UNIVERSIDAD DE LA COSTA, CUC

Departamento de ingeniería civil y ambiental

DETERMINACIÓN DE BIOAEROSOLES

AYOLA-SILVA, R. OROZCO-PABON, G. PORTO-ARZUAGA, D. TEHERAN-VILLEGAS, M.

Laboratorio de Control de Emisiones Atmosféricas, Grupo CD, Programa de Ingeniería Ambiental,

Universidad de la costa CUC

Rayola1@cuc.edu.co Gorozco7@cuc.edu.co Dporto@cuc.edu.co Mteheran1@cuc.edu.co

DUARTE GONZALEZ ANA LUCIA

10 de mayo de 2018

RESUMEN

El presente informe redacta el estudio de las partículas atmosféricas en el aire bajo muestras
graduadas, con la finalidad de identificar la concentración de bioaerosoles y los tamaños de las
partículas de la sustancia obtenida en la plazoleta verde dentro de las instalaciones de la universidad
de la costa CUC. El equipo pertinente para el respectivo muestreo, fue el impactador de cascada de 6
etapas consecutivas. El impactador operó durante 5 minutos, colocando el rotámetro a un caudal de
28.3 L/s para el muestreo. Posteriormente se dispuso a llevar al laboratorio las muestras obtenidas
para un periodo de incubación de 48 horas. Se procedió luego del tiempo de incubación a realizar el
conteo para identificar unidades formadoras de colonias (UFC) presentes en cada caja de Petri. Se
obtuvo un resultado Total de 15 UFC en la identificación y conteo de las etapas Sp2, Sp4, Sp5 y Sp6;
las etapas Sp1 y Sp3 fueron descartadas por la presencia de hongos. Finalmente se realiza la Tinción
de Gram donde la mayoría de bacterias fueron Cocos y Bacilos.

Palabras claves: Impactador de cascada, Etapas, incubación, partículas, colonias, atmosfera

ABSTRACT
The formless present there writes the study of the atmospheric particles in the low air graduated samples, with
the purpose of identifying the concentration of bioaerosoles and the sizes of the particles of the substance
obtained in the green small square inside the facilities of the University of the Coast CUC. The pertinent
equipment for the respective sampling, was the impactador of waterfall of 6 consecutive stages. The impactador
operated during 5 minutes, placing the rotameter to a flow of 28.3 L/s for the sampling. Later it prepared to
take to the laboratory the samples obtained for a period of incubation of 48 hours. One came after the time
from incubation to realize the count to identify forming units of colonies present (UFC) in every Petri's box. There
was obtained a Total result of 15 UFC in the identification and count of the stages Sp2, Sp4, Sp5 and Sp6; the
stages Sp1 and Sp3 were rejected by the presence of fungi. Finally Gram's Tint is realized where the majority of
bacteria were Coconuts and Bacilli.

Keywords: Impactor of waterfall, Stages, incubation, particles, colonies, atmosphere

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INTRODUCCIÓN su alteración. Además, los microorganismos

La atmósfera no tiene una microbiota
autóctona, pero es un medio para la
dispersión rápida y global de muchos tipos de
microorganismos. Además hay una
importante transferencia de ellos y de sus
metabolitos gaseosos entre la atmósfera, la
hidrosfera y la litosfera. Aunque la atmósfera
es un ambiente hostil para los
microorganismos, en la troposfera inferior se
encuentran un gran número de ellos. Los
microorganismos pueden ser transportados
rápidamente, en forma de bioaerosoles, a
través de grandes distancias con el
movimiento del aire que representa el mejor
camino de dispersión. Algunos han creado
adaptaciones especializadas que favorecen su
supervivencia y su dispersión en la atmósfera.
El transporte se realiza sobre partículas de
polvo, fragmentos de hojas secas, piel, fibras
de la ropa, en gotas de agua o en gotas de
saliva eliminadas al toser, estornudar o hablar
[1]. Los microorganismos dispersados en el
aire tienen una considerable importancia
biológica y económica. Numerosas
enfermedades de plantas son causadas por
hongos y algunas por virus y bacterias que se
trasmiten por el aire, produciendo graves
pérdidas en las cosechas [2].
por su metabolismo o trasformando la materia
orgánica, son la fuente principal de los gases
producidos biológicamente en la atmósfera:
amoníaco, óxido nítrico, óxido nitroso,
sulfhídrico, anhídrido carbónico. Aunque las
cantidades emitidas son insignificantes con
respecto a las emitidas por el hombre o la
industria, pueden contribuir a producir
deterioros en algunos ambientes y materiales,
como pinturas y el mal de la piedra de los
monumentos o corrosión de metales [3].
La metodología utilizada en este trabajo
consistió en determinar la concentración de
Bioaerosoles en el aire ambiente utilizando
Muestreador Activo. Se realizó la medición en
la plazoleta verde, ubicada dentro de las
instalaciones de la universidad de coda CUC,
utilizando el impactador de cascada como
método de muestreo o captura de agentes en
el aire presente del área de estudio.

Varias enfermedades del hombre y los

animales, víricas, bacterianas y fúngicas se
transmiten por la atmósfera y a menudo se
producen brotes epidémicos. Los Figura1.Ulilizacion impactado de cascada. Fuente: [4]

microorganismos presentes en el aire también

pueden contaminar los alimentos y materiales
orgánicos (cuero, textiles, papel) produciendo
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FUNDAMENTOS TEÓRICOS
Origen de los microorganismos
En el aire hay microorganismos, aunque no se
puede asegurar que existe un verdadero
«aeroplankton» que viven, se alimentan y se
reproducen permanentemente en él. Muchos
microorganismos que viven en la hidrosfera y
litosfera pueden encontrarse en el aire. Son
microbios alóctonos, procedentes del suelo,
agua y seres vivos que pueblan estos
ambientes. Los movimientos del aire y de los
seres vivos son los que sitúan a los
microorganismos en la atmósfera. Junto al
suelo hay una capa laminar de aire que impide
el fácil paso de microorganismos del suelo al
aire. Para que pasen se necesita una fuerte
corriente de aire que levante polvo del suelo o
agua de sus depósitos (mares, ríos...). También
las plantas los lanzan en sus movimientos de
dehiscencia y diseminación (polen, esporas...)
y los animales en los actos respiratorios
normales y anormales (estornudos, gotas de
Pflügge...). A menudo, tanto las esporas como
los microorganismos vegetativos entran en la
atmósfera como bioaerosoles, que pueden
formarse por muchas causas:
Lluvia, movimiento del agua en los ríos y mar,
tratamiento de aguas residuales, aspersores
de riego, aire acondicionado o secreciones
respiratorias del hombre y de los animales.
Ésta última es muy importante en la dispersión
de bacterias patógenas y virus animales. Los
microorganismos también pueden
encontrarse en el aire sobre partículas de
polvo o en el suelo [1]
Tipos de microorganismos
El aire contiene en suspensión diferentes tipos
de microorganismos, especialmente bacterias
y hongos. La presencia de uno u otro tipo
depende del origen, de la dirección e
intensidad de las corrientes de aire y de la
supervivencia del microorganismo. Algunos
microorganismos se encuentran en forma de
células vegetativas, pero lo más frecuente son
las formas esporuladas, ya que las esporas son
metabólicamente menos activas y sobreviven
mejor en la atmósfera porque soportan la
desecación. Las producen hongos, algas,
líquenes, algunos protozoos y algunas
bacterias. En el aire se aíslan frecuentemente
bacterias esporuladas de los géneros Bacillus,
Clostridium y Actinomicetos [5]
Figura2. Bacillus, Clostridium y Actinomicetos. Fuente:
[6]
Entre las bacterias también son muy
frecuentes los bacilos pleomórficos Gram
positivos (Corynebacterium) y los cocos Gram
positivos (Micrococcus y Staphylococcus). Los
bacilos Gram negativos (Flavobacterium,
Alcaligenes) se encuentran en menor
proporción y disminuyen con la altura [7]
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Este muestreador es un impactador en

cascada que capta las partículas en una serie
de placas con medio de cultivo a un caudal de
aire de 28,3 I/min.

Figura3. Tinción de Gram. Fuente: [8]

Cladosporium es el hongo que predomina en

el aire, tanto sobre la tierra como sobre el mar,
aunque también es frecuente encontrar otros
mohos, como Aspergillus, Penicillium,
Alternaria y Mucor [9] y la levadura
Rhodotorula [10] .

Los virus también pueden encontrarse en el

aire y ser transportados por él. Numerosos Figura 4. Esquema muestreador Endersen. Fuente: [11]
virus humanos (Orto y Paramixovirus,
En general, este impactador tiene seis niveles
Poxvirus, Picornavirus) se transmiten por vía
de captación, cada nivel está separado del
respiratoria, principalmente en ambientes
siguiente por un elemento perforado por 400
cerrados, y pueden formarse bioaerosoles de
orificios, debajo de cual se coloca la placa con
virus entéricos en las plantas de tratamiento
medio de cultivo, en cada nivel todos los
de aguas residuales. Por otro lado, pueden
orificios tienen el mismo diámetro, pero de un
encontrarse virus de vegetales en aerosoles
nivel al siguiente disminuye el tamaño del
procedentes de plantas infectadas. Se han
diámetro de los orificios, lo que provoca un
descrito numerosos géneros de algas aisladas
aumento de la velocidad del aire al pasar de un
del aire procedentes del suelo y de lagos
nivel a otro. La captación se basa en la inercia
eutróficos. Así mismo, amebas de vida libre
de las partículas, en el primer nivel se separan
como Naegleria y Acanthamoeba pueden ser
las partículas de mayor tamaño; las de menor
aerolizadas de forma natural (lagos,
tamaño, cuya inercia no es lo suficientemente
manantiales termales) o artificial (sistema de
grande, son arrastradas por la corriente de
aire acondicionado o humidificadores) [3]
aire que pasa al siguiente nivel, al aumentar la
Equipo de muestreo Andersen velocidad también aumenta la inercia de las
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partículas arrastradas, algunas serán captadas
en el segundo nivel mientras que otras
seguirán en el aire pasando al tercer nivel, y así
sucesivamente. El resultado final es una
separación por tamaño de partícula. Los
diámetros de corte teóricos para cada uno de
los niveles son, del nivel 1 al nivel 6. Otros
modelos de este equipo se presentan con uno
o dos niveles de captación. El modelo con un
solo nivel dispone de una placa perforada (400
orificios), su caudal de aire es de 28,3 I/min y
el diámetro de corte teórico es de 0,65 pm. En
el modelo con dos niveles, las placas
perforadas disponen de 200 orificios, un
caudal de aire de 28,3 I/min y unos diámetros
de corte teóricos de 8,0 •m y 0,95 •m
respectivamente. Este muestreador es uno de
los designados como de referencia en las
pruebas de ensayo para la validación de otros
muestreadores [12]
 Etapa 6: Alveolos (Partículas entre 1.1
Micras y 0.6)
ENFERMEDADES TRANSMITIDAS
POR EL AIRE
Hay numerosas enfermedades bacterianas
trasmitidas por el aire que se resumen en la
siguiente tabla. Están producidas,
principalmente, por bacterias Gram positivas
debido a su mayor supervivencia en el aire.
Afectan al tracto respira- torio superior
(faringitis, epiglotitis, difteria) e inferior
(bronquitis, neumonías, tosferina,
tuberculosis) o, desde éste pasan a sangre y
otros órganos (me- ningitis, carbunco
pulmonar, fiebre Q, peste) [13].

El impactador cuenta con seis etapas las

cuales se describen en el siguiente cuadro:

 Etapa 1: Cavidad nasal ( partículas

entre 7.0 Micras y por encima)

 Etapa 2: Faringe (Partículas entre 4.7

Micras y 7.0)

 Etapa 3: Tráquea y bronquios

primarios (Partículas entre 4.7 Micras
y 3.3) Figura 5.Enfermedades trasmitidas por el aire. Fuente:
 Etapa 4: Bronquios secundarios [13]

(Partículas entre 3.3 Micras y 2.1)

 Etapa 5: Bronquios terminales PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

(Partículas entre 2.1 Micras y 1.1)
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1. Se escoge el área evaluar y se verifica ZONA DE ESTUDIO

que cuente con toma para energía
eléctrica. Se colocan las cajas Petri Plazoleta verde – universidad de la costa
llenas con el medio de cultivo, en cada
una de las etapas del impactador.

2. Se debe realizar el muestreo con el

impactador de cascada durante 5
minutos a una altura de 1.5 metros del
suelo. Colocar el rotámetro de modo
que muestre un Caudal de 28.3 L/s

3. Se incubarán las muestras a una

temperatura de 37° durante 48 h.

4. Se procede al conteo e identificación

de colonias, macroscópica y
microscópicamente, por el método de
tinción de Gram, y al cálculo de la
concentración de UFC. Figura 6: Universidad de la costa. Fuente:
Google Map

Para calcular la concentración de UFC se

hace uso de la siguiente ecuación:

𝑼𝑭𝑪 ∗ 𝟏𝟎𝟎𝟎
𝑪𝑼𝑭𝑪 =
𝑸∗ 𝒕
Donde:

UFC: Unidades formadoras de colonias

Q: Caudal (28.3 L/s)

T: Tiempo de monitoreo

Fuente: Calculo UFC [14]

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Conteo de unidades formadoras de colonias CÁLCULOS

Etapa Tipo Periodo Sitio Tiemp Clasific UFC Concentración de UFC para cada etapa:
o ación
 Sp2:
1 Bacteri Mañana P.verde 5 min Sp 1
3 ∗ 1000
a 𝑪𝑼𝑭𝑪 =
28.3 𝑙/𝑀𝑖𝑛 ∗ 5 𝑚𝑖𝑛
2 Bacteri Mañana P.verde 5 min Sp 2 3
a 𝑪𝑼𝑭𝑪 = 21.20 𝑈𝐹𝐶/𝑚3

3 Bacteri Mañana P.verde 5 min Sp 3

a  Sp4:
7 ∗ 1000
4 Bacteri Mañana P.verde 5 min Sp 4 7 𝑪𝑼𝑭𝑪 =
28.3 𝑙/𝑀𝑖𝑛 ∗ 5 𝑚𝑖𝑛
a

5 Bacteri Mañana P.verde 5 min Sp 5 3 𝑪𝑼𝑭𝑪 = 49.46 𝑈𝐹𝐶/𝑚3

a

6 Bacteri Mañana P.verde 5 min Sp 6 2  Sp5:

a 3 ∗ 1000
𝑪𝑼𝑭𝑪 =
28.3 𝑙/𝑀𝑖𝑛 ∗ 5 𝑚𝑖𝑛
Tabla 1. Datos obtenidos en el conteo de colonias.
Fuente: Propia
𝑪𝑼𝑭𝑪 = 21.20 𝑈𝐹𝐶/𝑚3
Nota: se descarta la etapa 1 y 3 por
crecimiento de hongos.  Sp6:

2 ∗ 1000
𝑪𝑼𝑭𝑪 =
28.3 𝑙/𝑀𝑖𝑛 ∗ 5 𝑚𝑖𝑛

𝑪𝑼𝑭𝑪 = 14.13 𝑈𝐹𝐶/𝑚3

Grafica 1. Conteo estimado de colonias por etapas.

Fuente: Propia
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Numero de colonias y concentración UFC ANÁLISIS Y RESULTADOS

Clasificación UFC Concentración De acuerdo a los datos obtenidos en la

(UFC/m3) experiencia, se logró identificar el total de 15
unidades formadoras de colonias (UFC), no se
Sp2 3 21.20 tuvieron en cuenta las unidades cuya
formación fueron a la rama fungí. Teniendo en
Sp4 7 49.46
cuenta los datos obtenidos en la tinción de
Sp5 3 21.20 Gram, se podría afirmar que las bacterias que
se identificaron fueron cocos y bacilos, con
Sp6 2 14.13 mayor concentración de bacilos positivos,
donde predomina la bacteria Sp4 con 49.56
Tabla 2. Concentraion UFC determinada en cada etapa.
Fuente: Propia
UFC/m3. Bajo el criterio subjetivo de expertos
de la comisión de las comunidades europea
(Cost Proyect 613 Report N°12); se clasifican
los niveles de contaminación obtenidos en la
tabla 10 el cual redacta el rango o Número de
microorganismos transportados por el aire
recogido con un BIAP muestra de hendidura
en escuelas e instituciones públicas; bajo estos
criterios se puede afirmar que el área o zona
de estudio presenta niveles bajos y muy bajos
de contaminación, siendo el valor más
significativo en la etapa 4 (Sp4) 49.46 UFC/m3
y el valor con menor concentración en la etapa
6 (Sp6) con 14.13 UFC/m3. El entorno o área
(Plazoleta verde la universidad de la costa) no
representa un peligro para la salud en
condiciones de aire ambiente.
Figura6: Grafica de concentraciones. Fuente: propia
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CUESTIONARIO
¿A qué tipo de riesgos están expuestos los
seres humanos que están en contacto con los
microorganismos encontrados?
Según Jensen, 1997 [15]. Las enfermedades
víricas transmitidas por el aire por las bacterias
identificas son: Amigdalitis, faringitis,
bronquitis, escarlatina producida por la
especie Cocos y el Carbunco pulmonar
producida por la especie de Bacillus. Muchas
de las especies de Bacillus no tienen a causar
variedad de enfermedades; Los cocos que
pueden causar infecciones en los humanos
son los estafilococos, los estreptococos, los
neumococos y los meningococos, pero
muchos agentes externos tienden a generar o
transportar estas enfermedades infecciosas y
contagiosas que padecen los animales y
pueden trasmitirse al ser humano; se
identifica que cerca al área de estudio, la
presencia de aves y felinos (Gatos), muy
posibles portadoras de bacterias.
¿Cuáles son las posibles fuentes de estos
contaminantes en el lugar de estudio?
En el sitio de muestreo existían diferentes
fuentes como el polvo procedente de las
continuas brisas en el área, los alimentos que
ofrecen en la frutera ubicada a un costado de
la plazoleta verde. Por otro lado cerca del sitio
de muestreo se encuentra árboles que
pueden ser fuentes de emisión de esta
bacteria y animales.
¿Proponga una forma de mitigación para este
tipo de contaminantes?
Dado al análisis pertinente de las muestras y el
conteo de unidades formadoras de colonias
identificadas en la zona de estudio, no refleja
concentraciones significativas o de alerta que
puedan perjudicar la salud de los estudiantes
que diariamente se hallan en la zona; sin
embargo, el correcto manejo de residuos
sólidos por parte de la comunidad estudiantil,
ayudara a mantener un control mínimo sobre
las plagas o animales que tienden a cercarse al
lugar por la mala disposición de residuos que
aun contienen alimento impregnado en el
interior del empaque o embaces y el adecuado
aseo diario en el área por parte del equipo de
servicio general de la universidad ayudara a
mantener un control del levantamiento de
polvo o partículas suspendidas por el barrido
manual alrededor del área.
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BIBLIOGRAFÍA

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Educación, Madrid, 2002.

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Society, London , 1983.

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Pharmaceutical microbiology., London , 1992.

[6] J. Hernandez, «Containacion de alimentos po aire,» Universidad Autonoma de Sinaloa ,

Sinaloa , 2013.

[7] P. H. GREGORY y J. L. MONTEITH, « Airborne microbies,» Ed. Cambridge University,

Cambridge, 1967.

[8] slideplayer, «Estructura y morfologia Bacteriana,» 07 Abril 2018. [En línea]. [Último acceso:
2018].

[9] T. TAKAHASHI, «Airborne fungal colony-forming units in outdoor and indoor,»

Mycopathologia, pp. 139, 23-33., 1997.

[10 E. UNDERWOOD, «Ecology of microorganisms as it affects the pharmaceutical,»

] Pharmaceutical microbiology. London , vol. 5 Edit, 1992.

[11 SIAFA, «siafa,» Abril 2003. [En línea]. Available:

] http://www.siafa.com.ar/notas/nota98/contaminantes-biologicos.htm. [Último acceso: 07
Abril 2018].

[12 A. Hernández, «www.insht.es,» 2001. [En línea]. Available:

] http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/NTP/Ficheros/60
1a700/ntp_609.pdf. [Último acceso: 07 Abril 2018].
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[13 D. l. R. M.C y M. M.A, «El aire: Habitat y medio de transmisión de microorganismos,» 2002.
]

[14 D. C. Marti, «Metodo para el recuento de bacterias y hongos en el aire,» MINISTERIO DE

] TRABAJO Y ASUNTOS SOCIALES ESPAÑA, ESPAÑA, 2018.

[15 P. JENSEN, «Airborne Mycobacterium spp,» Ed. American Society for Microbiology,,
] Washington., 1997.

ANEXOS

Fuente: propia