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DETERMINACIÓN DE
LA BIOMASA
MICROBIANA
Cantidad
masa de
células personas
seres vivos
su determinación nos
lleva a la comprensión de
la eficiencia del mismo.
DETERMINACIÓN DE LA BIOMASA MICROBIANA 3
I. INTRODUCCIÓN
Consumo
de
nutrientes
Es una
variable
clave para Calculo de
establecer: balance de
Tasas de masas de
producción cualquier
proceso
biológico.
MÉTODO DIRECTO
MÉTODO INDIRECTO
Observación de los
organismos
DESVENTAJAS
Se puede determinar M’os activos y no, material inerte,
materia orgánica y polímeros extracelulares.
El diluyente queda
atrapado en el
espacio intercelular
y contribuye al peso
total de la masa.
Actividad Consumo de un
nutriente
metabólica característico
Determinación
nitrógeno total
El grado de dispersión de
la luz (o turbidez de la
solución) es proporcional
al número de partículas
que se encuentran a su
paso, lo cual depende de
la cantidad de analito
presente en la muestra.
1% de
Cl2Ba
Precipitado
de BaSO4
Cantidades
crecientes
de SO4H2
al 1%
Su utilidad es la de
poder elaborar
suspensiones
bacterianas,
Ajustadas a un
patrón y valorar su
concentración
D.O. = A = -logT/100
Mide la densidad óptica (D.O.), es decir la absorbancia.
T= transmitancia
• Peso Seco:
Tomar muestras de 5 mL de la solución inicial y
colocar en 3 tubos de ensayos previamente pesados.
Luego llevar los tubos a la centrifuga y hacerlo girar
a 4 000 rpm, por un tiempo de 10 minutos.
Luego pesar cada tubo de ensayo en la balanza
analítica y anotar los pesos.
Posteriormente, llevar los tubos a estufa, a una Tº de
105 ºC por un tiempo promedio de 3 horas.
Pasado el tiempo anotar, los pesos y luego obtener
un promedio. (Anexo 1).
DETERMINACIÓN DE LA BIOMASA MICROBIANA 26
III. MATERIALES Y MÉTODOS
• Peso Húmedo:
Tomar muestras de 5 mL de la solución inicial y
colocar en 3 tubos de ensayos previamente
pesados.
Llevar los tubos a la centrifuga, donde se hacen
girar a 4 000 r.p.m., por un tiempo de 10
minutos.
Luego pesar cada tubo de ensayo en la balanza
analítica, anotamos los pesos y luego promediar
(Anexo 1).
DETERMINACIÓN DE LA BIOMASA MICROBIANA 28
III. MATERIALES Y MÉTODOS
• Nefelométria de McFarland:
Agregar los reactivos a los tubos rotulados de
manera apropiada (1 a 10) en las cantidades que
se indican a continuación:
BaCl2 1%(ml) 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0
H2SO4 1%(ml) 9.9 9.8 9.7 9.6 9.5 9.4 9.3 9.2 9.1 9
Densidad aprox. De
3 6 9 12 15 18 21 24 27 30
células (x108/ml
• Espectrofotometría:
En el espectrofotómetro establecer la
absorbancia a 546 nm de longitud de onda, de
cada uno de los tubos de la escala de
MacFarland.
Con estos datos, teniendo en cuenta las
concentraciones celulares correspondientes a
cada tubo y mediante el uso de un papel
milimetrado semilogarítmico establezca una
curva patrón de número de bacterias con relación
a la absorbancia.
Fuente: propia
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Escuela De Bioanalisis-Carrera De Microbiología