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UNIVERSIDAD VERACRUZANA

ÁREA ACADÉMICA TÉCNICA

FAC. DE QUÍMICA FARMACÉUTICA BIÓLOGICA

LABORATORIO DE BIOQUIMÍCA

PRÁCTICA No. 5

CRISTALIZACIÓN DE ALBÚMINA DE HUEVO.

Tiempo de práctica: 2 horas.

Objetivo:

El alumno separará por medio de globulares, de modo que producen su


cristalización, una proteína a partir precipitación.7
de la clara de huevo

Funtamento: Material y reactivos

La solubilidad de las proteínas Material de laboratorio


globulares se ve afectada por la presencia
de sales neutras debido a su fuerza iónica, Probeta de 200 ml
que constituye una medida, tanto de la Embudo de filtración
concentración como del número de las Varilla de vidrio
cargas eléctricas de los cationes y los Gasa
aniones aportados por la sal.6
Reactivos
A baja concentración, las sales
Ácido acético 1 N
incrementan la solubilidad de muchas
Solución de sulfato de amonio al 50%
proteínas, fenómeno conocido como
solubilización por salado. Para solubilizar
Material biológico
proteínas por salado son más eficaces las
sales de iones divalentes tales como el 1 huevo
MgCl2 y el (NH4)2SO4 que las sales de hielo para hacer un baño frío
iones monovalentes, tales como el NaCl,
KCl y el NH4Cl. Procedimiento
La adición de solventes orgánicos
1. Medir 10 ml de clara de huevo.
miscibles en agua, particularmente etanol
2. Agitar las claras y añadir 0.1 ml de ácido
y acetona, disminuye la solubilidad en
acético 1N, filtrar para romper las
agua de la mayor parte de las proteínas
membranas agitando fuertemente con una
varilla para acelerar el paso por la gasa.
6. Dejar la mezcla previamente identificada
3. Añadir 0.3 ml de solución de (NH4)2SO4 con el nombre del profesor, número de
al 50% y dejar precipitar 30 minutos en equipo y fecha, a 4 °C (en el refrigerador)
baño frío. hasta la siguiente práctica (mínimo 2 días).
4. Separar mediante centrifugación por 10 7. Separar mediante centrifugación los
min. a 3500 rpm. Guardar el precipitado. cristales de albúmina precipitada.
5. Medir el volumen del sobrenadante (de 8. Suspender en 5ml de acetona y
color amarillo) y añadir lentamente un recuperar filtrando en embudo Büchner
volumen igual de (NH4)2SO4. Agitar con un papel filtro previamente pesado.
esporádicamente. Al contacto con el 9. Secar al aire y volver a pesar.
(NH4)2SO4 se torna de color blanco 10. Guardar en un vial etiquetado.
lechoso indicando la precipitación de
proteínas.
Hoja de resultados:
Nombre:__________________________________Grupo:________Fecha:___________

Discusión de resultados

Conclusiones

Cuestionario

1. Compara el rendimiento obtenido por tu equipo con el obtenido por los otros
equipos.
2. ¿Los datos concuerdan con lo reportado en la bibliografía?
3. ¿Qué es la albúmina?
4. Compara el peso molecular de la albúmina de huevo con la de otras fuentes
como suero o leche.
5. ¿Porque se utiliza el sulfato de amonio al 50%?

Bibliografía consultada

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