Universidad del Zulia

Facultad de medicina

Escuela de medicina

División y extensión de la facultad de medicina

I curso ce citología biopsia y autopsia

INFORME DE CITOLOGÍA Y BIOPSIAS

Realizado por:

 LEONELA DELGADO CI: 21.569.727

 DARWIN R VELEZ GARIZABAL CI: 21.567.649

Maracaibo marzo 2018

 1 Mencione y describa los aparatos que se utilizan en los
laboratorios de citotecnologia

 Mesas de trabajo .
 Estaciones de trabajo para patología, donde se realizan exámenes y
disecciones macroscópicas de muestras.
 Etiquetadores automáticos de casetes y portaobjetos.
 Procesadores automatizados de tejidos.
 Microtomos, para realizar cortes finos.
 Estaciones de parafina.
 Citocentrífugas.
 Procesadores citológicos.
 Sistemas automáticos de bloques celulares.
 Sistemas de diagnóstico por imagen.
 Teñidores automáticos para rutina y tinciones especiales.
 Teñidores automáticos para inmunohistoquímica.
 Montadores automáticos
 Microscopio .
 Cassette de inclusión y moldes
 Colorantes convenciones y especiales
 Portaobjetos y cubreobjetos

DESCRIBA LOS SIGUIENTE TIPOS DE COLORANTES CONVENCIONAL Y

ESPECIALES USADO EN HISTOTECNOLOGIA

Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para

mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. Los colorantes y tinturas
son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar
estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de
diferentes tipos de microscopios. Los diferentes colorantes pueden ser
utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido
(resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo),
poblaciones celulares(por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o
incluso para resaltar organelas dentro de células individuales

Colorantes histológicos más comunes

Los diferentes colorantes reaccionan o se concentran en diferentes partes de
las células o tejidos, y estas propiedades son utilizadas como una ventaja para
revelar partes o áreas específicas.
Azul brillante de Coomassie
Azul de Coomassie (también conocido como Coomassie blue) es un colorante
que tiñe en forma no específica a todas las proteínas con un fuerte color azul.
Se utiliza frecuentemente para teñir las corridas de proteínas en
las electroforesis en gel.
Azul de metileno
El azul de metileno se utiliza para teñir células de animales, para hacer más
visibles sus núcleos. Es también utilizado para teñir los extendidos de sangre
para ser utilizados en citología y como colorante vital en el recuento
de reticulocitos.
Azul Nilo
El Nile Blue o Nile blue A, es decir, azul Nilo, tiñe los núcleos de color azul.
También puede ser utilizado para teñir células vivas.
Bismarck brown
Bismarck brown (Marrón Bismarck, también conocido como Bismarck brown
Y o Manchester brown) imparte un color amarillo a las mucinas ácidas. Se
puede utilizar con células vivas.
Bromuro de etidio
El bromuro de etidio (BE) se intercala en el ADN y le otorga un color rojo
naranja fluorescente.
Carmín
El carmín es un colorante de un intenso color rojo que puede ser utilizado como
sal de litio para teñir glicógeno, mientras que las sales de alumbre-carmín son
colorantes que se adhieren al núcleo.
Cristal violeta
El cristal violeta, al ser combinado con un mordiente adecuado, tiñe las paredes
celulares de color púrpura. El cristal violeta es un componente importante en
lacoloración de Gram.
DAPI
El DAPI es un colorante nuclear (tiñe el núcleo) fosforescente, se excita con luz
ultravioleta para producir una fuerte fluorescencia azuL
Eosina
La eosina se utiliza más frecuentemente como contra coloración de la
hematoxilina, impartiendo un color que va del rosado al rojo al
material citoplasmático,membrana celular, y algunas estructuras extracelulares.
Además imparte un fuerte color rojo a los eritrocitos.
Fucsina ácida.
La fucsina ácida puede ser utilizada para colorear colágeno, músculo liso
o mitocondrias. Forma parte de la coloración tricrómica de Mallory donde se
utiliza para colorear núcleo y citoplasma.
Hematoxilina
La hematoxilina es un colorante nuclear. Utilizado con un mordiente, la
hematoxilina tiñe los núcleos celulares de color azul violeta a negro.
Hoechst
Hoechst es un compuesto derivado bis-benzimidazol que se une al surco
menor del ADN. Se utiliza con frecuencia en microscopía de fluorescencia para
colorear el ADN.
Lugol
El yodo se utiliza en química analítica como indicador para el almidón. Cuando
se mezcla almidón con una solución de yodo, se desarrolla un color
intensamente azul, representando la formación del complejo de inclusión
yodo/almidón.
Naranja de acridina
El naranja de acridina es un colorante fluorescente, catiónico y selectivo para
ácidos nucleicos útil para demostraciones sobre el ciclo celular.
Plata
Una tinción argéntica es el uso de plata para colorear preparados histológicos.
Este tipo de coloración es especialmente importante para demostrar proteínas
(por ejemplo el colágeno tipo III) y ADN.
Rodamina
La rodamina es una tinción fluorescente específica para proteínas utilizada
comúnmente en microscopía fluorescente.
Rojo neutro
El rojo neutro (toluylene red) colorea de rojo a la substancia de Nissl. Con
frecuencia se utiliza como contracoloración en otras técnicas de tinción.
Rojo Nilo
El Rojo Nilo (también conocido como oxazona del azul nilo) se produce
hirviendo el Azul Nilo con ácido sulfúrico. Este tratamiento produce una mezcla
de Rojo y Azul Nilo.
Safranina
La safranina (o safranina O) es un colorante nuclear. Colorea los núcleos
celulares de rojo, y se utiliza principalmente como contracoloración. También
puede ser utilizada para darle una coloración amarilla al colágeno.
Sudan
La coloración de Sudán se utiliza para destacar sustancias "sudanofílicas", por
lo común, lípidos. También se utiliza para determinar los niveles de grasa en
materia fecal para diagnosticar esteatorrea.
Tetróxido de osmiO
El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para colorear lípidos. Se
disuelve con facilidad en las grasas y se reduce a osmio metálico al interactuar
con material orgánico, dejando un color marrón o negro característico.
Verde de metilo
El verde de metilo se utiliza frecuentemente en microscopia de campo claro,
para teñir la cromatina de las células y facilitar así su visualización.
Verde malaquita
El verde malaquita (conocido también como diamond green B o victoria green
B) puede ser utilizado como contracoloración azul-verdosa.

-TINCIONES ESPECIALES
De los cientos de tinciones especiales que figuran en los textos clásicos de
técnica microscópica, se mencionan Las más usadas

1. PAS (periodicacid-Shiff)
2. Tinciones para microorganismos
3. Tinciones argentafines y argirófilas
4. Tinción de amiloide
5. Tinción de reticulina
6. Tinciones tricrómicas
7. Tinciones para hemosiderina (Perls)
8. Tinciones para calcio (vonKossa)
9. Tinción de Giemsa
10. Fibras elásticas
IMPORTANCIA DE LA CITOLOGÍA EXFOLIATIVA Y DESCRIBA
LA TÉCNICA

Es el estudio o interpretación de los caracteres de las células que se

descaman espontáneamente o de las que son extraídas activamente para su
observación, con la finalidad de evaluar cambios citológicos tempranos. La
citología exfoliativa es un método simple y razonable para la detección de
algunas enfermedades malignas y de esta manera el paciente puede recibir
tratamiento medico precoz

MATERIAL NECESARIO PARA LA CITOLOGÍA

a) lámina portaobjeto limpia y desengrasada.

b) un clip que se coloca en un extremo de la lámina, este señala la cara donde

se encuentra el material o extendido.

c) lápiz de punta de diamante o graso para identificar la lámina, esto puede

obviarse si se utilizan láminas portaobjetos “esmeriladas” con un extremo
rugoso y opaco que permite marcar con lápiz corriente.

d) instrumento para tomar la muestra el cual puede ser variable; en el caso de

mucosa oral se recomiendan espátulas de madera estériles para el raspado, o
hisopos si se quiere recolectar material mucoso.

e) frasco de boca ancha o portaláminas de cartón.

f) fijador: se utiliza alcohol al 96º, alcohol éter sulfúrico en partes iguales o

fijadores de revestimiento (spray), los cuales se rocían sobre la lámina antes de
que se seque, a 20 cms de distancia en forma de una capa delgada, luego de
10 minutos, se coloca en un portaláminas y puede enviarse al laboratorio.

MÉTODOS PARA TOMAR LA MUESTRA CITOLÓGICA (TÉCNICAS)

Se pueden citar las siguientes:

1. MÉTODO POR APOSICIÓN: Consiste en tomar un trozo de la muestra y

frotarlo en la lámina portaobjeto.

2. RASPADO, CURETAJE O LEGRADO: Consiste en frotar enérgicamente

con una baja lengua de madera sobre la superficie de la lesión sospechosa y
luego extender el producto obtenido sobre la lámina portaobjeto, es el método
más utilizado en la mucosa bucal. ej. : en placas, eritroplasias o leucoplasias.

3TÉCNICA DE LAVADO O IRRIGACIÓN (EN BOCA): Consiste en efectuar

repetidos buches con agua recogiendo el líquido en un recipiente, luego
centrifugarlo y extender el remanente sólido en forma de frotis sobre el
portaobjeto.

4. TÉCNICA DE ASPIRACIÓN O PUNCIÓN: Con esta técnica se extrae el

líquido, fluido o secreción de una cavidad patológica o preformada para la cual
se emplea una jeringa hipodérmica. Esta técnica se utiliza sobre todo en caso
de quistes y abscesos.

Los preparados deben ser enviados al laboratorio con la ficha o el protocolo

correspondiente.

COLORACIÓN : se usa el método de Papanicolau.

MÉTODO PARA LA COLORACIÓN DE PAPANICOLAU

1. Después de la fijación, lavado de la muestra con agua destilada por 2

minutos

2. Colocarla en hematoxilina de HARRYS durante 5 minutos.

3. Lavar con agua corriente para eliminar el exceso de colorante.

4. Lavar con agua acidulada durante 20 a 30 segundos, ésta se prepara

disolviendo 0,5 cc de ácido clorhídrico en 99,5 cc de agua destilada.

5. Lavar con agua corriente por 30 segundos para eliminar el ácido

. 6. Lavar con agua amoniacal que se prepara disolviendo 3 gotas de amoníaco

de 100 cc de agua destilada por 30 segundos.

7. Lavar con agua corriente por 1 o 2 minutos.

8. Lavar con alcohol de 70% y 90%, un minuto con cada uno de ellos.

9. Colocar en una solución de POLICROMADO DE PAPANICOLAU durante 2

a 5 minutos.

10. Lavar 3 veces con alcohol etílico puro.

11. Lavar con xilol para aclarar la coloración.

12. Secar la lámina con papel especial.

13. Colocar una gota del Bálsamo del Canadá y una lámina cubreobjeto.