UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA: LABORATORIO CLINICO E HISTOPATOLOGICO

GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

PERÍODO ACADÉMICO: Abril- Agosto 2018
DOCENTE: Msc. Estefanía Heredia
ASIGNATURA: HEMATOLOGÍA II
SEMESTRE: CUARTO SEMESTRE
FECHA DE LA PRÁCTICA: 24-04-2018 NÚMERO DE LA PRÁCTICA: 3
HORA: 11H00-14H00 DURACIÓN: 3 HORAS
GRUPO N°1
NOMBRE DEL ALUMNO TANIA DAYANARA BOLAÑOS VILLA
TITULO DE LA UNIDAD: SERIE BLANCA
TEMA DE LA PRÁCTICA: " RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS "
APRENDER A LA DIFERENCIAR LOS DIFERENTES TIPOS
OBJETIVO GENERAL: DE LEUCOCITOS E INTERPRETAR EL RESULTADO.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:  Identificar las diversas células del Sistema Inmunológico
 Realizar el diferencial leucocitario del paciente al que se le
realizó el frotis sanguíneo
FUNDAMENTO TEÓRICO O CONTENIDO CIENTÍFICO:

La clasificación manual de los leucocitos utilizando la coloración Wrigth permite determinar la relación
porcentual entre las diversas especies leucocitarias. Para ellos se debe trabajar en el área central del extendido
y realizar una observación sistemática del mismo moviendo la región visualizada asegurando la no repetición
del recuento. Se recomienda que preparado sea movido formando una figura de diente de sierra, de arriba
hacia abajo, de izquierda a derecha, de abajo hacia arriba, de izquierda a derecha, y volver a comenzar el
recorrido, hasta totalizar un recuento total de por lo menos 100 leucocitos. Es ideal realizar el recuento de dos
extendidos realizados con la misma muestra para promediar los resultados. Los porcentajes que se obtienen
por este método pueden ser transformados en valores absolutos al combinar con el recuento total de
leucocitos (1).
FUNDAMENTO: Los leucocitos son parte fundamental del tejido hemático y presentan las siguientes
características: son células que tienen un mayor diámetro que los eritrocitos, presentan un núcleo de forma
irregular, su citoplasma presenta algunas granulaciones las cuales son teñidos con diferentes colorantes, y la
cromatina del núcleo puede ser de diferentes densidades (2).
Pueden distinguirse 5 tipos de leucocitos maduros (neutrófilos, eosinófilos, basófilos, monocitos y linfocitos)
basándose en general en las siguientes características:
 Tamaño de la célula
 Forma del núcleo
 Contenido de gránulos
 Consistencia de la cromatina nuclear
 Coloración de los gránulos
El 65% de leucocitos corresponde a los GRANULOCITOS: Eosinófilos, Basófilos y Neutrófilos.
El 35% corresponde a los AGRANULOCITOS: Monocitos y Linfocitos.
Tinción de Wright.
El colorante está compuesto de azul de metileno en un 50-75%, (el cual tiñe de azul las partes ácidas de las
células) y eosina (tiñe partes alcalinas), disueltos en metanol (permite la fijación de células). En los
leucocitos, tiiñe el núcleo de púrpura, dejando el citoplasma ligeramente azulado. Dada la presencia de
metanol, no requiere fijación antes de la coloración, en caso de no teñir el mismo día el extendido, fijar para
evitar deterioro del frotis. La sangre cambiará de rojo a café claro si se fija con alcohol metílico (3).

Conteo diferencial manual (en microscopio) (4).

 Colocar el frotis sanguíneo sobre la platina del microscopio para hacer la observación correspondiente.
Enfocar directamente con el objetivo de 100x (inmersión).
 Contar 100 leucocitos y anotar el número correspondiente de neutrófilos, basófilos, eosinófilos, linfocitos
y monocitos.
 Para obtener las cifras absolutas, se debe transformar la cifra porcentual de cada tipo de leucocito,
tomando como número total de estos al cien. Se pueden contar desde 100, 200, hasta 500 células,
mientras más se cuenten más preciso será el resultado, pero generalmente sólo se manejan el 100 y el
200.

VALORES DE REFERENCIA:
Cellular Relativo (%)
Neutrófilos en Banda 0-5
Neutrófilos segmentados 45 - 65
Linfocitos 30 - 40
Monocitos 3-8
Eosinófilos 1-5
Basófilos 0-1

Resultados del frotis (5).

 Núcleos de leucocitos en azul púrpura, con cromatina y paracromatina diferenciadas.
 Gránulos de neutrófilos en lila o violeta
 Gránulos eosinófilos en rojo-naranja.
 Gránulos basófilos, púrpura-azul oscuro.
 Citoplasma de linfocitos azul claro.
 Citoplasma de monocitos ligero azul.
 Hematíes en rosa y plaquetas lila oscuro
Interpretación (5).
 Linfocitosis: aumento en el número de linfocitos por encima del rango normal.
 Linfopenia: disminución del número de linfocitos por debajo del rango normal.
 Eosinofilia: aumento del número de eosinófilos por encima del rango normal.
 Eosinopenia: niveles bajos de eosinófilos.
 Basofilia: aumento del número de basófilos por encima del rango normal.
 Basofilopenia: basófilos difíciles de detectar en sangre.
 Neutrofilia: exceso de neutrófilos, aparece ante infecciones.
 Neutropenia: niveles bajos de neutrófilos, hace al paciente vulnerable a contraer infecciones, incluso las
más insignificantes.
 Monocitosis: demasiados monocitos en sangre.
Monocitopenia: bajo recuendo de monocitos.
MATERIALES Y EQUIPOS: M MUESTRA:
• Portaobjetos Sangre venosa
• Cubetas para tinción
SUSTANCIAS:
• Pizetas con agua destilada  Colorante Wright
• Toalla de papel  Solución tampón pH 7,2
• Guantes  Aceite de inmersión
• Microscopio
• Libreta
• Contador celular
• Cronómetro
PROCEDIMIENTO: TÉCNICA:

1. Homogenizar la muestra sanguínea y ANTES de 3 hrs. realizar un frotis

2. Empleando un aplicador de madera, depositar una pequeña gota de sangre en el extremo de un
portaobjetos totalmente limpio

3. Con el borde de otro portaobjetos a 20 o 30 grados, tocar la gota, esperar a que la sangre se
distribuya por capilaridad en el extremo del portaobjetos extensor y deslizarlo suavemente sobre el otro
portaobjetos, en sentido longitudinal hasta que la gota quede bien extendida sobre la superficie del
primer portaobjetos (NOTA: revisar clase de leucopoyesis para recordar la forma de hacer el frotis)
4. Dejar secar el frotis.

5. Teñir el frotis con la tinción correspondiente de la siguiente manera:

a. fijar la extensión en metanol absoluto aproximadamente 30 segundos.
b. teñir con la solución de Eosina bufferizada por 20 segundos.
c. enjuagar con agua de la llave.
d. introducir la extensión en solución de azul de policromo durante 30 segundos.
e. enjuagar con agua de la llave, dejar escurrir el agua y dejar secar al aire libre.
6. colocar una gota de aceite de inmersión y leer al microscopio con el objetivo de 100x.
7. se hará un recuento de 100 células blancas en total, DIFERENCIANDO cada una de ellas según sus
características antes citadas.
 8. evaluar la morfología de eritrocitos, leucocitos y plaquetas y reportar anormalidades

OBSERVACIONES

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:
Conclusiones:
 Para realizar la práctica es necesario conocer todos los procedimientos para realizar el frotis y la técnica
de coloración para agilitar el proceso y realizar una práctica satisfactoria..
 Es indispensable conocer los diferentes tipos de células sanguíneas de sistema inmunológico para poder
identificarlas y poder realizar el conteo de estas células.
 No se pudo realizar la identificación ni el conteo por problemas con los reactivos en la tinción.
Recomendaciones:
 Realizar más extendidos para adquirir destreza en el recuento diferencial de leucocitos
 Verificar que los reactivos no se encuentren caducos o con impurezas
 Conocer la estructura y forma de los leucocitos para facilitar el reconocimiento
RESULTADOS

OMEGA LABORATORIOS CLÍNICOS

Análisis Clínicos y Microbiológicos

NOMBRES Y APELLIDOS: Fernando Carlos Ramírez Paguay

FECHA: 08/02/2018
EDAD: 34 Años
CÓDIGO: #003

PARÁMETRO RESULTADO VR
Recuento total 100
Linfocitos 32 30-40
Monocitos 7 3-8
Neutrófilos segmentados 55 45-65
Neutrófilos en banda 0 0-5
Eosinófilos 5 1-5
Basófilos 1 0-1

Dayannnara Bolaños

CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la utilidad del estudio de las extensiones sanguíneas?
Es estudio de las extensiones sanguíneas es esencial para el análisis morfológico de las células hemáticas
y para la realización del recuento diferencial linfocitario. Además es imprescindible para la distinción de
una auténtica trombopenia de una pseudotrombopenia producida por agregados plaquetarios.
2. ¿Qué características celulares se deben observar para diferenciar a los leucocitos y poder
clasificarles?
Las características que se pueden observar para diferenciarlos y poder clasificarlos son la presencia o
ausencia de gránulos y las características tintóreas de su citoplasma, además del tamaño y cantidad de sus
núcleos.
3. Además de evaluar la serie blanca, ¿Qué otras cosas deben ser evaluados al observar una extensión
sanguínea?
La forma, color, tamaño y cantidad de los eritrocitos y la cantidad de plaquetas.
4. ¿Qué características de calidad, debe tener la extensión sanguínea para realizar la lectura
diferencial?
 La cabeza debe estar cerca de uno de los extremos del portaobjetos
 La cola debe estar cercana al otro extremo pero sin llegar a el
 El borde de la cola debe estar finamente esparcido.
  Toda la extensión debe ser fina y homogénea
 Los bordes laterales de la extensión deben estar separados de los bordes del porta por 1mm aprox.
 Una extensión normal ha de tener una longitud de las ¾ partes del portaobjetos.
5. ¿Qué significado clínico tiene un aumento de los eosinófilos?
La eosinofilia aparece frente alguna amenaza para el organismo como si fuera un síntoma. En estos casos
los eosinófilos se ven alterados y reaccionan contra patologías como el cáncer. También surgen para
combatir agentes patógenos en personas asmáticas o con trastornos autoinmunes.
6. ¿Cómo se le llama a la elevación de los linfocitos y qué significado tiene?
La linfocitosis es un incremento en el número o la proporción de linfocitos en sangre. Los linfocitos son
un tipo de leucocito, los cuales forman parte importante del sistema inmunitario, formando así una
especie de capa protectora que combate cualquier proceso infeccioso o lo defienden de cualquier ente
extraño. Cuando se presenta una situación de linfocitos altos significa que existe un porcentaje más alto y
puede generar una gran cantidad de irregularidades en el organismo.
7. Mencione 3 enfermedades o patologías que produzcan una neutrofilia:
1) Neoplasia del tracto gastrointestinal y del pulmón
2) Leucemia mieloide crónica
3) Ataques cardiacos
8. Menciones 3 patologías que manifiesten una linfopenia:
1) VIH
2) El virus de Juan Cunningham
3) Virus de la gripe

BIBLIOGRAFÍA:
1. Obregón A. ATLAS DE HEMATOLOGÍA CON INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS Y
ESCATERGRAMAS. 1st ed. Bueno Aires: José Almudí; 2002.
2. Naranjo C. ATLAS DE HEMATOLOGÍA CÉLULAS SANGUÍNEAS. 2nd ed. Manizales: Luz Castro;
2011 p.60.
3. Cambero S. T.L.C. Sara E. Cambero Martínez C.B.T.i.s. 41 “Belisario Domínguez” 01/02/2012 Manual
de prácticas de laboratorio “Biometría Hemática”. 1st ed. México: Belisario Domínguez; 2012 p.44-49.
4. Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud. Manual de procedimientos de Laboratorio en Técnicas
Básicas de Hematología. Lima - Perú: César Cabezas; 2005 p. 29 - 32.
5. Torres E. Recuento de leucocitos | Lab Tests Online-ES [Internet]. Labtestsonline.es. 2016 [citado 21
Abril 2018]. Recuperado de: https://labtestsonline.es/tests/recuento-de- leucocitos

DIRECTOR DE CARRERA DOCENTE RESPONSABLE DEL LABORATORIO