INFORME PRACTICA 9 : AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE

ENTEROBACTERIAS

1. MUESTRAS:
Se trabaja con la muestra de cepa pura de Shigella y con muestra de E. coli ATCC 25922
en medio agar Mc Conkey.

2. CULTIVO DE ENTEROBACTERIAS:
- BATERIA BIOQUIMICA ( Shigella)

SIM PUNTURA SHIGELLA

CITRATO DE SIMMONS ESTRIADO SHIGELLA
TSI PUNTURA Y ESTRIADO SHIGELLA
LIA PUNTURA Y ESTRIADO SHIGELLA
UREA PUNTURA Y ESTRIADO SHIGELLA

- MEDIOS DE CULTIVO AGAR

AGAR MC CONKEY AGOTAMIENTO SHIGELLA
AGAR TSA AGOTAMIENTO SHIGELLA
AGAR EMB AGOTAMIENTO SHIGELLA

3. COLORACION GRAM ( E.coli)

4. RESULTADOS:
a) Caracteristica de la colonia:
BORDE festoneado
TAMAÑO grande
FORMA irregular
ELEVACIÓN cóncava
SUPERFICIE brillante
COLOR incoloro

5. BATERIA BIOQUIMICA:

SIM +
CITRATO DE SIMMONS -
TSI K/A
LIA -
UREA -

6. COLORACIÓN GRAM
E. coli : bacilo GRAM negativo
 7. CUESTIONARIO

1. ¿Cuáles son las pruebas que comparten todas las especies pertenecientes a la Familia
Enterobacteriaceae?

2. Explique reacciones en TSI

Si la bacteria metaboliza solo la glucosa, en la superficie la utilizará como vía respiratoria, y

donde la tensión de oxígeno disminuya lo suficiente, empleará una pequeña proporción por vía
fermentativa. Esto generará una pequeña cantidad de ácidos que serán neutralizados por las
aminas derivadas de la descarboxilación oxidativa de las proteínas.
Como resultado, el medio mantendrá su color rojo en la superficie, al no haber cambiado de PH.
Por el contrario, las bacterias crecidas en la profundidad emplearán desde el primer momento
 la glucosa por via fermentativa, generando ácidos que no serán neutralizados, provocándose
un descenso del PH y el color del medio en el fondo del tubo cambiará a amarillo.

3. Explique reacciones en LIA

El medio no llega a descarboxilarse.

4. Las bacterias que no producen lisina descarboxilasa, pero son fermentadores de la glucosa,
producen un viraje de la totalidad del medio de cultivo al amarillo, pero a las 24 horas de la
incubación se observa el pico de color violeta debido al consumo de las peptonas, y el fondo
amarillo.

5. Explique reacciones en Citrato

El medio permanece de color verde debido a que no hay desarrollo bacteriano y no hay cambio
de color.

6. Explique reacciones en SIM

Indica que no hay motilidad, indol negativo.

7. Explique reacciones en RM-VP

RM ( POSITIVO): Fermenta la glucosa por la via mixta, con producción de metabolitos.
VP (NEGATIVO) : Capacidad de un microorganismo de producir un producto final neutro, el
acetilmetilcarbinol (acetoína), a partir de la fermentación de la glucosa.
 INFORME PRACTICA 10 : AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE
ENTEROBACTERIAS II

1. MUESTRAS:
Se trabaja con la muestra de cepa pura de E. coli (placa) y Salmonella.

2. CULTIVO DE ENTEROBACTERIAS:
- BATERIA BIOQUIMICA ( Salmonella)

SIM INOCULACION SALMONELLA

CITRATO DE SIMMONS ESTRIADO SALMONELLA
TSI PUNTURA Y ESTRIADO SALMONELLA
LIA PUNTURA Y ESTRIADO SALMONELLA
UREA ESTRIADO SALMONELLA
CALDO NUTRITIVO INOCULACION SALMONELLA
MRVP INOCULACION SALMONELLA
MIO INOCULACION SALMONELLA

- MEDIOS DE CULTIVO AGAR

AGAR MC SORBITOL AGOTAMIENTO E. COLI
AGAR NUTRITIVO AGOTAMIENTO E. COLI
AGAR MC CONKEY AGOTAMIENTO SALMONELLA
AGAR XLD(Xilosa- AGOTAMIENTO SALMONELLA
Lisina-Desoxicolato)

3. COLORACION GRAM ( salmonella) OXIDASA, CATALASA

4. RESULTADOS:
a) BATERIA BIOQUIMICA ( Salmonella)

SIM Motilidad con producción de H2S

CITRATO DE SIMMONS +
TSI K/A H2S
LIA K/K H2S
UREA +
CALDO NUTRITIVO +, Con presencia de turbidez y en el fondo presencia
de precipitado.
MRVP Rojo metilo ( +) Vogues Proskauer (-)
MIO Motilidad(+) Indol (-) Ornitina (+)

b) COLORACION GRAM : bacilos GRAM negativos ,OXIDASA (+) ,CATALASA(-)

c) CARACTERISTICA DE COLONIA: Agar Mc Conkey

BORDE redondo, con centro negro

TAMAÑO grande- pequeño
FORMA regular
ELEVACIÓN elevado
SUPERFICIE brillante
COLOR incoloro transparente con centro negro (ojo de pescado)
 CUESTIONARIO:

1. Cómo realiza la identificación definitiva de los enteropatógenos propuestos en la práctica?

SALMONELLA