ANALISIS QUIMICO INSTRUMENTAL

• Dr. José Alfredo Cruz Monzón

• ingquimico33@hotmail.com

LEY DE BEER – LAMBERT

LEY DE LAMBERT - BEER

Potencia del haz

antes de atravesar Absortividad
el blanco

Absorbancia total Concentración molar

medida a la de las especies
longitud de onda absorbentes
λ P0
AT,l = log =ebc
P

Potencia del haz

luego de atravesar Camino
la muestra óptico

P = Transmitancia (T)
P0 A = - logT
 LIMITACIONES DE LA LEY DE BEER

REALES
* Variación de la absortividad debida al disolvente
* Concentración

APARENTES
* Instrumentales: radiación policromática
* Químicas: cambios químicos de las especies absorbentes por
interacción
con el disolvente
 DESVIACIONES DE LA LEY DE BEER
La mayoría de analitos la cumplen en un determinado intervalo de concentraciones.
Fuera de él: Desviaciones positivas o negativas.

Respuesta debida
a la autoabsorción
o a la luz escasa que
atraviesa la cubeta

Es preciso asegurar que se está

trabajando en el intervalo lineal!!
 SELECCIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA DE TRABAJO

A A
banda A banda C
banda A

banda B
banda C banda B

l concentración

Medir absorbancias en el entorno más próximo a λ max.

Pues se minimizan errores, y se logra mayor sensibilidades.

Lecturas lejos del λ max produce pequeñas variaciones que se traducen en grandes
errores.
 METODOS DE CALIBRADO

En muchos análisis químicos se mide la respuesta(señal), de un instrumento cuando se

le someten a él cantidades conocidas de analito (patrones o estándares), para luego
interpretar la respuesta de una muestra que contiene cantidades desconocidas de
analito.

Es común entonces la construcción de rectas de calibrado

Recta de Calibrado: grafico que representa la respuesta de un método analítico

(absorbancia, área, emisión, etc), en función de cantidades conocidas
de analito.
 TECNICA DE ESTANDARES EXTERNOS

Ejemplo:
Cierto laboratorio cuenta con K2Cr2O7 ( 99,8% pureza), fiolas de 100 mL y suficiente
agua destilada, entonces determine:
1. Los g de K2Cr2O7 a tomar para preparar 250 mL de solución stock de 200 ppm Cr6+.
2. La [Cr6+] real si se tomaron 0,1004 g de K2Cr2O7 disolviéndose con agua destilada
hasta completar los 250 mL.
3. Los mL a tomar de solución stock, para que al aforar a 100 mL, la solución de
trabajo preparada sea de 10 ppm Cr6+.
4. La concentración exacta de la solución de trabajo, si se tomaron exactamente 7 mL
de la solución stock.
5. Determine los mL a tomar de la solución de trabajo real y, complete la sgte tabla:

Estándar mL sol. trabajo Aforar a ppm Cr6+

1 50 0

2 50 0,05

3 50 0,10

4 50 0,20

5 50 0,25
6. Si se toman los volúmenes que se detallan, determine las [Cr6+] de los estándares
preparados.
uL sol.
Estándar trabajo Aforar a ppm Cr6+ Absorb
1 0 50 0
2 250 50 0.018
3 500 50 0.034
4 1000 50 0.064
5 1250 50 0.081

7. Determine la ecuación de regresión lineal que ajusta los valores a la ley de Beer

8. Si se tiene una muestra de agua residual, la cual es tratada adecuadamente, y de la

cual se toma 1mL y se le agregan los reactivos de forma similar que los estándares,
(hasta aforar a 50 mL), entonces al leer en el equipo se obtiene una absorbancia de
0,026. Determine las ppm Cr6+ presente en la muestra de agua analizada.
Solución
 TECNICA DE ADICION DE ESTANDAR

Especialmente útil en análisis de muestras complejas, en donde es considerable el

efecto de la matriz.
Se puede aplicar de diferentes formas, siendo la mas habitual, la sgte:

1. Depositar en una serie de fiolas una mismo volumen de muestra “Vx”

2. Añadir volúmenes crecientes de una disolución estándar (de concentración
“Cs”), a cada una de las fiolas.
3. Aforar a la marca con los reactivos y disolvente (“Vt”).
4. Leer en el instrumento correspondiente cada solución preparada, obteniendo la
señal analítica “S”.
5. Usar una hoja de calculo (Por ejemplo Excell), para determinar la ecuación de
regresión lineal que ajusta dichos valores.
Resumiendo:
Vx = volumen de muestra (alícuota), tomada.
CX = concentración del analito en la muestra problema
Vs = volumen de estándar añadido.
Cs = concentración del analito en la solución estándar.
S = señal analítica del instrumento

Si la respuesta del instrumento es lineal, entonces:

S α Vs Cs + Vx Cx S = K ( Vs Cs + Vx Cx)
Vt Vt

S = K Vs Cs + K Vx Cx S = K VX CX + (K CS) Vs
Vt Vt Vt Vt
Al comparar con la ecuación: Y = A + BX

B = K Cs/Vt A = K Vx Cx / Vt
En donde los valores de “A” y “B”, se pueden determinar de la acuación de ña recta ajustada por los
mínimos cuadrados. El valor de Cx (concentración del analito en la muestra), se puede obtener
simplemente relacionando:

A = ( K Vx Cx )/Vt = Vx Cx
B (K Cs ) / Vt Cs
De donde:
Cx = A * Cs
B * Vx

Ejemplo:
En 05 fiolas de 50 mL se depositan exactamente 10 mL de una muestra de relave tratado,
adicionándoles secuencialmente 0 ; 0,5 ; 1 ; 1,5 y 2 mL de una disolución patrón que contiene
0,088 ppm Fe, entonces al leer las soluciones preparadas en un equipo de AAS, se reportaron los
sgtes valores:
 Vs
Estándar Absorbancia
(mL S. Patron)
1 0,00 0,085 Calcular las ppm Fe total presente en
la muestra analizada.
2 0,50 0,114
3 1,00 0,144
4 1,50 0,175
5 2,00 0,208

Solución

Determinación Espectrofotométrica de Fe a λ = 505 nm

0.25

y = 0.0614x + 0.0838
0.2 R² = 0.9994
Absorbancia

0.15

0.1

0.05

0
0 0.5 1 1.5 2 2.5
mL añadidos
 TECNICA DE PATRON INTERNO
Un patrón interno es una sustancia en cantidad conocida (diferente al analito de
interés), que se añade a las muestras (o estándares), problema.
Es muy útil cuando:
- La cantidad de muestra analizada (o la respuesta del instrumento), varía algo cada
vez que se utilizan por razones difíciles de controlar.
- Cuando suceden perdidas de muestra durante los pasos de preparación previo al
análisis.
Consiste en añadir una cantidad medida de patrón interno a la muestra problema,
para posteriormente y medir la relación (patrón interno/analito),
Verificando su constancia de variación, por cuanto se pierde la misma fracción de
ambos en cualquier operación.
Para usar un patrón interno se prepara primero la mezcla conocida tanto del
patrón interno como del analito, y luego se mide la respuesta relativa del detector
a las 2 especies.

La señal de respuesta a graficar en el eje “Y”, no es la del analito, sino el cociente

(señal analito/señal patrón interno), mientras que en el eje “X” se ubican siempre
las concentraciones del analito en los estándares:
Ejemplo:
Se desean preparar 05 estándares cuyas concentraciones en Potasio son las que se detallan en la
tabla, pero a la vez se requiere que cada una de ellas es de 50 ppm Li. (Fiolas de 25 mL). Entonces:
a. Los g LiCl (98,5%) necesarios para preparar 100 mL de una solución de 5000 ppm Li+.
b. La concentración real de Li+, si se pesaron 2,9975 g LiCl
c. Los g de KCl (pureza 99,2%) a usar para preparar 500 mL una solución stock de 250 ppm K+)

d. La concentración real, si en realidad se pesaron 0,2325 g de KCl

e. Los uL de solución stock de K+ tomar para preparar los estándares
Std ppm K+
requeridos. 1 0
f. Los uL de stock de Li+ para que todos los estándares (excepto el 2 2

blanco), sean de 50 ppm Li+ 3 3

4 5

5 7
g. Las concentraciones reales si se tomaron los volúmenes que se detallan a continuación:

uL Sol. uL Sol.
Std ppm K+ ppm Li+
Stock K+ Stock Li+
1 0 0 0 0

2 200 250 1,9354 48,3383

3 300 250 2,9032 48,3383

4 500 250 4,8386 48,3383

5 700 250 6,7741 48,3383

Al leer en un equipo de AES (emisión atómica), se obtuvieron los sgtes datos

experimentales:
Estándar ppm K+ Emisión K+ Emisión Li+
1 0 0 0
2 1,9354 1,65 8,54
3 2,9032 2,54 8,85
4 4,8386 4,08 8,44
5 6,7741 5,68 8,64
Muestra 4,43 9,55
Si en una fiola idéntica se colocan 5 mL de muestra y además 250 µL de solución stock de Li+ preparada,
entonces al leerla se obtiene una intensidad de emisión de 4,43 para el K+ y del 9,55 para el Li+ tal como
de detalla a continuación

Estándar ppm K+ Emisión K+ Emision Li (Emis K+/Emis Li)

1 0 0 0 0
2 1,9354 1.65 8,54 0,1932
3 2,9032 2.54 8,85 0,2870
4 4,8386 4.08 8,44 0,4834
5 6,7741 5.68 8,64 0,6574

Muestra 4.43 9,55 0,4639

Determine las ppm K+ en la muestra problema.

 Determinaciòn de K+ técnica de AES usando patrón interno Li+
0.7

0.6 y = 0.0975x + 0.0034

R² = 0.9995
0.5
Emision K+/Emision Li+

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8

ppm K+
 PREPARACION DE SOLUCIONES MIX DE ANALITOS PARA RECTAS DE CALIBRADO
Se requiere preparar una serie de estándares que contengan simultáneamente metanol,
isopropanol e fenol a fin de preparar las rectas de calibrado para cada analito en mix simultáneo,
para lo cual se cuenta con metanol (CH3OH) del 99,8 % pureza; con isopropanol (C3H8O ), del
98,7% pureza y con fenol sólido (C6H5OH), del 99,5 % pureza .
Determine;
a. Los µL de metanol ( ρ = 0,79 g/cm3) necesarios para preparar 100 mL una solución stock de
5000 ppm CH3OH
b. La concentración real, si se tomaron experimentalmente 650 µL de metanol
c. Los µL de isopropanol (ρ = 0,785 g/cm3) necesarios para preparar 100 mL una solución stock
de 5000 ppm C3H8O
d. La concentración real, si se tomaron 640 µL de isopropanol
e. Los gramos de fenol necesarios para preparar 100 mL una solución stock de 5000 ppm C6H5OH
f. La concentración real, si se pesaron 0,5085 g de fenol.
g. Los uL teóricos a tomar de cada analito para preparar las soluciones mix que se detallan en la
sgte tabla:

Concentraciones iniciales uL a tomar de solucion stock

Std Metanol isopropanol Fenol CH3OH Isopropanol Fenol Aforar a ( mL )
1 0 0 0 50
2 20 15 2 50
3 40 30 4 50
4 60 45 6 50
5 80 60 8 50
6 100 80 10 50
h. Si ajustamos los volúmenes teóricos a los sgtes valores reales, determine las concentraciones reales:

CH3OH Isoprop Fenol

Std uL CH3OH uL Isoprop ul Fenol Aforar a ( ppm ) (ppm) (ppm)
1 0 0 0 50 0 0 0
2 200 200 20 50 20,4989 19,8347 2,0238
3 400 300 40 50 40,9978 29,7521 4.0477
4 600 450 60 50 61,4967 44,6281 6,0715
5 800 600 80 50 81,9956 59,5042 8.0953
6 1000 800 100 50 102,4946 79,3390 10.1192

i. Las rectas de calibrado si se cuenta con la sgte información

Std ppm CH3OH Área Std ppm Isop Área Std ppm Fenol Área
1 0 0 1 0 0 1 0 0
2 20,4989 0,024 2 19,8347 0,064 2 2.0238 0.048
3 40,9978 0,050 3 29,7521 0,094 3 4.0477 0.094
4 61 ,4967 0,071 4 44,6281 0,139 4 6.0715 0.147
5 81,9956 0,096 5 59,5042 0,186 5 8.0953 0.194
6 102,4946 0,122 6 79,3390 0,246 6 10.1192 0.241
k. La concentración de metanol en una muestra de licor, si de ella se tomaron 25
ml y se el aforó con el solvente adecuado hasta completar 50 mL ( así como los
estándares), obteniéndose un área de 24,4 para el metanol; de 12,4 para el
isopropanol y de 6,8 para el fenol.
Gracias