“AÑO DEL DIALOGO Y LA CONCERTACION NACIONAL”

INSTITUTO DE EDUCACION SUPERIOR

TECNOLOGICO PÚBLICO

TEMA

TECNICAS MICOLOGICAS

UNIDAD DIDACTICA : MUESTRAS BIOLOGICAS

DOCENTE : Gunder Laffosse Grijalva

ESPECIALIDAD : Laboratorio Clínico

ALUMNO(A) :Vela Rimachi Pilar

CICLO : 2018– I

TINGO MARIA 2018

TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

DEDICATORIA

El presente trabajo realizado durante el fin de semana agradezco

primordialmente a DIOS por permitir y darme los beneficios y las posibilidades
de poder culminar el trabajo del tema y de esta manera también agradezco a mis
padres por apoyarme y saber comprender en las necesidades del instituto si no
fuera esto no hubiera obtenido mis respuestas ante el tema.

2
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

INTRODUCCIÓN

EL mundo de los hongos ha estado en contactos con el hombre desde su origen

mismo, hasta el siglo XVIII, los únicos hongos conocidos fueron los
macromicetros o setas, pero gracias a la creación del microscopio por
Leeuwenhoek, se nos ha permitido asomarnos al mundo no perceptible por el
ojo humano, y por ende hemos encontrado el vasto grupo de los hongos
microscópicos, con los que el hombre han obtenido múltiples beneficios, como
el desarrollo de variados antibióticos, pero también han descubierto los
microorganismos patógenos para él, animales, plantas e insectos.

Durante la última década se ha observado un incremento de las enfermedades

micóticas, ello ha significado la aparición de nuevas formas clínicas de micosis
así como localizaciones o presentaciones no habituales, además de la presencia
de nuevas especies fúngicas consideradas antiguamente como no patógenas
pero que excepcionalmente producían enfermedad en individuos
inmunodeprimidos.

Diversos factores han permitido la aparición de infecciones emergentes: cambios

poblacionales y sus patrones de costumbres, avances tecnológicos y desarrollo
económico de algunos países, que ha permitido la generalización de
tratamientos médicos quirúrgicos invasivos, con supervivencia de enfermos que
difícilmente superaban procesos patológicos y que favorecen el desarrollo de
micosis sistémicas; incremento de viajes inter y transcontinentales, nuevos
mecanismos de adaptación de algunos microorganismos que conlleva a la
aparición de resistencia a los antifúngicos e infección por VIH.

Actualmente se reconocen entre 300 y 400 especies de hongos causantes de

micosis sistémicas, las cuales constituyen un pequeño porcentaje del total de
más de 100 000 especies catalogadas. Debido a que los patógenos primarios al
infectar a individuos inmunosuprimidos, se comportan con mayor agresividad,
originando infecciones sistémicas, diseminadas, de evolución aguda y mal
pronóstico.

3
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

TÉCNICAS MICOLÓGICAS

DEFINICION:

La micosis planteada, así como el estudio micológico y la selección de la muestra

a examinar, estará guiada por la forma de presentación clínica.

Actualmente no debe olvidarse que

hongos que no se consideraban
patógenos o se encontraban limitado a
un solo órgano pueden causar
enfermedad diseminada en el
inmunodeprimnido. En este contexto se
debe tener en cuenta que el aislamiento
de algunos hongos en piel, mucosas u
otros sectores, puede no significar una
afección localizada, sino que por el
contrario ser la manifestación de una
micosis sistémica diseminada.

La eficacia con la que se realice un diagnóstico micológico correcto está

vinculada al grado de perfección con el que se conjuguen algunas de las
siguientes premisas.

El primer lugar, es el médico clínico (médico general, internista, infectólogo,

hematólogo, dermatólogo entre otros especialistas) quien sospecha la presencia
de una micosis, por lo cual debe conocer los síntomas y signos de la misma,
para solicitar al laboratorio la realización de los estudios micológicos pertinentes.

La obtención de una muestra biológica para estudio micológico depende fundamentalmente

de la sintomatología o lesiones presentadas por el paciente.

RECOMENDACIONES

 Toda muestra debe considerarse como potencialmente infecciosa.

 Utilice siempre guantes cuando extraiga y maneje muestras biológicas y

lávese bien las manos antes y después de su recogida.

 Para prevenir pinchazos accidentales, evite reencapuchar las agujas.

 Conservación y transporte de la muestra.

 Si el médico no establece un diagnóstico presuntivo de una micosis, o no

logra obtener muestras adecuadas en cantidad y calidad, o remite las
muestras en contenedores inapropiados, o con el agregado de medios de
transporte o sustancias químicas no específicas para un estudio micológico,

4
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

o envía la muestra horas/días después de su obtención; el resultado de ello

será la pérdida de la muestra o un falso negativo.

 Por otro lado el rol del micólogo va a ser decisivo en el diagnóstico, dado que
si éste deja de realizar la observación directa de las muestras (con fresco y
coloraciones), o no selecciona para el cultivo los medios apropiados para el
aislamiento de ciertas especies de hongos, sea por omisión o por no haber
sido informado de la impresión clínica del médico solicitante, la posibilidad
de establecer un diagnóstico final correcto puede perderse o quedar
gravemente comprometida.

MATERIALES

Material de vidrio

 Placas de PETRI
 Laminas portaobjetos
 Tubos de ensayo de 15 x 150
 Matraces
 Pipetas

Material de ansas micológicas

 Gradillas de metal
 Mechero

Equipos de laboratorio

 Autoclave
 Horno
 Estufa o incubadora
 Microscopio

Otros materiales

 Cajas de plástico.
 Papel filtro
 Vasos de precipitación
 Baguetas
 Frascos de vidrio de superficie plana

MUESTRAS:

Los estudios a realizarse pueden proceder de las siguientes muestras:

5
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

 LA PIEL

Las infecciones por hongos de la piel se denominan candidiasis cutánea y

son causadas por levaduras como hongos llamadas cándida. Esta produce
anchas de color rojo, descamación y picazón en la piel. Las infecciones por
levaduras no son contagiosas.

Las infecciones por hongos pueden afectar

casi cualquier superficie de la piel en el
cuerpo, pero son más probables de ocurrir
en áreas cálidas, húmedas y con pliegues
como las axilas y la ingle.

La infección por cándida es especialmente

común entre las personas obesas o que
tienen diabetes. Las personas que toman
antibióticos también están en riesgo.

Cándida puede provocar dermatitis del pañal en los bebés y puede causar
infecciones en la uña. La candidosis bucal es una forma de infección por
cándida que se encuentra en la boca. Cándida también causa infecciones
vaginales.

Síntomas

Los signos de infección por hongos en los pliegues de la piel incluyen:

 Erupción.
 Parches que supuran fluido transparente.
 Picazón o ardor.

Los síntomas de la candidiasis (infección por hongos en la boca) son:

 Manchas blancas en la lengua y el interior de las mejillas.

 Dolor.

Los signos de infección vaginal por hongos son:

 Secreción blanca o amarilla de la vagina

 Comezón
 Enrojecimiento en la zona externa de la vagina
 Ardor

Tratamiento

6
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

El tratamiento de la infección por levaduras depende del tipo específico de

infección. Las infecciones cutáneas por levaduras son fáciles de tratar con
ungüentos medicinales.

Los supositorios medicados pueden ser utilizados para tratar infecciones de

hongos en la vagina.

La candidiasis puede tratarse con pastillas medicinales que se disuelven en

la boca.

Las infecciones graves o las que se presentan en una persona con un

sistema inmunológico comprometido pueden ser tratadas con medicamentos
antimicóticos orales.

La tiña.- también llamada tinea corporis, es

una infección por hongos de la piel. Puede
aparecer en cualquier parte del cuerpo y se
ve como un círculo rojo y plano, a veces
acompañado por piel escamosa.

La tiña se puede contagiar por contacto

directo con personas o animales infectados.
También se puede propagar en la ropa o los
muebles.

Síntomas

La tiña se presenta como manchas rojas, circulares y planas, acompañadas

a veces por la piel escamosa. Es posible tener tiña sin tener el anillo rojo de
la erupción.

Tratamiento

Generalmente el tratamiento consiste en medicamentos antimicóticos que

se aplican sobre la piel.

Lesión cutánea escamosa y seca.- Las escamas deben recogerse raspando el

borde activo con un bisturí, ya que dicho borde es el que más probablemente
contenga elementos fúngicos viables. Cuando existen lesiones satélites
(candidiasis), el raspado se realiza de dichas lesiones por ser las más
jóvenes. El material obtenido se recoge en un portaobjetos (previamente
flameados) o placa de Petri estéril, con el fin de mantenerlo seco y libre de
contaminación. Los dermatofitos en los raspados de la piel pueden
permanecer viables durante meses.

Espacios interdigitales.- En las micosis intertriginosas de manos y pies, deben

rasparse cuidadosamente con un bisturí o cucharilla de Vidal ambos lados y base de
cada espacio interdigital. Cuando existen fisuras, deben rasparse solo los lados.

7
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

Además, debe tomarse siempre una muestra del cuarto espacio interdigital, ya que
puede encontrase el dermatofito a pesar de no encontrar lesión alguna.

 Pie de atleta.- El pie de atleta, también llamado tinea pedis, es una infección
micótica del pie. Esto causa descamación, enrojecimiento, picazón, ardor
y algunas veces ampollas y llagas.

El pie de atleta es una infección muy

común. El hongo crece mejor en un ambiente
cálido y húmedo, y es más común en el
verano y en climas cálidos. Se presenta con
mayor frecuencia en personas que usan
zapatos apretados y que utilizan baños y
piscinas comunitarias.

Causas

El pie de atleta es causado por un hongo microscópico que vive en los

tejidos muertos del cabello, las uñas y las capas externas de la piel. Hay
por lo menos cuatro tipos de hongos que pueden causar el pie de atleta. El
más común de estos hongos es Trichophyton rubrum.

Síntomas

Los síntomas del pie de atleta puede variar de persona a persona, sin
embargo, los más comunes incluyen:

 Agrietamiento y descamación de los pies.

 Enrojecimiento, ampollas y ruptura de la piel.
 Picazón, ardor o ambos.

Tratamiento
El pie de atleta se trata con medicamento antimicótico tópico en la mayoría
de los casos. Los casos graves pueden requerir medicamentos
orales. Los pies deben mantenerse limpios y secos, ya que el hongo crece
en ambientes húmedos.

 PELOS

Dependiendo del tipo de lesión observada, los pelos deben recogerse

mediante diversas técnicas: en la Piedra blanca o la Piedra negra, ambas
confinadas a la vaina del pelo, se debe cortar la porción extra folicular de los
pelos enfermos; en las tiñas del cuero cabelludo o de la barba, es importante
recoger los pelos parasitados arrancándolos con la raíz intacta con una pinza
estéril.
En muchas ocasiones, los pelos parasitados se reconocen porque tienen
una fluorescencia positiva con luz de Wood, están deslustrados, rotos,
friables o se desprenden fácilmente con el raspado.

8
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

Las tiñas microspóricas, presentan una placa escamosa blanquecina con

escasa o nula inflamación, que puede alcanzar varios centímetros de
diámetro, y en la cual se observan pelos ro tos a escasos mm de la
superficie cutánea, estos pelos parasitados son friables y se desprenden con
facilidad al raspar con el bisturí.

Las tiñas tricofíticas, antropófilas, forman

pequeñas placas escamosas con pelos rotos
al nivel de la superficie dando un aspecto de
“puntos negros”, casi siempre en ausencia de
inflamación. Estos “puntos negros” son los
que deben extraerse con la punta del bisturí
o mediante pinzas. Sin embargo, cuando la
infección se debe a especies zoófilas, se
observan placas escamosas de tamaño variable, que se inflaman y se elevan
sobre la superficie cutánea, apareciendo numerosas pústulas foliculares que
originan un Kerión. Los pelos situados en la placa se extraen con facilidad
sin causar dolor al paciente.

La tiña favosa, presenta costras amarillentas, cóncavas y centradas por un

pelo, denominadas escútulas o cazoletas fávicas. Están formadas por un
conglomerado de hifas que originan una foliculitis, que con el tiempo,
alopecia cicatricial por destrucción de la matriz. En estas lesiones se debe
tomar muestra del pus y las cazoletas.

 UÑAS:

En las onicomicosis, la toma de muestras varía en función del tipo de lesión

clínica: Onicomicosis distal y lateral subungueal: la lesión comienza en el
epitelio del lecho ungueal del borde libre de la uña y va extendiéndose
hacia la matriz. La sustancia de la uña se sustituye por un material
amarillento y friable, mientras que la lámina exterior puede estar infectada o
destruida. Los tres signos clínicos mayores interdependientes son:
hiperqueratosis subungueal, onicolisis y paroniquia. La muestra debe
tomarse raspando con un bisturí el lecho distal subungueal.

Onicomicosis proximal subungueal: comienza en la

porción proximal de la uña. En estos casos se debe recoger el material de la

9
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

porción más profunda de la tabla ungueal más cercana a la cutícula,

raspando con el bisturí en la profundidad del surco periungueal.

La onicomicosis blanca superficial: se

manifiesta como una mancha blanca lechosa
en un punto cualquiera de la superficie de la uña
que se va extendiendo progresivamente. Es
debida a dermatofitos Para recoger la muestra
se raspa con el bisturí la tabla externa de la uña.

 MUESTRAS RESPIRATORIAS:

Las muestras respiratorias se recogerán mediante la emisión de un esputo o bien

mediante un aspirado o lavado bronquial. Las muestras deben homogeneizarse y
concentrarse de la misma forma que para el estudio de mico bacterias.

 TOMA DE MUESTRA DE MUCOSAS:

Se dispondrá de una torunda estéril de algodón y un

contenedor de torunda, con o sin medio de transporte.
En caso de existir lesiones blanquecinas a nivel de
boca, vagina o glande, se frotará la torunda en la zona
d e lesión o secreción. Si el paciente solo presenta
enrojecimiento, se humedecerá la torunda con unas
gotas de agua o solución salina estéril y
se efectuará una rotación por la superficie
enrojecida. Si no existiesen evidencias de
secreción y/o enrojecimiento, se procurará pasar la
torunda por una zona lo suficientemente amplia como
para asegurar la recuperación de la mayor cantidad
posible de microorganismos.

 MUESTRA DE FLUIDOS CORPORALES

Extracción de sangre

Es el espécimen más usado habitualmente para los estudios analíticos por

la riqueza de datos que puede aportar, por su funcionalidad y por ser
relativamente fácil su obtención. Dependiendo del tipo de estudio que se
vaya a realizar, el tipo de muestra puede coincidir con el espécimen (sangre
total) o ser una parte del mismo (plasma, suero).
Cultivo de muestra de sangre

10
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

 En laboratorios pequeños que

tienen un bajo flujo de este tipo de
muestras y no permite tener medios
especiales es aceptable inocular
0,5 mL de sangre heparinizada
directamente en la superficie de un
medio de cultivo.

 Como medio de cultivo se debe

emplear una botella bifásica que
contenga 60 mL de caldo infusión
cerebro corazón y agar cerebro
corazón.

 Se inocula 10 mL de sangre en el medio bifásico, recibiendo ventilación a

través de una aguja con tapón de algodón, colocando el medio de cultivo
en forma vertical.

 Se incuba a 30 ºC por 30 días.

 Examinar en forma diaria, hasta observar el crecimiento de

microorganismos. Después de examinar diariamente los cultivos, se debe
de mezclar la fase líquida del medio de cultivo con el agar.

 Otro sistema de recuperación de hongos es el sistema de lisis

centrifugación, que tiene la capacidad de lisar leucocitos sanguíneos con
ulterior liberación al medio de microorganismos fagocitados, pero para su
correcta realización hay que considerar las especificaciones del fabricante

 Para las técnicas automatizadas seguir las recomendaciones de los

fabricantes de como inocular dos frascos en cada extracción (aeróbico y
anaeróbico), pero en caso de niños emplear un frasco pediátrico por
extracción.

 El volumen de sangre inoculado por frasco es esencial para incrementar

la sensibilidad de la técnica.

Orina

Se debe explicar claramente al paciente el procedimiento de recogida.

En el caso de pacientes ambulatorios la explicación debe ir acompañada de
unas instrucciones claras, por escrito.

Utilice el contenedor adecuado a los requerimientos de la prueba solicitada

y recolecte los volúmenes mínimos requeridos por el Laboratorio.
Si la orina no puede ser enviada inmediatamente al laboratorio debe
mantenerse refrigerada.

11
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

Los contenedores de orina deben

enviarse al laboratorio cerrados
herméticamente y con la identificación
adecuada.

En orinas de 24 horas, no olvide anotar

en el volante de petición la diuresis
total

En el caso de orinas para urocultivo

es necesario respetar
escrupulosamente las normas de
higiene durante la recogida de la orina
y el manejo de los contenedores.

Cultivo de muestra de orina

 El urocultivo convencional es el método idóneo para el estudio de

infección del tracto urinario, permitiendo diferenciar cualitativa y
cuantitativamente una contaminación de una candiduria significativa.

 Inocular 1 ó 10 μL de orina no centrifugada en una placa Petri que

contenga agar sabouraud dextrosa con antibiótico (ASD).

 Incubar a 35 - 37 ºC por 48 – 72 horas en aerobiosis.

 En la infección del tracto urinario, el valor del recuento de colonias en la

orina no esta bien establecido. En general, se acepta que un recuento
mayor a 10 000 UFC/mL, indicaría infección urinaria o candidiasis
diseminada, un recuento inferior no es significativo de infección.

 Algunos investigadores señalan que hay que valorar cualquier recuento

de levaduras como anormal y realizar nuevamente el cultivo antes de
descartar una infección.
 En general, ante un cultivo positivo, se puede considerar las siguientes
situaciones:

- Candiduria inferior a 1000 UFC/mL: generalmente corresponde a

ausencia de infección, con excepción si la muestra fue obtenida por
punción suprapúbica.

- Candiduria entre 1000 y 10 000 UFC/mL: de significado clínico dudoso y

puede resultar de una contaminación sobre todo si existe flora mixta.
En ciertos pacientes (niños, diabéticos, cateterizados), un recuento bajo
puede ser de valor, sin embargo considerar una nueva muestra.

- Candiduria entre 10 000 y 50 000 UFC/mL: sugiere la existencia de

infección urinaria. La presencia de leucocitos y clínica del paciente pueden
ayudar a valorar la candiduria. Al encontrar en el cultivo flora fúngica mixta
o asociada con bacterias, sospechar de contaminación.

12
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

- Candiduria superior a 50 000 UFC/mL: indica infección.

Agentes etiológicos diferentes al género Cándida obliga a la realización

de recuentos de colonias y puede sembrarse inclusive el sedimento
urinario.

Líquido Cefalorraquídeo (LCR)

La obtención del LCR la debe realizar

personal facultativo experimentado, por
punción lumbar.

Se recogerá en tubos estériles de tapón

a rosca. Generalmente el primer tubo
será para estudio bioquímico, el
segundo para estudio microbiológico y
el tercero para investigación de células.

Cultivo de líquido cefalorraquídeo

La muestra se obtiene por punción lumbar, y luego es depositada en un tubo

de vidrio o frasco estéril con tapa rosca. El volumen requerido para un
adecuado diagnóstico de hongos debe ser de 5 mL.

Centrifugar la muestra a 1500 g ó 3500 rpm por 15 minutos. El sobrenadante

puede ser empleado para realizar pruebas serológicas de detección de
antígeno de C.neoformans.

El sedimento debe ser sembrado sobre ASD o agar infusión cerebro corazón
o agar semilla de girasol (agar niger seed). Emplear de cuatro a seis tubos
conteniendo el medio de cultivo por muestra. Incubar a temperatura
ambiente y 37 ºC por cuatro semanas.

La proporción de resultados positivos aumentan en forma directamente

proporcional al volumen de muestra.

Lectura e interpretación de los cultivos Durante la primera semana de

incubación realizar las lecturas a diario de los medios de cultivo, luego puede
realizarse dos veces por semana hasta completar el tiempo de incubación
establecida.

Una vez realizado el aislamiento primario sembrar en medios de cultivo

selectivos para su tipificación.

Saliva

13
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

1. Utilizar tubos de 14 x 75 mm.

2. Aspirar la saliva con pipeta Pasteur y depositar en el tubo, hasta
aproximadamente un volumen de 1 mL.

CULTIVO DE ESPUTO Y SECRECIONES BRONQUIALES

Colocar la muestra de esputo en tubos de

ensayo con ASD y agar infusión cerebro-
corazón. Emplear como mínimo seis tubos
por muestra, tres de ellos se incubarán a
temperatura ambiente y los otros tres a 37
ºC. Los medios de cultivo deben de
contener cloramfenicol 0,5g/L.

Evitar el uso de cicloheximida debido a

que puede inhibir el desarrollo de mohos,
principalmente Aspergillus spp., Penici
llium marneffei, y Cryptococcus
neoformans.

El LBA se debe de colocar en recipiente estéril y con tapa rosca. La muestra

se centrifuga (1500 g ó 3000 rpm por 30 minutos) y a partir del sedimento se
realiza el cultivo.

El valor diagnóstico del hallazgo de los diferentes hongos es diverso. Son

importantes los aislamientos de Paracoccidioides brasiliensis e Histoplasma
capsulatum; otros como Aspergillus spp. y Fusarium spp. Tienen valor
cuando se les observa en el examen directo y se les aísla en forma reiterada
a partir de especímenes seriados.

Finalmente, algunos hongos como Cándida spp. Son considerados como

causantes de infección respiratoria si son observados por histopatología de
biopsias o piezas quirúrgicas. Cryptococcus neoformans puede causar
micosis pulmonar principalmente en pacientes VIH.

Los cultivos se deben controlar hasta 45 días.

14
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

EXAMEN DE SECRECION VAGINAL

El flujo vaginal si es de color blanco, no constituye una enfermedad sino

manifestación de la ovulación, o de una alteración local leve a causa de una
infección del aparato genital.

Un flujo vaginal amarillento o verdoso que produce molestias locales y un olor

seriamente objetable puede indicar una infección vaginal o vulvar.

Clasificación causal:

- Infecciones Bacterianas: (por Neisseria Gonorrhoeae, Clamydia

trachomatis, Haemophylus vaginales
- Infección viral: Herpes genital
- Infecciones por hongos: Candida albicans.
- Infecciones por Protozoarios: Tricomonas vaginales
- Infecciones Parasitarias: Enterobius vermicularis
- Vulvovaginitis atrófica
- Citología Exfoliativa para el diagnóstico de tumores malignos.

Materiales y Equipos requeridos:

- Camilla ginecológica
- Especulo estéril
- Guantes quirúrgico
- Hisopos de algodón largo
- Suero fisiológico o solución salina al 0.9%
- Tubos de prueba de 13 x 100
- Cintas adhesivas
- Lápiz graso o plumón con tinta indeleble
- Gradillas para los tubos
- Hidróxido de potasio ( KOH)
- Laminas portaobjetos y cubreobjetos

PROCEDIMIENTO:

- Tomar la muestra de las paredes de la vagina con ayuda de un hisopo y

el especulo estéril.
- Colocar el hisopo con la muestra en un tubo que contenga
aproximadamente 3 a 5 ml. de hidróxido de potasio al 10% o suero
fisiológico.
- Luego centrifugar a 2,500 rpm durante 5 minutos y decantar el
sobrenadante.
- Colocar una gota del sedimento en una lámina portaobjetos, cubrir con
una lámina cubreobjetos y observar al microscopio con el lente de 10x, y
buscar tricomonas, estructuras micóticas etc.

15
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

- Preparar un frotis de la muestra en una lámina portaobjetos, dejar secar.

Fijar y colorear por el método de Gram. Observar al microscopio con el
objetivo de 100x, buscar gonococos.
- Anotar sus observaciones.
- Realizar el examen en un máximo de 1 hora después de haber tomado
la muestra.

RESULTADOS:
Anotar sus resultados y observaciones siguientes en el esquema adjunto:

EXAMEN DIRECTO:

Ph………………………………………………
Leucocitos:……………………………………
Hematíes:……………………………………..
Células epiteliales:……………………………
Estructuras Micóticas………………………..
Trichomonas…………………………………
Otros………………………………………….

Coloración Gram.:
- Gonococos:………………………………….
- Bacilos Gram (+):………………………….
- Bacilos Gram (-):…………………………..
- Diplococos Gram (+):……………………..
- Hongos Levaduriformes:…………………
- Otros:……………………………………….

CONCLUSIÓN

16
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

CULTIVO DE SECRECION VAGINAL

Los cultivos de secreción vaginales tiene una importancia capital no solo porque
establece con certeza el diagnóstico etiológico, sino también porque la
identificación del microorganismo causal. Por ello, el diagnóstico de las agentes,
con un adecuado procesamiento de los cultivos, debe ser una de las funciones
más importantes del Laboratorio de Microbiología Clínica.

MICROORGANISMOS QUE SE CULTIVAN

MATERIALES PARA LA TOMA DE MUESTRA

• Camilla ginecológica.
• Espéculo estéril
• Hisopos estériles de 6 pulgada
• Agua templada ( si es necesario )

Técnica:

1) Lávese las manos.

2) Prepare el equipo.
3) Identifique si el paciente es el correcto.

4) Informe al paciente del procedimiento.

5) Prepare el sitio de la obtención de la muestra.

6) Colóquese los guantes.

Obtención de la muestra

Con el paciente en posición ginecológica se introduce un especulo “sin

lubricante” si es necesario para lubricar utiliza agua templada

17
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

. Se limpiará la superficie exterior del cuello uterino, las secreciones

vaginales, con el hisopo de algodón, bajo visión directo se comprimirá
cuidadosamente el cerviz con un movimiento de rotación durante 30”

. Con la primera limpieza se realizará dos extendidos en láminas

portaobjetos, para realizar estudios en coloración de Gram. y azul de
metileno, como también este mismo procedimiento se realiza para el
cultivo.

Materiales para el cultivo

Placas Petri.
Asas bacteriológicas.
Medios de cultivo (Agar Mac Conkey, Agar Manitol Salado, Agar
Sangre.)
Tubos para prueba bioquímica 13 X 100.
Solución salina fisiológica estéril al 0. 85%.
Mechero.
Estufa.

Procedimientos

Aislamiento y siembra de la muestra.

 Rotule las placas donde se hará la siembra con nombre, fecha, tipo de
muestra del paciente.

18
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

 Prenda el mechero para crear un espacio estéril

 Coja el asa bacteriológica y tomar de los tubos con la muestra y realice
la siembra a manera de estría, en placas con Agar Mac Conkey, Manitol
salado, Agar sangre.
 Lleve las placas a la estufa e incube de 18 -24 horas a 37ºC.

 Pasado el período de incubación, verifique el crecimiento o no

crecimiento del microorganismo.
 Reporte las características de las colonias (forma, tamaño, color,
aspecto, borde, constancia)de cada placa y la actividad hemolítica.

Transporte y conservación.

• Debe ser inmediato. Cuando no puedan procesarse las muestras antes

de 15 minutos, se utilizarán torundas con un medio de transporte Stuart-
Amies que se mantendrán a temperatura ambiente o, preferentemente,
en estufa a 35 - 37ºC. Las muestras se procesarán siempre que se
pueda antes de 3 horas, y como máximo en un plazo de 6 - 12 horas.

CULTIVO DE NEISSERIA GONORRHOEAE

• Es un diplococo Gram negativo, oxidasa positiva, que causa la

gonococia, una enfermedad de transmisión sexual que se presenta en
los humanos.

Materiales para la siembra

• Asa Bacteriológica.
• Una vela.
• Muestra.
• Cámara anaerobia.
• Placa petri.
Medios de cultivo (Thayer Martin

Procedimiento
1. Tener todos los materiales listos.
2. Servir el medio de cultivo en la placa Petri
3. Comenzar el sembrado con un asa bacteriológica de la muestra en el
medio de cultivo por estría

3. . Después colocar en la cámara anaerobia que tiene el fondo de

algodón y sobre la placa una vela a una temperatura de 35° C.

5. Se deja por 72 horas y se revisa cada 24 horas y verifica las dos veces.

CONCLUSION

19
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

Los hongos cada año que pasa va evolucionando día a día como evoluciona
también va evolucionando la medicina así se puede tratar las enfermedades
que se da a causa del hongos.

Como se sabe los hongos no es hereditario se contagia y también tenemos que

tener en cuenta el higiene personal, los hongos tienen tratamiento como
también tiene cura depende en qué etapa se encuentra, cuando una persona
está enfermo por los hongos tiene que tener cuidado con las personas que lo
rodean puede que sea que lo contagien y además tiene que tener sus cosas de
aseo personal.

WEBGRAFIA

20
TÉCNICAS MICOLÓGICAS 2018

http://www.slideshare.net/ysirubi/micologia-general-15628099

http://blog.codeconutrilife.com/medicina-natural/infecciones-
micoticas-de-la-piel/

Crespo Erchiga V, Delgado Florencio V y Martínez García S. Micología

dermatológica. Ed. M.R.A.Barcelona, 2006.

Daniel III CR. The Diagnosis of Nail Fungal Infection. Editorial Arch
Dermatol 1991; 127:1566-1567.

Roberts BJ, Friedlander SF. Tinea capitis: a treatment update. Pediatric

Annals 2005; 34: 191-200.

Frieden IJ: Tinea capitis: asymptomatic carriage of infection. Pediatr

Infect Dis J 1999; 18: 186-190.

21