ARTIKEL KINETIKA REAKSI ENZIM

Oleh:
Ni Nyoman Junitri Suari
1313031059
VI C

JURUSAN PENDIDIKAN KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSETAS PENDIDIKAN GANESHA
SINGARAJA
2016
 GLIKOLISIS DALAM SEL RAGI DAN SEL DARAH MERAH

Ni Nyoman Junitri Suari

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Pendidikan Ganesha
e-mail:juni3_suari@yahoo.com

Abstrak
Glikolisis merupakan jalur utama dalam metabolisme karbohidrat untuk menghasilkan energi. Adapun
tujuan dari percobaan ini adalah mengamati proses glikolisis di dalam sel ragi dan sel darah merah dan
mengamati pengaruh inhibitor seperti flourida dan arsenat terhadap proses glikolisis. Metode yang
digunakan pada percobaan ini adalah metode kuantitatif dengan mengukur absorbansi dan menentukan
%kadar glukosa dan etanol. Hasil dari percobaan glikolisis dalam sel ragi dan sel darah merah yaitu kadar
glukosa pada glikolisis sel ragi secara Folin-Wu pada tabung kontrol positif sebesar 164,18 mg/100mL,
pada tabung kontrol negatif sebesar 243,62 mg/ 100mL, pada tabung pengaruh inhibitor flourida sebesar
11,8 mg/100mL, dan pengaruh inhibitor arsenat sebesar 20,90 mg/100mL. Kadar etanol dari hasil glikolisis
sel ragi yaitu pada kontrol positif sebesar 200 g/dL, kontrol negatif sebesar 150 g/dL, pengaruh flourida
sebesar 66,67 g/dL, dan pengaruh arsenat sebesar 100 g/dL. Kadar glukosa yang dihasilkan dari glikolisis
sel darah merah dengan cara Folin-Wu yaitu pada kontrol positif sebesar 83,33 mg/100mL, kontrol negatif
sebesar 76,67 mg/100mL, pengaruh flourida sebesar 26,67 mg/ 100mL, dan pengaruh arsenat sebesar 50,69
mg/ 100mL. Pengaruh inhibitor pada glikolisis dalam sel ragi dan sel darah merah adalah menghambat
terjadinya reaksi enzimatis yang menyebabkan sedikit produk yang dihasilkan.

Kata kunci: glikolisis, metabolisme, sel ragi, sel darah merah

Abstract
Glycolysis is a major pathway in the metabolism of carbohydrates to produce energy. The purpose of
this experiment is to observe the process of glycolysis in yeast cells and red blood cells and observe the effect
of inhibitors such as fluoride and arsenate on glycolysis. The method used in this experiment is a
quantitative method to measure the absorbance and determine % glucose and ethanol. Results of
experiments glycolysis in yeast cells and red blood cells that glucose levels in the yeast cell glycolysis in
Folin - Wu tube at 11.39 mg/100 mL positive control, negative control tube was 79.75 mg/100 mL, the effect
of inhibitors on the tube fluoride at 39.24 mg/100 mL, and the influence of inhibitors of 8.86 mg/100 mL
whereas arsenate is o - toluidine glucose levels obtained in the positive control was 36.29 mg/100 mL,
amounting to 102.80 mg/100 mL negative control, influence fluoride 121.64 for mg/100 mL, and the effect of
arsenate was 73.88 mg/100 mL. Ethanol content of the yeast cell glycolysis that results in positive control of
290.84 g/dL , a negative control was 253.37 g/dL, the effect of fluoride at 239.66 g/dL, and the effect of
arsenate of 164.94 g/dL . Glucose levels that result from red blood cell glycolysis by means of Folin - Wu is
the positive at 1020.76 mg/100 mL control, negative control for 824.94 mg/100 mL, the effect of fluoride was
885.32 mg/100 mL, and the effect of arsenate 1041.14 mg/100 mL. Effect of inhibitors on glycolysis in yeast
cells and red blood cells is to inhibit the enzymatic reaction that causes a bit of product produced .

Keywords: metabolism, glycolysis, yeast cells, red blood cells

PENDAHULUAN
Setiap makhluk hidup mengadakan pertukaran
zat dengan lingkungannya, artinya makhluk hidup
tidak hanya mengambil zat-zat tertentu dari
lingkungannya, tetapi ia juga mengembalikan zat-zat
tertentu kedalam lingkungannya. Inilah yang disebut
proses metabolisme. Metabolisme adalah reaksi
kimia untuk pembentukkan dan perombakan bahan
organik. Metabolisme dibedakan ke dalam
anabolisme dan katabolisme. Anabolisme, yaitu
pembentukan senyawa-senyawa kompleks dari
senyawa sederhana. Proses ini memerlukan energi.
Katabolisme, yaitu penguraian senyawa kompleks
menjadi senyawa-senyawa sederhana. Proses ini
menghasilkan energi. Energi ini dapat digunakan
oleh makhluk hidup untuk berbagai kegiatan
(Siregar, 2010 (a)).
Senyawa-senyawa seperti karbohidrat, lipid dan
protein dapat digunakan sebagai sumber energi
untuk metabolisme sel. Senyawa ini di dalam sel
akan mengalami perubahan melalui berbagai reaksi
enzimatik atau jalur metabolisme. Sebagian besar
jalur metabolisme dan reaksi-reaksi yang terjadi di
dalam jalur metabolisme hampir sama baik pada
organisme sederhana seperti bakteri maupun
organisme tertinggi seperti mamalia (Soewoto,
2013).
Glikolisis merupakan jalur utama dalam
metabolisme karbohidrat untuk menghasilkan
energi. Jalur glikolisis ini merupakan jalur yang
sangat penting. Pertama karena tidak hanya
berperan pada metabolisme karbohidrat saja, tetapi
bersama-sama dengan siklus asam sitrat dapat
berperan sebagai jalur amfibolik. Selain itu, jalur ini
juga harus berfungsi setiap saat dan tersebar dalam
seluruh makhluk hidup, mulai dari bakteri hingga
manusia.
C6H12O6
Glukosa
Gambar 1. Reaksi yang terjadi pada glikolisis sel ragi
Pada eksperimen metabolisme ini akan
dilakukan pengamatan terhadap proses glikolisis
yang terjadi di dalam sel ragi dan yang terjadi di
dalam sel darah merah. Untuk menghamati
terjadinya glikolisis dan pengaruh inhibitor maka
dilakukan penentuan kadar glukosa dan etanol.
Penetapan kadar glukosa dapat dilakukan dengan
cara Folin-Wu dan o-toluidin. Penetapan kadar
etanol dilakukan dengan mereaksikan dikromat.
Pada manusia dan hewan mengalami proses
glikolisis anaerob. Glikolisis anaerob atau respirasi
anaerob mer upakan serangkaian reaksi enzimatis
yang memecah glukosa secara tidak sempurna
karena kekurangan oksigen. Pada manusia, respirasi
anaerob menghasilkan asam laktat sehingga
menyebabkan rasa lelah, sedangkan pada sel ragi
menghasilkan CO2 dan alkohol. Glikolisis anaerob
hanya menghasilkan sedikit energi, yaitu 2 ATP.
Glikolisis sel ragi disebut fermentasi atau peragian.
Pada umumnya glikosisis ini terjadi pada tumbuhan,
fungi dan bakteri. Proses fermentasi sering disebut
sesuai dengan hasil akhir yang terbentuk. Misalnya:
fermentasi alkohol bila hasil akhir fermentasiberupa
alkohol. Menurut hasil samping yang terbentuk,
maka fermentasi dibedakan atas fermentasi alkohol
pada ragi (khamir) dan bakteri anaerobik, fermentasi
asam laktat pada umumnya di sel otot, dan
fermentasi asam sitrat pada bakteri heterotrof.
Bahan baku respirasi anaerobik pada peragian
adalah glukosa, disamping itu juga terdapat fruktosa,
galaktosa, dan manosa. Hasil akhirnya adalah
alkohol, karbon dioksida, dan energi. Alkohol
bersifat racun bagi sel-sel ragi. Sel-sel ragi hanya
tahan terhadap alkohol pada kadar 9-18%. Lebih
tinggi dari kadar tersebut, proses alkoholisasi
(pembuatan alkohol) terhenti. Hal tersebut
merupakan suatu kendala pada industri pembuatan
alkohol. Oleh karena glukosa tidak terurai lengkap
menjadi air dan karbon dioksida, maka energi yang
dihasilkan lebih kecil dibandingk an respirasi
aerobik. Pada respirasi aerobik dihasilkan 675 kal,
sedangkan pada respirasi anaerobik hanya dihasilkan
21 kal (Siregar, 2010 (b)). Reaksi sel ragi seperti
dibawah ini:
2 C2H5OH + 2 CO2 + 21 Kal
Etanol
Penetapan kadar glukosa melalui cara Folin-Wu
dapat dilakukan dengan penambahan larutan
tembaga alkalis yang mana glukosa akan mereduksi
ion kupri menjadi senyawa kupro yang tidak dapat
larut (Soewoto, 2013). Kemudian ion kupro akan
mereduksi ion fosfomolibdat menghasilkan larutan
biru tua. Penetapan kadar glukosa melalui cara
Folin-Wu dapat dihitung menggunakan persamaan
berikut.
 AU  AB 100
Kadar glukosa = x 0,2 x mg/ 100mL
AS  A B 0,2
Penetapan kadar glukosa juga dilakukan dengan
cara o-toluidin yaitu mereaksikan larutan sel ragi ke
dalam asam asetat yang panas sehingga dapat
dibentuk senyawa yang berwarna hijau dan warna
tersebut akan dilakukan pengukuran absorbansi
menggunakan spektrofotometer UV-Vis dengan 
625nm. Penetapan kadar glukosa melalui cara o-
Cr2O7 + 10 H+ + CH3CH2OH
Gambar 2. Reaksi oksidasi etanol menjadi asetat
Perhitungan penetapan kadar etanol yang dihasilkan
dari reaksi glikolisis sel ragi dapat dihitung dengan
menggunakan persamaan sebagai berikut.
A  AU 0,5 100 100
Kadar etanol = B x 0,5 x x x g/ dL
AS  A U 100 0,5 0,5
MATERI DAN METODE
Percobaan glikolisis sel ragi dan sel darah
merah yang menentukan kadar glukosa dan kadar
etanol dilakukan menggunakan metode kuantitatif.
Percobaan glikolisis ini dilaksanakan di
Laboratorium Kimia Organik FMIPA UNDIKSHA
pada tanggal 10 Mei 2016.
Alat dan bahan
Peralatan yang diperlukan untuk melaksanakan
percobaan glikolisis sel ragi dan sel darah merah
adalah kaca arloji, cawan petri, spektrofotometer
UV-Vis, tabung reaksi, rak tabung reaksi, pipet ukur
10 mL, pipet volumetri 5 mL, corong kaca, dan
kertas saring. Bahan yang digunakan dalam
percobaan glikolisis ini adalah suspensi ragi roti;
larutan glukosa 2%; larutan flourida; larutan arsenat;
akuades; larutan Na-tungstat 10%; larutan H2SO4
2/3N; pereaksi Cu-alkalis; asam fosfomolibdat;
larutan TCA 10%; o-toluidin; larutan standar
glukosa 1 mg/mL; larutan asam dikromat; larutan
Na2CO3 20%; larutan standar etanol 0,5 g/dL; sel
darah ayam; dapar KRP; dan larutan glukosa 0,5%.
Prosedur kerja
1 Glikolisis Sel Ragi
Tabung reaksi disiapkan sebanyak 4 buah yang
masing-masing tabung diberikan tanda 1, 2, 3, dan 4.
Tabung 1 digunakan sebagai kontrol positif, tabung
toluidin dapat dihitung menggunakan persamaan
berikut.
AU  AB
Kadar glukosa = x 100 mg/ 100mL
AS  A B
Penetapan kadar etanol pada glikolisis sel ragi
dapat dilakukan dengan penambahan larutan
dikromat dalam suasana asam yang bertujuan untuk
mengoksidasi etanol menjadi asetat. Reaksi yang
terjadi pada penetapan kadar etanol adalah sebagai
berikut.
2Cr3+ + CH3COOH + 6H2O
2 digunakan sebagai kontrol negatif, dan tabung 3
dan 4 digunakan untuk melihat pengaruh inhibitor.
Tabung 1 dituangkan suspensi ragi roti sebanyak 14
mL dan larutan glukosa 2% sebanyak 2 mL, tabung
2 dituangkan 14 mL suspensi ragi roti yang telah
dididihkan dan larutan glukosa 2% sebanyak 2 mL.
Tabung 3 dituangkan suspensi ragi roti sebanyak
13,5 mL, larutan flourida 0,5 mL, dan 2 mL larutan
glukosa 2%, dan tabung 4 dituangkan suspensi ragi
roti sebanyak 13,5 mL, larutan arsenat 0,5 mL, dan 2
mL larutan glukosa 2%. Tabung yang telah diisikan
campuran dibolak-balikkan sebanyak 3 kali dan
didiamkan selama 15 menit dalam suhu kamar.
Campuran yang telah didiamkan selama 15 menit
kemudian diukur kadar glukosa dan kadar etanol
yang terkandung dalam campuran tersebut.
Penetapan Kadar Glukosa
a) Cara Folin-Wu
Pembuatan
Akuades sebanyak 7 mL dimasukkan ke dalam
labu Erlenmeyer dan ditambahkan 1 mL campuran
yang akan diuji kadar glukosa kemudian labu
Erlenmeyer digoyangkan secara perlahan. Larutan
Na-tungstat 10% ditambahkan secara perlahan ke
dalam labu dan digoyangkan secara perlahan
kemudian larutan H2SO4 2/3N sebanyak 1 mL
ditambahkan ke dalam labu secara tetes demi tetes
sambil labu digoyangkan dan labu didiamkan selama
10 menit. Campuran yang terbentuk disaring dan
filtrat yang dihasilkan ditampung.
Pengukuran Kadar Glukosa
Filtrat yang dihasilkan ditambahkan dengan
larutan Cu-alkalis, asam fosfomolibdat, dan larutan
standar glukosa 0,1 mg/mL. Prosedur kerja pengukuran kadar glukosa dapat dilihat pada tabel 1.

Tabel 1. Prosedur kerja kadar glukosa

Larutan 1 2 3 4 5
(mL) Blanko Standar 1 Uji 1 Uji 2 Uji 3
Filtrat bebas
- - 2,0 2,0 2,0
protein
Standar
- 2,0 - - -
glukosa
Akuades 2,0 - - - -
Pereaksi Cu-
2,0 2,0 2,0 2,0 2,0
alkalis
Campuran digoyangkan secara perlahan dan diletakkan pada penangas air selama
8 menit kemudian dinginkan menggunakan es selama 3 menit
Asam
2,0 2,0 2,0 2,0 2,0
fosfomolibdat
Campuran didiamkan selama 3 menit agar Cu2O dapat larut. larutan diencerkan
sampai 25 mL menggunakan akuades dan larutan diukur absorbansinya dengan
spektrofotometer UV-Vis dengan  = 420 nm.

Penetapan Kadar Etanol terbentuk suspensi. Setelah terbentuk suspensi

Cawan petri dirangkaikan dengan kaca arloji
dalam hal ini kaca arloji berada ditengah cawan petri
yang dimasukkan 3 mL larutan asam dikromat dan
tutup cawan petri dengan cepat. Cawan petri
kemudian dikeram pada suhu 90oC selama 20 menit.
larutan dikromat diambil dan dimasukkan ke dalam
labu 25 mL. Kaca arloji dibilas dengan akuades dan
hasil bilasan tersebut dimasukkan ke dalam tabung
dan diencerkan hingga 25 mL. Larutan asam
dikromat dimasukkan ke dalam labu kemudian
diencerkan untuk dijadikan sebagai larutan blanko.
larutan diuji absorbansinya dengan  = 450nm.
2. Glikolisis Sel Darah Merah
Tabung reaksi sebanyak 4 buah disiapkan dan
diberi tanda tabung 1, 2, 3, dan 4 dalam hal ini
tabung 1 digunakan sebagai kontrol positif, tabung 2
sebagai kontrol negatif, tabung 3 sebagai pengaruh
inhibitor flourida, dan tabung 4 sebagai pengaruh
inhibitor arsenat. Pada tabung 1 dimasukkan sel
darah merah 50% sebanyak 0,5 mL, dapar KRP pH
7,4 sebanyak 7 mL, tabung 2 dimasukkan sel darah
merah 50% sebanyak 0,5 mL, dapar KRP pH 7,4
sebanyak 7 mL yang telah dididihkan selama 5
menit, tabung 3 dimasukkan sel darah merah 50%
sebanyak 0,5 mL, dapar KRP pH 7,4 sebanyak 6,5
mL, dan tabung 4 dimasukkan sel darah merah 50%
sebanyak 0,5 mL dan dapar KRP pH 7,4 sebanyak
6,5 mL, setelah bercampur didiamkan hingga
tabung 3 ditambahkan sebanyak 0,5 mL larutan
flourida, tabung 4 ditambahkan larutan arsenat 0,5
mL, dan keempat tabung reaksi ditambahkan dengan
1 mL larutan glukosa 0,5%. Campuran yang
terbentuk dikeram dalam penangas air selama 30
menit dan dilakukan pengujian kadar glukosa pada
keempat tabung dengan menggunakan metode Folin-
Wu yang sebelumnya filtrat yang dihasilkan
dibebaskan dari protein.
Filtrat yang bebas dari protein dapat dibuat
dengan akuades yang dimasukkan ke dalam labu
Erlenmeyer dan ditambahkan suspensi sel darah
merah dan labu digoyangkan secara perlahan.
Campuran ditambahkan dengan larutan Na-tungstat
10% dan H2SO4 2/3N secara perlahan dengan labu
yang digoyangkan secara perlahan. Labu
Erlenmeyer ditutup dan didiamkan selama 10 menit
sehingga larutan berwarna cokelat. Larutan disaring
dan filtrat yang dihasilkan ditampung untuk
dilakukan pengujian kadar glukosa dengan cara
Folin-Wu.
HASIL DAN PEMBAHASAN
1 Glikolisis dalam Sel Ragi
Pada pengujian glikolisis ragi disiapkan 4 buah
tabung reaksi yang diisi dengan bahan yang berbeda-
beda yaitu pada tabung 1 yang diisi dengan suspensi
ragi dan larutan glukosa 2% diperoleh campuran
yang berwarna putih, tabung 2 diisikan dengan
suspensi ragi yang telah dididihkan dan larutan
glukosa 2% diperoleh campuran yang berwarna
putih, tabung 3 diisikan dengan suspensi ragi,
larutan flourida, dan larutan glukosa 2% diperoleh
campuran yang berwarna putih, dan tabung 4 yang
diisi dengan suspensi ragi, larutan arsenat, dan
larutan glukosa 2% diperoleh campuran yang
berwarna putih. Larutan flourida dan arsenat
berfungsi sebagai inhibitor yang mana penambahan
inhibitor ini digunakan untuk menunjukkan
pengaruh adanya inhibitor dalam proses glikolisis
sel ragi. Larutan glukosa 2% ditambahkan ke dalam
tabung dengan tujuan agar proses glikolisis sel ragi
dapat berjalan dengan sempurna dalam keadaan
anaerob sehingga menghasilkan etanol dan gas CO2,
selain itu penambahan larutan glukosa juga
bertujuan sebagai substrat yang akan diubah oleh
enzim heksokinase menjadi etanol dan gas CO2.
Reaksi yang terjadi dalam proses glikolisis dalam sel
ragi adalah sebagai berikut.

C6H12O6 2 C2H5OH + 2 CO2 + 21 Kal

Glukosa Etanol
Gambar 3. Reaksi glikolisis pada sel ragi

Keempat tabung tersebut kemudian dibolak-balik
dengan tujuan untuk meratakan atau
menghomogenkan larutan yang terdapat di dalam
tabung reaksi. Tabung reaksi tersebut didiamkan
selama 15 menit pada suhu kamar yang bertujuan
untuk mengoptimalkan reaksi glikolisis sel ragi.
Campuran yang terdapat pada keempat tabung reaksi
kemudian diukur kadar glukosa dan kadar etanol.
Pada pengukuran kadar glukosa dengan cara Folin-
Wu pada tabung 1, 2, 3, dan 4 setelah ditambahkan
Cu-alkalis terbentuk larutan yang berwarna biru.
Tabung reaksi kemudian dipanaskan dalam hal ini
masing-masing tabung menunjukkan hasil yang
berbeda yaitu pada tabung 1 diperoleh larutan yang
berwarna biru jernih (seperti gambar 4 (a)), pada
tabung 2 diperoleh larutan yang berwarna kuning
(seperti gambar 4(b)), pada tabung 3 diperoleh
campuran yang berwarna biru dengan endapan yang
berwarna kuning kecokelatan (seperti gambar 4 (c)),
dan pada tabung 4 diperoleh larutan yang berwarna
biru jernih (seperti gambar 4 (d)). Pada keempat
tabung reaksi tidak menunjukkan perubahan hasil
setelah ditambahkan dengan asam fosfomolibdat.

(a) (b) (c) (d)

Gambar 4. (a) Pada tabung 1 (kontrol positif) larutan berwarna biru muda; (b) Pada tabung 2 (kontrol
negatif) terbentuk larutan berwarna kuning; (c) Pada tabung 3 (pengaruh inhibitor) terbentuk larutan
berwarna biru dan sedikit endapan berwarna merah; (d) Pada tabung 4 (pengaruh inhibitor) terbentuk
larutan berwarna biru

Larutan berwarna yang dihasilkan dari masing-
masing tabung merepresentasikan banyaknya ion
fosfomolibdat yang tereduksi oleh ion kupro. Ion
kupro dihasilkan dari reduksi ion kupri yang terjadi
akibat adanya glukosa. Semakin biru larutan yang
dihasilkan menujukkan semakin banyak adanya
glukosa yang mereduksi ion kupri menjadi kupro
kemudian mereduksi ion fosfomolibdat sehingga
menghasilkan warna biru. Penentuan kadar glukosa
pada keempat tabung ditunjukkan dengan tingginya
nilai absorbansi hasil pengukuran menggunakan
spektrofotometer. Nilai absorbansi dari masing-
masing tabung dapat dilihat pada tabel 2.
 Tabel 2. Hasil pengukuran absorbansi kadar glukosa secara Folin-Wu
Tabung Bertindak sebagai Absorbansi
1 Kontrol positif 0,58
2 Kontrol negatif 0,70
3 Pengaruh inhibitor flourida 0,07
4 Pengaruh inhibitor arsenat 0,10
5 Blanko 0,03

Berdasarkan hasil pengukuran absorbansi diperoleh kadar glukosa dari hasil glikolisis sel ragi
menggunakan spektrofotometer UV-Vis tersebut dengan cara sebagai berikut.

AU  AB
Kadar glukosa = x 100 mg/ 100mL
AS  A B
Kadar glukosa tabung 1 = 0,58 - 0,03 x 100 mg/ 100mL = 82,09 mg/ 100mL.
0,70 - 0,03
Kadar glukosa tabung 2 = 0,70  0,03 x 100 mg/ 100mL = 121,81 mg/ 100mL.
0,58  0,03
Kadar glukosa tabung 3 = 0,07 - 0,03 x 100 mg/ 100mL = 5,9 mg/ 100mL.
0,70  0,03
Kadar glukosa tabung 4 = 0,10  0,03 x 100 mg/ 100mL = 10,45 mg/ 100mL.
0,70  0,03

Larutan pada tabung 1, 2, 3, 4 dan blanko Kadar glukosa tabung 2 = 121,81

merupakan hasil pengenceran sampel sebanyak dua
kali, dimana 25 mL sampel diencerkan menjadi 50
mL. Sehingga kadar glukosa yang sebenarnya atau
sebelum diencerkan adalah :
Kadar glukosa tabung 1 = 82,09
mg/100 mL x 2 = 164,18 mg/dL
Hasil penentuan kadar glukosa di atas
menunjukkan bahwa penambahan larutan flourida
dan larutan arsenat menurunkan laju reaksi sel ragi
glukosa menjadi etanol. Hal ini ditunjukkan dengan
banyaknya kadar glukosa pada tabung 2 dan tabung
3 dibandingkan dengan larutan positif. Flourida dan
arsenat bertindak sebagai inhibitor yang bereaksi
seperti substrat yang menyerang sisi aktif enzim
yang berperan dalam reaksi sel ragi.
Pada glikolisis sel ragi ini dilakukan penentuan
kadar etanol yang dihasilkan dalam proses glikolisis
sel ragi. Pada penentuan kadar etanol pada glikolisis
sel ragi ditambahkan dengan larutan asam dikromat
mg/ 100 mL x 2 = 243,62 mg/dL
Kadar glukosa tabung 3 = 5,9
mg/ 100 mL x 2 = 11,8 mg/dL
Kadar glukosa tabung 4 = 10,45
mg/100 mL x 2 = 20,90 mg/dL.
bertujuan untuk mengoksidasi etanol menjadi asetat
dan ditambahkan Na2CO3 dilakukan untuk
memberikan suasana asam agar warna dikromat
berkurang. Hasil yang diperoleh pada masing-
masing labu yaitu labu 1 dan 2 diperoleh larutan
yang berwarna kuning, sedangkan labu 3 dan 4
diperoleh hasil berupa larutan yang berwarna kuning
kehijauan.
Masing-masing larutan yang terdapat di dalam
labu diukur absorbansinya untuk menentukan kadar
etanol yang terdapat di dalam larutan. Hasil
absorbansi tersebut ditunjukkan pada tabel 3.

Tabel 3. Hasil pengukuran absorbansi kadar etanol dalam glikolisis sel ragi
Labu Bertindak sebagai Absorbansi
1 Kontrol positif 0,08
2 Kontrol negatif 0,10
3 Pengaruh inhibitor flourida 0,12
4 Pengaruh inhibitor arsenat 0,09
 5 Blanko 0,1

Berdasarkan hasil pengukuran absorbansi larutan

hasil glikolisis sel ragi dapat ditentukan kadar etanol
dari hasil glikolisis sel ragi adalah sebagai berikut.

AB  AU 0,5 100 100

Kadar etanol = x 0,5 x x x g/ dL
AS  A U 100 0,5 0,5
Kadar etanol labu 1 = 0,1  0,08 x 0,5 x 0,5 x 100 x 100 g/ dL = 200 g/ dL.
0,09  0,08 100 0,5 0,5
Kadar etanol labu 2 = 0,1  0,07 x 0,5 x 0,5 x 100 x 100 g/ dL = 150 g/ dL.
0,09  0,07 100 0,5 0,5
0,1  0,12 0,5 100 100
Kadar etanol labu 3 = x 0,5 x x x g/ dL = 66,67 g/ dL.
0,09 - 0,12 100 0,5 0,5
Kadar etanol labu 4 = 0,1 - 0,09 x 0,5 x 0,5 x 100 x 100 g/ dL = 100 g/ dL.
0,1 - 0,09 100 0,5 0,5

Dari perhitungan kadar etanol diatas dapat 2 Glikolisis dalam Sel Darah Merah
dilihat bahwa penambahan inhibitor mempengaruhi
Pada percobaan glikolisis sel darah merah
jumlah etanol yang dihasilkan. Hal ini dikarenakan
setelah sel darah merah ditambahkan dengan larutan
inhibitor dapat menghambat pembentukan etanol
dapar pH 7,4 diperoleh hasil yaitu tabung 1
dengan cara bereaksi dengan sisi aktif dari enzim
terbentuk larutan berwarna cokelat, tabung 2
yang terlibat pada reaksi glikolisis sel ragi. Ini
terbentuk larutan yang berwarna cokelat, tabung 3
sejalan dengan prinsip kerja inhibitor pada
dan 4 terbentuk larutan yang berwarna cokelat.
penentuan kadar glukosa dengan Folin-Wu.

Glukosa ditambahkan pada masing-masing Filtrat selanjutnya diuji kadar glukosanya

tabung bertujuan untuk menyempurnakan proses
glikolisis yang berlangsung pada sel darah merah.
Keempat tabung kemudian dipanaskan hingga
keempat tabung terdapat suspensi. Suspensi sel
darah merah yang terbentuk dalam masing-masing
tabung ditambahkan dengan akuades dan Na-
tungstat sehingga terbentuk larutan kuning jernih
dan setelah penambahan H2SO4 terbentuk campuran
yang berwarna kuning dan keruh. Campuran tersebut
disaring diperoleh filtrat berupa larutan yang tidak
berwarna yang kemudian diuji kadar glukosa
menggunakan cara Folin-Wu.
dengan Folin-Wu dihasilkan filtrat yang berwarna
biru yang menunjukkan jumlah Cu yang direduksi
oleh glukosa. Selain itu, warna biru yang dibentuk
akibat adanya penambahan asam fosfomolibdat yang
menunjukkan bahwa di dalam larutan telah
terbentuk asam laktat. Pengukuran kadar glukosa
dapat dilakukan dengan mengukur absorbansi filtrat
yang terdapat dalam masing-masing tabung dan
hasil absorbansi kadar glukosa pada glikolisis sel
darah merah dapat ditunjukkan pada tabel 4.

Tabel 4. Hasil absorbansi kadar glukosa pada glikolisis sel darah merah
Labu Bertindak sebagai Absorbansi
1 Kontrol positif 0,60
2 Kontrol negatif 0,58
3 Pengaruh inhibitor flourida 0,5
4 Pengaruh inhibitor arsenat 0,43
5 Blanko 0,35
 Dari hasil absorbansi di atas menunjukkan
jumlah glukosa yang tersisa di dalam filtrat sangat
tinggi sehingga jumlah glukosa yang tersisa paling
banyak yaitu pada tabung 4, 1, 3, dan 2. Tabung 2
jumlah glukosa yang tersisa sedikit dikarenakan
:
pada tabung 2 glukosa telah diubah menjadi laktat
sehingga memiliki nilai absorbansi yang lebih
rendah. Kadar glukosa yang diperoleh dari hasil
glikolisis sel darah merah dengan cara Folin-Wu
adalah sebagai berikut.

AU  AB 100
Kadar glukosa = x 0,2 x mg/ 100mL
AS  A B 0,2
Kadar glukosa tabung 1 = 0,60  0,35 x 0,2 x 100 mg/ 100mL = 83,33 mg/ 100mL.
0,65 - 0,35 0,2
Kadar glukosa tabung 2 = 0,58  0,35 x 0,2 x 100 mg/ 100mL = 76,67 mg/ 100mL.
0,65  0,35 0,2
0,43  0,35 100
Kadar glukosa tabung 3 = x 0,2 x mg/ 100mL = 26,67 mg/ 100mL.
0,65  0,35 0,2
Kadar glukosa tabung 4 = 0,5  0,35 x 0,2 x 100 mg/ 100mL = 50 mg/ 100mL.
0,65  0,35 0,2

SIMPULAN UCAPAN TERIMA KASIH

Ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada
Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan
Dr. I Nyoman Tika, M.Si., sebagai dosen pengampu
di atas dapat disimpulkan bahwa kadar glukosa pada
mata kuliah Praktikum Biokimia, Made Wirahadi
glikolisis sel ragi secara Folin-Wu pada tabung
Kusuma, Nengah Wiyadnya dan Ayu Amardini
kontrol positif sebesar 164,18 mg/100mL, pada
selaku asisten dosen, dan I Dewa Subamia selaku
tabung kontrol negatif sebesar 243,62 mg/ 100mL,
laboran di Jurusan Pendidikan Kimia atas masukan
pada tabung pengaruh inhibitor flourida sebesar 11,8
dan sarannya sehingga percobaan ini dapat
mg/100mL, dan pengaruh inhibitor arsenat sebesar
dilaksanakan dengan baik.
20,90 mg/100mL. Kadar etanol dari hasil glikolisis
sel ragi yaitu pada kontrol positif sebesar 200 g/dL,
kontrol negatif sebesar 150 g/dL, pengaruh flourida DAFTAR PUSTAKA
sebesar 66,67 g/dL, dan pengaruh arsenat sebesar
Siregar, Amelia. 2010 (a). Sistem Metabolisme Sel.
100 g/dL. Kadar glukosa yang dihasilkan dari
Diakses dari situs http://www.chem-is-
glikolisis sel darah merah dengan cara Folin-Wu
try.org/materi_kimia/biologi-
yaitu pada kontrol positif sebesar 83,33 mg/100mL,
pertanian/metabolisme-sel/sistem-
kontrol negatif sebesar 76,67 mg/100mL, pengaruh
metabolisme-sel/ pada tanggal 17 Mei 2015.
flourida sebesar 26,67 mg/ 100mL, dan pengaruh
Siregar, Amelia. 2010 (b). Katabolisme (Respirasi
arsenat sebesar 50,69 mg/ 100mL. Pengaruh
Sel). Diakses dari situs http://www.chem-is-
inhibitor pada glikolisis dalam sel ragi dan sel darah
try.org/materi_kimia/biologi-
merah adalah menghambat terjadinya reaksi
pertanian/metabolisme-sel/katabolisme-
enzimatis yang menyebabkan sedikit produk yang
respirasi/ pada tanggal 17 Mei 2015.
dihasilkan.
Soewoto, dkk. 2013. Biokimia Eksperimen
Laboratorium. Jakarta: Widya Medika.