ACTIVIDAD ENZIMATICA

HAROLD CORREA, IVAN SANCHEZ, FRAY BARRIOS, ROBERTO AYALA

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Universidad del Magdalena, Estudiantes del Programa de Pesca, Facultad de ingenieríía.
Carrera 32 No 22 – 08. Santa Marta, Colombia.

RESUMEN
El objetivo de esta praí ctica de laboratorio Identificar en una reacción las enzimas y su respectivo
sustrato.
Observar la actividad de algunas enzimas en tejidos animales y vegetales.
Demostrar el efecto de la temperatura, el pH y la concentración sobre la actividad de una enzima.
Demostrar la forma en que una enzima es específica para cierto sustrato.

INTRODUCCION

Las células poseen compuestos químicos que controlan las reacciones que ocurren en su interior.
La sustancia que controla la velocidad a la que ocurre una reacción química sin que la célula sufra
daño alguno ni se destruya se conoce como catalizador. Las enzimas son sustancias (proteínas) que
actúan como catalizadores en las células y hacen posibles las reacciones que ocurren en las células
disminuyendo la cantidad de energía de activación que se necesita. Las enzimas también controlan
la velocidad a la que ocurre la reacción para que la energía se libere a una temperatura que no haga
daño al organismo. Las miles de reacciones que constituyen el metabolismo de los seres vivos
están bajo control de miles de enzimas.
Diferentes enzimas controlan diferentes reacciones. La sustancia sobre la cual actúa una enzima se
llama Sustrato. Al ocurrir una reacción el sustrato se convierte en uno o más productos nuevos.

E + S ======== ES ------------- E + P
Las enzimas no se consumen en las reacciones y se pueden volver a utilizar. Sin embargo una
enzima particular actúa solo sobre un sustrato específico, así que una enzima solo puede controlar
un tipo de reacción específica.
Una enzima recibe el nombre del sustrato sobre el cual actúa; Ej. Anhidrasa carbónica, la cual actúa
en la conversión del CO2 en HCO3. Como nota, a una parte del nombre del sustrato sobre el cual
actúa la enzima se le añade el sufijo asa.
Como las enzimas son proteínas; los factores que afectan la estructura de la proteína, también
afectan la función o actividad de las enzimas. La temperatura, el pH y la concentración son algunos
de los factores que influyen en la actividad de las enzimas.
 MATERIALES Y MÉTODOS.

Laboratorio:
Beakers, tubos de ensayo pequeño, baño maria, gradilla, vidrio de reloj, cajas petri, pinzas para
tubos de ensayo, cuchilla o bisturí, papel absorbente, estufa, termómetro, probetas, pipetas, cinta
para rotular, pitillos plástico, varias jeringas (1 y 10ml), balanzas analítica, cucharas desechables,
mortero, algodón.

Reactivos y Soluciones:
Solución de almidón, solución de lugol, solución de peróxidos de hidrogeno al 6%, agua destilada,
agua en bolsa, hielo, cloruro férrico (en cristales). Ácido acético, Hidróxido de sodio o amoniaco,
anticoagulante 8citrato de sodio), Benedict, MnO 2.

Biológico:
Saliva, un pedazo de hígado, un pedazo de riñón, papa, zanahorias, remolacha, sangre fresca,
levadura.

Acción de la invertasa

1. Tome 3 g de levadura y disuélvala en 40 ml de agua destilada; déjela en reposo por 20 minutos y

centrifugue o decante. De esta manera, obtiene la enzima invertasa.
2. Tome 3 tubos de ensayo y adiciónele 5 ml del extracto de levadura y adiciónele 10 ml de
solución de sacarosa al 2% a cada uno.
3. Deje un tubo a temperatura ambiente, haga enfriar el segundo y caliente el otro; deje enfriar y
determine glucosa con Benedit a los 30 minutos.
Describa

1.Rotule y prepare cuatro tubos de ensayos de la siguiente forma:

Numero del Mililitros (ml) de Peróxido de

tubo Extracto de hidrógeno
hígado
1 0 2 ml
2 1.0 ml 2 ml
3 2.0 ml 2 ml
4 4.0 ml 2 ml

Una vez realizado, agite bien los tubos, luego agregue al mismo tiempo 2 ml de peroxido de
hidrogeno en cada uno de los tubos
 2. Rotule y prepare 5 tubos de ensayos de la siguiente forma:

Numero del Mililitros (ml) de Volumen de

tubo extracto de peróxido de
hígado hidrógeno
1 1.0 0 ml
2 1.0 1 ml
3 1.0 2 ml
4 1.0 4 ml
5 1.0 6 ml

Agite cada uno de los tubos, agregue al mismo instante las siguientes cantidades de peróxido de
hidrogeno:
Al tubo No 1. 0 ml; al tubo No. 2. 1 ml; al tubo No. 3. 2 ml; al tubo No. 4. 4 ml, al tubo No. 5. 6 ml

3.Rotule y prepare tres tubos de ensayos de la siguiente forma:

Numero ml de Temperatura °C Volumen de

del tubo Extracto peróxido de
de hígado hidrógeno
1 2.0 Baños con hielo 2 ml
2 2.0 Tempera ambien 2 ml
3 2.0 Agua hirviendo 2 ml

Espere que el material que este dentro de los tubos tenga la misma temperatura que la de los
respectivos baños; luego agite y proceda agregar al mismo tiempo 2 ml de peróxido de hidrogeno a
cada uno de los tubos.

4.Rotule y prepare tres tubos de ensayos de la siguiente forma:

Tubo Nº ml de Extracto pH ml de
de hígado peróxido
1 2 Ác. acético (5.0 2 ml
gotas)
2 2 Neutro 2 ml
3 2 Amoniaco (5.0 2 ml
gotas)

Agite cada uno de los tubos y agregue al mismo instante 2 ml de peróxido de hidrogeno en cada uno
de ellos.
 06.Rotule y prepare 6 tubos de ensayos de la siguiente forma:

Numero del Material ml de

tubo peróxido
1 1gramo de papa 2
2 1gramos de 2
zanahoria
3 1gramos de 2
remolacha
4 1 gramo de hígado 2
5 1 gramos de riñón
6 1 ml de sangre
Agite cada uno de los tubos al mismo instante, agregue 2 ml de peroxido en cada uno de ellos.

7.Rotule y prepare 3 tubos de ensayos de la siguiente forma:

Numero del tubo Material

1 5 ml de agua
2 1gramos de FeCl3 + 5ml de H2O
3 1 ml de Ext. de hígado

Agite cada uno de los tubos, mida la temperatura de cada uno de ellos y agregue al mismo instante 2
ml de peróxido de hidrogeno. Mida de nuevo la temperatura

RESULTADOS

Acción de la invertasa

1) En el tubo de ensayo #1 no hgubo actividad enzimática ya que no tenia estracto de hígado,

en el #2 si hubo una antividad enzimática nolmal, en el #3 se presento una actividad
enzimática mas alta y se puso un poco caliente y el #4 hubo una actividad enzimática muy
alta y el tubo de ensayo se calentó.

2) En el tubo de ensayo #2 notamos una normal actividad enzimática y su color no cambia casi
en nada #2 se noto una actividad enzimática un poco mas alta que la primera pero su color
fue un tono mas claro, en el #3 su actividad enzimática fu mas alta que la del segundo tubo
de ensayo y se torno un tono mas claro que el segundo tubo de ensayo y el #4 hubo mayor
actividad enzimática y su color se torno claro.

3) En el tubo de ensayo #1 se nota una baja actividad enzimática , en el #2 se nota una

actividad enzimatuca normal y en el #3 se nota una alta actividad enzimática.

4) En el tubo de ensayo #1 no hubo actividad enzimática, en el #2 si hubo actividad enzimática

y en el #3 no hubo actividad enzimática.

5)
 Cunclusion

Con la realización de este práctico pudimos comprobar que la acción enzimática está presente en
muchos procesos, y que es fundamental para mantener el equilibrio y el normal funcionamiento
de los organismos ya que en varias oportunidades del experimento estos reaccionaron en forma
brusca e inmediata hecho que sucede al alterar su estado natural.