Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN Y
PROPIEDADES DE LOS CARBOHIDRATOS
Objetivos
Introducción
1
Prácticas de Bioquímica I Práctica: Reacciones de identificación y Propiedades de los Carbohidratos
furfural
O
H2COH CHO
+
H
Hexosas (C6H12O6)
5-hidroximetilfurfural
O
H3C CHO
+
H
6-Desoxihexosas (C6H12O5)
5-metilfurfural
2
Prácticas de Bioquímica I Práctica: Reacciones de identificación y Propiedades de los Carbohidratos
A pesar de que estas sean las propiedades más importantes en las que se basan
muchas pruebas para la determinación de carbohidratos, existen otras
determinaciones como la capacidad de rotar la luz polarizada, la formación de
osazonas, entre otras, que nos abren nuevas posibilidades y recursos, útiles en la
identificación de estas biomoléculas.
MATERIALES Y EQUIPOS
- Tubos de ensayo.
- Gradillas.
- Pipetas graduadas.
- Baño de María a 100°C.
- Goteros.
- Pinzas para tubos de ensayo.
REACTIVOS
- α -naftol al 0,5% en etanol.
- Ácido sulfúrico concentrado.
- Glucosa, fructosa, almidón, sacarosa, maltosa, muestra problema
- Reactivo de Benedict: preparar combinando las siguientes soluciones:
Solución A: 173 g de citrato de sodio y 100 g de carbonato de sodio se
disuelven en 800 mL de agua destilada
Solución B: disolver 17,3 g de CuSO4: 5 H2O en 100 mL de agua destilada.
3
Prácticas de Bioquímica I Práctica: Reacciones de identificación y Propiedades de los Carbohidratos
OH O
alfa-naftol
OH
+
2 H O C R
HC R
+
RCHO
OH OH
Cromógeno violeta
intermediario
4
Prácticas de Bioquímica I Práctica: Reacciones de identificación y Propiedades de los Carbohidratos
Prueba de Molisch:
Esta reacción detecta la presencia del furfural producido en medio ácido por las
pentosas. El reactivo de Bial contiene orcinol disuelto en HCl concentrado. El ácido
provoca la formación del furfural y el orcinol se condensa con este último para
producir cromógenos de color verde-azul.
CH3
O
CHO H+ Compuestos de
FeCl3
+ + color verde-azul
HO OH
furfural
orcinol
Prueba de Bial:
1.- Rotule dos tubos de ensayo (1 y 2)
2.- Agregar 2 mL del carbohidrato al tubo 1 y 2 mL del compuesto desconocido al
tubo 2.
3.- Colocar 2 mL de reactivo de Bial a los dos tubos.
4.- Calentar los tubos en baño de agua hirviente por 5 minutos.
4.- La reacción es positiva cuando aparece una coloración azul-verdosa que indica la
presencia de pentosas.
5
Prácticas de Bioquímica I Práctica: Reacciones de identificación y Propiedades de los Carbohidratos
O OH
HOH2C CHO
H+ Compuestos de
+ color rojo
OH
5-hidroximetilfurfural resorcinol
Prueba de Seliwanoff:
1.- Rotule dos tubos de ensayo (1 y 2)
2.- Agregar con la ayuda de una pipeta 4 gotas del carbohidrato al tubo 1 y 4 gotas del
desconocido al tubo 2.
3.- Colocar 5 mL de reactivo de Seliwanoff en ambos tubos de ensayo.
4.- Calentar en agua hirviente.
5.- La reacción es positiva al aparecer un color rojo intenso en forma de precipitado,
indicando la presencia de cetohexosas.
6
Prácticas de Bioquímica I Práctica: Reacciones de identificación y Propiedades de los Carbohidratos
Trommens, entre otras. En el presente trabajo práctico se hará referencia a las dos
primeras.
Esta reacción nos indica si un azúcar es o no reductor. Para tal fin el carbohidrato se
hace reaccionar con el ión cúprico (Cu++) en medio alcalino y a una temperatura de
100°C. El carbohidrato, a través de su hemiacetal libre en el carbono 1, se oxida
favoreciendo la reducción del cobre a oxido cuproso (Cu2O) el cual se presenta como
un precipitado rojo.
precipitado rojo
Prueba de Benedict:
1.- Rotule dos tubos de ensayo (1 y 2)
2.- Añadir 8 gotas del carbohidrato al tubo 1 y 8 gotas del compuesto desconocido al
tubo 2.
3.- Colocar 5 mL de reactivo de Benedict en ambos tubos.
4.- Calentar en agua hirviente durante 5 minutos.
La reacción es positiva al aparecer un precipitado rojo ladrillo, indicando ésto la
presencia de sustancias reductoras.
7
Prácticas de Bioquímica I Práctica: Reacciones de identificación y Propiedades de los Carbohidratos
precipitado rojo
Prueba de Barfoed:
1.- Rotule tres tubos de ensayo (1, 2 y 3)
2.- Colocar 2 mL de una solución de monosacárido reductor en el tubo 1, 2 mL de una
solución de disacárido reductor en el tubo 2 y 2 mL del desconocido en el tubo 3.
3.- Agregar 2 mL de Reactivo de Barfoed a todos los tubos.
4.- Calentar en baño de agua hirviente. Tome nota del tiempo y observe los tubos
cada 5 minutos.
Se emplea para comprobar la presencia de polisacáridos y nos permite tener una idea
de cual de ellos se trata. Se basa en poner en contacto el carbohidrato con yodo; si se
obtiene un color azul intenso, se trata de almidón, dicha coloración desaparece
calentando a ebullición y reaparece al enfriar debido a que la estructura helicoide del
polisacárido se desordena por efecto del calor y se reordena al enfriarse. De esto se
deduce que la relación entre el yodo y el almidón es de adhesión y no hay formación
de enlaces químicos permanentes. Si la coloración obtenida es rojiza el polisacárido
presente es el glucógeno.
Prueba de Lugol:
1.- Rotule dos tubos de ensayo (1 y 2)
2.- Colocar 5 mL del carbohidrato en el tubo 1 y 5 mL del desconocido en el tubo 2.
3.- Añadir 2 gotas de una solución diluida de yodo-yoduro de potasio a ambos tubos.
Mezclar.
8
Prácticas de Bioquímica I Práctica: Reacciones de identificación y Propiedades de los Carbohidratos
4.- Observe la coloración. Si ésta es azul, caliente el tubo en agua hirviente por 2 min.
y observe. Deje enfriar y observe nuevamente.
AUTOEVALUACIÓN
BIBLIOGRAFÍA