UNIVERSIDAD DE LAS

FUERZAS ARMADAS -ESPE

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE
LA VIDA Y LA AGRICULTURA

FITOQUÌMICA

NOMBRES: Aguirre Flores Carlos NRC: 2469

Panchana Torres Carolina FECHA DE ENTREGA: 2017/05/23

1. TEMA: Extracción e identificación de antocianos por cromatografía en

Capuchina de (Tropaeolum majus) y Tibouchina granulosa

2. OBJETIVOS

2.1 Objetivo General

• Extraer e identificar antocianos por cromatografía en muestras de Capuchina

(Tropaeolum majus) y Tibouchina granulosa

2.2 Objetivos Específicos

• Analizar los antocianos mediante método espectrofotométrico y observar sus

máximos de absorción.
• Determinar los antocianos de las muestras de Capuchina (Tropaeolum majus)
y Tibouchina granulosa por medio de la comparación de los Rf encontrados
en revisiones bibliográficas.
• Identificar los tipos de reacciones de coloración existentes para la
determinación de grupos funcionales en infusiones de las muestras de
Capuchina (Tropaeolum majus) y Tibouchina granulosa
3. RESULTADOS

3.1 RESULTADOS DE ESPECTROMETRÍA DE CAPUCHINA (Tropaeolum

majus) Y (Tibouchina granulosa)

Tabla 1. Valores máximos de absorción para las muestras de Capuchina (Tropaeolum

majus) y (Tibouchina granulosa) en MetOH-HCl

Absorbancia (Tibouchina Absorbancia Capuchina

granulosa) (nm) (Tropaeolum majus) (nm)
Espectro visible 540 455
Espectro no visible 245 275

A
4

0
200 300 400 500 600 700
nm

Figura 1. Espectrofotometría de (Tibouchina granulosa)

Maleza1.dsp

A
4

0
200 300 400 500 600 700
nm

Figura 2. Espectrometría de Capuchina (Tropaeolum majus)

Maleza2.dsp
3.2 RESULTADOS DE CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA DE CAPUCHINA
(Tropaeolum majus) Y (Tibouchina granulosa)

Tabla 2. Resultados de la cromatografía en ambos eluyentes.

Butanol: Ácido acético: Agua (4:1:5) Ácido clorhídrico(concetrado):

Ácido perfómico: Agua (2:5:3)

Tabla 3. Tabla de resultados de la cromatografía en capa fina para Capuchina

(Tropaeolum majus) con Fase móvil: Ácido clorhídrico (concentrado): Ácido perfórmico:
Agua (2:5:3)

Cromatografía en capa fina de antocianos presentes en Capuchina (Tropaeolum majus)

𝒂
a (cm) Rf= Antocianina
𝒃
Donde b=16,5
a1=14,1 0,8545455 Cianidina
 a2=15,5 0,9393939 Malvidina

Tabla 4. Tabla de resultados de la cromatografía en capa fina para (Tibouchina

granulosa), con Fase móvil: Butanol: Ácido acético: Agua (4:1:5)
Cromatografía en capa fina de antocianos presentes en (Tibouchina granulosa)
𝒂
a (cm) Rf= 𝒃
Donde b=9,4
a1=8,6 0,91489362

3.3 RESULTADOS DE LAS PRUEBAS DE COLORIMÉTRICAS EN LAS

EMULSIONES DE CAPUCHINA (Tropaeolum majus) Y (Tibouchina granulosa)
Tabla 5. Resultados de las pruebas de colorimétricas en la emulsión de capuchina (Tropaeolum
majus)

Prueba Resultado Observación

Ácido sulfúrico Se observó que la
(H2SO4) emulsión con adición
ácido sulfúrico perdió el
color verde, dejando un
color violeta muy débil.

Ac. Tricloro Se observó que la

acético emulsión con adición
(CCl3COOH) ácido tricloro acético tuvo
una reducción en la
intensidad del color que
presentaba volviéndose
casi transparente.
 Bicarbonato de Se observó que la
sodio emulsión con adición
(NaHCO3) bicarbonato de sodio
cambió de color a un
verde intenso.

Hidróxido de Se observó que la

sodio emulsión con adición
(NaOH) hidróxido de sodio
cambió de color a un
verde intenso

Tabla 6. Resultados de las pruebas de colorimétricas en la emulsión de (Tibouchina

granulosa)

Prueba Resultado Observación

Ácido sulfúrico Se observó que con la
(H2SO4) adición de ácido sulfúrico,
la emulsión cambio de
color a un violeta intenso.

Ac. Tricloro acético Se observó que la emulsión

(CCl3COOH) con la adición de ácido
tricloro acético tuvo un
cambio de color a un café
claro.
 Bicarbonato de Se observó que la emulsión
sodio con la adición de
(NaHCO3) bicarbonato de sodio tuvo
un cambio de color a un
verde oscuro.

Hidróxido de sodio Se observó que la emulsión

(NaOH) con la adición de hidróxido
de sodio tuvo un cambio de
color a un café oscuro.

4. DISCUSION

La extracción de antocianinas se la realizó utilizando como solvente una solución de

metanol y ácido clorhídrico 1N (9:1). (Santacruz, 2011) reporta que las antocianinas son
compuestos solubles en solventes polares y comúnmente se extraen de sus fuentes
naturales usando metanol y etanol con pocas cantidades de algunos ácidos como ácido
clorhídrico, acético y fórmico, ya que el ácido mantiene el pH ácido lo que previene el
desplazamiento de los equilibrios químicos de hidratación.
El factor de retardo (Rf) obtenidos de la muestra de capuchina (Tropaeolum majus) (Tabla
3) fueron 0,85 y 0,93. (Ortega, 2006) reporta que con una fase móvil Butanol: Ácido
acético: Agua (4:1:5) y fase estacionaria sílica gel, mostraron para cianidina un Rf entre
0,83 y 0,85 y para malvidina un Rf entre 0,93 y 0,95.
La identificación de antocianinas en la muestra (Tibouchina granulosa) no resultó ser
efectiva con ninguno de los dos eluyentes, presentando manchas superpuestas. (Ferreira,
2002) menciona que la identificación de las antocianinas depende en gran parte de la
eficiencia de la extracción considerando que se debe ser en un tiempo mayor a dos horas,
la obtención del extracto crudo en cantidad suficiente, depende no solamente de su
concentración, también del solvente de extracción.
La Tabla 5 y 6 indica los cambios colorimétricos producidos por diferentes pruebas, para
la prueba de ácido sulfúrico presentó un color violeta, en el ácido tricloro acético presentó
un color palo de rosa, para el bicarbonato de sodio presentó una color verde y para el
hidróxido de sodio presentó un color café, siendo los colores con mayor intensidad en la
muestra de (Tibouchina granulosa) a diferencia de la muestra de capuchina (Tropaeolum
majus) que presentó un baja intensidad de colores con las respectivas pruebas,
confirmando mayor cantidad de antocianos en la emulsión de (Tibouchina granulosa).
Los antocianos experimentan transformaciones estructurales, en función del pH del
medio, en medio ácido presentan color rojo adquieren color violeta al acercarse a pH
neutro, decreciendo la intensidad del color a medida que aumenta el pH, demostrando que
en medio ácido los antocianos se encuentran en equilibrio entre las cuatro estructuras que
presenta la Ilustración 1 (Elejalde, 1999).
En las curvas de la figura 1 y 2 se observan picos, uno en el espectro visible y otro en el
UV. De acuerdo a (Gallego & Morcillo, 2015). Esto es causado porque en determinadas
longitudes de onda, cada compuesto presentará su máxima absorbancia y es debido a que
en la misma se encuentra la mayor concentración del analito.
En la muestra de (Tibouchina granulosa) y Capuchina (Tropaeolum majus) se obtuvo dos
valores por muestra: 540 y 245, 455 y 275 nm respectivamente, de acuerdo a (Olsen,
1990) Longitudes de ondas menores a 400 nm, como es el caso de los valores de 245 y
275 de las muestras de (Tibouchina granulosa) y Capuchina (Tropaeolum majus) se
encuentran en el rango UV, las mismas que no se pueden observar por el ojo humano. En
cambio, longitudes de ondas encontradas en el intervalo de 400 a 800 nm, como es el caso
de los valores de 540 y 455 de las muestras de (Tibouchina granulosa) y Capuchina
(Tropaeolum majus) se encuentran en el espectro visible.
(Lock, 1997) reporta que para la longitud máxima en metanol y ácido clorhídrico de
cianidina es de 455 nm, confirmando la presencia de esta antocianina en la cromatografía
de capa fina y 540 nm para pteunidina.

Ilustración 1: Equilibrio formas coloreadas

5. CONCLUSIONES

• En la muestra de capuchina (Tropaeolum majus) se halló la presencia de cianidina

y malvidina, mientras que para (Tibouchina granulosa) no resultó ser efectiva con
ninguno de los dos eluyentes utilizados en la práctica.

• Los antocianos encontrados en la muestra de (Tibouchina granulosa)

reaccionaron colorimétricamente al cambio de pH, la muestra de capuchina
(Tropaeolum majus) presentó reacción colorimétrica reducida al cambio de pH
causada por la concentración y antocianos presentes en la muestra.

• Tanto la muestra de capuchina (Tropaeolum majus) como de (Tibouchina

granulosa) presentaron picos altos en la longitud de onda visible y UV
confirmando una alta concentración de compuestos en dichos valores, siendo el
valor máximo 455 nm para cianidina en la muestra de capuchina (Tropaeolum
majus) y 540 nm para pteunidina en la muestra de (Tibouchina granulosa).

6. BIBLIOGRAFÍA

• Elejalde, E. (1999). Extracción y caracterización de antocianos y procianidinas

de distintas variedades de uva empleadas en la elaboración del txakoli tinto de
Bizkaia. Universidad del Paìs Vasco.
• Ferreira, S. (2002). Antocianinas en Uvar var. California: Departamento de
Ciencia y Tecnologia de Alimentos Universidad de Californias.
• Gallego, A., & Morcillo, J. (2015). Experimentación en Química Analítica.
UNED.
• Lock, O. (1997). Colorantes Naturales. Lima: Pontificia Universidad Catòlica del
Perù.
• Olsen, E. (1990). Métodos ópticos de análisis. Reverte.
• Ortega, M. (2006). Separaciòn, caracterizaciòn estructural y cuantificaciòn de
antocianinas mediante mètodos quìmcos-fìsicos. Parte I. Red de Revistas
Científicas de América Latina, el Caribe, España y Portugal, 35-44.
• Santacruz, L. A. (2011). ANÁLISIS QUÍMICO DE ANTOCIANINAS EN FRUTOS
SILVESTRES COLOMBIANOS. Bogotà : Universidad Nacional de Colombia.
Facultad de Ciencias Quìmicas .