I.

INTRODUCCION
Son sustancias cristalinas, casi siempre de sabor dulce; tienen carácter ácido como
propiedad básica y actividad óptica; químicamente son ácidos carbónicos con, por lo
menos, un grupo amino por molécula, 20 aminoácidos diferentes son los componentes
esenciales de las proteínas.

Aparte de éstos, se conocen otros que son componentes de las paredes celulares. Las
plantas pueden sintetizar todos los aminoácidos, nuestro cuerpo solo sintetiza 16,
aminoácidos, éstos, que el cuerpo sintetiza reciclando las células muertas a partir del
conducto intestinal y catabolizando las proteínas dentro del propio cuerpo.
Los aminoácidos son las unidades elementales constitutivas de las moléculas
denominadas Proteínas. Son pues, y en un muy elemental símil, los "ladrillos" con los
cuales el organismo reconstituye permanentemente sus proteínas específicas
consumidas por la sola acción de vivir.

Proteínas que son los compuestos nitrogenados más abundantes del organismo, a la vez
que fundamento mismo de la vida. En efecto, debido a la gran variedad de proteínas
existentes y como consecuencia de su estructura, las proteínas cumplen funciones
sumamente diversas, participando en todos los procesos biológicos y constituyendo
estructuras fundamentales en los seres vivos. De este modo, actúan acelerando
reacciones químicas que de otro modo no podrían producirse en los tiempos necesarios
para la vida (enzimas), transportando sustancias (como la hemoglobina de la sangre, que
transporta oxígeno a los tejidos), cumpliendo funciones estructurales (como la queratina
del pelo), sirviendo como reserva (albúmina de huevo), etc.

Los alimentos que ingerimos nos proveen proteínas. Pero tales proteínas no se absorben
normalmente en tal constitución sino que, luego de su desdoblamiento ("hidrólisis" o
rotura), causado por el proceso de digestión, atraviesan la pared intestinal en forma de
aminoácidos y cadenas cortas de péptidos, según lo que se denomina " circulación
entero hepática. Esas sustancias se incorporan inicialmente al torrente sanguíneo y,
desde allí, son distribuídas hacia los tejidos que las necesitan para formar las proteínas,
consumidas durante el ciclo vital.
Se sabe que de los 20 aminoácidos proteicos conocidos, 8 resultan indispensables (o
esenciales) para la vida humana y 2 resultan "semi indispensables". Son estos 10
aminoácidos los que requieren ser incorporados al organismo en su cotidiana
alimentación y, con más razón, en los momentos en que el organismo más los necesita:
en la disfunción o enfermedad. Los aminoácidos esenciales más problemáticos son el
triptófano, la lisina y la metionina. Es típica su carencia en poblaciones en las que los
cereales o los tubérculos constituyen la base de la alimentación. Los déficit de
aminoácidos esenciales afectan mucho más a los niños que a los adultos.
Hay que destacar que, si falta uno solo de ellos (Aminoácido esenciales) no será posible
sintetizar ninguna de las proteínas en la que sea requerido dicho aminoácido. Esto puede
dar lugar a diferentes tipos de desnutrición, según cual sea el aminoácido limitante.
  Objetivos
 Identificar aminoácidos por la técnica de ninhidrina.
 Separa mezclas de aminoácidos por técnica de cromatografía en papel.
 Contribuir a que el estudiante desarrolle la capacidad de aprendizaje
autónomo y de actualización permanente de los conocimientos y
habilidades; de trabajo en equipo .

II.MATERIALES.
MATERIAL / EQUIPOS REACTIVOS
 Tubos de ensayo de 11x30  Acido acético 0.1 N
 Gradilla  Butanol
 Pipetas graduadas de  Arginine
1,5,10ml
 Micropipetas capilares  Cysteine
 Fiola de 100ml  Alanine
 Phmetro  Propanol

 Buretas
 Placa petrir
 Lamina portaobjeto
 Papel watman
 Estufa
 Espectofotometro
III. PARTE EXPERIMENTAL.

 CROMATOGRAFIA EN PAPELUNIDIMENCIONAL.

 Se ha cortado el papel watman a la medida de

25x3cm .

 Luego lo pusimos la cuerda la cual servirá para la

prueba cromatografía, también marcamos los tres
puntos la cual será para los reactivos.

 Después lo pasamos por el agua destilada , luego por

el acido acético y lo pasamos a secar en la estufa

 Colocamos con la micropipeta en los puntos marcados

los reactivos de arginine, cysteine y laanine

 Luego lo colocamos en la cámara cromatografica que

contiene butanol , después de un tiempo que lo
dejamos absorver luego lo pasamos por la ninhidrina y
lo hacemos secar para así observar las manchas
violáceas o azuladas que esto viene a ser el revelado .
  TECNICA DE LA NINHIDRINA.
SUSTANCIA T1 T2 T3 T4 T5
Gly(mg/ml),ml 0.1 0.2 0.3 0.5
Agua 0.5 0.4 0.3 0.2
destilada, ml
Reatv.De 1 1 1 1 1
Ninh,ml

 1S0 TUBO

 Agregamos 0.5ml de agua destilada y 1 de Ninhidrina

 20 tubo
 Agregamos (gly/ml) .ml 0,1ml , luego agregamos 0.4 ml de agua
destilada y la ninhidrina 1 ml

 30tubo
 Agregamos (gly /ml ) ml 0.2ml , luego agregamos agua destilada 0.3 ml
y de después el reactivo de la ninhidrina 1ml

 40tubo

 Agregamos (gly/ml) agregamos 0.3 ml , luego agregamos 0,2 de agua

destilada y luego el reactivo de la ninhidrina que se coloco 1ml

 50tubo

 Agregamos agregamos 0.5 ml , luego agregamos el reactivo de la

ninhidrina que se coloco 1ml

Luego pasarlo a una ebullición , luego enfriar y en cada tubo debe tener 3.5 ml
de la mecla propanol dejar tapar 15 minutos a temperaturade ambiente . luego
lo pasamos al espectofometro para que nos indique el porcentaje que contiene
cada tubo de ensayo .
IV. PARTE TEORICA
AMINOACIDOS

Un aminoácido es una molécula orgánica con un grupo amino (-NH2) y un grupo

carboxilo (-COOH). Los aminoácidos más frecuentes y de mayor interés son aquellos
que forman parte de las proteínas. Dos aminoácidos se combinan en una reacción de
condensación entre el grupo amino de uno y el carboxilo del otro, liberándose una
molécula de agua y formando un enlace amida que se denomina enlace peptídico; estos
dos "residuos" de aminoácido forman un dipéptido. Si se une un tercer aminoácido se
forma un tripéptido y así, sucesivamente, hasta formar un polipéptido. Esta reacción
tiene lugar de manera natural dentro de las células, en los ribosomas.

Todos los aminoácidos componentes de las proteínas son L-alfa-aminoácidos. Esto

significa que el grupo amino está unido al carbono contiguo al grupo carboxilo (carbono
alfa) o, dicho de otro modo, que tanto el carboxilo como el amino están unidos al
mismo carbono; además, a este carbono alfa se unen un hidrógeno y una cadena
(habitualmente denominada cadena lateral o radical R) de estructura variable, que
determina la identidad y las propiedades de cada uno de los diferentes aminoácidos.
Existen cientos de radicales por lo que se conocen cientos de aminoácidos diferentes,
pero sólo 20 (actualmente se consideran 22, los últimos fueron descubiertos en el año
2002) forman parte de las proteínas y tienen codones específicos en el código genético

Ácido acético
El ácido acético, ácido metilencarboxílico o ácido etanoico, se puede encontrar en
forma de ion acetato. Éste es un ácido que se encuentra en el vinagre, siendo el principal
responsable de su sabor y olor agrios. Su fórmula es CH3-COOH (C2H4O2). De acuerdo
con la IUPAC se denomina sistemáticamente ácido etanoico.

Fórmula química; el grupo carboxilo, que le confiere la acidez, está en azul

Es el segundo de los ácidos carboxílicos, después del ácido fórmico o metanoico, que
sólo tiene un carbono, y antes del ácido propanoico, que ya tiene una cadena de tres
carbonos.

El punto de fusión es 16,6 °C y el punto de ebullición es 117,9 °C.

En disolución acuosa, el ácido acético puede perder el protón del grupo carboxilo para
dar su base conjugada, el acetato. Su pKa es de 4,8 a 25 °C, lo cual significa, que al pH
moderadamente ácido de 4,8, la mitad de sus moléculas se habrán desprendido del
protón. Esto hace que sea un ácido débil y que, en concentraciones adecuadas, pueda
formar disoluciones tampón con su base conjugada. La constante de disociación a 20 °C
es Ka = 1,75·10-5.

Es de interés para la química orgánica como reactivo, para la química inorgánica como
ligando, y para la bioquímica como metabolito (activado como acetil-coenzima A).
También es utilizado como sustrato, en su forma activada, en reacciones catalizadas por
las enzimas conocidas como acetiltransferasas, y en concreto histona acetiltransferasas.

Hoy día, la vía natural de obtención de ácido acético es a través de la carbonilación

(reacción con CO) de metanol. Antaño se producía por oxidación de etileno en
acetaldehído y posterior oxidación de éste a ácido acético

Butanol
es un alcohol de fórmula H3C-(CH2)3-OH. Los isómeros de este compuesto son el butan-2-ol, el
metilpropan-1-ol y el metilpropan-2-ol. Se cataloga como alcohol primario, porque el grupo
hidroxilo está unido a un carbono primario; y como un alcohol de fusel al tener más de dos
carbonos

Arginina
La arginina (arg o R) es uno de los 20 aminoácidos que se encuentran formando parte
de las proteínas. En el tejido hepático, la arginina puede ser sintetizada en el ciclo de la
ornitina (o ciclo de la urea). Se clasifica, en población pediátrica, como un aminoácido
esencial. Este aminoácido se encuentra involucrado en muchas de las actividades de las
glándulas endocrinas.2

PROPANOL
es un alcohol incoloro, inflamable, con un olor intenso y muy miscible con el agua. Su
fórmula química semidesarrollada es H3C-HCOH-CH3 y es el ejemplo más sencillo de
alcohol secundario, donde el carbono del grupo alcohol está unido a otros dos carbonos.
Es un isómero del propanol
Cisteína
La cisteína ( abreviada como Cys o C) es un α-aminoácido con la fórmula química
HO2CCH(NH2)CH2SH. Se trata de un aminoácido no esencial, lo que significa que
puede ser sintetizado por los humanos. Los codones que codifican a la cisteína son
UGU y UGC. La parte de la cadena donde se encuentra la cisteína es el tiol que es no
polar y por esto la cisteína se clasifica normalmente como un aminoácido hidrofílico. La
parte tiol de la cadena suele participar en reacciones enzimáticas, actuando como
nucleófilo. El tiol es susceptible a la oxidación para dar lugar a puentes disulfuros
derivados de las cisteína que tienen un importante papel estructural en muchas
proteínas. La cisteína también es llamada cistina, pero esta última se trata de un dímero
de dos cisteínas a través de un puente disulfuro.

alanina
es uno de los aminoácidos que forman las proteínas de los seres vivos. Es codificada por
los codones GCU, GCC, GCA y GCG. Es el aminoácido más pequeño después de la
glicina y se clasifica como hidrófobico.

La alanina es un aminoácido no esencial para el ser humano pero es de gran

importancia. Existe en dos distintos enantiómeros - L-alanina y D-alanina. La L-alanina
es uno de los 20 aminoácidos más ampliamente usados en biosíntesis de proteína, detrás
de la leucina, encontrándose en un 7,8 % de las estructuras primarias, en una muestra de
1.150 proteínas.2 La D-alanina está en las paredes celulares bacteriales y en algunos
péptidos antibióticos. Se encuentra tanto en el interior como en el exterior de las
proteínas

VIURET
es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con
dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida.

Está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4), junto con tartrato
de sodio y potasio (KNaC4H4O6·4H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en
presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con polipéptidos de cadena
corta. El hidróxido de potasio no participa en la reacción, pero proporciona el medio
alcalino necesario para que tenga lugar.
DISCUSIONES YCONCLUSIONES

DISCUSION
Se pudo observar que todas las muestras se coagularon, debido al gran tamaño de sus
moléculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formándose
coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con
soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc. La coagulación de las proteínas es un proceso
irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre
la proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria.
CONCLUSIONES
*Las proteínas constituyen una de las moléculas más importantes en el organismo, ya que
cumple muchas funciones.
*Las reacciones se utiliza en trabajos analíticos, así como en la visualización de las
bandas de los aminoácidos después de su separación por electroforesis o por
cromatografía.
*Las proteínas están constituidos por aminoácidos, por los cuales los métodos se basan en
el reconocimiento de los aminácidos.
Cálculos y resultados :

Se uso una forma determinar la curva de calibración :

C1V1 : C2V2

1: (1ml /ml) x (0,1ml) : x(1.5ml)

X: 0.1mg/1,.5 : 0.06

2:(1ml /ml) x (0,2ml) : x(1.5ml)

X: 0.2mg/1,.5 : 0.13

3:(1ml /ml) x (0,3ml) : x(1.5ml)

X: 0.3mg/1,.5 : 0.2

4:(1ml /ml) x (0,5ml) : x(1.5ml)

X: 0.5mg/1,.5 : 0.33

T1 T2 T3 T4 T4
V2 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5
cc 0.06 0.13 0,2 0.33

Fc = (
RECONOCIMIENTO DE VIURET Y EL PORCENTAJE EN EL
ESPECTOFOTOMETRO

T1: Color incoloro 0.029%

T2 Color azul 1.237%
T3 color violeta 0.824%
T4 color violeta claro 0,582%
T5 color violeta incolor 0.076%

RECOMENDACIONES

El valor óptimo o deseado de suministro de un nutriente determinado siempre se

encuentra por encima de su requerimiento real. La recomendación nutricional con todas
las adiciones en relación con los requerimientos reales se corresponde con la cantidad
de un nutriente determinado que en diferentes condiciones ambientales y en todas las
posibles situaciones de la vida es capaz de facilitar un óptimo o normal funcionamiento
del metabolismo del ser humano. Mientras que el establecimiento de los requerimientos
nutricionales ha sido obtenido mediante la realización de ensayos bioquímicos,
fisiológicos o clínicos, el establecimiento de las recomendaciones nutricionales
responde más a fines prácticos y tiene un enfoque meramente poblacional.1,3

Como ejemplos pioneros de recomendaciones nutricionales para grupos poblacionales

se toman siempre las primeras existentes establecidas por la Liga de las Naciones en el
año 1938 y la primera edición de las Recommended Dietary Allowances de EE.UU. en
el año 1943, las cuales cumplieron funciones de hilo conductor en consejería nutricional
en conexión con la defensa nacional en esos años. Las guerras y las limitaciones
alimentarias de diverso tipo contribuyeron de forma significativa al desarrollo del
establecimiento de recomendaciones nutricionales al nivel internacional.

Las recomendaciones para el suministro de alimentos al ser humano deben reflejar los
resultados obtenidos u observados por vías experimentales y clínicas y no deben ser
solo un ejemplo de justeza estadística o de buenos resultados epidemiológicos, sino que
deben reflejar lo más exactamente posible, la necesidad real cuantificada de la cantidad
de alimentos a suministrar para cubrir los requerimientos exactos de cada nutriente para
el ser humano.

Bibliografía

4. Bibliografía
Bioquímica
Lehninger L. Albert
Segunda edición.
Ediciones Omega
Barcelona 1990
Bioquímica
Peña Díaz Antonio et. All.
Segunda edición
Editorial Limusa
México 1990
Página de Internet
www.um.es
Universidad de Medicina