UNIVERSIDAD NACIONAL INTERCULTURAL DE LA AMAZONIA

Facultad de ingeniería y ciencias ambientales

Ingeniería Agroindustrial

MICROBIOLOGIA AGROINDUSTRIAL
Práctica N° 5

“OBSERVACION Y DIFERENCIACION DE BACTERIAS”

 DOCENTE: Ing. Darwin Josué Estacio Albornoz

 ESTUDIANTES: Rodríguez López, Charles

 Ciclo: V

 Fecha de entrega: 31/10/18

PUCALLPA - PERU
I. INTRODUCCIÓN
Las bacterias tienen la capacidad de crecer bajo un amplio rango de
condiciones, pudiéndose encontrar en diversos tipos de hábitats extremos; desde
manantiales calientes, profundidades tanto de mares como de la corteza terrestre,
cristales de halito, nódulos de manganeso marino, esmalte de rocas, rocas de
desierto e incluso condiciones extremas parecidas a las encontradas en el espacio
exterior (Fajardo 2006).Se les ha dado un uso también en la industria farmacéutica,
en la agroindustria como es la producción de inoculantes para fijar nitrógeno en
leguminosas y endófitos en caña de azúcar, o en la industria de alimentos
produciendo queso, mantequilla, yogurt e incluso en otro tipo de alimentos
fomentando una mejor digestión (Hagedon,1994).

II. OBJETIVOS
2.1 Objetivo general
 Observación de bacterias a través del microscopio.
2.2 Objetivo especifico
 Identificar los tipos de bacterias, también si son Gram + o Gram -.
 Reconocer las bacterias según su forma.

III. MARCO TEORICO

3.1 Bacterias Gram-negativas
En microbiología, se denominan bacterias gramnegativos aquellas que no
se tiñen de azul oscuro o de violeta por la tinción de Gram, y lo hacen de un
color rosado tenue: de ahí el nombre de "gramnegativos" o también "Gram-
negativas.

3.2 Bacterias Gram-positivas

Se le denomina bacterias Gram positivas, a aquellas que se tiñen de azul

oscuro o violeta por la tinción de Gram. Esta característica química está
íntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular, por lo que refleja un
tipo natural de organización bacteriana. Son grupos principales de bacterias y,
cuando se tratan como taxón, se utiliza también el nombre de Posibacteria y las
que restan son las bacterias gramnegativas.
3.3 Características

Las bacterias son microorganismos unicelulares que se reproducen por

fisión binaria. La mayoría es de vida libre, a excepción de algunas que son de
vida intracelular obligada, como Chlamydias y Rickettsias. Tienen los
mecanismos productores de energía y el material genético necesarios para su
desarrollo y crecimiento. Las bacterias integran el reino procariota (pro de
primitivo y cariota de núcleo). Todos los organismos vivos se pueden dividir en
dos tipos celulares: eucariotas y procariotas. Tienen estructuras en común como
la membrana celular, los ribosomas encargados de la síntesis proteica y el ácido
desoxirribonucleico (ADN) portador de la información genética.
Los organismos multicelulares, animales y plantas, están constituidos por
células eucariotas (eu de verdadero). Los protistas, los hongos y las algas que
se organizan de forma unicelular, multicelular o en colonias (como los protistas),
también poseen células eucariotas. Dentro de este esquema, las bacterias son
microorganismos unicelulares procariotas. En este reino, según criterios
evolutivos, diferenciamos el grupo de las eubacterias y el de las
arqueobacterias. Este último comprende bacterias sin peptidoglicano como las
anaerobias que viven en condiciones ácidas calientes, las que viven en
condiciones salinas y las que reducen el anhídrido carbónico (CO2) a metano.
Por lo tanto éstas viven en las profundidades del mar, en las aguas saladas y
en las fuentes ácidas. Las eubacterias, en cambio, viven en el suelo, el agua y
los organismos vivos; entre ellas se encuentran las bacterias de interés médico,
las bacterias verdes foto sintetizadoras, las cianobacterias o algas verde-azules
y las bacterias púrpuras foto sintetizadora. A continuación nos referiremos a las
eubacterias simplemente como bacterias. Como característica principal, los
procariotas no poseen compartimientos intracelulares delimitados por
membranas, por lo que carecen de membrana nuclear, a diferencia de los
eucariotas. También es importante destacar que el ADN procariota es circular y
cerrado, mientras que el eucariota se organiza en cromosomas individuales y
se asocia a proteínas de tipo histonas. Las bacterias poseen una pared celular
compuesta por peptidoglicano (a ex- cepción de los Mycoplasmas) mientras que
las células eucariotas no tienen este tipo de pared (la pared celular de los
vegetales es de celulosa). La reproducción en los eucariotas puede ser tanto
sexuada como asexuada, mientras que los procariotas se reproducen por
división simple (forma asexuada).
El tamaño de la célula eucariota es mayor que el de la procariota. Los
procariotas no poseen cito esqueleto, a diferencia de los eucariotas. Otra
diferencia es la presencia de fimbrias o pilis en las bacterias. Los procariotas
pueden poseer flagelos, mientras que los de los eucariotas si los poseen, éstos
tienen una estructura más compleja. Por último mencionar que mientras las
células eucariotas se reproducen por mitosis, las células procariotas lo hacen
 por fisión binaria. En dicho proceso la célula crece, se forma un tabique y
finalmente se desprenden dos células nuevas. En este proceso se produce
también la replicación del ADN, de forma que las células hijas contienen cada
una un duplicado idéntico del genoma de la progenitora.
3.4 Tamaño
El tamaño de las bacterias oscila entre las 0.5 y 3 µm, pudiendo llegar en
algunos tipos a 10 µm. Las bacterias de interés médico tienen un tamaño entre
0.4 y 2 µm. Solo son visibles entonces, al microscopio óptico o microscopio
electrónico. Para observarlas con el microscopio óptico se usa el objetivo de
inmersión (100X), sumergiendo esta lente en una gota de aceite (aceite de
inmersión) en el preparado a observar. A modo comparativo, una célula
eucariota mide más de 5 µm (un eritrocito tiene un diámetro de 7µm), mientras
que un reo virus mide menos de 0.1µm. Su tamaño pequeño determina una
relación entre la superficie y el volumen elevado, con alta tasa metabólica (M.
Pírez, M. Mota, Morfología y estructura bacteriana)
3.5 Estructura

La envoltura celular de las bacterias gramnegativos está compuesta por una

membrana citoplasmática (membrana interna), una pared celular delgada de
peptidoglicano, que rodea a la anterior, y una membrana externa que recubre la
pared celular de estas bacterias.4 Entre la membrana citoplasmática interna y
la membrana externa se localiza el espacio periplásmico, relleno de una
sustancia denominada periplasma, la cual contiene enzimas importantes para
la nutrición en estas bacterias. Retienen la safranina.

IV. MAERIALES Y METODOS

4.1 Materiales e insumos
 Lamina porta objetos.
 Microscopio.
 Placa Petri.
 Asa de siembra.
 Cámara de celular.
 Mechero bunsen.
 Fosforo.
 Algodón.

 Agua destilada.
 Alcohol.
 Ron de quemar.
 Violeta.
 Lugol.
  Acetato.
 Safranina.
4.2 Métodos.
Alistamos los microscopios la cual se utilizara en la práctica para poder observar
las bacterias.
Luego el docente nos entregó la muestra en placa Petri ya lista con las muestras
y el agar ya preparado.
Pasamos a desinfectar la luna porta objetos para el inicio de la siembra.
Para esto ya tenemos listo el mechero encendido para desinfectar el asa de
agarre y evitar contaminación de microorganismos extraños.
Luego colocamos la lámina porta objeto en el microscopio y observamos que
bacterias se encuentran presente en las muestras preparadas.
Sujetando el portaobjetos con la pinza, lo colocaremos encima de la llama del
mechero de alcohol realizando pequeñas oscilaciones hasta que se seque la
preparación, sin proporcionarle calor en exceso. Con este procedimiento mueren
las bacterias aumentando la permeabilidad de las bacterias.
Se procederá a teñir la muestra sobre la gradilla de tinciones con azul violeta de
metileno durante 35 seg a 1 min. Transcurrido este tiempo, se procederá a lavar
la muestra con agua y a su secado.
Para luego repetir la operación con el lugol el cual su concentración es de 1 min
a 1 min con 30 seg.
Luego procederemos con la acetona el cual su concentración también es de 1
min a 1 min con 30 seg.
Para finalmente agregar la safranina el cual su concentración también es de 1
min a 1 min con 30 seg.
Apuntamos los resultados observados y vimos las bacterias presentes en las
muestras presentes en la práctica.
V. RESULTADOS
o Finalmente en la práctica se pudo observar bacterias con tinción de color
violeta por la tinción de la safranina en la muestra y esta corresponde a la
pared Gram positivo.
o Su forma fue de cocos y bacilos.
o También se observó bacterias Gramnegativas de un color rosado tenue: de
ahí el nombre de "gramnegativas" o también "Gram-negativas".
o Bacilos y bacilos cortos.
VI. DISCUCION
Según Pisabarro (2009) Los microorganismos del género Bacillus son bacilos
de gran tamaño (4-10 μm), Los bacilos son bacterias que tienen forma de bastón
cuando se observan al microscopio. En la práctica se pudo observar que este
microorganismo era de forma recta y los extremos redondeados por tanto lo
identificamos como un bacilo.
Según Vázquez (2010) Las bacterias presentan una amplia variedad de
tamaños y formas. La mayoría presentan un tamaño diez veces menor que el de las
células eucariotas, es decir, entre 0,5 y 5 Coco (del griego kókos, grano): de forma
esférica. En la práctica se pudo observar que tenía forma circular de forma de grano.
VII. CONCLUSION
Esta práctica me ha parecido bastante interesante, puesto que no es algo
anormal, las cuales los bacteria gram - son procedentes de cualquier sitio, tanto en
los alimentos, en el suelo o en nuestro propio cuerpo. Las cuales son importantes y
útil el estudio de los bacterias gram- , que es diferente a nosotros como ser vivo,
con otras características u otras formas de vida.
Se observó bacterias Gram positivas y Gram negativas.
Se identificó las bacterias cocos y bacilos.
VIII. WEBGRAFIA

http://www.micologia.net/micologia/bacterias .htp
http://www.unsa.edu.ar/matbib/bacterias/07htextoalternaria.pdf
http://es.wikipedia.org/wiki/Penicillium_notatum
http://www.vc.ehu.es/plfarm/01.clpur.htm
http://es.wikipedia.org/wiki/Histoplasma_capsulatum
http://www.amanitacesarea.com/pleurotus-ostreatus.htm
BIBLIOGRAFIA
Según Pisabarro (2009) Los microorganismos del género Bacillus son bacilos de gran
tamaño (4-10 μm), Los bacilos son bacterias que tienen forma de bastón cuando se
observan al microscopio. En la práctica se pudo observar que este microorganismo era de
forma recta y los extremos redondeados por tanto lo identificamos como un bacilo.
Según Vázquez (2010) Las bacterias presentan una amplia variedad de tamaños y formas.
La mayoría presentan un tamaño diez veces menor que el de las células eucariotas, es
decir, entre 0,5 y 5 Coco (del griego kókos, grano): de forma esférica. En la práctica se pudo
observar que tenía forma circular de forma de grano.
ANEXOS