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EXTRACCIÓN DE LÍPIDOS DE CEREBRO

BRAIN LIPID EXTRACTION

Cruz Vera Yeyzon Javier* Suarez Hernández Jhon Wilmar** Pan Andrés Felipe***
Fecha de entrega: 15/10/2014

Resumen: En la práctica se pretendió extraer y separar los lípidos presentes en el cerebro de res, para posteriormente mediante
una serie de pruebas previamente asignadas hacer reconocimiento de los posibles lípidos extraídos de la muestra.

Palabras Clave: lípidos, colesterol, esfingolípidos, fosfolípidos, glucolípidos.

Abstract: In practice, an attempt was made to extract and separate the lipids present in the brain of beef, and later by a preassigned
number of tests, make possible the recognition of lipids extracted from the sample

keywords: Lipids, cholesterol, sphingolipids, phospholipids, glycolipids.

en los seres humanos. También los lípidos cerebrales pueden


Introducción ser alterados en diferentes patologías. Estudios actuales
El cerebro tiene un alto contenido de lípidos, tanto como 60% sobre cómo el envejecimiento predispone al cerebro a la
de su peso seco. Los ácidos grasos (FAS) de los fosfolípidos neurodegeneración es sin duda de gran importancia, la
del cerebro, especialmente de cadena larga mono insaturados comprensión de cómo el cerebro envejece normalmente
AF, son responsables de mantener la estructura de las también es crítica. Para abordar estas cuestiones, se revisan
membranas, mientras que los poliinsaturados AF controlar su los aspectos funcionales de los lípidos que están
fluidez Estos conjuntos combustibles están sujetos a una especialmente enriquecidos en las membranas del cerebro y
continua renovación. De hecho, los cambios en los lípidos de los cambios en la concentración y la localización de estos
la dieta materna durante el embarazo o la lactancia provocan lípidos que se producen con el envejecimiento. Asimismo,
cambios en el perfil de AG del cerebro de las crías al nacer y discutir las consecuencias de estos cambios para la
en el desarrollo postnatal temprano. Además, el cerebro plasticidad neuronal y la supervivencia. Con suerte, un mejor
adulto puede ser influenciado por las contribuciones conocimiento de estos aspectos durante el envejecimiento
específicas FA exógenos. Estos cambios implican no sólo la normal del cerebro nos acercará a la comprensión de las
cantidad total de los AG poliinsaturados administrados, sino causas y los mecanismos de su patología relacionada con la
también la relación ω-6/ω-3. edad.

Por lo tanto, la ingesta de grasas en la dieta determina la


composición FA del cerebro y, por lo tanto, puede influir en la
función neurológica y la capacidad de aprendizaje, como se
ha demostrado en algunos animales y, con menos frecuencia,

[] Cruz Vera Yeyzon Javier


Facultad Ciencias Básicas
Escuela Química
Programa Química
E-mails: duranjavier572@gmail.com
[] Suarez Hernández Jhon Wilmar
Facultad Ciencias Básicas
Escuela Química
Programa Química
E-mails jw@live.com.ar
[***] Pan Andrés Felipe
Facultad Ciencias Básicas
Escuela Química
Programa Química
E-mails: felipan17@gmail.com
Resultados y discusión Extracto II seco 0,2703 6.66%
(fosfolípidos)
Resultados y discusión Extracto III seco 0.0310 0.76%
1. Extracción y separación de lípidos. (glucolípidos)
El proceso de separación y extracción de los distintos
extractos para la muestra de cerebro se realizó mediante las Eficiencia de las extracciones
distintas centrifugaciones en cada extracto y la utilización de
solventes más afines al componente lipídico que se quisiera %EFICI= W extracto/W cerebro
extraer.
Ejemplo
2. Separación de lípidos del extracto II %EFICI = 0.1539g/4.0547 *100
Este procedimiento no se realizó debido a que se pensó que %EFICI= 3.79% para colesterol
no era necesario ya que se sugiere que las extracciones y Para hallar las eficiencias de cada extracto se procedió como
separaciones hechas en la primera parte de la sección de se muestra en el ejemplo.
laboratorio fueron adecuadas.

3. Pruebas especificas
Tabla 2 Resultado de las pruebas especificas

Prueba Prueba para Prueba Prueba para


para Acilgliceroles para Glucolípidos y
Colesterol y Fosforo Esfingolípidos
Fosfolípidos
Imagen 1 de Extracto I. Contiene principalmente colesterol, Lecitinas R. Molish
Los esteroles son solubles en acetona, al contrario de lo que Positivo Positivo Positivo
sucede con otros lípidos complejos. Positivo

Prueba para colesterol: El test realizado para la


determinación de colesterol es el test Lieberman-Burchard es
un reactivo colorimétrico utilizado para la determinación de
colesterol, lo que da un color verde intenso. Este color
comienza con un color rosa violáceo y progresa a través de
un verde claro y luego un color verde muy oscuro.

Imagen 2 de Extracto II contiene fosfolipídos. Algunos El color es debido al grupo hidroxilo (-OH) del colesterol
glicerofosfolípidos, como las lecitinas, la fosfatidiletanolamina reacciona con los reactivos lo que genera una aumento en la
y la fosfatidilserina, son solubles el éter e insolubles en conjugación de la instauración del anillo fusiona adyacente. La
acetona.} reacción cosiste en que el colesterol sufre una oxidación
gradual, formándose una molécula de colestapolieno que
posee un doble enlace adicional al colesterol, la etapa inicial
consiste en la protonación del oh del colesterol,
desprendiéndose agua, obteniéndose el ion carbonio 3,5-
colestadieno que constituye el primer paso de la reacción de
color. La oxidación del ion carbonio por el so2 produce un
ácido colesta-hexano-sulfónico cromoforo, produciendo la
tonalidad verdosa.
Imagen 3 de Extracto III cual consiste principalmente de
glucolípidos. Los glucósidos de esfingosina se disuelven en
Se utilizan reactivos específicos para la coloración de los
alcohol caliente y son insolubles en acetona y éter.
derivados del colesterol. se usa un ácido fuerte para que el
colesterol actúe como un alcohol y así pueda ocurrir la
deshidratación con la formación de un conjugado pi.
Tabla 1 para reconocimiento de lípidos del El medio debe ser anhídrido al fin de evitar que las moléculas
cerebro de agua no interfieran en la reacción de colesterol a
Peso Muestra (g) %EFICI colesterileno.
Cerebro 4,0547 -
Extracto I seco 0,1539 3.79%
(colesterol)
Figura 1 Lieberman-Burchard Figura 2 reaccion de la prueba de fosforo

Prueba para Acilgliceroles y Fosfolípidos:


Prueba de lecitina el proceso de la extraccion de la lecitina ha
sido muy dscutido desde su descubrimento en Dobley cerca
de 1847 ya que la lecitina es un compusto de fácil
autooxidacion. La lecitina esta costituida principalmente Prueba para Glucolípidos y Esfingolípidos:
poracido fosforico, glicerol,colina entre otros. MacLean [1909,
i] mostró que cuando un solución alcohólica de lecitina se trata La reacción de Molisch es una prueba de carácter cualitativo
con cloruro de cadmio, la porcentaje de nitrógeno presente para cualquier carbohidrato, donde se deshidrata (las pentosa
en forma de colina en la lecitina precipitó como el compuesto furfural o hexosas a hidroximetilfurfural) e hidroliza (el enlace
de cloruro de cadmio, es mayor que la del original lecitina; Por glucosidico) por medio de ácido sulfúrico los grupos
otro lado, la sustancia restante en el filtrado tiene funcionales, apareciendo un anillo morado debido a que en la
correspondientemente menos de su nitrógeno representado preparación el ácido es un catalizador para la hidrólisis de los
por la colina. Ademas la muestra presenta dos capas ya que enlaces glucosídicos presentes en loscarbohidratos, donde
con la adicion del cloruro de cadmio la solucion pasa a ser los polisacáridos y disacáridos los reduce a monosacáridos.
insoluble en alcohol ya que esta se une al cloruro de cadmio El reactivo de Molisch contiene naftol que es el que condensa
y se precipita. a los furfulares (de lashexosas o pentosas) y es lo que
produce el anillo morado en la preparación.

La reaccion es positiva para todos los lipidos de tipos


glucolidios es decir todos los lipidos que contiene una seccion
carbohidratada ya que esta sera la hidrolizada.
La prueba que utilizaria seria la prueba de fosforo ya que los
esfingolípidos contienen fosforo.

Figura 3 reaccion de molisch

Prueba para Fósforo: La reacción se basa en que el fosfato


inorgánico, en medio ácido, con el molibdato (reactivo 1) da
fosfomolibdato, color amarillo.

La positividad de esta reacción indica la presencia de fósforo


inorgánico. Las sustancias orgánicas dan la reacción positiva,
siempre que se haga una hidrólisis previa. La reacción positiva
se manifiesta por la reacción de un precipitado amarillo de
fosfomolibdato de amonio.
Prueba de Fehling: En un tubo de ensayo, adicione 1 mL de
fehling A y 1 mL de fehling B. Adicione 1mL de la muestra
obtenida en 3.10. Caliente en baño maría a ebullición durante
5 minutos o hasta la formación de un precipitado rojo y la
decoloración de la solución.

Analice los resultados obtenidos.

Esta prueba dio positivo (precipitado rojo) a pesar de la


coloración azul, debido que se evidenció la presenció la
presencia de un precipitado color rojo en el fondo del tubo; la
coloración azul, posiblemente, se debió al orden de los
reactivos en la adición de estos.

Conclusiones
 El proceso de extracción de los extractos para el
análisis de cada una de las muestras, tuvo poca
eficiencia para los tres extractos, obteniéndose
mayor eficiencia de extracción del extracto I.
 Realizando cada una de las muestras de lípidos en
la extracción, se evidenció la presencia de estos
aplicando cada una de las pruebas específicas
realizadas, debido a que estos resultados dieron
positivo.

BIBLIOGRAFIA

1. Maciá-Botejara, E., et al., Brain lipid composition in


rabbits after total parenteral nutrition with two
different lipid emulsions. Nutrition, 2013. 29(1): p.
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2. Ledesma, M.D., M.G. Martin, and C.G. Dotti, Lipid
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function and neuronal survival. Progress in Lipid
Research, 2012. 51(1): p. 23-35.

http://www.slideshare.net/Milisanm/reconocimiento-
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http://quimicosfarmacobiologos.bligoo.com.mx/reacc
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http://webdelprofesor.ula.ve/farmacia/gmendez/man
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http://diposit.ub.edu/dspace/bitstream/2445/13092/1/
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https://archive.org/stream/compositionofbra00darr/c
ompositionofbra00darr_djvu.txt