Índice

Introdução.............................................................................................................2

Procedimento experimental..................................................................................4

Apresentação dos Resultados..............................................................................5

Discussão e conclusão.........................................................................................7

Bibliografia............................................................................................................9

Anexos................................................................................................................10
 Introdução

Este problema surgiu no âmbito do estudo do DNA na disciplina de

Biologia e Geologia, tendo como objectivos a extracção, observação,
identificação e caracterização de filamentos de DNA e proteínas constituintes
dos filamentos presentes nas células de um kiwi e de uma banana, bem como
analisar a quebra das ligações na molécula de DNA, separar o DNA das
proteínas e conhecer técnicas de extracção de DNA das células.
Toda a informação necessária para criar um organismo encontra-se no
DNA. Esta molécula é usada durante o período de vida de um organismo para
fornecer instruções para milhões de processos celulares que ocorrem
constantemente.
O DNA (ácido desoxirribonucleico) é o suporte físico da informação
genética, que é composto por nucleótidos, esta molécula existente em todos os
seres vivos codifica a informação necessária à constituição dos organismos.
Os ácidos nucleicos são polímeros de nucleótidos, sendo que cada
nucleótido constituído por uma base azotada, uma pentose (glícido com 5
carbonos) e um grupo fosfato (ácido fosfórico).
Existem cinco tipos de bases azotadas: adenina (A) e guanina (G)
(bases púricas – possuem dois anéis); citosina (C), timina (T) e uracilo (U)
(bases pirimídicas – possuem um anel). A timina só existe no DNA e o uracilo
só existe no DNA, as restantes são comuns aos dois compostos.
No DNA, as bases ligam-se entre si por complementaridade: à citosina
de um nucleótido de uma cadeia liga-se uma guanina do nucleótido de outra
cadeia (C-G); à adenina liga-se a timina (A-T).
Relativamente às pentoses, e tal como os nomes indicam o DNA contém
desoxirribose e o RNA contém ribose.
O quadro seguinte assinala as diferenças de estrutura e composição do
DNA e do RNA.

DNA RNA
Açúcar Desoxirribose Ribose

Base Azotadas Adenina, guanina citosina e timina Adenina, guanina, citosina e uracilo

Cadeias Cadeia Dupla Cadeia Simples

Hélice Sim Não

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 A molécula de DNA é composta por duas cadeias polinucleotídicas, que
se dispõem em sentidos inversos, designando-se, por isso, antiparalelas.
Os nucleótidos que formam uma cadeia polinucleotídica ligam-se entre si
através de ligações covalentes (do tipo fosfodiéster), que se estabelecem entre
o grupo fosfato e os carbonos 3’ e 5’ das pentoses. À extremidade 5’ de uma
cadeia irá corresponder a extremidade 3’ da outra cadeia.
A ligação entre as duas cadeias faz-se por pontos de hidrogénio que se
estabelecem entre as bases azotadas verificando-se complementaridade, esta
permitiria que a molécula de DNA se autoduplicasse de forma
semiconservativa: cada uma das cadeias serviria de molde para uma nova
cadeia e, consequentemente, cada uma das novas moléculas de DNA, seria
formada por uma cadeia antiga e uma cadeia nova – Replicação do DNA.

Para se conseguirem visualizar melhor os filamentos de DNA utilizou-se:

 Detergente – as células e o seu núcleo têm a sua volta uma
membrana (celular e nuclear), formadas por gorduras. O
detergente dissolve essas gorduras, desfazendo a membrana e
libertando o DNA.
 Sal – quando as membranas se desfazem, o conteúdo das
células, incluindo o DNA e as proteínas, ficam na solução. O sal
separa as proteínas do DNA e contribui com iões positivos que
neutralizam a carga negativa.
 Etanol (álcool) frio – o DNA não se mistura com o álcool, por isso
forma uma “nuvem”, diz-se assim que precipita o DNA.

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 Procedimento Experimental

Material:

-Kiwi (em alternativa, banana, maçã ou pêra);

-Caixa de Petri;
-Garfo e bisturi;
-Proveta de 100 ml;
-Gaze;
-Gobelé;
-Água destilada;
-Etanol frio [a 5ºC];
-Detergente da louça;
-Cloreto de sódio;
-Vareta de vidro.

Procedimento:

1. Descascar um kiwi, cortá-lo em pequenos cubos e esmagá-lo (juntando

ocasionalmente um pouco de água destilada) numa caixa de Petri, e,
logo depois, colocar num gobelé;
2. Adicionar mais um pouco de H2O destilada e cloreto de sódio;
3. Mexer a solução com a vareta;
4. Filtrar a solução, através da gaze, no topo da proveta, de forma a obter
5 ml de líquido para a mesma;
5. Depois de o líquido estar na proveta, adiciona-se o detergente da louça
e em seguida juntar, lentamente, 5 ml de etanol. Logo depois, mexer a
solução com a vareta;
6. Deixar a solução repousar até que uma camada semi-gelatinosa
ascenda.

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 Apresentação dos Resultados

Filamentos de DNA

Formação de duas camadas distintas

Figura 1 – Filamentos de DNA, de células

vegetais do kiwi.

Filamentos de DNA

Formação de duas camadas distintas

Figura 2 – Filamentos de DNA, de células vegetais do kiwi.

Apresentação dos Resultados

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 Filamentos de DNA

Formação de duas camadas distintas

Figura 1 – Filamentos de DNA, de células

vegetais da banana.

Filamentos de DNA

Formação de duas camadas distintas

Figura 2 – Filamentos de DNA, de células vegetais da banana.

Discussão e Conclusão

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 Este problema surgiu no âmbito do estudo do DNA na disciplina de
Biologia e Geologia, tendo como objectivos a extracção, observação,
identificação e caracterização de filamentos de DNA e proteínas constituintes
dos filamentos presentes nas células de um kiwi e de uma banana, bem como
analisar a quebra das ligações na molécula de DNA, separar o DNA das
proteínas e conhecer técnicas de extracção de DNA das células. Llllllllllllllllllllllllll
Com a elaboração desta experiência, conclui-se que o DNA é uma molécula
formada por duas cadeias polinucleotídicas que formam uma dupla hélice e
que é constituído por unidades básicas denominadas nucleótidos. O DNA
contém todo o material genético. lllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllll
Os objectivos foram cumpridos, sem algum tipo de problemas, pois
foi possível visualizar, na proveta, os filamentos de DNA ( moléculas de DNA
às quais se encontram associadas proteínas denominadas de histonas) o que
levou a melhor compreensão da estrutura e da constituição do mesmo.
Para a realização desta actividade experimental foi necessário o uso de três
reagentes, sendo estes o cloreto de sódio, o detergente de louça e o etanol
96% a 5ºC. llllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllll
Durante a experiência, a adição do cloreto de sódio à solução deve-se
ao facto de este composto dar iões positivos ao DNA, que neutralizaram a sua
carga negativa, proporcionando assim um ambiente favorável para o decorrer
da experiência. Quanto ao detergente, este, devido à sua capacidade de
emulsionar os lípidos, ajudou a dissolver a bicamada fosfolipídica que compõe
a membrana plasmática, permitindo a libertação do DNA. O último reagente, o
etanol, levará o DNA a ascender, deixando em baixo a solução inicial. Este
fenómeno ocorre devido ao DNA não se dissolver no álcool e por ser o
constituinte da solução que possui menor densidade, esta situação possibilita a
sua visualização (e recolha, caso desejada). Depois da junção do etanol, foi
possível observar o início da formação de uma espécie de goma de cor branca,
porém, ainda não muito visível. Assim, foi necessário deixar o líquido em
repouso durante alguns minutos para que a visualização das moléculas de
DNA fosse mais eficaz. lllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllll
A actividade laboratorial correu satisfatoriamente, visto que todos os
objectivos anteriormente referidos foram concretizados com sucess, tais como,
descobrir que DNA possui ligações, através de pontes de hidrogénio, que são

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consideradas fracas energeticamente, logo são quebradas com facilidade. O
DNA mostrou ser pouco denso, pois moveu-se na direcção do elemento menos
denso, o etanol.
A partir de agora o grupo que realizou esta actividade experimental será
capaz de identificar e caracterizar os filamentos de DNA. As críticas que o
grupo apresenta são de cariz positivo, sendo este um trabalho completo,
rigoroso, bem estrutrado e organizado em termos de grupo.

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 Bibliografia

Matias, Osório; Martins, Pedro. Biologia 10/11

Porto, Areal Editores, 2007

Matias, Osório; Martins, Pedro. Biologia 11

Porto, Areal Editores, 2009

http://relatorios-bg-fq.blogspot.com/search/label/Biologia%2011

http://www.notapositiva.com/pt/trbestbs/biologia/11extrmoladn.htm

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Anexos

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11
12