de aminoácidos, provocaron un
sistema con potencial para llevar a cabo cambio de especificidad tan dramático,
estudios de evolución in vitro. que el dominio mutado pudo
Uno de los primeros y más interaccionar con una proteína,
sorprendentes trabajos donde utilizan a específicamente una amilasa. Debido a
los CBMs como “plataforma de que dicha interacción ocurre con el sitio
evolución” lo reportan Lehtiö y activo de la amilasa; la unión del CBM

impide que el sustrato entre al sitio con aumentar la actividad enzimática, de
activo. La modificación realizada hecho una de las principales funciones
mediante evolución in vitro cambió por de los dominios de unión a carbohidratos
completo la funcionalidad del CBM1, al es aumentar la concnetración del
pasar de unir polímeros de celulosa a sustrato en el sitio catalítico. Con base
inhibir la actividad de una enzima en lo anterior, Shiraga et al., (2004)
amilolítica. diversificaron el CBM20 de la
Por otro lado, Gunnarsson et al. glucoamilasa de Rizhopus oryzae, para
(2004) utilizaron el dominio CBM4-2 de la determinar el efecto de la adsorción al
xilanasa de Rhodothermus marinus almidón sobre la actividad de la enzima.
(proteína termófila, capaz de reconocer Al respecto, los autores concluyen que el
sustratos como: xilano, b-glucanos y obtener variantes con mayor capacidad
celulosa no cristalina) como scaffold para de adsorberse al sustrato incrementa la
modificar la especificidad y afinidad del disponibilidad del mismo en el sitio
dominio hacia diferentes polisacáridos. A catalítico y por consecuencia, la
partir de una biblioteca de un millón 600 capacidad de hidrólisis del almidón
mil variantes del dominio CBM4-2, se insoluble.
lograron aislar variantes con mayor
afinidad por xilano (Gunnarsson et al., CONCLUSIONES
2007); otras capaces de reconocer A pesar de que existe un importante
específicamente xiloglucano número de estructuras resueltas, aún no
(Gunnarsson et al., 2006) e incluso de enorme cantidad de carbohidratos
distinguir entre xiloglucano fucosilado del presentes en la naturaleza. Se sabe que
que no presenta unidades de fucosa en la estructura de beta-sandwich se
su estructura, característica importante encuentra conservada en la mayoría de
en el reconocimiento diferencial de los dominios descritos y que en todos
tejidos en semillas, por lo que esta estos, las interacciones hidrofóbicas de
variante funciona como marcador en el los aminoácidos aromáticos juegan un
estudio de polisacáridos estructurales en papel primordial en la unión, siendo tan
plantas (Schantz et al., 2009; Filanova et solo las pequeñas modificaciones
al., 2007). espaciales de los residuos que
Mejorar la especificidad y capacidad interaccionan con el sustrato, lo que les
de adsorción, también está relacionado

da la capacidad de reconocer y unir Abbott WD & Boraston A (2011)
específicamente su carbohidrato blanco. Structural analysis of a putative
Los reportes existentes muestran family 32 carbohydrate-bindig
que utilizando una estrategia de module from the Streptococcus
diversificación “artificial” es posible pneumoniae enzyme Endo D. Acta
mejorar la selectividad y/o especificidad Crystallogr., Sect. C: Cryst. Struct.
de estos módulos, lo que crea una Commun. F67: 429- 433.
plataforma novedosa para estudiar la Barbas CF, Bain JD, Hoekstra DM &
interacción proteína-carbohidrato y para Lerner RA (1992) Semisynthetic
imaginar diversas aplicaciones combinatorial antibody libraries: a
biomédicas y biotecnológicas. chemical solution to the diversity
problem. Proc. Natl. Acad. Sci. 89:
AGRADECIMIENTOS 4457- 4461.
La MC Silvia Armenta agradece a la Bewley C & Shahzad-Ul-Hussan (2013)
comisión de premios 2012-2014 de la Characterizing carbohydrate-protein
Sociedad Mexicana de Biotecnología y interactions by nuclear magnetic
Bioingeniería y a Applikon Biotechnology resonance spectroscopy. Biopolym.
por el premio “Sergio Sánchez Esquivel”, 99: 796-806.
otorgado como mejor Protocolo de Tesis Binz HK, Amstutz P & Plückthum A
de Doctorado. A los Dres. Karen (2005) Engineering novel binding
Manoutcharian Airapetian y Amelia proteins from nonimmunoglobulin
Farrés González Sarabia por la discusión domains. Nat. Biotechnol. 23: 1257-
crítica en el diseño de la metodología. A 1268.
Conacyt por la beca para estudios de Boder ET & Wittrup KD (1997) Yeast
doctorado. Este trabajo forma parte del surface display for screening
trabajo de Tesis del Doctorado en combinatorial polypeptide libraries.
Ciencias Bioquímicas, UNAM de Silvia Nat. Biotechnol. 15: 552-557.
Armenta. Este trabajo es realizado con el Boraston A, Bolam D, Gilbert H & Davies
apoyo de DGAPA-UNAM IN222113 y G (2004) Carbohydrate-binding
Conacyt 131149. modules: fine-tuning polyssacharide
recognition. Biochem. J. 382:769-
REFERENCIAS 781.

Boraston A, Hesaley M, Klassen, Ficko- Binding Module that have evolved
Blean E, Lammerts van Bueren A & from common sequence is not
Law V (2006) A Structural and conserved. J. Biol. Chem. 276:
Funcional Analysis of a-glucan 48580-48587.
recognition by family 25 and 26 Filanova L, Gunnarsson LC, Daniel G &
Carbohydrate-binding Modules Ohlin M (2007) Synthetic xilan-
reveals a conserved mode of starch binding modules for mapping of pulp
Recognition. J. Biol. Chem. 281: 587- fibers and wood section. BMC Plant
598. Biology. 7: 54.
Cadwell C & Joyce G (1992) Francisco JA, Campell R, Iverson BL &
Randomization of gene by PCR Georgiou G (1993) Production and
mutagenesis. Genome Res. 2: 28-33. fluorescence-activated cell sorting of
Charles-Niño C, Pedroza-Roldan C, Escherichia coli expressing a
Viveros M, Gevorkian G & funtional antibody fragment on the
Manoutcharian K (2011) Variable external surface. Proc. Natl. Acad.
epitope libraries: New vaccine Sci. 90:10444-10448.
immunogens capable of inducing Fuchs P, Breitling F, Seehaus T & Little
broad human immunodeficiency virus M (1991) Targeting recombinant
type 1-neutralizing antibody antibodies to the surface of
response. Vaccine. 29: 5313-5321. Escherichia coli: fusion to a
Cid M, Pedersen H, Kaneko S, Coutinho peptidoglycan associated lipoprotein.
P, Henrissat B, Willats W & Boraston Biotechnol. 9: 1369-1372.
A (2010) Recogniton of the helical Gebauer M, Skerra A (2009) Engineered
structure of b-1,4 galactan by a new protein scaffolds as next-generation
family of Carbohydrate-Binding antibody therapeutics. Curr. Opin.
Module. J. Biol. Chem. 283: 35999- Chem. Biol. 13: 245-55.
36009. Gregg K, Finn R, Abbott DW & Boraston
Czjzek M, Bolam D, Mosbah A, Allouch J, A (2008) Divergent modes of glycan
Fontes c, Ferreira L, Bornet O, recognition by a new family of
Zamboni V, Darbon H, Smith N, Carbohydrate-Binding Module. J.
Black G, Henrissat B & Gilbert H Biol. Chem. 283: 12604-12613.
(2001) The location of the Ligand- Guillén D, Sánchez S & Rodríguez-
Binding site of the Carbohydrate- Sanoja R (2010) Carbohydrate-

binding domains: multiplicity of as a scaffold for novel binding
biological roles. Appl. Microbiol. proteins. J. Mol. Biol. 284: 1141-
Biotechnol. 85: 1241-1249. 1151.
Gunnarsson LC, Montanier C, Tunnicliffe Lehtiö J, Teeri TT & Nygren PA (2000)
RB, Williamson MP, Gilbert HJ, Alfa-amylase inhibitors selected from
Nordberg Karlsson E & Ohlin M a combinatorial library of a cellulose
(2007) Novel xylan-binding properties binding domain scaffold. Proteins:
of an engineered family 4 Struct., Funct., Genet. 41: 316-322.
carbohydrate-binding module. Malabarba MG, Milia E, Faretta M,
Biochem. J. 406: 209-214. Zamponi R, Pelicci PG & Di Fiore PP
Gunnarsson LC, Zhou Q, Montanier C, (2001) A repertoire library that allows
Karlsson EN, Brumer H & Ohlin M the selection of synthetic SH2s with
(2006) Engineered xyloglucan altered binding specificities.
specificity in a carbohydrate-binding Oncogene. 20: 5186-5194.
module. Glycobiology. 16: 1171- Mattheakis LC, Bhatt RR & Dower WJ
1180. (1994) An in vitro polysome display
Gunnarsson LC, Karlsson A.S., Albrekt system for identifying ligands from
M, Andersson O & Holsty M (2004) A very large peptide libraries. Proc.
carbohydrate binding module as a Natl. Acad. Sci. 91: 9022-9026.
diversity-carrying scaffold. Protein McCafferty, Griffiths AD, Winter G &
Eng., Design & Selection. 3: 213- Chiswell DJ (1990) Phage
221. antibodies: filamentous phage
Hanes J & Plückthum A (1997) In vitro displaying antibody variable domains.
selection and evolution of funtional Nature. 348: 552-554.
proteins by using ribosome display. McCartney L, Flint J, Bolam D, Boraston
Proc. Natl. Acad. Sci. 94: 4937-4942. A, Gilbert H & Knox JP (2006)
Hawkins RE, Russell SJ & Winter G Differential recognition of plant cells
(1992) Selection of phage antibodies walls by microbial xilan-specific
by binding affinity. Mimicking affinity Carbohydrate-Binding Modules.
maduration. J. Mol. Biol. 226: 889- Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 103:
896. 4765: 4720.
Koide A, Bailey CW, Xiaolin H & Koide S Nemoto N, Miyamoto-Sato E, Husimi Y &
(1998) The fibronectin type III domain Yanagawa H (1997) In vitro virus:

bonding of mRNA bearing puromycin Schantz L, Gullfot F, Scheer S, Filonova
at the 3’-terminal end to the C- L, Gunnarsson L, Flint J, Daniel G,
terminal end of its encoded protein Nordberg-Karlsson E, Brumer H &
on the ribosome in vitro. FEBS Lett. Ohlin M (2009) Affinity maturation
414: 405-408. generates greatly improved
Qi H, Lu H, Qiu HJ, Petrenko V & Liu A xyloglucan-specific carbohydrate
(2012) Phagemid vectors for phage binding modules. BMC
display: properties, characteristics Biotechnology. 9: 1-12.
and construction. J. Mol. Biol. 417: Shiraga S, Kawakami M & Ueda M
129-143. (2004) Construction of combinatorial
Quiocho F (1989) Protein-carbohydrate library of starch-binding domain of
interactions: basic molecular Rhizopus oryzae glucoamylase and
features. Pure Appl. Chem. 61: 1293- screening of clones with enhanced
1306. activity by yeast display method. J.
Roberts RW & Szostak JW (1997) RNA- Mol. Catal. B: Enzym. 28: 229-234.
peptide fusions for the in vitro Simpson PJ, Xie H, Bolam DN, Gilbert HJ
selection of peptides and proteins. & Williamson MP (2000) The
Proc. Natl. Acad. Sci. 94: 12297- structural basis for the ligand
12302. specificity of family 2 carbohydrate-
Rodríguez-Sanoja R, Oviedo N, binding modules. J. Biol. Chem. 275:
Escalante L, Ruíz B & Sánchez S 41137-41142.
(2009) A single residue mutation Skerra A (2000a) Engineered protein
abolishes attachment of the CBM26 scaffolds for molecular recognition. J.
starch-binding domain from Mol. Recognit. 13: 167-187.
Lactobacillus amylovorus a-amylase. Skerra A (2000b) Lipocalins a scaffold.
J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 36: 341- Biochim. Biophys. Acta. 1482: 337-
346. 350.
Rodríguez-Sanoja R, Ruiz B, Guyot JP & Smith GP (1985) Filamentous fusion
Sánchez S (2005) Starch-Binding phage: novel expression vectors that
Domain affects catalysis in two display cloned antigens on the virion
Lactobacillus a-amylases. Appl. surface. Science. 228: 1315-1317.
Environ. Microbiol. 71: 297–302. Stahl S, Kronqvist N, Jonsson A &
Löfblom J (2012) Affinity proteins and

their generation. J. Chem. Technol. recognition by a family 41
Biotechnol. 88: 25-38. carbohydrate-binding module of
Stawalt Se, Masteller EL, Bluestone JA & Thermotoga maritima. J. Mol. Biol.
Kranz DM (2003) Directed evolution 365: 555-560.
of a single-chain class II MHC Zoller MJ & Smith M (1987)
product by yeast display. Protein Oligonucleotide-directed
Eng. 16: 147-156. mutagenesis: A simple method using
Stemmer WP (1994) Rapid evolution of a two oligonucleotide primers and a
protein in vitro by DNA shuffling. single-stranded DNA template. Meth.
Nature. 370: 389-391. Enzymol. 154: 329-350.
van Bueren AL & Boraston A (2007) The
structural basis of α-glucan

Control Biológico del Chapulín en México
Antonio J. Huerta, Fernando Espinoza, Alejandro Téllez-Jurado, Alma P. Maqueda
Gálvez y Ainhoa Arana-Cuenca*
Laboratorio de Microbiología Molecular, Universidad Politécnica de Pachuca,
Carretera Pachuca – Ciudad Sahagún km 20, Ex Hacienda de Santa Bárbara,
Zempoala, Hidalgo, CP 43830. Tel. 771 5477510. *E-mail: ainhoa@upp.edu.mx
RESUMEN
Los insectos conocidos como chapulines, pertenecientes al orden Orthoptera tienen gran
importancia agrícola en México ya que se han convertido en una plaga endémica debido,
entre otras razones, a los cambios climatológicos en los últimos años. Un ejemplo de esto son
los largos periodos de sequía y cortos periodos de lluvia que han ocasionado que plagas
secundarias como el chapulín se encuentren en desequilibrio, dando origen así a una plaga
con alto potencial que ha llegado a poner en riesgo a la ganadería y agricultura. Su
comportamiento, distribución y control son aspectos que se discuten en el presente trabajo de
revisión sobre la situación de estos insectos en México, dando especial importancia al control
biológico como una alternativa efectiva y amigable con el medio ambiente.
Palabras clave: chapulín, control químico, control biológico
ABSTRACT
The insects commonly known as grasshoppers, members of the order Orthoptera, have a
significant impact on Mexican agriculture because they have become an endemic plague due,
among other factors, to the phenomenon of climate change in recent years. Particularly
important are the long periods of drought and short rainy seasons that have caused
imbalances in populations of secondary plagues like grasshoppers, and given rise to a plague
that has a high potential to threaten both livestock-raising and agriculture. The behavior,
distribution and control of this plague are the topics discussed in this work, which presents a
review of the situation of these insects in Mexico that pays special attention to biological
control as an effective option, but one that is environmentally friendly.
Key words: grasshoppers, chemical control, biological control.

INTRODUCCIÓN La taxonomía del chapulín (también
El registro que se tiene sobre los conocido como saltamontes) se presenta
organismos del orden Orthoptera data de en la Tabla 1 incluyendo los géneros de las
más de doscientos millones de años. Los especies más comunes y con mayor
Gryllidae aparecen a fines del periodo importancia en México como son:
Triásico, los Tettigoniidae en el Jurásico y Melanoplus spp., Brachystola magna,
los Acrididae en el Terciario, en este último Sphenarium purpurascens, Sphenarium
se encuentran los chapulines. Actualmente mexicanus, Taeniopoda eques, y algunas
se conocen más de veinte mil especies de especies de Chromacris versicolor,
las cuales se han descrito alrededor de localizadas en el Altiplano y Norte del país,
seiscientas en México, encontrándose en donde llegan a infestar hasta una
distribuidas en regiones cálidas superficie de 300,000 ha
principalmente (Rivera, 2004). Su aproximadamente, donde los cultivos de
población se ha visto en aumento, debido, maíz, frijol, pastizales y hortalizas
en gran parte, al cambio climático, por lo predominan principalmente (SAGARPA,
que producen importantes pérdidas 2012).
económicas y es necesario su control de En una estación se pueden encontrar
manera eficiente y amigable con el medio de treinta a cuarenta especies de acrídidos
ambiente. en una sola comunidad de pastizal, y estas
especies varían en gran proporción de una
TAXONOMÍA Y SINONIMIA comunidad a otra dependiendo de la
Dentro del orden Orthoptera se vegetación en donde se encuentran. La
encuentra el suborden Ensifera en el cual densidad poblacional llega a variar de 1
los chapulines se caracterizan por tener hasta 50 chapulines/m2, en casos extremos
antenas más largas que el cuerpo, el se llegan a encontrar más de 1,000 en la
ovipositor bien desarrollado y con forma de misma superficie en las dos primeras fases
sable, a comparación con el suborden de desarrollo (Fielding, 2004).
Caelifera en el cual se encuentran
chapulines con antenas más cortas a MORFOLOGÏA
comparación del cuerpo y con el ovipositor Los chapulines presentan tres fases de
robusto y corto. desarrollo: huevo, ninfa y adulto (Figura 1).

Tabla 1. Taxonomía del chapulín
Clase Insecta
Orden Orthoptera
Suborden Caelifera/Ensifera
Familia Acrididae
Géneros Melanoplus, Brachystola, Sphenaium,

Taenipoda, Chromacris
Huevos siete estadios (según la especie) durante el

Los chapulines pasan la temporada de cual crecen de 5 ± 1 mm a 18 ± 1.2 mm,
invierno en estado de huevo presentando cambian de coloración de pardo a un color
diapausa (Anaya et al., 2000). Las más definido, las antenas pasan de ser
hembras adultas depositan de seis a ocho cortas y gruesas a largas y delgadas
masas de huevecillos denominados pasando de tener 8 a 14 artejos y
“ooteca”, cada una contiene de veinte a presentando ojos globulosos grandes y de
cuarenta huevos aproximadamente unidos color negro (Figura 1b) (Carruthers et al.,
entre sí. Morfológicamente son alargados y 1997).
ovalados (6 mm x 1,5 mm), de coloración
Adultos
crema al ser recién ovipositados
Los adultos del chapulín presentan
tornándose a pardo brillante durante su
dimorfismo sexual, con dos pares de alas,
desarrollo (Figura 1a), microscópica-mente
y según el sexo se aprecian distintas
se observan con una cubierta formada por
características.
cavidades hexagonales (Carruthers et al.,
1997).
Machos
Son más delgados que las hembras,
Ninfas
midiendo 2.5 ± 0.5 cm de largo por 0.7 ±
Se les conoce como ninfas a los
0.7 cm en su parte más ancha; presentan
chapulines que aun no se han convertido
ojos prominentes en relación al tamaño de
en adultos, son de tamaño menor y
la cabeza que es de forma triangular. Se
carecen de alas. Presentan de cinco a

a b
c d
Fig. 1. Morfología de las diferentes fases del ciclo de vida del chapulín perteneciente al género
Melanoplus sp. a. Huevecillos, b. Ninfas, c. Macho adulto, d. Hembra adulta (CESAVEG, 2012; INIFAP,
2012)
observan con patas robustas y con cortas que en el macho y ojos más
antenas más alargadas que las hembras, pequeños (Figura 1d) (Carruthers et al.,
constando de 14 artejos, (Figura 1c) 1997).
(Carruthers et al., 1997).
CICLO BIOLÓGICO
Hembras El ciclo biológico del chapulín es anual
Las hembras se logran distinguir con (Figura 2) pero en condiciones de
mayor facilidad tanto por su tamaño y laboratorio llega a durar como mínimo
coloración. Miden 3 ± 0.5 cm de largo por doscientos treinta días y como máximo
0.8 ± 0.09 cm en su parte más ancha trescientos cincuenta días. El
presentando coloración más notoria, a apareamiento ocurre en los meses de
excepción de cuando han ovipositado ya agosto y septiembre con una duración
que sufren cambio de tonalidad. La cabeza máxima de siete horas, y la oviposición
es más ancha que larga, con antenas más ocurre cuatro a cinco días después a las

orillas de las parcelas, caminos, zanjas, madurar sexualmente e iniciar su
etc., incubándose en el suelo a una reproducción a finales del mes de julio y
profundidad de 1.5 a 5 cm y a una durante el mes de agosto; en diversas
temperatura de 30 °C durante un periodo ocasiones se puede apreciar gran parte de
de ocho a nueve meses. En la región acrídidos en estado adulto entre los meses
centro-norte de México la eclosión de los de septiembre y diciembre (univoltinos) y
huevecillos ocurre en un periodo de quince otras casi todo el año (añopolivoltinos). Los
a veinte días después de iniciar la adultos y ninfas se alimentan de maleza de
temporada de lluvias (mayo-junio) (Uribe- hoja ancha y cuando la terminan invaden
González & Santiago-Basilio, 2012). Las cultivos en los meses de julio a septiembre
ninfas presentan de cinco a siete estados (Fontana et al., 2008), en general viven
ninfales equivalentes a un periodo de tres meses al encontrarse en estado
cuarenta a sesenta días, hasta llegar a adulto, pero las especies del género
convertirse en adultos que tardan Brachystola llegan a sobrevivir hasta cinco
alrededor de veinte a veinticinco días en meses (Barrientos-Lozano, 2003).
Fig. 2. Ciclo biológico del chapulín (Orthoptera:Acrididae)
DISTRIBUCIÓN DEL CHAPULÍN EN climáticos. Los periodos cálidos y secos

MÉXICO son los más favorables para la ocurrencia
La distribución del chapulín a lo largo de brotes de un gran número de acrídidos
de grandes extensiones territoriales puede (Lockwood, 1993). En un estudio realizado
ser predecible en base a los cambios por Hewitt (1979) se encontró que ninfas

de Melanoplus sanguinipes y Amphitornus Los sitios de clima seco de
coloradus comenzaron a eclosionar Norteamérica y México han sido favorables
cuando la temperatura del suelo (1 cm para la adaptación de los acridoideos
debajo de la superficie) se encontró por (Orthoptera: Acrididae) de las subfamilias
encima de 15.6 °C, de igual forma se Melanoplinae, Gomphocerinae y
observó que estas dos especies inician su Oedipodinae; dentro de estas se encuentra
actividad cuando la temperatura (5 cm el chapulín Melanoplus sp., que se
arriba del suelo) es de 13-16 °C, y presenta ocasionando daños económicos,
comienzan su alimentacion cuando la principalmente en el oriente de San Luis
misma es al menos de 21 °C. Potosí y en el norte de Veracruz (García &
Los chapulines se logran encontrar en Lozano, 2011).
primavera y verano, pero abundan en
mayor proporción durante la temporada de IMPORTANCIA ECONÓMICA DE LA
otoño, estas poblaciones son reguladas PLAGA
por factores bióticos y abióticos, y es el El orden Orthoptera ha llegado a tomar
estado de ninfa el de mayor importancia en gran importancia agrícola en México,
la regulación, ya que es la etapa de debido a que se ha convertido en una
transición al estado adulto (Lockwood, plaga que provoca pérdidas económicas
1993). entre el 20 y 30 % de la producción cuando
Los chapulines se distribuyen a lo largo no se realizan acciones de control
del territorio nacional; principalmente se (SAGARPA, 2012). Los largos periodos de
encuentran los géneros Melanoplus sp, escasez de lluvia han provocado que
Sphenarium sp, Taeniopoda sp., y plagas que no tenían esta importancia
Brachystola sp., los cuales se logran pierdan su posición equilibrada dando
adaptar fácilmente a distintas condiciones origen a una plaga de alto potencial que
del medio, variando desde los climas fríos pone en riesgo la agricultura y ganadería
del Altiplano Mexicano, las zonas cálido- (García & Lozano, 2011), afectando
tropicales de Aguascalientes, Jalisco, cultivos de la familia de las gramíneas,
Michoacán y Sinaloa; hasta llegar a los leguminosas, cucurbitáceas y frutales
climas semiáridos de Baja California, (García & Lozano, 2011; SAGARPA,
Chihuahua, Durango y Zacatecas (Fontana 2012).
et al., 2008).

Los problemas que causan los considerados los herbívoros con mayor
miembros de este grupo varían según las importancia en pastizales de zonas
especies involucradas, el tipo de cultivo templadas, en las cuales se produce la
que atacan y la región donde se detecta el mayor cantidad de alimentos para el
problema (Rivera, 2004). Alrededor de hombre (Gangwere et al., 1997).
treinta especies han sido catalogadas El chapulín cuando se encuentra en
como plagas en cultivos de México (Anaya estado de ninfa y adulto causa severos
et al., 2000) pertenecientes a las familias daños, llegando a consumir casi la mitad
Acrididae, Gryllidae, Pyrgomorphidae, de su peso corporal de forraje verde en un
Romaleidae y Tettigonidae. día, lo que equivale a 250 miligramos
Entre las especies que han llegado a diarios, es decir que 10 chapulines/m2 en
tener gran importancia económica una ha. se llegan a abastecer con 25 kg,
destacan: Sphenarium purpurascens, cantidad que equivale al consumo que
Sphenarium mexicanum, Melanoplus spp., realiza una vaca en un día (García
Taeniopoda eques y Brachystola magna, Gutiérrez et al., 2006; Chaírez-Hernández
afectando en el Altiplano y Norte una et al, 2008); con esto se reduce de forma
superficie territorial de 300,000 ha considerable el valor del forraje de los
aproximadamente (Fontana et al., 2008) pastizales provocando una disminución en
La Dirección de Sanidad Vegetal de el peso del ganado (Barrientos-Lozano &
México dio a conocer que los estados más Amlaguer-Sierra, 2009).
afectados por plaga de Chapulín son: Lockwood et al. (1993) reportan que
Aguascalientes, Chihuahua, Coahuila, cuando se presenta una población densa
Estado de México, Durango, Guanajuato, de Melanoplus differentialis se puede llegar
Hidalgo, Puebla, Querétaro, San Luis a destruir en tres o cuatro días un cultivo
Potosí, Michoacán, Tlaxcala, Veracruz y de plantas jóvenes de maíz. Por otro lado,
Zacatecas; y los cultivos que presentan Belovsky et al. (2000) mencionan que al
más daños son: calabaza, cebada, frijol, haber densidades bajas de chapulines (8
maíz y sorgo, ya que las ninfas y adultos ejemplares/m2) se pueden causar daños
se llegan a alimentar principalmente de sus considerables en el forraje (superior al
tallos, hojas y frutos (Fontana et al., 2008). 70%).
Los acridoideos presentan en su grupo
diversos miembros considerados plagas, CONTROL QUÍMICO DE CHAPULÍN
que junto con los mamíferos son

El control químico de plagas es Estados Unidos han sido restringidos
definido como la prevención o represión alrededor de 90 plaguicidas, de los cuales
del desarrollo de sus poblaciones mediante 30 son utilizados en México (INEGI, 1998).
el uso de substancias químicas, y es a la El uso inmoderado de estos productos ha
vez, la mejor y peor solución al problema provocado riesgos para la vida animal, al
de chapulín en campo; la mejor por el eliminar fauna benéfica que llega a impedir
efecto inmediato y confiabilidad, y el peor el surgimiento de otros insectos como
por los efectos secundarios indeseables plaga.
causados después de su aplicación como En este sentido, actualmente, se están
son: contaminación ambiental, estudiando la síntesis de compuestos más
desequilibrio ecológico y resistencia del amigables con el medio ambiente que
insecto a los insecticidas (Barrientos- ayuden al control de esta plaga. Un
Lozano & Almaguer-Sierra, 2009). ejemplo, es la síntesis y caracterizacióno
El control químico llega a solucionar el de feromonas sexuales (Fürstenua et al.,
problema por un lapso de tiempo corto 2013).
provocando altas mortalidades en las
plagas y que solo unos pocos individuos CONTROL BIOLÓGICO DE CHAPULÍN
que reúnen características especiales El concepto de control biológico ha
suelan sobrevivir a los tratamientos y sido definido por diversos investigadores.
posteriormente desarrollen niveles de Paul de Bach (1964) menciona que es la
resistencia más altos. El uso excesivo de acción de mantener a otra población de
estos productos causa efectos negativos organismos a una densidad más baja en
en el suelo, agua y en el medio ambiente promedio, ya sea por parásitos,
(Monzón, 2001), así mismo llegan a afectar predadores o patógenos; en 1971 Falcon
la salud de las personas debido a los incluye el uso de microorganismos como
residuos que quedan en los frutos donde agentes de control que surgen
han sido aplicados (Brun et al., 1989; naturalmente y son introducidos o
Depieri et al., 2005). aplicados como insecticidas microbianos;
En México se utilizan 60 % de los finalmente en 1987 el término se define
veintidós plaguicidas considerados como nuevamente como el uso de organismos
dañinos para la salud y el medio ambiente, naturales o modificados genéticamente,
de los cuales 42 % son fabricados en el genes o sus productos para reducir los
país, por otro lado se conoce que en

efectos de organismos plaga (Gabriel & Existe una gran variedad de
Cook, 1990). organismos que utilizan los chapulines
El uso del control biológico se realiza como alimento o que parasitan a los
desde hace varios siglos. En 1980 la mismos por lo que pueden ser utilizados
National Academic of Sciences menciona como control biológico (Tabla 2) y el
que la idea de usar agentes microbianos análisis de cada uno se realiza a
para el control de insectos fue concebido continuación.
en el siglo XVIII. En la actualidad se ha
encontrado una gran cantidad de Depredadores vertebrados
organismos con potencial microbiano La araña Neoscona spp. se ha
contra diversas poblaciones de insectos encontrado depredando ninfas de chapulín
plaga en diversos sectores., dentro de que quedan atrapadas en su telaraña
estos se han reportado más 2000 cuando el maíz y la maleza están en
microorganismos naturales con potencial floración; el chapulín salta y
para formar parte de un programa de accidentalmente queda inmovilizado en la
control biológico. Entre los agentes red donde es capturado por el depredador,
entomopatógenos se encuentran por lo y este inmediatamente lo envuelve para
menos, 100 especies de bacterias, 100 de después hacerlo parte de su dieta (Figura
virus, 300 de protozoarios y 750 especies 3a) (Salas-Araiza & Salazar-Solis, 2009).
de hongos (Monzón, 2001). Rivera (2004) reporta en Durango la
El método clásico de control biológico presencia de Araneus diadematus, Argiope
se basa en introducir en un área en la que aurantia y Aphonopelma spp. depredando
aun no se presenta, un enemigo natural ninfas del género Syrbula; de igual forma
adecuado para una plaga que favorezca su Salas-Araiza & Salazar-Solis (2009)
control (Julien, 1992), este método tiene reportan la presencia del género Argiope
una gran ventaja ya que todo organismo en los Estados de Irapuato y Guanajuato.
vivo (plantas, animales y el hombre) tiene El chapulín forma parte de la dieta de
enemigos naturales que pueden combatirlo Toxostoma curvirostre y Mimus polyglottos,
y que están sujetos a un amplio número de estas aves se han encontrado depredando
parasítoides, depredadores y patógenos en solo un 6 % de las comunidades con
(Henry et al., 1985). registro natural de chapulín. Ambas
especies consumen ninfas, pero a M

Tabla 2. Organismos que pueden ser utilizando en el control biológico del chapulín
Depredadores vertebrados Arañas de los géneros Neoscona, Araneus,

Argiope, Aphonopelma,
Aves de los géneros Toxostomas y Mimus
Moscón del género Efferia
Animales como ratones, ardillas, musarañas,

coyotes, zorras y zorrillos
Nemátodos Familias Allantonenematidae, Gordiaceae,

Parasitylenchidae, Phaenopsitylenchidae,
Tetradonematidae, Mermithidae, Iotonchiidae,
Allantonematidae, Sphaerulariidae,
Steinernematidae y Heterorhabditidae
Protozoarios Nosema
Virus Entomopoxvirus, Polihedrosis nuclear (VPN),

Baculoviridae, Reoviridae y Poxvirida.
Plantas entomopatógenas Proboscidea
Bacterias entomopatógenas Coccobacillus, Bacillus
Hongos entomopatóngenos Beauveria, Metarhizium, Entomocela,

Verticillium, Paecilomyces, Hirsutella
polyglottos se le ha encontrado realizaron un estudio en el cual reportan

consumiendo algunas especies de tamaño tres aves que pueden consumir hasta 100
menor, que al volar llaman su atención y chapulines por día, entre las que se
las capturan (Branson, 2005; Mullié & encuentran Sturnella spp, respecto a otros
Youssoupha, 2010). Mc Ewen et al. (2002) vertebrados es conocido que el chapulín

Fig. 3. Control biológico del chapulín. a. El insecto Neoscopna sp. atacando a un chapulín adulto
(Cotinis, 2005), b. Moscón de la especie Efferie atacando al chapulín Conozoa carinata (Huachuca,
2009), c. Nemátodo Mermis nigrescens emergiendo del cuerpo del chapulín M. differentialis (Capinera,
1987), d. Esporas del protozoario Nosema lacustae presente en el interior del un chapulín (SIP, 2000),
e. Planta entomopatógena Proboscidea louisianica (Mosquin, 2007), f. Producción in vitro de B.
polilliae (Hidalgo, 2001), , g. Chapulín atacado por el hongo entomoatógeno Beauveria bassiana.
forma parte de la dieta del coyote Canis Chapulín (Figura 3b) en Querétaro. Rees &
latrans (Guerrero et al., 2002). Onsager (1985) reportan que este insecto
Por otro lado, el moscón Efferia spp. se tiene una alta capacidad voraz y logra
ha encontrado depredando ninfas de capturar al chapulín en pleno vuelo,

sin embargo, de las 856 especies Mermithidae, Iotonchiidae,
reportadas 26 depredan chapulín y solo Allantonematidae, Sphaerulariidae,
seis tienen definida su preferencia por este Steinernematidae y Heterorhabditidae
insecto. (Dillman & Sternberg, 2012).
Los enemigos naturales del chapulín Los nemátodos de la familia Mermithidae y
son variados; se conoce que algunos Gordiaceae son parásitos de los
pequeños como ratones, ardillas y chapulines. Dentro de los mermítidos, las
musarañas, así mismo especies de especies, Agamospirura melanopis,
coyotes pequeños, zorras y zorrillos se Agamermis decaudata, Hexamermis spp. y
alimentan de acrídidos cuando están Mermis nigrescens (Figura 3c), han sido
disponibles, y con esto contribuyen en su recolectados de chapulines. Estos
control. Sin embargo sus infestaciones nemátodos necesitan de dos a cuatro años
llegan a ser tan grandes que hace para el desarrollo de cada generación, en
necesario su regulación a través de los periodos de lluvias las hembras salen
aplicaciones en sitios de eclosión (McEwen del suelo y ovipositan sobre la vegetación,
et al., 2002). los chapulines consumen la flora
contaminada con los huevecillos y dentro
Nemátodos de su tubo digestivo eclosionan los
Los nemátodos contemplan un grupo nemátodos, estos permanecen en los
del cual se ha comenzado a trabajar en chapulines alrededor de cuatro a diez
México, con altas posibilidades de semanas, y al madurar la larva sale del
producción y comercialización. Por acrídido matándolo y cae al suelo para su
naturaleza, son agentes con alta capacidad hibernación. Cabe hacer mención que en
para buscar a su presa, pero al mismo el Estado de Irapuato se ha observado a T.
tiempo son poco específicos y no logran eques, B. diabolicum y M. differentialis con
distinguir a un insecto “blanco”. De presencia de nemátodos (Hostetter, 2000).
nematodos entomopatógenos se conocen
más de treinta familias relacionadas a Protozoarios
insectos, de las cuales solo nueve El protozoario Nosema locustae se
presentan potencial para el control encuentra dentro de los organismos
biológico: Allantonenematidae, patógenos capaces de combatir
Gordiaceae, Parasitylenchidae, poblaciones altas de chapulines (Figura
Phaenopsitylenchidae, Tetradonematidae, 3d). El Agricultural Research Service

Rangeland Insect Laboratory del United gran importancia ya que se ha observado
States Department of Agriculture (USDA) que puede ser utilizado como agente de
realizó más de veinte estudios en los control del chapulín (Garcia & Lozano.,
cuales se menciona que este protozoario 2011).
es seguro y efectivo para el control de En México, el Centro de
chapulín. Investigaciones de Estudios Avanzados del
Nosema locustae se encuentra instituto Politécnico Nacional
registrado en Estados Unidos como agente (CINVESTAV) ha comenzado a trabajar
para el control de chapulín desde 1980 con el virus de la Polihedrosis Nuclear
(Tanada & Kaya., 1992) y puede controlar (VPN) de Neodiprion sertifer involucrando
grillos y acrididos en pastizales a largo aspectos de biología molecular y de
plazo (Henry & Oma., 1981). Se realizaron ingeniería genética para conocer más
unas pruebas en parcelas pequeñas, en acerca de su modo de acción. Por otro
donde se aplicó un millón de esporas de N. lado, en Estados Unidos el Dr. Entwistle se
locustae y observó que en 0.45 ha se ha encargado de caracterizar la acción del
ocasionó la reducción poblacional del 50 % VPN, sin embargo se conoce que hay
de chapulines, cuatro semanas después se muchos virus que pueden actuar contra
reporto una infección entre el 30 % y 50 % insectos y ser producidos para
restante reduciendo de igual modo la comercializarlos como agentes de control
oviposicion de los huevecillos, de los de plagas (Lisansky, 1985).
cuales varios no fueron fértiles. La Así mismo se han estudiado los virus
infección por N. locustae se basa en el de la familia: Baculoviridae, Reoviridae y
debilitamiento del chapulín más que por Poxvirida. De los más utilizados han sido
una muerte instantánea, la infección los baculovirus debido a que son el grupo
además reduce la fertilidad del más seguro para utilizarse en programas
espermatozoide y la fecundidad del mismo de control biológico ya que solo atacan a
(Henry & Oma., 1981). insectos. A pesar de presentar gran
efectividad como agentes de control de
Agentes virales plagas, la producción de estos virus para
Las partículas virales se encuentran su aplicación a gran escala presentan dos
formando parte de otro grupo de agentes principales problemas. Primero, los medios
de control biológico, específicamente el son muy costosos. Segundo, los
virus Entomopoxvirus (epv) ha tomado baculovirus se adaptan rápidamente al

cultivo celular y pierden los genes tercer estadio se adhieren accidentalmente
necesarios para la supervivencia en el a los tallos y hojas de esta planta (Salas-
medio ambiente, por consecuencia Araiza & Salazar-Solis, 2009).
disminuye su actividad insecticida Proboscidea louisianica es una planta
(Caballero & Williams, 2008). semicarnivora que florece durante los
meses de junio a octubre, crece alrededor
Plantas entomopatógenas de las poblaciones de maíz y frijol, se
Desde mediados del siglo XVIII se ha reporta como una planta medicinal y
tenido interés por el uso de plantas debido a su carácter pegajoso es útil
entomopatógenas como agentes de control contra piojos y pulgas, puede obtener
biológico, tal es el caso del biólogo Charles diversos nutrientes de los insectos que
Darwin, quien destino la mayor parte de su atrapa, se caracteriza por su olor
tiempo al estudio de plantas que utilizan desagradable y por la dificultad de eliminar
insectos como parte de su dieta; dichos la substancia adherente de las
estudios se concluyeron con la publicación herramientas, piel y ropa. Su modo de
del libro “Plantas insectívoras” en el año de acción se basa en sus semillas, las cuales
1875. En la actualidad se conocen más de poseen dos ganchos que se atoran en el
500 especies de plantas fotosintéticas que tracto digestivo del animal que las
utilizan compuestos orgánicos mediante consume, matándolos y usando
los insectos que atrapan con diferentes posteriormente sus cadáveres como abono
mecanismos de captura (Evans, 1984), para nuevas plantas (Salas-Araiza &
aunque se ha observado que también Salazar-Solis, 2009).
existen plantas que utilizan extractos
químicos cuyo propósito es inhibir la Bacterias entomopatógenas
alimentación del insecto, alterando su La mayoría de las bacterias que se usan
desarrollo mediante antioviposintantes y que están en desarrollo para emplearse
(Miller & Chamberlain., 1989). como agentes de control son formadoras
La planta Proboscidea louisianica de esporas, pertenecientes a la familia
(Figura 3e) logra que los insectos se Bacillaceae y al género Bacillus. Hasta el
adhieran debido a que posee una momento solo se conocen 3 especies de
vellosidad pegajosa muy abundante. En el bacterias con posibilidad de ejercer control
Estado de Irapuato se ha observado que sobre insectos: Bacillus thuringiensis que
los chapulines al estar entre el primer y es usada para el control de plagas de

moscas negras, orugas y mosquitos, así Los hongos entomopatógenos poseen
como Bacillus popilliae que se utiliza para un gran potencial para ser empleados
el control de escarabajos japoneses como biocontroladores de plagas debido a
(Figura 3f) y Bacillus sphaericus que es que presentan altas ventajas siendo la
considerado un patógeno altamente toxico principal la forma de infección ya que son
para el control del mosquito, sin embargo los únicos microorganismos que pueden
aun no se produce comercialmente atravesar la cutícula del insecto y no es
(González et al., 2012). necasario que el chapulín se alimente de
El mecanismo de acción de estas ellos, además no afectan al humano y al
bacterias entomopatógenas se basa en la medio ambiente y son fáciles de producir
producción de proteínas tóxicas para el con sustratos ecónomicos por lo que su
insecto una vez que son ingeridas. Según aplicación es la más utilizada hoy en día
su modo de acción se pueden clasificar en: para el control biológico de estos insectos
proteínas que forman cristales con efecto que, cada año, producen importantes
tóxico sobre algún insecto (Cry) y proteínas pérdidas en el país (Mota-Delgado &
con actividad hemolíticas (Cyt), siendo las Murcia-Ordoñez, 2011).
primeras las más estudiadas (Soberon & Los hongos entomopatógenos se
Bravo, 2009). encuentran distribuidos en la naturaleza y
Aunque estas bacterias se estudian y pueden ser factores para la limitación
utilizan en el control biológico de insectos, poblacional de varias especies de insectos;
como lepidópteros, coleópteros, dípteros en la actualidad se conocen más de 750
(Tamez Guerra et al., 2001) su estudio en hongos entomopatógenos, de los cuales se
el control biológico de chapulín es muy han registrado para uso comercial los
escaso, aunque se ha reportado una toxina siguientes géneros: Beauveria,
tipo Cry denominada BTH-13 (de 64 KDa Metarrhizium, Entomocela, Verticillium,
después de su activación), producida por Paecilomyces e Hirsutella, siendo el
B. thuringiensis que presenta una alta primero el más estudiado (Humber, 2009;
toxicidad contra Locusta migratoria Moazami, 2010). Dentro de los hongos
manilensis (Song et al., 2008; Wu et al., entomopatógenos frecuentemente
2011). asociados al control de chapulín se
encuentran las especies: Beauveria
Hongos entomopatógenos bassiana (Figura 3g), Metarhizium
anisopliae y Entomophaga grylli. Tamez

bassiana (Figura 3g), Metarhizium muertos aunque también se ha
anisopliae y Entomophaga grylli. Tamez observado en insectos vivos. De esta
Guerra et al. (2001) reportan la manera, las esporas son dispersadas
comercializanción de dos productos para comenzando nuevamente el ciclo (Téllez
el control específico de chapulín: Bio- et al., 2009).
Fung (con B. bassiana como agente de La producción industrial de estos
biocontrol) y Fitosoan-M (con M. hongos se realiza, principalmente,
anisopliae como agente), ambos mediante tres formas diferentes:
producidos por CESAVEG. utilizando soportes sólidos en bandejas,
Su mecanismo de acción comienza frascos o bolsas (García-Galido et al.,
cuando una espora fúngica se adhiere a 2011; Méndez et al., 2010); en cultivo
la cuticula mediante el reconocimiento de líquido (Villalba et al., 2010) o mediante
receptores específicos del insecto. A cultivo bifásico, donde primero se realiza
continuación ocurre la penetración en el un inóculo en forma líquida para
hemocele gracias a la acción combinada posteriormente pasar a su crecimiento en
de dos mecanismos: uno físico con la un soporte sólido (Gandarilla-Pacheco et
formación de un apresorio y uno químico al, 2013). Actualmente, no existen
con la secreción de enzimas hidrolíticas protocolos estandarizados para el control
como proteasas, lipasas y quitinasas que de calidad de este tipo de productos por
degradan la cutícula facilitando la lo se están proponiendo metodologías
entrada del hongo. Una vez en el que se puedan implementar en la
hemocele, la mayoría de los hongos producción artesanal de estos productos
realizan una transición dimórfica de biotecnológicos (Castillo Rivera et al.,
micelio a levadura produciendo la 2013). Esta es una seria limitante a la
septicemia y la consecuente muerte del hora de introducir los productos
insecto. Finalmente, cuando las biológicos en las prácticas agrícolas, ya
condiciones de humedad y temperatura que en ocasiones la aplicación no se
son adecuadas, el hongo se transforma realiza correctamente o la viabilidad de
nuevamente a filamentoso de manera las esporas fúngicas es muy baja de
que las hifa emergen al exterior donde manera que no se obtienen los
esporulan, normalmente en insecto

resultados esperados perdiendo la REFERENCIAS
credibilidad ante los productores. Por Anaya RS, Romero JN & López VR
ello, es importante realizar un (2000) Manual de diagnóstico para
seguimiento oportuno en las prácticas de las especies de chapulín (Orthoptera:
campo y así poder convencer a los Acridoidea) del estado de Tlaxcala y
productores de las ventajas y virtudes estados adyacentes. Colegio de
que los productos biotecnológicos Postgraduados, México.
ofrecen a la sociedad. Barrientos-Lozano L (2003) Orthopteros
plaga de México y Centro América:
CONCLUSIÓN Guía de campo. Instituto Tecnológico
Las plagas de chapulín han ido en de Cd. Victoria, Consejo del Sistema
aumento en los últimos años debido a los Nacional de Educación Tecnológica
cambios climáticos que está sufriendo el y Conacyt, México.
país, es por ello, necesario realizar su Barrientos-Lozano L & Almaguer-Sierra P
control con un método efectivo y (2009) Manejo sustentable de
amigable con el medio ambiente como es chapulines (Orthoptera:Acridoidea)
el uso del control biológico. Dentro de los en México. Vedalia 13(2): 51-56.
diferentes organismos propuestos para Belovsky GE, Lockwood JA & Winks K
su uso industrial, destaca la producción y (2000) Recognizing and managing
comercialización de los hongos potential outbreak conditions In:
entomopatógenos. Su mecanismo de Grasshopper Integrated Pest
acción y su fácil producción utilizando Management User Handbook. (Gary
sustratos económicos son la principal L. Cunningham and Mike W.
ventaja que ofrece este método de Sampson). Technical Bulletin 1809.
biocontrol. No obstante, hay que realizar Washington, D.C. pp. 8-1 to 8-4.
un seguimiento oportuno y puntual de su Branson DH (2005) Direct and indirect
aplicación para obtener los resultados effects of avian predation on grass
esperados y convencer a los productores hopper communities in northern
de las ventajas y virtudes que estos
productos biotecenológicosfrecen.

mixed-grassprairie. Environ. Entomol. 1820), vector del paludismo en
34: 1114-1121. México. Interciencia 38(5): 387-391.
Brun LO, Marcillaud V, Gaudichon C, & Cotinis (2005) Flickr. Disponible en
Suckling DM (1989) Endosulfan http://www.flickr.com/people/pcoin/.
resistance in Hypothenemus hampei De Bach P (1964). Biological control of
(Coleoptera: Scotlytidae) in New insect pests and weeds. Reinhold
Caledonia. J. Econ. Entomol. 82(5): Pub. Corp., New York, USA.
1311-1386. Depieri AR, Martínez SS & Meneses OA
Caballero P & Williams T (2008) Virus (2005) Compatibility of the fungus
Entomopatógenos. In: Control Beauveria bassiana (Bals.) Vull.
Biológico de Plagas Agrícolas. (Deuteromycetes) with extracts of
Jacas JA &Urbaneja a (ed), seeds and leaves and the emusible
Phytoma, España. pp. 121-136. oil. Neotrop. Entomol. 34(4): 601-
Capinera JL (1987) Observations on 606.
natural and experimental parasitism Dillman AR & Sternberg PW (2012)
of insects by Mermis nigrescens Entomopathogenic nematodes. Curr.
Dujardin (Nematoda: Mermithidae). Biol. 22(11): R430-1
J. Kansas Entomol. Soc. 60(1): 159- Evans H E (1984) Insect Biology;
162. Entomophagus plants: a textbook of
Carruthers RI, Ramos ME, Larkin TS, Entomology. Addison-Wesley.
Hostetter DL & Soper RS (1997) The Publisher. California, USA.
Entomophaga grylli (Fresenius), Falcon LA (1971) Progreso del control
species complex: its biology, ecology integrado en el algodón de
and use for biological control of pest Nicaragua. Rev. Perú Entomol.
grasshoppers. Mem. Ent. Soc. Can. 14(2): 376-378.
129 (S171): 329-353. Fielding DJ (2004) Developmental time of
Castillo Rivera I, Gálvez Coutiño OR, Melanoplus sanguinipes (Orthoptera:
Torres Estrada JL & Vázquez Acrididae) at high latitudes. Environ.
Martínez, MG (2013) Control de Entomol. 35: 1166-1177.
calidad en la producción del hongo Fontana P, Buzzetti FM & Mariño P
Gliocladium virens, patógeno de (2008) Chapulines, langostas, grillos
Anopheles albimanus (Wiedemann y esperanzas de México. Guía

fotográfica. Edición Hand Books, como soporte. Revista Científica
Verona. 3(5).
Fütstenua B, Muñoz L, Coca-Abia M, García Gutiérrez C, Chaírez Hernández I,
Rosell G, Guerrero A & Quero C Rivera García E, Gurrola Reyes N &
(2013) Phytal: a candidate sex González Maldonado MB (2006)
pheromone component of the Chapulines (Orthoptera: Acridoidea)
moroccan locust Dociostaurus de pastizales de la Región de los
maroccanus. ChemBioChem 14(12): Llanos en Durango. Fol. Entomol.
1450-1459. Mex. 45(3): 273-282.
Gandarilla-Pacheco FL, Galán-Wong LJ, Garcia GC & Lozano GJ (2011) Control
Arévalo-Niño K, Elías-Santos M & biológico de plagas de chapulín en el
Quintero-Zapata I (2013) Evaluación norte-centro de México. Instituto
de aislados nativos mexicanos de Politécnico Nacional. Zacatecas,
Beauveria bassiana (Bals.) México.
Vuill.(Hypocreales: Cordycipitaceae) Gonzalez JE, Hobbs EC & Losick R
provenientes de zonas citrícolas para (2012) Cannibalism by sporulating
su producción masiva en cultivo bacteria. Science 301: 510–513.
sumergido y bifásico. Agrociencia Guerrero S, Badii MH, Zalapa SS &
47(3): 255-266. Flores AE (2002) Dieta y nicho de
Gabriel CJ & Cook CR (1990) Biological alimentación del coyote, zorra gris,
control the need for a new scientific mapache y jaguar en un bosque
framework. Bioscience. 40(3): 204- tropical caducifolio de la costa sur del
207. estado de Jalisco, México. Acta Zool.
Gangwere SK, Muraliranga MC, & Mex. (86): 119-137.
Muraliranga M (1997) The Bionomics Chaírez-Hernández I, García-Gutiérrez
of grasshoppers, katydids and their C, Gurrola-Reyes N & Echavarría-
kin. CAB International, Madras, India. Chaírez F (2008) Modelo para
García-Galindo I, Amaya-Rivera I, estimar la longevidad de ninfas y
Gallegos-Morales G, Rodríguez- periodos de eclosión de tres
Herrera R, & Aguilar CN (2011). especies de chapulines en pastizales
Analisis de hidrolasas de de Durango. Southwestern Entomol.
Metarhizium anisopliae en cultivo 33(4): 299-310.
solido sobre espuma de poliuretano

Henry JE, Wilson MC, Oma EA & Fowler Humber RA (2009) Entomogenous Fungi
JL (1985) Pathogenic microorga- In: Encyclopedia of Microbiology,
nisms isolated from West African Schaechter M (ed) Elsevier, San
grasshoppers (Orthoptera: Diego, USA. pp. 443-456
Acrididae). Trop. Pest. Manag. 31(3): INEGI (1998) Anuario estadístico del
192-195. Estado de Zacatecas. Gobierno de
Henry JE & Oma EA (1981) Pest control Estado de Zacatecas.
by Nosema locustae, a pathogen of Julien MH (1992) Biological control of
grasshoppers and crickets. In: weed. A world catalogue of agents
Microbial control of pests and plant and their target weed. International
diseases. Burges HD (ed), Academic Institute of Biological Control.
Press, New York, USA. pp. 573-586. Wallingford, UK.
Hewitt GB (1979) Hatching and Lisansky SG (1985) Production and
development of rangeland commercialization of pathogens. In:
grasshoppers in relation to forage Biological pest control: the
growth, temperature, and precipita- glasshouse experience. Hussey NW
tion. Environ. Entomol. 8(1): 24-29. & Scopes S (ed), Blandford Press,
Hidalgo E (2001) Usos de microorga- pp. 210-218.
nismos para el control de Lockwood JA (1993) Environmental
Phyllophaga spp. Revista Manejo issues involved in biological control
Integrado de Plagas 60:I-IV. of rangeland grasshoppers
Hostetter DL (2000) Natural enemies (Orthoptera: Acrididae) with exotic
attacking grasshopper nymphs and agents. Environ. Entom. 22(3): 503-
adults. In Grasshopper Integrated 518.
Pest Management User Handbook. McEwen LC, Petersen BE & Althouse
Cuningham GL & Sampson MW (ed) CM (2002) Biological Control: birds
United States Department of and wildlife as grasshopper
Agriculture Animal and Plant Health predators. In: Field guide to common
Inspection Services Technical western grasshoppers, Pfadt RE (ed)
Bulletin pp. I.8, 1-7. Wyoming Agricultural Experiment
Huachuca C (2009) Nature photography, Station. Bulletin 912: 10-1,10-4.
writing, tour leading. Arizona. En:
http://nwiassoc.com/5.html.

Méndez A, del Pozo E, García I & Green Muscle (Metarhizium acridum)
González A (2010) Evaluación de used for grasshopper control. J. Orth.
sustratos sólidos para la producción Res. 19(1): 139-155.
masiva de Nomuraea rileyi (Farlow) Rees NE & Onsager JA (1985)
Samson. Revista de Protección Parasitism and survival among
Vegetal 25(2): 108-112. rangeland grasshoppers in response
Miller JA & Chambrelain WF (1989) to suppression of robber fly (Diptera:
Azadirachtin as a larvicide against Asilidae) predators. Environ.
the horn fly, stable fly and house fly Entomol. 14: 20-23.
(Diptera: Muscidae). J. Econ. Rivera GE (2004) Records of predators
Entomol. 82: 1375-1378. and parasites (vertebrates and
Moazami N (2011) Biological Control In: invertebrates) of creosote bush
Comprehensive Biotechnology, Moo- grasshopper. Acta Zool. Mex. 20(1):
Young M (ed) Academic Press, New 287-290.
York, USA. 3: 731-739 SAGARPA (2012) Guía de plaguicidas
Monzón A (2001) Producción, uso y Autorizados de Uso Agrícola.
control de calidad de hongos Dirección Estatal de Sanidad
entomopatógenos en Nicaragua. Vegetal.
Manejo Integrado de Plagas 63: 95- Salas-Araiza MD & Salazar-Solis G
103. (2009) Enemigos naturales de la
Mosquin D (2007) Proboscidea plaga del chapulín (Orthoptera:
louisianica subsp. Fragrans. Acrididae) con énfasis en
Vancouver B.C. Disponible en Guanajuato, México: Una breve
http://www.botanicalgarden.ubc.ca/p revisión. Vedalia 13(2): 57-64.
otd/(2007)/07/proboscidea_louisianic SIP (2000) Midwest Institute for
a_subsp_fragrans.php#002207. Biological Control. Disponible en
Motta-Delgado PA & Murcia-Ordoñez B http://wwx.inhs.illinois.edu/research/b
(2011) Hongos entomopatógenos iocontrol/pathogens/typesofpathogen
como alternativa para el control s/photos/6m-nlocustae/
biológico de plagas. Revista Soberon M & Bravo A (2009) Bacillus
Ambiente y Água 6(2): 77-90. thuringiensis y sus toxinas
Mullié WC & Youssoupha G (2010) Does insecticidas. Microbios en línea.
bird predation enhance the impact of UNAM México. Disponible en

http://www. biblioweb. dgsca. unam. de acción y respuesta en la relación
mx/libros/microbios/Cap12.. de hongos entomopatógenos e
Song L, Gao M, Dai S, Wu Y, Yi D, Li R insectos. Rev. Mex. Mic. 30: 73-80.
(2008) Specific activity of a Bacillus Uribe-González E & Santiago-Basilio MA
thuringiensis strain against Locusta (2012) Contribución al conocimiento
migratoria manilensis. J. Invertebr. de enemigos naturales del chapulín
Pathol. 98(2): 169-176. (Orthoptera:Acridoidea) en el Estado
Tanada Y & Kaya HK (1992) Insect de Querétaro, México. Acta Zool.
Pathology. Academic Press. New Mex. 28(1): 133-144.
York, USA. Villalba PL, Grillo-Ravelo H & Cupull R
Tamez Guerra P, Galán Wong LJ, (2010) Evaluación de tres sistemas
Medrano Roldán H, García Gutiérrez de agitación para la producción de
C, Rodríguez Padilla C, Gómez blastosporas del hongo Beauveria
Flores RA & Tamez Guerra RS bassiana (Bálsamo) Vuillemin.
(2001) Bioinsecticidas: su empleo, Centro Agrícola 37(1), 17-21.
producción y comercialización en Wu Y, Lei CF, Yi D, Liu PM & Gao MY
México. Ciencia UANL 4(2): 143-152. (2011) Novel Bacillus thuringiensis δ-
Téllez Jurado A, Cruz Rarmírez MG, Endotoxin Active against Locusta
Mercado Flores Y, Torres Asaff A, migratoria manilensis. Appl. Environ.
Arana Cuenca A (2009) Mecanismos Microbiol, 77(10): 3227-3233.


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Año 2014 Volúmen 18 Número 1

MESA DIRECTIVA Dr. Sergio Sánchez Esquivel

Dr. Víctor Manuel Loyola

DISEÑO GRAFICO E IMAGEN

Lic. Nayeli Quinto (SODIO NET)

ISSN 0188-4786, revista cuatrimestral publicada por la Sociedad Mexicana de Biotecnología y

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 2

INSTRUCCIONES PARA AUTORES 7

Contról Biológico del Chapulín en México

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 3

México es uno de los 10 principales productores de alimentos en el mundo. Con

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en papayas y en el 2013 por Cyclospora en ensaladas. Lo anterior no es un indicativo

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 5

Recientemente en un estudio binacional, hemos logrado identificar y cuantificar

Dr. J. Santos García A.

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 6

Los idiomas de la revista son el Español y el Inglés.

2. Las fronteras de la biotecnología: revisiones de nuevos campos o nuevas aplicaciones de la

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4. Problemas de bioseguridad, bioética y biodiversidad relacionados con las aplicaciones de la

5. La educación, la cultura y la difusión tecnológica en relación con la biotecnología. Por ejemplo:

6. Oportunidades y propuestas para mejorar la cooperación y el desarrollo biotecnológicos. Por

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 8

3. Se deberá añadir un Resumen de no más de 250 palabras en Español y un Abstract en Inglés

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Para congresos y reuniones: Se aceptarán un máximo de dos citas de este tipo.

Para tesis de pre y posgrado:

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Los trabajos solamente se reciben vía correo electrónico en la dirección smbiotec@yahoo.com.mx

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Armenta-Jaime Silvia, y Rodríguez-Sanoja Romina*.

Departamento de Biología Molecular y Biotecnología. Instituto de Investigaciones

Los módulos de unión a carbohidratos (CBM, Carbohydrate-Binding Module) son

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 12

La interacción proteína-carbohidrato como las glucósido-hidrolasas u otras

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 13

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 14

Fig. 1. Estrategia experimental para la obtención de variantes de los dominios de fijación al

es elegir el procedimiento metodológico forma inespecífica dentro del gen que

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 15

Fig. 2. Métodos comúnmente utilizados para generar diversidad durante la construcción de

MÉTODOS PARA LA ELECCIÓN DE la transformación de la biblioteca de ADN

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 16

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 17

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La forma o conformación espacial del sitio de unión es clave la presencia de

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 19

amilasa de Lactobacillus amylovorus, se aminoácidos involucrados en el sitio de

confirmó que la principal contribución para unión durante la interacción CBM-

que ocurra el reconocimiento está dada por carbohidrato.

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Existen pocos reportes donde se

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BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 23

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 24

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 25

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 26

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 27

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 28

BioTecnología, Año 2014, Vol. 18 No. 1 29

Géneros Melanoplus, Brachystola, Sphenaium,