Você está na página 1de 74

Page 1

Seminar Hasil Penelitian & Pengabdian kepada Masyarakat, Unila, 2008
135
IDENTIFIKASI SENYAWA ALKALOID DARI EKSTRAK HEKSANA 
DAUN
Ageratum conyzoides. Linn 
Nurul Utami * dan Mukhlis Robara**
(*)Jurusan Kimia FMIPA UNILA. Jl. Prof. Dr Sumantri Brojonegoro No 1, 35145. Telepon ; 701609,
ext :706. Email : nutami@gmail.com; (**) Alumni Jurusan Kimia FMIPA UNILA
ABSTRACT 
Alkaloid compounds have been isolated from hexane extract of Ageratum conyzoides. Linn
leaves. The isolation steps were started from maseration followed by purification using column
chromatography method. The purification product was whitist amorf crystal (29.9 mg). Analysis
by thin layer chromatography indicated that the crystal contained only one alkaloid. However,
having anylised by UV­Vis spectroscopy and Gas ­ Chromatography ­ Mass Spectroscopy, the
crystal contained eleven compounds in which four of them were alkaloids and as major
components. The alkaloids were predicted to be isomers containing some functional groups
which were hydroxyl, carbonyl, secondary N­H, and heteroaromatic. The alkaloids had 
molecular weight of 432
Key words : Ageratum conyzoides, alkaloid, isomer
PENDAHULUAN 
Masyarakat Indonesia sudah biasa menggunakan obat­obatan tradisional yang umumnya berasal
dari tumbuhan untuk mencegah dari serangan penyakit atau mengobati penyakit. Aplikasi dari
obat­obatan ini bisa dengan cara meminum ekstrak air dari tanaman tersebut atau meletakkan
simplisia yang sudah ditumbuk halus pada daerah di tubuh yang sakit. Kurangnya informasi ilmiah
mengenai komponen­kompenen kimia yang terdapat dalam tanaman untuk obat tradisional ini
mengakibatkan nilai ekonomi dari tanaman­tanaman ini sangat rendah. Selain itu penggunaannya
yang biasanya menggunakan dosis sembarang bisa mengakibatkan efek yang tidak diinginkan. 
Situasi ini mendorong penulis untuk meneliti tanaman yang sudah dikenal baik oleh masyarakat
sebagai obat tradisional.
Salah satu tanaman yang telah digunakan sebagai obat tradisional adalah Ageratum conyzoides
Linn., yang memiliki nama daerah bandotan, babandotan (Sunda), badotan dan wedusan (Jawa). 
Di Indonesia, tanaman ini digolongkan sebagai gulma sehingga sering dimusnahkan. Namun
beberapa kelompok masyarakat kita menggunakan tanaman ini sebagai obat tradisional untuk
menyembuhkan berbagai macam penyakit: luka koreng di kulit, malaria, influenza, radang paru­
paru dan tumor ((Djauharia dan Hernani, 2004). Di negara lain di Asia, Africa dan Amerika Latin
, tanaman ini juga digunakan sebagai obat tradisional dengan beragam aplikasi, seperti obat
demam, rematik, sakit kepala, dan sakit perut, obat pneumonia (Ming, 1999), obat diarrhea,
diabetes, HIV/AIDS (Igoli, 2005). 
Ming (1999) juga mengatakan bahwa beberapa penyelidikan farmakologi telah dilakukan oleh
beberapa peneliti . Misalnya, ekstrak eter dan kloroform memiliki efek inhibitor terhadap
perkembangan in vitro Staphilococcus aureus, ekstrak metanol dari seluruh bagian tanaman
menunjukkan aksi inhibitor tehadap perkembangan Staphylococus aureus, Bacillus subtilis,
Eschericichia coli, and Pseudomonas aeruginosa. Selain itu, ekstrak air dari tanaman ini memiliki
aksi analgesik yang efektif pada tikus dan antispasmotik. 
Ming (1999) juga melaporkan bahwa telah dilakukan penyelidikan pemanfaatan aktivitas biologi 
A. conyzoides yang bisa digunakan di bidang pertanian. Aktivitas biologi yang paling penting dari
spesies ini adalah sebagai insektisida, baik dari ekstrak nonpolarnya heksana maupun ekstrak 

Page 2
PROSIDING 
136
polarnya (metanol). Sifat insektisida ini disebabkan oleh adanya senyawa kromen yaitu prekosen
I dan II. 
Beberapa penelitian yang telah dilakukan juga berhasil mengisolasi senyawa metabolit
sekunder. Vyas dan Mulchandani (1986) dalam Ming (1999),berhasil mengisolasi senyawa
golongan kromen, yaitu : prekosen I dan prekosen II yang dapat menghambat hormon juvenil
dalam serangga. Iqbal, et.al., (2004) berhasil mengisolasi prekosen II dari ekstrak n­heksana
pucuk daun A.conyzoides yang memiliki aktivitas antijamur. Almaqboul et.al., 1985 dalam 
Iqbal, et.al., 2004 membuktikan bahwa ekstrak kasar metanol dari semua bagian tanaman
menghambat bakteri Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Eschericia coli dan Pseudomonas
aeruginosa. Trigo et.al.,(1988) dalam Ming (1999) berhasil mengisolasi 1,2­desifropirrolizidinic
dan lycopsamine dari tanaman A. conyzoides yang bersifat hepatotoksik. Wiedenfeld dan
Roeder (1991) dalam Wiedenfeld et.al., (2003) berhasil mengekstrak lycopsamine, O7­
acetyllycopsamine, dan O7­acetylintermedine dari ekstrak n­heksana tanaman A. conyzoides,
namun tidak dilaporkan aktivitas biologi dari senyawa­senyawa tersebut .
Uji pendahuluan terhadap berbagai ekstrak baik nonpolar, semipolar maupun polar dari daun
A.conyzoides yang dilakukan penulis mengindikasikan bahwa tanaman ini mengandung banyak
alkaloid, sehingga masih dimungkinkan untuk menemukan dan mengisolasi senyawa alkaloid 
lainnya dari tanaman ini. Dari penelitian ini diketahui bahwa ekstrak n­heksana selain
mengandung alkaloid, komponen­komponen lainnya juga tidak banyak jumlahnya (matriknya
sederhana) sehingga ekstrak ini dipilih untuk diisolasi alkaloidnya dengan alasan metoda
isolasinya tidak akan sulit. 
Alkaloid adalah basa organik yang mengandung amina sekunder, tersier atau siklik. Diperkirakan
ada 5500 alkaloid telah diketahui, dan alkaloid adalah yang containing Some 5500 alkaloids are
known, yang merupakan golongan senyawa metabolit sekunder terbesar dari tanaman, Tidak ada
satupun definisi yang memuaskan tentang alkaloid, tetapi alkaloid umumnya mencakup senyawa­
senyawa bersifat basa yang mengandung satu atau lebih atom nitrogen, biasanya sebagai bagian
dari sistem siklik. Secara kimia, alkaloid adalah golongan yang sangat heterogen berkisar dari
senyawa­senyawa yang sederhana seperti coniine sampai ke struktur pentasiklik strychnine. 
Banyak alkaloid adalah terpenoid di alam dan beberapa adalah steroid. Lainnya adalah senyawa­
senyawa aromatik, contohnya colchicine (Makkar, et.al., 1993) 
Diketahui bahwa senyawa alkaloid yang berasal baik dari tanaman maupun hewan menunjukkan
beragam aktivitas biologi. Di Brazil, beberapa perusahaan farmasi telah menggunakan tanaman
ini sebagai bahan baku fitokimia. Kebutuhannya senantiasa meningkat setiap tahun sehingga
mendorong para peneliti untuk mengembangkan penelitian tanaman ini terutama di bidang
pertanian dan obat­ obatan. Penggunaan tanaman ini secara tradisional dan dapat
menyembuhkan berbagai jenis penyakit menunjukkan bahwa A. conyzoides bisa menjadi sumber
ekonomi yang penting bagi Indonesia.
Dari penelusuran beberapa pustaka dan uji pendahuluan yang telah dilakukan penulis, maka
penelitian ini dilakukan yang bertujuan untuk mengisolasi senyawa golongan alkaloid dari ekstrak
n­heksana. Senyawa yang dihasilkan diharapkan bisa memberikan informasi tambahan tentang
senyawa alkaloid dalam tanaman ini yang kemudian bisa dilakukan uji aktivitas biologinya agar
tanaman ini bisa dimanfaatkan lebih lanjut sebagai biosida dan obat­obatan 
BAHAN DAN METODE
Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilakukan dari bulan April sampai dengan bulan Desember 2004 di Laboratorium
Penelitian Kimia Organik, Laboratorium Biokimia, dan Laboratorium Instrumentasi Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA) Universitas Lampung (UNILA). Analisis
spektrofotometri dilakukan di Laboratorium Instrumentasi Universitas Pendidikan Indonesia (UPI)
Bandung Jawa Barat 

Page 3
Seminar Hasil Penelitian & Pengabdian kepada Masyarakat, Unila, 2008
137
Alat ­alat 
Beberapa alat gelas yang umum digunakan di laboratorium kimia, bejana kromatografi lapis
tipis, seperangkat alat kromatografi kolom, penguap putar vakum, spektrometer UV­Vis
Shimadzu Mini Seri 1240, spektrometer FTIR Shimadzu series 8400, dan spektrometer GC­MS
Shimadzu QP 5050A
Bahan­bahan
Sampel : daun A.conyzoides (937 g) yang telah dikeringanginkan dan dibuat serbuk. Sampel ini
diambil dari Desa Bogorejo, Kecamatan Gedong Tataan, Kabupaten Lampung Selatan. Beberapa
pelarut organik : metanol, DCM, etilasetat, n­heksana, dan kloroform (berkualitas teknis dan
p.a). Beberapa pereaksi : CeSO4, Dragendorff, HNO3/etanol, dan lain­lain : silika gel 60 MERCK
(0.063­0.200 mm),plat silika Kiesel 60 F254, dan akuades. 
Prosedur Penelitian 
Ekstraksi dan Pemurnian
Sampel daun A.conyzoides dimaserasi dengan pelarut n­heksana selama 2 x 24 jam. Ekstrak yang
dihasilkan dipekatkan dengan penguap putar vakum. Ekstrak diuji dengan metoda kromatografi
lapis tipis (KLT) untuk mengetahui adanya senyawa alkaloid menggunakan pelarut penampak
noda CeSO4, Dragendorff dan lampu UV. 
Ekstrak pekat n­heksana difraksinasi dan refraksinasi dengan metoda kromatografi kolom
menggunakan beberapa sistem pelarut sampai diperoleh senyawa alkaloid yang murni dan
berbentuk kristal. Semua fraksi hasil fraksinasi dan refraksinasi dianalisis dengan metoda KLT
menggunakan beberapa sistem pelarut pengembang dan pelarut penampak noda CeSO 4 dan,
Dragendorff, juga lampu UV untuk melihat sifat UV aktifnya. Pada kristal digunakan larutan
penampak noda lain untuk melengkapi identifikasi alkaloid yaitu HNO3 dalam etanol. 
Analis Spektroskopi. 
Isolat dianalisis dengan metode spektroskopi ultraungu­tampak, infra merah dan spektroskopi
massa yang digabungkan dengan kromatografi gas (KG­MS). Analisis spektroskopi ultraungu­
tampak digunakan untuk mengidentifasi gugus fungsi dari ikatan rangkap terkonjugasi,
spektroskopi infra merah dilakukan untuk mengetahui lebih lengkap tentang gugus­gugus fungsi
lain yang terdapat dalam senyawa tersebut, dan metoda spektrsokopi massa untuk mengetahui
bobot molekul senyawa yang dihasilkan dan pola fragmentasinya yang akan membimbing ke
struktur senyawa tersebut 
HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi dan Pemurnian. 
Ekstrak n­heksana hasil maserasi daun A. conyzoides dikeringkan dengan penguap putar vakum
dan menghasilkan ekstrak pekat sebanyak 26.82 gram. Setelah dianalisis dengan metoda KLT
menggunakan pelarut pengembang DCM : EtAst (4:1) dan pereaksi penampak noda CeSO 4 dan
Dragendorff ekstrak ini mengandung alkaloid. Dari identifikasi menggunakan lampu UV,
diketahui bahwa senyawa alkaloid tersebut bersifat UV aktif. Kandungan alkaloid dalam ekstrak
ini juga tidak begitu tinggi yang ditunjukkan oleh lemahnya intensitas warna yang ditunjukkan. 
Sebanyak 12.773 gram ekstrak pekat tersebut menjalani proses pemurnian. Metoda yang
digunakan adalah kromatografi kolom dengan elusi landaian menggunakan sistem pelarut :
heksana : DCM (1:1), DCM : EtAst (4:1 dan 1;1), etil asetat dan methanol. Dari fraksinasi pertama
ini dihasilkan sembilan fraksi dan setiap fraksi dianalisis dengan metoda KLT yang sama untuk
mengetahui adanya alkaloid. Tiga fraksi (fraksi 4,5, dan 6) menunjukkan adanya alkaloid dengan 

Page 4
PROSIDING 
138
fraksi 4 mengandung alkaloid lebih banyak dibandingkan dua fraksi lainnya. Fraksi ini dikeringkan
dan diperoleh ekstrak pekat sebanyak 1.7383 gram. Senyawa alkaloid dalam fraksi ini terdapat
pada kisaran nilai Rf 0.19 – 0.36 dan konsentrasinya cukup kecil yang ditunjukkan intensitas
warna noda yang lemah. 
Refraksinasi dilakukan terhadap fraksi 4 tersebut di atas dengan metoda yang sama. Jumlah
sampel yang difraksinasi adalah 1.6958 gram dan pelarut yang digunakan adalah DCM : EtAst
(19:1, 9:1, 1:1) dan metanol. Dari proses ini diperoleh 32 fraksi yang kemudian dianalisis dengan
metoda KLT yang sama. Senyawa alkaloid terdapat pada fraksi 18­29 sehingga semua fraksi ini
disatukan, dipekatkan dan didapat berat sebesar 0.5961 gram. Fraksi gabungan ini dianalisis
dengan metoda KLT dengan pelarut pengembang n­heksana:EtAst (1:1) dan diketahui ada
beberapa senyawa alkaloid yang memiliki nilai Rf berkisar antara 0.06 – 0.43.
Fraksi gabungan ini dimurnikan lebih lanjut dengan metoda yang sama. Jumlah sampel adalah
0.5912 gram dan pelarut yang digunakan adalah n­heksana : EtAst (3:2). Fraksi yang dihasilkan
berjumlah 64 fraksi. Hasil analisis KLT menunjukkan senyawa alkaloid berada dalam fraksi 11­59
dan senyawa alkaloid dengan Rf yang sama terdapat dalam fraksi 11­29. Fraksi­fraksi ini
kemudian disatukan dan diperoleh berat sebesar 0.169 gram. Sebanyak 0.1184 gram fraksi ini
dimurnikan lebih lanjut dengan pelarut n­heksana:EtAst (7:3) dan dihasilkan 31 fraksi. Senyawa
alkaloid terdapat pada fraksi 7­27 dan pada fraksi 16­20 terlihat adanya kristal. Fraksi 16­20 ini
juga memiliki kromatogram yang sama sehingga bisa digabungkan, dipekatkan dan didapat berat
sebesar 66.4 mgram. Hasil analisis dengan metoda KLT menggunakan larutan pengembang n­
heksana­EtAst (3:2) dan dua jenis larutan penampak noda : Dragendorff dan HNO 3/etanol,
menunjukkan bahwa noda yang dihasilkan adalah benar alkaloid. Intensitas warna yang kuat
setelah diidentifikasi dengan larutan CeSO4 menunjukkan bahwa senyawa alkaloid merupakan
komponen yang dominan. 
Analisis dengan Metode Spektroskopi. 
A. Spektroskopi Ultraungu­ Tampak.
Spektrum Ultraungu­Tampak dari senyawa isolat ditunjukkan oleh Gambar 1. Spektrum ini
menunjukkan ada serapan pada beberapa panjang gelombang yaitu absorbansi 0.539 pada 239
nm, 0.558 pada 321 nm, dan 0395 pada 275 nm. Serapan ini terjadi disebabkan adanya transisi
elektronik π→π*, n →π*, dan n →σ*. Hal ini memberikan keterangan bahwa senyawa isolat
mengandung gugus ikatan rangkap terkonjugasi dan/atau aromatik, juga gugus C=O (Silverstein,
et.al., 1993)
Gambar 1. Spektrum ultraungu­tampak senyawa isolat 

Page 5
Seminar Hasil Penelitian & Pengabdian kepada Masyarakat, Unila, 2008
139
B. Spektroskopi Inframerah
Spektrum inframerah memberikan informasi lebih lengkap tentang gugus fungsional yang
terkandung dalam struktur senyawa isolat. Spektrum senyawa isolat ditunjukkan oleh Gambar 2. 
Gambar 2. Spektrum inframerah senyawa isolat
Serapan pada 3073.3 cm­1 diduga merupakan serapan untuk uluran C­H dari suatu aromatik yang
diperkuat dengan adanya serapan pada 840,9 cm­1
yang diduga akibat vibrasi tekuk C­H
aromatik keluar bidang. Serapan pada 1635,5 cm­1 diduga merupakan serapan vibrasi ulur dari
gugus C=O keton yang berkonjugasi dengan ikatan rangkap (Silverstein et al, 1986). Serapan­
serapan ini mendukung hasil analisis spektrum ultraungu­tampak sebelumnya. 
Serapan pada 2939.3 cm­1 dan 2839.0 cm­1 mengindikasikan adanya vibrasi uluran C­H metil
dan/atau metilena. Sedangkan serapan pada 3429.2 cm­1 diduga merupakan serapan dari N­H
sekunder yang bertumpangsuh dengan serapan gugus –OH. Adanya serapan pada 1589.2 cm ­1
merupakan serapan untuk vibrasi tekuk N­H yang mendukung adanya gugus gugus N­H sekunder.
Sedangkan serapan pada 1126.4 cm­1 diduga merupakan serapan dari uluran C­O. 
C. Spektroskopi Massa.
Dalam analisis ini, metode spektroskopi massa digabungkan dengan metoda kromatografi gas.
Senyawa isolat dianalisis terlebih dulu menggunakan metoda kromatografi gas yang selanjutnya
setiap komponen dianalisis menggunakan spektroskopi massa. Kromatogram KG dari senyawa
hasil isolasi ditunjukkan oleh Gambar 3. 

Page 6
PROSIDING 
140
Gambar 3. Kromatogram kromatografi gas senyawa isolat
Kromatogram KG menunjukkan bahwa senyawa ini memiliki 11 komponen dengan 4 komponen
dominan yang memiliki waktu retensi (tR) yang sangat berdekatan (hanya berbeda 0.1 menit).
Lima senyawa memiliki konsentrasi <1,00 % yaitu senyawa 1,2,3 dan 10. Senyawa 4 dan 5
memiliki konsentrasi 2.03% dan 6.80%. Empat senyawa sisanya yaitu senyawa 6,7,8 dan 9
memiliki konsentrasi 28.92%, 12.02%, 30.17% dan 17.43% secara berturut­turut sehingga
merupakan komponen yang dominan dalam isolat tersebut. Keempat senyawa ini merupakan
senyawa­senyawa yang memberikan noda bulat dan lebar pada kromatogram KLT dan merupakan
alkaloid. Waktu retensi yang hampir sama menunjukkan bahwa keempat senyawa tersebut
memiliki kepolaran yang serupa yang dimungkinkan oleh adanya hubungan keisomeran satu sama
lain. 
Sifat keisomeran dari keempat senyawa tersebut ditunjukkan oleh spektrum massanya yang
ditunjukkan oleh Gambar 4. Keempat senyawa tersebut memiliki pola fragmentasi yang serupa
dan memberikan bobot molekul yang sama yaitu ,m/e =432. Bobot molekul [M] bernilai genap
menunjukkan bahwa dalam struktur senyawa tersebut mengandung atom N dalam jumlah genap.
Selanjutnya tidak ada puncak [M+2] mengindikasikan bahwa tidak ada atom halogen dalam
strukturnya( Silverstein, et.al., 1991) Keempat senyawa memiliki puncak dasar, m/e 417 yang
merupakan hasil dari fragmentasi M­CH3 . Puncak­puncak fragmen yang sama dan selalu muncul
pada keempat senyawa tersebut adalah m/e 432,418, 417, 374, 356,197,149, 83, 69, 43. 
Puncak­puncak fragmen yang lain hanya berbeda sedikit, seperti puncak pada m/e 225 pada
senyawa 6,7dan 9, sedangkan pada senyawa 8 terekam pada m/e 224. Terdapat pula puncak
yang kemungkinan sama namun tidak terekam nilainya pada senyawa lain, seperti puncak
fragmen pada m/e 109 yang terdapat pada senyawa 7,8, dan 9, namun pada senyawa 6 tidak
muncul walaupun terdapat puncak yang diduga sama. Perbedaan lainnya adalah pada senyawa
6,7 dan 8 terdapat puncak fragmen pada m/e 401 sedangkan pada senyawa 9 muncul pada m/e
389. Kemungkinan pola fragmentasi untuk senyawa 6,7, dan 8 adalah sebagai berikut : 
Z
H2
C
H2
C
H
N
CH3
Z
H2
C
H2
C
NH
CH3
m/e 432
­
m/e 417
Fragmentasi selanjutnya dengan melepas dengan melepas NH2, yang menghasilkan fragmen
pada m/e 401. Kemudian lepasnya C2H3 menghasilkan puncak dengan m/e 374 yang pola
fragmentasinya adalah sebagai berikut :
Z
H2
C
H2
C
NH
NH2
­
Z
H2
C
CH
C2H3
­
Z
m/e 174
m/e 401
m/e 417
Sedangkan untuk senyawa 9 memberikan pola fragmentasi yang diduga sebagai berikut : 

Page 7
Seminar Hasil Penelitian & Pengabdian kepada Masyarakat, Unila, 2008
141
Z
H2
C
CH3
H
N
CH3
CH3
­
Z
H2
C
CH3
NH
m/e 432
m/e 417
Z
CH3
H2
C
NH
Z
CH
m/e 417
m/e 389
Z
m/e 374
CHNH2
CH3
­
­
Puncak fragmen pada m/e 356 menginformasikan adanya gugus –OH dalam struktur senyawa
yang berasal dari lepasnya gugus H2O dengan BM 18 dari m/e 374. Puncak pada m/e 83 dan 55
pada senyawa 7,8,9 diduga adanya gugus keton siklik. Sedangkan puncak fragmen pada m/e 83
dan 57 dalam senyawa 6 menunjukkan adanya gugus keton alifatik. Tidak adanya puncak
fragmen pada m/e 77 dan/atau 91 menunjukkan bahwa struktur tidak memiliki gugus aromatik
benzena, namun karena data spektrum IR menunjukkan adanya serapan aromatik, maka diduga
ada gugus heteroromatik. 
Berdasarkan data­data spektroskopi tersebut di atas maka dapat disimpulkan bahwa senyawa­
senyawa alkaloid hasil isolasi memiliki gugus fungsi hidroksil, karbonil, amina sekunder dan
heteroaromatik. Keempat senyawa tersebut memiliki hubungan keisomeran dan bobot molekul
432. 
Senyawa 9
Gambar 4. Spektrum massa empat senyawa alkaloid yang terdapat dalam senyawa isolat 

Page 8
PROSIDING 
142
SIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa : 
1. Isolat yang diperoleh dari ekstrak heksana daun A. conyzoides. Linn berbentuk kristal
amorf berwarna putih dengan berat 29.9 mg.
2. Kristal tersusun dari sebelas komponen dengan empat senyawa alkaloid sebagai
komponen yang dominan.
3. Keempat senyawa alkaloid dalam kristal memiliki hubungan keisomeran.
4. Analisis spektroskopi Ultra Ungu­Tampak dan KG­MS menunjukkan bahwa keempat
senyawa alkaloid tersebut memiliki bobot molekul 432 dan dalam strukturnya terdapat
gugus­gugus fungsi: hidroksi, amina sekunder, karbonil, dan heteroaromatik. 
SARAN
Dari hasil penelitian yang telah diperoleh maka penulis menyarankan untuk :
1. Melakukan pemurnian lebih lanjut terhadap kristal yang mengandung alkaloid hasil
isolasi.
2. Melakukan analisis spektroskopi RMI untuk mendapatkan struktur lengkap senyawa
alkaloid yang sudah teridentifikasi.
3. Mempelajari aktivitas biologi senyawa alkaloid yang diperoleh agar diketahui potensinya
sebagai bahan baku obat.
DAFTAR PUSTAKA
Akinyemi, K.O., Oladapo, O., Okawaaraa, C.E., Ibe, C.C. and Fasure, K.A., 2005 . Screening of
Crude Extracts of Six Medicinal Plants Used in South West Nigerian Unorthodox
Medicine for Antimethicilin Resistant Staphylococcus aureus activity. BMC
Complementary and Alternative Medicine, 5 :6 
Djauharia, E. dan Hernani. 2004. Gulma Berkhasiat Obat. Penebar Swadaya Jakarta. 128 hlm
Gritter, R..J., Bobbit, J.M., Schwarting, A.E., 1991, Pengantar Kromatografi. Penerjemah:
Kosasih Padmawinata. Penerbit ITB. Bandung, 266 hlm
Igoli, J.O., Ogaji, O.G., Anyiin, T.A., and Igoli, N.P., 2005. Traditional Medicines Practices
Among The Igede People of Nigeria, Part II. African Journal of Traditional CAM, 2 (2)
: p. 134 ­ 152
Makkar, H. P.S,Siddhuraju, P., and K. Becker, K. 1993. Plant Secondary Metabolites, Methods in
Molecular Biology, vol. 393 © Humana Press Inc., Totowa, NJ. P. 107 
Ming, L.C., 1999. Ageratum conyzoides : A Tropical Source of Medicinal and Agricultural
Products. In Janic J. (Ed.). Perspective on New Crops and New Uses. ASHS Press.
Virginia, USA. P. 469­473
Silverstein, R.M., Bassler, G.C., Morrill, T.C.,1991. Spectrometric Identification of Organic
Compounds, Fifth Edition, John Wiley and Sons, 419 pp. 
Wiedenfeld, H., Pietrosiuk, A., Furmanowa, M., and Roeder, E., 2003. Pyrrolizidine Alkaloids
from Lithospermum canescens Lehm. Z. Naturforsch. 58c. p.173­176 
Page 1
KARAKTERISASI ZAT METABOLIT SEKUNDER DALAM
EKSTRAK BUNGA KRISAN (Chrysanthemum cinerariaefolium)
SEBAGAI BAHAN PEMBUATAN BIOPESTISIDA
TUGAS AKHIR II
Diajukan Dalam Rangka Penyelesaian Studi Strata I
Untuk Mencapai Gelar Sarjana Sains
Oleh :
YUSUF ISKANDAR
NIM : 4350402027
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS NEGERI SEMARANG
2007 
Page 2
ii
PERSETUJUAN PEMBIMBING
Tugas Akhir ini telah disetujui oleh Pembimbing untuk diajukan ke Sidang
Panitia Ujian Akhir Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam Universitas Negeri Semarang.
Semarang, Februari 2007
Pembimbing I
Pembimbing II
Agung Tri Prasetya S.Si, M.Si
Dewi Selvia F. ST,MT
NIP. 132084943
NIP. 132238500 

Page 3
iii
HALAMAN PENGESAHAN
Tugas akhir dengan judul: KARAKTERISASI ZAT METABOLIT
SEKUNDER DALAM EKSTRAK BUNGA KRISAN (Chrysanthemum
cinerariaefolium) SEBAGAI BAHAN PEMBUATAN BIOPESTISIDA, telah
dipertahankan di hadapan sidang Panitia Ujian Tugas Akhir Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Semarang
pada :
Hari

Tanggal : 
Panitia Ujian
Ketua 
Sekretaris
Drs. Kasmadi Imam S., M.S.
Drs. Sigit Priatmoko M. Si.
NIP. 130781011 
NIP. 131965839
Anggota Penguji
Penguji I
Penguji II
Dra. Endang Susilaningsih, MS
Agung Tri Prasetya S.Si, M.Si
NIP. 132125658
NIP. 132084943
Penguji III
Dewi Selvia F. ST,MT
NIP. 132238500 

Page 4
iv
PERNYATAAN
Saya menyatakan bahwa yang tertulis di dalam Tugas Akhir II ini benar­
benar karya saya sendiri, bukan jiplakan dari karya tulis orag lain, baik sebagian
atau seluruhnya. Pendapat atau temuan lain yang terdapat dalam Tugas Akhir II
ini dikutip atau dirujuk berdasarkan kode etik ilmiah.
Semarang, Februari 2007
Yusuf Iskandar 

Page 5
v
ABSTRAK
Iskandar, Yusuf. 2007. “Karakteristik Zat Metabolit Sekunder dalam Ekstrak
Bunga Krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium) Sebagai Bahan Pembuatan
Biopestisida”. Tugas Akhir II. Jurusan Kimia FMIPA UNNES.
Tanaman krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium) merupakan salah satu
tanaman yang memiliki kandungan bahan biopestisida. Tanaman krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium) mempunyai banyak manfat dalam kehidupan,
namun penelitian mengenai senyawa metabolit sekunder dalam tanaman krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium) masih relatif sedikit, maka perlu
dikembangkan penelitian untuk mengetahui kandungan senyawa metabolit
sekunder dalam bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium). Penelitian ini
bertujuan untuk mengetahui zat metabolit sekunder dan menentukan jenis pelarut
yang cocok untuk karakterisasi zat metabolit sekunder yag terkandung dalam
ekstrak bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium). Uji pendahuluan
dilakukan dengan cara mengekstrak serbuk bunga krisan (Chrysanthemum
cinerariaefolium) dengan menggunakan pelarut heksana, kloroform, metanol
kemudian diuji dengan reagen dragendorf. Dalam uji pendahuluan didapat hasil
positif pada pelarut metanol sehingga dilanjutkan dengan mengekstrak senyawa
dalam bungan krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium) dengan cara sokletasi
menggunakan pelarut metanol. Pemisahan senyawa dilakukan dengan
menggunakan kromatografi lapis tipis yang disinari dengan sinar UV λ365 nm
dan kromarografi kolom, sedangkan eluen yang digunakan dalam kromatografi
kolom dan kromatografi lapis tipis adalah metanol : kloroform = 1:15. Analisis
senyawa dan elusidasi strukturnya dilakukan dengan spectrometer IR dan GC­MS.
Berdasarkan karakterisasi IR, hasil ekstrak bunga krisan (Chrysanthemum
cinerariaefolium) diduga berupa terpenoid campuran yang memiliki gugus ester,
gugus karbonil, gugus asam, gugus C­H siklik, gugus C=H alkena. Sedangkan
analisis dengan kromatografi gas­ spektrofotometer massa diketahui bahwa
senaywa utama zat metabolit sekunder yang terkandung dalam bunga krisan 
(Chrysanthemum cinerariaefolium) adalah asam trans krisantemik dengan berat
molekul 167 dan kadar 4,59% , asam trans piretroid dengan berat molekul 212 dan
kadar 9,63%, Piretrolon dengan berat molekul 178 dan kadar 12,66%, Jasmolon
dengan berat molekul 180 dan kadar 4,03%, Cinerolon dengan berat molekul 166
dan kadar 4,43%.
Kata kunci: Bunga krisan, ekstraksi, Piretroloe, Cinerolin, Jasmolon 

Page 6
vi
MOTTO DAN PERSEMBAHAN
MOTTO
1. “Dan Kami hamparkan bumi itu dan Kami letakkan padanya gunung­gunung yang
kokoh dan Kami tumbuhkan padanya segala macam tanaman yang indah dipandang
mata. Untuk menjadi pengajaran dan peringatan bagi tiap­tiap hamba yang kembali
(mengingat) Allah”. (Qaaf:7­8) 
2. “Yang paling bahagia dan hakiki dalam kehidupan adalah dapat mencintai, 
dapat iba hati, dapat merasai kedukaan…” (Gie).
3. “Now I see the secret of the making of the best person. It is to grow in the open air
and to eat and sleep with the earth” ( Walt Whitman) 
PERSEMBAHAN
Kupersembahkan sekelumit karya ini teruntuk :
1. Ibu dan Bapakku tercinta yang selalu mendoakanku
2. Adik­adikku yang manis dan selalu ku sayangi Ruroh dan Rias 
3. Sobat tercinta Yuli, Tuti, Sari, Wiwik, Hamid, Ryan, Indrianto, Kartika dan rekan­
rekan kimia angkatan ’02, thanks guys atas supportnya. 
4. Adik­adik kelasku, thanks atas dukungan dan doanya.
5. Almamaterku
6. Temen­temenku di BJ Kost
7. Sepiku 
Page 7
vii
KATA PENGANTAR
Syukur alhamdulillah penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, karena
dengan petunjuk dan ridla­Nya penulis dapat menyelesaikan Tugas Akhir ini.
Shalawat serta salam semoga tetap kepada beliau, Nabi Muhammad SAW, yang
senantiasa kita tunggu syafa’atnya di hari akhir nanti. Amin.
Dalam pelaksanaan penulisan Tugas Akhir II ini, banyak kendala dan
kesulitan yang penulis hadapi. Tetapi, berkat bimbingan dan dorongan dari
berbagai pihak akhirnya penulis dapat menyelesaikan Tugas Akhir II ini. Pada
kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada semua pihak yang telah
membantu, baik dalam penelitian maupun dalam penyusunan tugas akhir. Ucapan
terima kasih penulis sampaikan kepada :
1. Rektor Universitas Negeri Semarang.
2. Drs. Kasmadi Imam S., M.S selaku Dekan FMIPA Universitas Negeri
Semarang.
3. Drs. Sigit Priatmoko M. Si, selaku Ketua Jurusan Kimia FMIPA Universitas
Negeri Semarang.
4. Drs. Kasmui, M. Si., selaku Kepala Laboratorium Jurusan Kimia yang telah
memberikan ijin untuk melaksanakan penelitian.
5. Agung Tri Prasetya S.Si, M.Si, selaku Pembimbing I yang telah memberikan
bimbingan dan pengarahan dalam penyusunan tugas akhir ini.
6. Dewi Selvia F. ST, MT, selaku Pembimbing II yang telah memberikan
bimbingan dan pengarahan dalam penyusunan tugas akhir ini. 

Page 8
viii
7. Dra. Endang Susilaningsih MS, selaku dosen penguji tugas akhir yang telah
menguji dan memberikan saran yang membangun demi perbaikan tugas akhir
ini. 
8. Bapak dan Ibu dosen yang telah memberikan dasar dan bekal ilmu
pengetahuan.
9. Teknisi dan laboran Kimia FMIPA Universitas Negeri Semarang.
10. Teman­teman kimia 2002 serta teman­teman yang selalu memberikan
dukungan dan motivasi.
11. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang telah
banyak membantu dalam penyusunan Tugas Akhir II ini.
Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan Tugas Akhir II ini masih
banyak kekurangan. Karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang
bersifat membangun demi sempurnanya tulisan ini. Akhir kata, penulis berharap
semoga Tugas Akhir II ini dapat bermanfaat bagi para pembaca dan
perkembangan ilmu pengetahuan di Indonesia.
Semarang, Februari 2007 
Penulis. 

Page 9
ix
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ........................................................................................... i
PERSETUJUAN PEMBIMBING ....................................................................... ii
HALAMAN PENGESAHAN............................................................................... iii
PERNYATAAN ................................................................................................... iv
ABSTRAK .......................................................................................................... v
MOTTO DAN PERSEMBAHAN ...................................................................... vi
KATA PENGANTAR .........................................................................................
vii
DAFTAR ISI ........................................................................................................ ix
DAFTAR TABEL................................................................................................. xi
DAFTAR GAMBAR ...........................................................................................
xii
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................
xiii
BAB I : PENDAHULUAN
A. Alasan Pemilihan Judul .............................................................. 1
B. Permasalahan .............................................................................. 3 

Page 10
x
C. Tujuan Penelitian ........................................................................ 3
D. Manfaat Penelitian ...................................................................... 4
E. Sistematika Tugas Akhir ............................................................ 4
BAB II : LANDASAN TEORI
A. Tinjauan Tentang Bunga Krisan ................................................ 6 
B. Tinjauan Tentang Piretrum .........................................................
11 
C. Tinjauan Tentang Piretrin ...........................................................
12 
D. Tinjauan Tentang Metode Ekstraksi ...........................................
19 
E. Tinjauan Tentang Kinetika Kromatografi Laps Tipis ................
20
F. Tinjauan Tentang Spektrofotometer Infra Merah (IR) ..............
21
G. Tinjauan tentang Gas Cromatography­Mass Spectrofotometer 
(GC­MS) .....................................................................................23
BAB III : METODE PENELITIAN
A. Sampel dan Populasi Penelitian ..................................................
25
B. Variabel Penelitian .....................................................................
25 

Page 11
xi
C. Alat dan Bahan ...........................................................................
25
D. Prosedur Penelitian ....................................................................
26
BAB IV : HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Penelitian ...........................................................................
28 
B. Pembahasan ................................................................................
32
BAB V : PENUTUP
A. Simpulan .....................................................................................
53
B. Saran ...........................................................................................
54
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................................
55
LAMPIRAN­LAMPIRAN 

Page 12
xii
DAFTAR TABEL
Tabel 
Halam
an
1. Data korelasi Spektra Inframerah .............................................................
22
2. Hasil ekstraksi soklet ...............................................................................
29
3. Hasil perlakuan masing­masing ekstraktan dengan 
pereaksi dragendorf ................................................................................
29
4. Hasil kromatografi kolom ........................................................................
31
5. Hasil KLT dari ekstrak bunga krisan .......................................................
31
6. Data interpretasi spectrum IR dari kromarografi kolom ..........................
34
7. Data waktu retensi kromatogram GC­MS dari ekstrak bunga krisan ......
36
8. Hasil penelusuran data spektrofotometri massa 
dari kromatogram GC­MS .......................................................................
37 

Page 13
xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
1. Jenis­jenis bunga krisan ........................................................................... 7
2. Enam senyawa yang bersifat insektisida yang terkandung 
dalam piretrum .........................................................................................
13
3. Diagram spektrofotometer IR ..................................................................
23
4. Skema metoda spektrometri massa .........................................................
24
5. Hasil KLT setelah disinari dengan sinar UV λ 365 nm ...........................
30
6. Kromatografi lapis tipis ekstrak bunga krisan menggunakan 
sinar UV λ 365 nm ...................................................................................
32
7. Spektrum IR dari kromatogram kolom ....................................................
34
8. Kromatogram GC­MS dari ekstrak bunga krisan ....................................
36
9. Spektra massa puncak nomer 3 dari kromatogram GC­MS .....................
38
10. Fragmentasi senyawa metabolit sekunder berdasarkan 
puncak nomer 3 dari kromatogram GC­MS ............................................
40 
11. Spektra massa puncak nomer 8 dari kromatogram GC­MS .....................
41
12. Fragmentasi senyawa metabolit sekunder berdasarkan 
puncak nomer 8 dari kromatogram GC­MS ............................................
42
13. Spektra massa puncak nomer 29 dari kromatogram GC­MS ...................
43
14. Fragmentasi senyawa metabolit sekunder berdasarkan 

Page 14
xiv
puncak nomer 29 dari kromatogram GC­MS ...........................................
45
15. Spektra massa puncak nomer 37 dari kromatogram GC­MS ...................
46
16. Fragmentasi senyawa metabolit sekunder berdasarkan 
puncak nomer 37 dari kromatogram GC­MS ...........................................
47
17. Spektra massa puncak nomer 40 dari kromatogram GC­MS ...................
48
18. Fragmentasi senyawa metabolit sekunder berdasarkan 
puncak nomer 40 dari kromatogram GC­MS ..........................................
50
19. Spektra massa puncak nomer 43 dari kromatogram GC­MS ...................
51
20. Fragmentasi senyawa metabolit sekunder berdasarkan 
puncak nomer 43 dari kromatogram GC­MS ...........................................
52
DAFTAR LAMPIRAN 

Page 15
xv
Lampiran:
1. Skema cara kerja ...................................................................................
58
2. Sertifikasi Bunga Krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium) .............
59
3. Spektrum IR ..........................................................................................
60
4. Kromatogram GC­MS dari ekstrak bunga krisan .................................
61
5. Spektra massa puncak nomer 3 dari kromatogram GC­MS .................
63
6. Spektra massa puncak nomer 8 dari kromatogram GC­MS ................
64
7. Spektra massa puncak nomer 29 dari kromatogram GC­MS ..............
65
8. Spektra massa puncak nomer 37 dari kromatogram GC­MS ...............
66
9. Spektra massa puncak nomer 40 dari kromatogram GC­MS ...............
67
10. Spektra massa puncak nomer 43 dari kromatogram GC­MS ..............
68
11. Foto hasil penelitian ..............................................................................
69
12. Ijin Penelitian ........................................................................................
70 

Page 16
1
BAB I
PENDAHULUAN
A.
Alasan Pemilihan Judul
Sejak krisis melanda bangsa Indonesia sekitar tahun 1997 harga
berbagai kebutuhan pangan dan sandang semakin tinggi, termasuk sarana
produksi pertanian yaitu pupuk dan pestisida sintetis. Tingginya kebutuhan
sarana produksi menimbulkan masalah di kalangan petani diantaranya
harga pupuk dan pestisida sintetis yang tinggi. Untuk memecahkan masalah
pupuk dan pestisida sintetis, para petani, petugas dan ahli pertanian kembali
menggunakan bahan alami. Pupuk kimiawi diganti menggunakan pupuk
alami seperti seresah dan kotoran ternak, sedangkan untuk pestisida sintetis
diganti menggunakan biopestisida. 
Negara kita terlambat dalam bidang pengembangan biopestisida di
banding negara­negara ASEAN. Sampai sekarang Indonesia masih
mengimpor pestisida sintetis dari negara­negara maju yang mencapai
20.000 ton per tahun, meliputi 594 merek dagang pestisida
(Natawigena:1985). Dampak penggunaan pestisida sintetis secara terus
menerus adalah pencemaran tanah, air, residu pestisida, dan ikut
terbunuhnya predator alami sehingga muncul hama baru yang lebih resisten
terhadap pestisida. Berbagai jenis pestisida akan terakumulasi di tanah dan
air, sehingga akan berdampak buruk terhadap keseluruhan ekosistem dan
efektivitas pestisida akan menurun. Prospek pengembangan biopestisida di 

Page 17
2
negara kita masih sangat terbuka lebar, karena keanekaragaman hayati yang
ada sangat potensial untuk dimanfaatkan. Biopestisida cepat terurai oleh
komponen alam seperti sinar matahari, kelembaban, suhu udara, sehingga
tidak akan menyebabkan pencemaran tanah dan air. Daya racun pestisida
bersifat selektif karena hanya mematikan organisme pengganggu tanaman
tertentu dan relatif aman bagi predator alami, manusia, mamalia dan ikan. 
Indonesia memiliki banyak keanekaragaman tanaman yang
memiliki kandungan bahan biopestisida diantaranya bunga krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium). Lebih dari 2400 jenis tanaman yang
masuk dalam 235 familia telah diketahui mengandung pestisida
(Budiyono:2001).
Penelitian tanaman yang memiliki bahan biopestisida di Indonesia
belum dilakukan secara maksimal, bahkan penggunaannya cenderung
berdasarkan pengalaman secara turun temurun. Bahan alami yang terdapat
dalam tanaman yang mengandung biopestisida dapat berperan sebagai
insektisida, rodentisida, moluskisida, dan sifat lainnya. Bahan alami yang
berperan sebagai pestisida antara lain: piretrin, jasmolin, dan cinerin
(Novizan:2000).
Ekstrak bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium)
mengandung beberapa jenis zat aktif yang bersifat insektisida. Salah satu
zat aktif yang kadarnya besar adalah piretrin. Kandungan piretrin mencapai
0,9­1,3% (Novizan,2000). Piretrin diperoleh dari ekstrak bunga krisan 

Page 18
3
merupakan racun kontak yang tidak meninggalkan residu dan aman bagi
lingkungan (Novizan:2000)
Dari uraian tersebut penulis ingin mengadakan penelitian untuk
mengetahui karakterisasi zat metabolit sekunder yang terkandung dalam
ekstrak bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium) sehingga dapat
digunakan sebagai alternatif bahan pembuatan biopestisida.
B.
Permasalahan
Berdasarkan judul dan latar belakang tersebut diatas dapat
dirumuskan permasalahan yaitu :
1. Zat metabolit sekunder apa yang terkandung dalam ekstrak bunga
krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium) ?
2. Pelarut apa yang cocok digunakan untuk karakterisasi zat metabolit
sekunder yang terkandung dalam ekstrak bunga krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium) ?
C.
Tujuan Penelitian
Berdasarkan permasalahan yang dikemukakan di atas, maka tujuan
penelitian ini adalah :
1. Karakterisasi zat metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak
bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium).
2. Menentukan jenis pelarut yang cocok untuk karakterisasi zat metabolit
sekunder yang terkandung dalam ekstrak bunga krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium). 

Page 19
4
D.
Manfaat Penelitian
Manfaat yang diperoleh dari penelitian ini adalah :
1. Memberikan informasi tentang cara karakterisasi zat metabolit
sekunder yang terkandung dalam ekstrak bunga krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium) dan Memberikan informasi tentang
zat metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak bunga krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium).
2. Memberikan informasi tentang jenis pelarut yang cocok untuk
karakterisasi zat metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak
bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium).
E.
Sistematika Tugas Akhir II
Untuk memberikan gambaran isi dari penelitian ini, maka garis
besar sistematika tugas akhir II ini adalah sebagai berikut :
A. Bagian pendahuluan
Bagian ini terdiri dari halaman judul, halaman pengesahan, sari,
halaman motto dan persembahan, kata pengantar, daftar isi, daftar tabel,
daftar gambar dan daftar lampiran.
B. Bagian isi
Bagian ini terdiri dari lima bab, yaitu :
BAB I PENDAHULUAN
Bab ini berisi tentang alasan pemilihan judul, permasalahan,
tujuan, dan manfaat penelitian, serta sistematika tugas akhir. 

Page 20
5
BAB II LANDASAN TEORI
Landasan teori berisi landasan teori yang digunakan dalam
penelitian, yaitu tinjauan tentang bunga krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium), tinjauan tentang piretrum,
tinjauan tentang piretrin, tinjauan tentang metode ekstraksi,
tinjauan tentang kromatografi lapis tipis (KLT), tinjauan
tentang Spektrofotometer Infra Merah (IR), tinjauan tentang
Gas Cromatography­Mass Spectrofotometer (GC­MS)
BAB III METODE PENELITIAN
Metode penelitian berisi tentang sampel penelitian, variabel
penelitian, metode pengumpulan data dan metode analasis
data.
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
Pada bab ini berisi mengenai hasil penelitian dan pembahasan
hasil penelitian yang dilakukan oleh peneliti di laboratorium
Kimia FMIPA UNNES.
BAB V PENUTUP
Penutup berisi simpulan dan saran­saran.
C. Bagian Akhir
Bagian ini terdiri dari daftar pustaka dan lampiran­lampiran. 

Page 21
6
BAB II
LANDASAN TEORI
A. Tinjauan Tentang Bunga Krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium)
Krisan merupakan tanaman bunga hias berupa perdu dengan sebutan lain
Seruni atau Bunga emas (Golden Flower) yang berasal dari dataran Cina.
Krisan yang berasal dari dataran Cina, dikenal dengan Chrysanthenum
indicum (kuning), Chrysanthenum morifolium (ungu dan merah muda) dan
Chrysanthenum daisy (bulat, ponpon). Pada tahun 797 bunga krisan dijadikan
sebagai simbol kekaisaran Jepang dengan sebutan Queen of The East
(Reginawanti:1999).
Tanaman krisan yang berasal dari Cina dan Jepang menyebar ke kawasan
Eropa dan Perancis pada tahun 1795. Sejak tahun 1940, bunga krisan
dikembangkan secara komersial di seluruh dunia. Daerah sentra produsen
bunga krisan di Indonesia antara lain: Cipanas, Cisarua, Sukabumi, Lembang
(Jawa Barat), Bandungan (Jawa Tengah), Brastagi (Sumatera Utara).
(Reginawanti:1999).
Klasifikasi botani tanaman hias krisan adalah sebagai berikut:
Divisi 
: Spermathophyta
Sub Divisi : Angiospermae
Famili 
: Asteraceae
Genus 
: Chrysanthemum
Species
: C. morifolium Ramat, C. indicum, C. daisy dll 

Page 22
7
Gambar a) Chrysanthemum morifolium, b) Krisan aster 
c) Krisan pompon, d) Chrysanthemum cinerariaefolium
Sumber : Reginawanti,1999
a
d
c

Page 23
8
Bentuk daun krisan khusus pada bagian tepi tampak bercelah dan
bergerigi. Daun tersebut tersusun berselang­seling pada cabang atau batang.
Sedangkan batangnya tumbuh tegak, berstruktur lunak, dan berwarna hijau.
Namun demikian, bila batang dibiarkan terus tumbuh, maka batang pun akan
menjadi keras berkayu dan warnanya menjadi hijau kecoklat­coklatan.
Bunga krisan tumbuh tegak pada ujung tanaman dan tersusun dalam
tangkai berukuran pendek sampai panjang. Bentuk bunganya beraneka ragam
dan bisa dikelompokkan menjadi 5 golongan sebagai berikut: 
1. Tunggal
Pada setiap tangkai hanya memiliki satu kuntum bunga. Piringan dasar
bunga sempit dan susunan mahkota hanya satu lapis.
2. Anemon
Sekilas mirip dengan bunga tunggal, tapi piringan dasar bunganya lebih
tebal dan lebar.
3. Besar 
Di setiap tangkai hanya terdapat satu kuntum, tetapi ukurannya besar
(bisa mencapai 10 cm). 
4. Pompon 
Karakteristik bentuk bunga pompon adalah bulat mirip bola, mahkota
bunga menyebar ke segala penjuru, dan piringan dasar bunganya tidak
tampak. 
5. Dekoratif 
Sesuai namanya, penampilannya memang sangat dekoratif, mempunyai 

Page 24
9
mahkota bunga bertumpuk­tumpuk rapat, di bagian tengah pendek dan
bagian tepinya memanjang.
Kuntum bunga krisan juga memiliki karakter masing­masing, antara lain
(Anonim:2005) : 
a. Standar 
Setiap tangkai memiliki satu buah kuntum bunga, biasanya berukuran
besar. Contohnya: krisan Shamrock, dark red pompon, regal mist,
Borholm, dan sebagainya. 
b. Spray 
Setiap tangkai memiliki sekitar 10­20 buah kuntum bunga, namun
diameternya hanya sekitar 2­3 cm. Contohnya krisan Puma, Salmon,
Granada, Klondike, dan sebagainya.
Kegunaan Bunga Krisan 
1. Bunga krisan sering digunakan sebagai bunga potong dalam berbagai
kegiatan. Uniknya, warna bunga krisan bisa dikaitkan dengan 'makna'
kegiatan itu sendiri. Misalnya pada upacara kematian digunakan krisan
berbunga putih dan ungu, di hari Valentine digunakan krisan merah dan
pink, upacara pernikahan digunakan krisan putih, kuning, ungu, atau
merah. Dan pada kegiatan imlek banyak digunakan krisan merah dan
putih.
2. Sebagai bunga potong, krisan juga sebagai bahan dekorasi ruangan,
jambangan bunga, rangkaian aneka macam variasi bunga, dan
sebagainya. 

Page 25
10
Beberapa krisan yang digunakan sebagai bunga potong antara lain
(Anonim:2005) : 
a. Puma, berbunga putih, bentuk bunga anemon, diameter bunga dan
mata bunga 45 mm/25 mm.
b. Salmon, bentuk bunga tunggal, berwarna merah muda, diameter
bunga dan mata bunga 70 mm/15 mm.
c. Gold van Langen, bentuk bunga tunggal, berwarna kuning emas,
diameter bunga dan mata bunga 65 mm/18 mm. 
3. Selain sebagai bunga potong, krisan juga digunakan sebagai tanaman
hias yang ditanam dalam pot. Contohnya beberapa krisan asal Amerika
yang telah dikembangkan di Indonesia dan diberi nama­nama tokoh
wayang. Misalnya Krisan Shinta yang berbunga kuning, tipe tunggal,
dan ukuran bunga cukup besar, krisan Kunti yang berbunga putih
bersih, tipe anemone, dan krisan Srikandi dengan bunga merah tua
dengan bagian tengah kuning, tipe dekoratif.
Syarat pertumbuhan bunga krisan menurut Reginawanti(1999) adalah
sebagai berikut :
1. Tanaman krisan membutuhkan air yang memadai, tetapi tidak tahan
terhadap terpaan air hujan. Oleh karena itu untuk daerah yang curah
hujannya tinggi, penanaman dilakukan di dalam bangunan rumah
plastik.
2. Untuk menghasilkan bunga membutuhkan cahaya yang lebih lama
selain dengan sinar matahari yaitu dengan bantuan cahaya dari lampu 

Page 26
11
pijar. Penyinaran yang paling baik adalah pada waktu tengah malam
antara jam 22.30–01.00 dengan lampu 150 watt untuk areal 9 m2 dan
lampu dipasang setinggi 1,5 m dari permukaan tanah. 
3. Suhu udara terbaik untuk daerah tropis seperti Indonesia adalah antara
200­260C. Toleran suhu udara untuk tetap tumbuh adalah 170­300C.
4. Tanaman krisan membutuhkan kelembaban yang tinggi antara 90­95%
untuk pembentukan akar bibit, sedangkan untuk tanaman muda sampai
dewasa kelembaban yang dibutuhkan antara 70­80% dan diimbangi
dengan sirkulasi udara yang memadai.
5. Kadar CO2 yang ideal untuk memacu fotosintesa tanaman krisan antara
600­900 ppm. Pada pembudidayaan tanaman krisan dalam bangunan
tertutup, seperti rumah plastik, greenhouse, dapat ditambahkan CO2,
hingga mencapai kadar yang dianjurkan sebesar 600­900 ppm.
6. Tanah yang ideal untuk tanaman krisan adalah bertekstur liat berpasir,
subur, gembur dan drainasenya baik serta tidak mengandung hama dan
penyakit. Derajat keasaman tanah yang baik untuk pertumbuhan
tanaman sekitar 5,5­6,7.
B. Tinjauan Tentang Piretrum 
Bahan piretrum bersumber dari bunga krisan yang telah dikeringkan.
Tanaman Chrysanthemum cinerariaefolium ini memang bukan tanaman asli
Indonesia. 

Page 27
12
Menurut catatan Djisbar dkk (1999) dalam Novizan (2000), tanaman ini
pernah dikembangkan secara besar­besaran oleh pemerintah Indonesia di
Dieng Barat pada tahun 1950­an.
C. Tinjauan Tentang Piretrin 
Bahan mentah dari bunga krisan kering disebut sebagai piretrum,
sedangkan piretrin merupakan istilah untuk 6 senyawa yang bersifat
insektisida yang dikandung dalam piretrum. Piretrum umumnya mengandung
0,9­1,3% piretrin (Novizan:2000).
Piretrin merupakan hasil ekstraksi dari bubuk mentah piretrum sebagai
resin yang dapat dipakai untuk insektisida komersial. Satu koma enam liter
piretrin dapat diperoleh dengan melarutkan satu kilogram bubuk piretrum ke
dalam 5,4 liter etanol (Tempo:Desember 1993).
Senyawa piretrin memiliki densitas ~0,859 g/mL pada suhu 200C, indek
bias 1,45; titik didih 750C dan penyimpanannya pada suhu 2­80C. Senyawa
piretrin bekerja dengan cara mengganggu jaringan syaraf serangga. Piretrin
dapat bekerja dengan cepat dan dapat langsung membuat serangga pingsan.
Piretrum memiliki daya racun yang rendah pada manusia dan mamalia.
Kucing adalah salah satu contoh mamalia yang sangat peka terhadap piretrin.
Piretrin lebih beracun bagi mamalia jika tercium (inhalasi) karena inhalasi
menyediakan lebih banyak jalur bagi piretrin mencapai aliran darah yang
menuju ke otak. Jika termakan, daya racun piretrin sangat rendah, karena tidak
segera terserap oleh saluran pencernaan dan cepat dinetralisir oleh asam
lambung. 

Page 28
13
Piretrin adalah racun kontak yang tidak meninggalkan residu, sehingga
pestisida ini sering disebut sebagai pestisida yang paling aman bagi
lingkungan. Piretrin cepat terurai oleh sinar matahari dan kelembaban udara.
Penguraian yang lebih cepat terjadi pada kondisi asam dan basa.
O
CH2
CH3
H
O
O
H
CH3
H3C
H
H3C
H3C
PYRETHRIN I
O
CH2
CH3
H
O
O
H
CH3
H3C
H
H3C
O
O
H3C
PYRETHRIN II
O
CH3
CH3
H
O
O
H
CH3
H3C
H
H3C
O
H3C
O
CINERIN II
O
CH3
CH3
H
O
O
H
CH3
H3C
H
H3C
H3C
H3C
CINERIN I
O
CH3
H
O
O
H
CH3
H3C
H
H3C
O
H3C
O
CH3
JASMOLIN II
O
CH3
H
O
O
H
CH3
H3C
H
H3C
H3C
CH3
JASMOLIN I
Gambar 2. Enam senyawa yang bersifat insektisida yang
terkandung dalam piretrum
(Buchel:1986)
Piretrin I
Piretrin II
Cinerin I
Cinerin II
Jasmolin I
Jasmolin II 

Page 29
14
piretrin I
IUPAC: (Z)­(S)­2­metil­4­okso­3­(penta­2,4­dienil)siklopentana­2­enil
(1R,3R)­2,2­dimetil­3­(2­metilpropana­1­
enil)siklopropanakarboksilat
atau
(Z)­(S)­2­ metil ­4­okso­3­(penta­2,4­dienil)siklopentana­2­
enil (1R)­trans­2,2­dimetil­3­(2­ metilpropana­1­enil)
siklopropanakarboksilat 
atau
(Z)­(S)­2­ metil ­4­okso­3­(penta­2,4­dienil)siklopentana­2­
enil (+)­trans­krisantemat
CAS:
(1S)­2­metil­4­okso­3­(2Z)­2,4­pentadienilsiklopentena­1­il
(1R,3R)­2,2­dimetil­3­(2­metil­1­propenil)
siklopropanakarboksilat
Molekul: C21H28O3
Struktur:
piretrin II
IUPAC: (Z)­(S)­2­metil­4­okso­3­(penta­2,4­dienil)siklopentana­2­enil
(E)­(1R,3R)­3­(2­metoksikarbonilpropana­1­enil)­2,2­dimetil
siklopropanakarboksilat
atau
O
CH2
CH3
H
O
O
H
CH3
H3C
H
H3C
H3C
PYRETHRIN I
Piretrin I 

Page 30
15
(Z)­(S)­2­metil­4­okso­3­(penta­2,4­dienil)siklopentana­2­enil
(E)­(1R)­trans­3­(2­ metoksikarbonilpropana ­1­enyl)­2,2­
dimetil siklopropanakarboksilat
atau
(Z)­(S)­2­metil­4­okso­3­(penta­2,4­dienil)siklopentana­2­enil
piretrat
CAS:
(1S)­2­metil­4­okso­3­(2Z)­2,4­pentadienil­2­siklopentena­1­il
(1R,3R)­3­[(1E)­3­metoksi­2­metil­3­okso­1­propenil]­2,2­
dimetil siklopropanakarboksilat
Molekul: C22H28O5
Struktur:
Jasmolin I
IUPAC: (Z)­(S)­2­metil­4­okso­3­(pent­2­enil)siklopentana­2­enil
(1R,3R)­2,2­dimetil­3­(2­metilpropana­1­enil)
siklopropanakarboksilat
atau
(Z)­(S)­2­metil­4­okso­3­(pent­2­enil)siklopentana­2­enil
(1R)­trans­2,2­dimetil­3­(2­metilpropana­1­enil)
siklopropanakarboksilat 
atau
(Z)­(S)­2­metil­4­okso­3­(pent­2­enil)siklopentana­2­enil (+)­
trans­krisantemat
O
CH2
CH3
H
O
O
H
CH3
H3 C
H
H3 C
O
O
H3 C
PYRETHRIN II
Piretrin II 

Page 31
16
CAS:
(1S)­2­metil­4­okso­3­(2Z)­2­pentenil­2­siklopentena­1­il
(1R,3R)­2,2­dimetil­3­(2­metil­1­propenil)
siklopropanakarboksilat
Molekul: C21H30O3
Struktur:
Jasmolin II
IUPAC: (Z)­(S)­2­metil­4­okso­3­(pent­2­enil)siklopentana­2­enil (E)­
(1R,3R)­3­(2­ metoksikarbonilpropana ­1­enil)­2,2­dimetil
siklopropanakarboksilat
atau
(Z)­(S)­2­metil­4­okso­3­(pent­2­enil)siklopentana­2­enil (E)­
(1R)­trans­3­(2­ metoksikarbonilpropana ­1­enil)­2,2­dimetil
siklopropanakarboksilat
atau
(Z)­(S)­2­metil­4­okso­3­(pent­2­enil)siklopentana­2­enil
piretrat
CAS:
(1S)­2­metil­4­okso­3­(2Z)­2­pentenil­2­siklopentena­1­il
(1R,3R)­3­[(1E)­3­metoksi­2­metil­3­okso­1­propenil]­2,2­
dimetil siklopropanakarboksilat
O
CH3
H
O
O
H
CH3
H3C
H
H3C
H3C
CH3
JASMOLIN I

Page 32
17
Molekul: C22H30O5
Struktur:
Cinerin I
IUPAC: (Z)­(S)­3­(but­2­enil)­2­metil­4­oksosiklopentana­2­enil
(1R,3R)­2,2­dimetil­3­(2­metilpropana­1­enil)
siklopropanakarboksilat
atau
(Z)­(S)­3­(but­2­enil)­2­metil­4­oksosiklopentana­2­enil (1R)­
trans­2,2­dimetil­3­(2­metilpropana­1­enil)
siklopropanakarboksilat 
atau
(Z)­(S)­3­(but­2­enil)­2­metil­4­oksosiklopentana­2­enil (+)­
trans­krisantemat
CAS:
(1S)­3­(2Z)­2­butenil­2­metil­4­okso­2­siklopentens­1­il
(1R,3R)­2,2­dimetil­3­(2­metil­1­propenil)
siklopropanakarboksilat
Molekul: C20H28O3
O
CH3
H
O
O
H
CH3
H3 C
H
H3 C
O
H3 C
O
CH3
JASMOLIN II

Page 33
18
Struktur:
Cinerin II
IUPAC: Z)­(S)­3­(but­2­enil)­2­metil­4­oksosiklopentana­2­enil (E)­
(1R,3R)­3­(2­ metoksikarbonilpropana ­1­enil)­2,2­dimetil
siklopropanakarboksilat
atau
(Z)­(S)­3­(but­2­enil)­2­metil­4­oksosiklopenta­2­enil (E)­
(1R)­trans­3­(2­ metoksikarbonilpropana ­1­enil)­2,2­dimetil
siklopropanakarboksilat
atau
(Z)­(S)­3­(but­2­enil)­2­metil­4­oksosiklopenta­2­enilpiretrat
CAS:
(1S)­3­(2Z)­2­butenil­2­metil­4­okso­2­siklopentena­1­il
(1R,3R)­3­[(1E)­3­metoksi­2­metil­3­okso­1­propenil]­2,2­
dimetil siklopropanakarboksilat
Molekul: C21H28O5
Struktur:
O
CH3
CH3
H
O
O
H
CH3
H3C
H
H3C
H3C
H3C
CINERIN I
O
CH3
CH3
H
O
O
H
CH3
H3C
H
H3C
O
H3C
O
CINERIN II

Page 34
19
D. Tinjauan Tentang Metode Ekstraksi
Ekstraksi adalah proses atau pemisahan atau isolasi dua atau lebih
komponen dengan menambahkan suatu pelarut yang hanya dapat melarutkan
salah satu komponennya saja. Cara ini berguna untuk memisahkan penyusun
yang dimulai dari suatu campuran lewat pelarutan selektif (Arsyad:2001).
Ekstraksi meliputi distribusi zat terlarut diantara dua pelarut yang tidak
dapat campur. Pelarut yang umum dipakai adalah air dan pelarut organik lain
seperti kloroform, eter atau pentana. Perbandingan aktivitas zat terlarut
diantara dua pelarut yang tidak saling bercampur dinyatakan dengan koefisien
distribusi (KD). 
[A]1
KDA=­­­­­­­­­
[A]2
KDA = Koefisien distribusi zat terlarut A
[A]1 = Aktivitas zat terlarut A pada pelarut 1
[A]2 = Aktivitas zat terlarut A pada pelarut 2
(Tim Dosen:2003)
Dalam prosedur ekstraksi, zat­zat terlarut akan terdistribusi diantara
lapisan air dan lapisan organik sesuai dengan perbedaan kelarutannya
Pada ekstraksi senyawa­senyawa organik dari larutan berair, selain air atau
eter, biasanya digunakan pula etil asetat, benzena, kloroform, dan sebagainya.
Ekstraksi lebih efisien bila dilakukan berulangkali dengan jumlah pelarut yang
lebih kecil daripada bila jumlah pelarutnya banyak tapi ekstraksinya hanya
sekali.
Pelarut yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah metanol,
kloroform, dan heksana. Metanol atau metil alkohol (CH3OH) bersifat polar 

Page 35
20
dan larut dalam air, memiliki titik didih 64,70C dan titik beku –980C.
Kloroform atau triklormetana (CHCl3) memiliki titik didih 61,30C dan titik
beku –63,50C. Kloroform merupakan cairan tak warna, bersifat toksik yaitu
dapat merusak hati dan tidak larut dalam air karena bersifat non polar.
Heksana termasuk golongan alkana CnH2n+2. Heksana merupakan cairan
yang tidak berwarna, memiliki titik didih 690C dan titik beku –94,30C, tidak
larut dalam air (non polar) dan memiliki rumus struktur C6H14. Pada umumnya
heksana dimanfaatkan sebagai pelarut karena sifatnya yang inert, tidak
bereaksi dengan komponen yang akan disintesis.
E. Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Pada hakekatnya KLT merupakan metoda kromatografi cair yang
melibatkan dua fasa yaitu fasa diam dan fasa gerak. Fasa geraknya berupa
campuran pelarut pengembang dan fasa diamnya dapat berupa serbuk halus
yang berfungsi sebagai permukaan penyerap (kromatografi cair­padat) atau
berfungsi sebagai penyangga untuk lapisan zat cair (kromatografi cair­cair).
Fasa diam pada KLT sering disebut penyerap walaupun berfungsi sebagai
penyangga untuk zat cair di dalam sistem kromatografi cair­cair. Hampir
segala macam serbuk dapat dipakai sebagai penyerap pada KLT, contohnya
silika gel (asam silikat), alumina (aluminium oksida), kiselgur (tanah
diatomae) dan selulosa. Silika gel merupakan penyerap paling banyak dipakai
dalam KLT
Alumina berbeda dengan silika gel yang bersifat sedikit asam dan sering
dipakai untuk pemisahan basa. Kiselgur dan selulosa merupakan bahan 

Page 36
21
penyangga lapisan zat cair yang dipakai dalam sistem kromatografi cair­cair.
Kromatografi jenis ini selalu dipakai untuk pemisahan senyawa polar seperti
asam amino, karbohidrat, nukleotida dan berbagai senyawa alam lainnya.
Lapisan silika gel atau alumina yang akan dipakai sebagai penyerap
diusahakan tidak mengandung banyak air, karena jika tidak maka air akan
menempati semua titik penyerapan sehingga tidak akan ada pelarut yang
melekat. Menurut Gritter (1991), penampakan bercak pada KLT menggunakan
larutan ninhidrin dan senyawa yang terpisah dapat diidentifikasi dengan
menghitung harga Rf (Retardation Factor) yaitu :
Rf = Jarak yang ditempuh komponen
Jarak yang ditempuh eluen
Harga Rf komponen murni dapat dibandingkan dengan harga Rf senyawa
standar, karena pada kondisi tertentu suatu senyawa akan memiliki harga Rf
yang sama. 
Faktor­faktor yang mempengaruhi harga Rf antara lain: tebal lapisan
penyerap, kadar air, jenis eluen, suhu, tingkat kejenuhan bejana oleh uap eluen
dan ukuran partikel (Tim dosen:1993).
F. Spektrofotometer Infra Merah (IR)
Spektroskopi infra merah adalah suatu metoda analisis yang didasarkan
pada penyerapan sinar infra merah. Fungsi utama dari spektroskopi infra
merah adalah untuk mengenal struktur molekul (gugus fungsional).
Spektroskopi infra merah adalah grafik dari persentasi transmitansi dengan
panjang gelombang atau penurunan frekuensi. Tiap lekukan yang disebut 

Page 37
22
gelombang atau puncak menunjukkan adsorbsi dari radiasi inframerah oleh
cuplikan pada frekuensi tersebut (Fessenden&Fessenden:1981).
Tabel 1. Data Korelasi Spektra Inframerah
Tipe vibrasi
Frekuensi (cm­1) Panjang gelombang
C­H Alkana (rentangan)
­CH3 (bengkokan)
­CH2­ (bengkokan)
Alkena (rentangan)
(Serapan
keluar
bidang)
Aromatik (rentangan)
(Serapan
keluar
bidang)
Alkuna (rentangan)
Aldehid
C O Alkena
Aromatik
C ═ C Alkuna
C O Aldehid
Keton
Asam Karboksilat
Ester
Amida
Anhidrida
Asam Klorida
C O Alkohol, ester, eter,
Asam karboksilat,
Anhidrida
O H Alkohol, Fenol
Ikatan –H
2850 – 3000
1400 dan 1375
1465
3000 – 3100
650 – 1000
3050 – 3159
690 – 900
ą330
2800 – 2900
2700 – 2800
1600 – 1680
1475 – 1600
2100 – 2250
1720 – 1740
1700 – 1725
1730 – 1750
1640 – 1670
1760 dan 1810
1000 – 1300
1800
1000 – 1300
3600 – 1650
1500 ­ 3200
3,33 – 3,51
6,90 dan 7,27
6,83
3,23 – 3,33
10,0 – 15,3
3,17 – 3,28
11,1 – 14,5
+3,03
3,45 – 3,57
3,57 – 3,70
5,95 – 6,25
6,25 dan 6,78
4,44 – 4,75
5,75 – 5,81
5,80 – 5,87
5,80 – 5,88
5,71 – 5,78
6,00 – 6,10
5,25 dan 5,68
5,56
7,69 – 10,0
2,74 – 2,78
2,85 – 3,13
(Widodo, Nanik: 2002)
Bagian dari spektrofotometer IR adalah :
1. Sumber sinar
Sumber sinar IR pada umumnya berupa zat inert yang dipanaskan dengan
listrik. 

Page 38
23
2. Monokromator
Monokromator IR terdiri dari sistem celah masuk dan celah keluar, alat­
alat pendispersi (kisi difraksi, prisma) dan beberapa cermin untuk
memantulkan kembali dan memfokuskan berkas sinar.
3. Detektor
Jenis detektor yang digunakan untuk mendeteksi sinar IR adalah detektor
kalor atau detektor yang didasarkan pada hantaran foton.
4. Rekorder
Rekorder merupakan alat pembacaan atau perekam spektrum.
Gambar 3. Diagram Spektrofotometer IR
G. Gas Cromatography­Mass Spectrofotometer (GC­MS)
GC­MS merupakan gabungan antara kromatografi gas dengan
spektrometer massa. Sampel yang dianalisis menggunakan GC­MS akan
menunjukkan berat molekul senyawa yang dianalisis.
Kromatografi gas adalah suatu metoda pemisahan campuran menjadi
komponen­komponen penyusunnya. Campuran yang dipisahkan dengan
metoda ini harus mudah menguap.
Sumber sinar
rekorder
detektor
Wadah sampel
monokromator 

Page 39
24
Kromatografi gas dapat digunakan untuk analisis kuantitatif secara
organik. Cuplikan dalam bentuk uap dapat dibawa oleh aliran gas ke dalam
kolom pemisahan, hasil pemisahan dapat dianalisis dengan kromatografi ini.
Jumlah puncak menunjukkan senyawa yang terdapat dalam cuplikan
sedangkan luas permukaan menunjukkan konsentrasi senyawa.
Spektrometer massa merupakan alat untuk menentukan massa (berat)
molekul. Hasil­hasil yang dibentuk, ion­ion tidak bermuatan, yang massa­
massa limpahan relatifnya ditunjukkan dalam spektrum massa
(Sastrohamidjojo,2001).
Gambar 4. Skema Metoda Spektrofotometri Massa (Hendayana dkk:1994) 
Penganalisis massa
Sistem masukan
sampel
pembacaan
Detektor sinyal
Sumber ion 

Page 40
25
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Sampel Penelitian
Sampel adalah sebagian atau wakil dari populasi yang diteliti
(Suharsimi:1993). Sampel dalam penelitian ini adalah cuplikan bunga krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium) yang diperoleh disentra budidaya bunga
krisan Bandungan­Jawa Tengah. 
B. Variabel Penelitian
Variabel yang digunakan dalam penelitian ini adalah :
1. Variabel Bebas
Variabel bebas yaitu variabel yang diselidiki pengaruhnya terhadap
variabel terikat. Variabel bebas dalam penelitian ini adalah pelarut untuk
karakterisasi senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam bunga
krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium).
2. Variabel Terikat
Variabel terikat yaitu variabel yang menjadi titik pusat penelitian. Variabel
terikat dalam penelitian ini adalah zat metabolit sekunder hasil
karakterisasi ekstrak bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium).
C. Alat dan Bahan 
Alat­alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah :
a. Oven (Mammert 854 Schwabach)
b. Gelas ukur (100 mL) 

Page 41
26
c. Erlenmeyer (Pyrex 250 mL)
d. Evaporator (Eyela SB 651)
e. Plat silika gel
f. Soklet volume 500 mL
g. Kromatografi kolom
h. Spektrofotometer IR (Shimadshu FTIR 8201 PC)
i. GC­MS (Shimadshu QP­2010S) 
Bahan­bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah :
a. Bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium)
b. Metanol (Merck) (Kadar 99,9% ρ=0,790)
c. Heksana (Merck)
d. Pereaksi Dragendorf
e. Kloroform (Merck) (Kadar 99­99,4% ρ=1,47)
f. Silika Gel G (Tipe 60)
D. Prosedur penelitian
1. Penyiapan sampel
Bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium) segar yang telah dipilih,
dilayukan, dan dipotong kecil­kecil. Dimasukkan kedalam oven dengan
suhu 400­500C. Tujuan dikeringkan adalah agar kadar air yang ada pada
bunga berkurang sehingga memudahkan pada saat ekstraksi. Pengeringan
dengan oven membantu daun menjaga penguapan yang berlebihan karena
suhu bisa diatur dan menghindari dari pengotor (bakteri, serangga) yang
tidak diinginkan. 

Page 42
27
2. Uji pendahuluan
Bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium) yang telah kering
diekstrak dengan heksana (pelarut 1) sehingga diperoleh filtrat I dan
residu I. Filtrat I diuji dengan reagen dragendorf (+) berwarna oranye.
Residu I diekstrak dengan kloroform (pelarut 2) sehingga didapat filtrat II
dan residu II. Filtrat II diuji dengan reagen dragendorf (+) berwarna
oranye. Residu II diekstrak dengan metanol (pelarut 3) sehingga didapat
filtrat III dan residu III. Filtrat III diuji dengan reagen dragendorf (+)
berwarna oranye. Sampel dengan uji dragendorf memberikan hasil (+)
kemudian dilakukan tahap karakterisasi.
3. Karakterisasi zat metabolit sekunder pada bunga krisan (Chrysanthemum
cinerariaefolium).
Karakterisasi zat metabolit sekunder pada bunga krisan (Chrysanthemum
cinerariaefolium) menggunakan pelarut metanol dengan metode sokhlet.
Ekstrak metanol dipekatkan menggunakan evaporator pada suhu 300C. Uji
KLT terhadap ekstrak pekat menggunakan eluen metanol:kloroform
(1:15). Ekstrak kloroform difraksinasi dengan kromatografi kolom
menggunakan eluen yang sama dengan kromatografi lapis tipis dengan
fasa diam silika gel. Hasil pemisahan dengan kromatografi kolom
selanjutnya diidentifikasi dengan IR, dan GC­MS. 

Page 43
28
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Penelitian
1. Preparasi sampel
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah cuplikan bunga
krisan (Crysanthemum cinerariaefolium) yang diperoleh disentra budidaya
bunga krisan Bandungan­Jawa Tengah.
Bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium) segar yang telah
dipilih, dilayukan, dan dipotong kecil­kecil. Dimasukkan kedalam oven
dengan suhu 400­500C. Pengeringan dengan oven membantu daun
menjaga penguapan yang berlebihan karena suhu bisa diatur dan
menghindari dari pengotor (bakteri, serangga) yang tidak diinginkan.
Penghalusan dilakukan dengan cara diblender, setelah terbentuk serbuk
diayak dengan menggunakan ayakan 50 mesh agar serbuknya menjadi
homogen.
Hasil perhitungan kadar airnya
Berat sebelum dioven 
= 580,3 gram
Berat sampel setelah dioven = 206,42 gram
Perhitungan kadar air sampel :
Kadar air yang hilang =
0
0

100
dioven
sebelum
Berat
dioven
setelah
Berat
­
dioven
sebelum
Berat
Ũ

Page 44
29
=
=
Ũ

0
0

100
3.580
42,206
3.580
64,42 %
Kadar air dalam sampel = 100% ­ 64,42% = 35,57%
2. Hasil Ekstraksi Soklet
Tabel 2. Hasil Ekstraksi Soklet
Sampel
Perlakuan
Pengamatan
Keterangan
Serbuk bunga
krisan
(Chrysanthemum
cinerariaefolium)
kering
Ampas Kering
Ampas Kering
Ekstraksi soklet
dengan heksana
Ekstraksi soklet
dengan
kloroform
Ekstraksi soklet
dengan metanol
Ekstrak
berwarna
kekuningan
Ekstrak
berwarna kuning
kecoklatan
Ekstrak
berwarna coklat
tua
Melarutkan
komponen
non polar
Melarutkan
komponen
yang
kepolarannya
sedang
Melarutkan
komponen
polar
Selanjutnya hasil ekstraksi dipekatkan dengan evaporator dan kemudian
diuji dengan pereaksi Dragendorf.
Tabel 3. Hasil Perlakuan Masing­masing Ekstraktan
Sampel
Perlakuan
Pengamatan 
Keterangan 
Ekstrak bunga
krisan dalam
heksana
Ekstrak bunga
krisan dalam
kloroform
Ekstrak bunga
krisan dalam
Pereaksi
Dragendorf
Pereaksi
Dragendorf
Pereaksi
Dragendorf
Ekstrak
berwarna kuning
Ekstrak
berwarna coklat
bening
Ekstrak
Ekstrak heksana
(­) terhadap uji
terpenoid
campuran
Ekstrak
kloroform (­)
terhadap uji
terpenoid
campuran
Ekstrak metanol
(+) terhadap uji 

Page 45
30
metanol
berwarna coklat
dan terdapat
endapan merah
bata
terpenoid
campuran
3. Identifikasi Senyawa Ekstrak Bunga Krisan. 
Identifikasi pertama yang dilakukan dengan menggunakan Kromatografi
Lapis Tipis. Hasil pemisahan dengan Kromatografi Lapis Tipis dapat
dilihat pada gambar 5. 

Page 46
31
A
B
C
D
E
F
G H I
J
K
L
Gambar 5. Hasil Kromatografi Lapis Tipis Setelah Disinari dengan Sinar
UV Menggunakan λ 365 nm.
Keterangan :
A. Larutan pengembang metanol : heksana = 1:29
B. Larutan pengembang metanol : heksana = 1:10
C. Larutan pengembang metanol : heksana = 1:1
D. Larutan pengembang metanol : heksana = 2:1
E. Larutan pengembang metanol : heksana = 10:1
F. Larutan pengembang metanol : kloroform = 1:1
G. Larutan pengembang metanol : kloroform = 1:14
H. Larutan pengembang metanol : kloroform = 1:29
I. Larutan pengembang metanol : kloroform = 1:15
J. Larutan Pengembang metanol : kloroform = 1:10
K. Larutan pengembang kloroform murni
L. Larutan pengembang heksana murni
Berdasarkan hasil Kromatografi Lapis Tipis diperoleh pemisahan paling
baik dengan menggunakan larutan pengembang metanol:kloroform (1:15).
Larutan pengembang metanol:kloroform (1:15) ini selanjutnya digunakan
sebagai eluen untuk kromatografi kolom.
Berdasarkan tabel 3, ekstrak bunga krisan dalam metanol menunjukkan uji
positif terhadap pereaksi dragendorf, selanjutnya ekstrak dipisahkan
dengan kromatografi kolom.
Tabel 4. Hasil Kromatografi Kolom
Sampel
No. botol
Pengamatan
Ekstrak bunga krisan
dalam pelarut metanol
1 – 16
17 – 23
24 – 45
46 – 54
55 – 63
Jernih
Coklat
Coklat jernih
Kuning jernih
Bening 

Page 47
32
Kemudian fraksi hasil kromatografi kolom dilakukan pengelompokan
fraksi dengan menggunakan uji kromatografi lapis tipis dengan
menggunakan larutan pengembang metanol:kloroform (1:15).
Tabel 5. Hasil KLT dari Ekstrak Bunga Krisan
No. Fraksi No. Botol
Bercak
Rf
1
2
3
4
5
6
7
Fraksi 1
Fraksi 2
Fraksi 3
Fraksi 4
Fraksi 5
Fraksi 6
Fraksi 7
1 – 16
17
18 – 19
20 – 23
24 – 45
46 – 54
55 – 63
Tidak ada
3 noda
5 noda
6 noda
5 noda
3 noda
Tidak ada
­
0,775; 0,875; 0,95
0,3; 0,55; 0,65; 0,8; 0,925
0,05; 0,225; 0,48; 0,6; 0,73; 0,86
0,09; 0,2; 0,29; 0,53; 0,78
0,3; 0,4; 0,53
­
Hasil pemisahan dengan kromatografi lapis tipis dapat dilihat pada gambar
5. 
Page 48
33
Gambar 6. Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Metanol Bunga Krisan
Menggunakan Sinar UV dengan λ 365 nm.
Dari hasil KLT didapat harga Rf yang sama dikelompokkan menjadi satu
fraksi, selanjutnya dikarakterisasi dengan IR dan GC­MS. 
B. Pembahasan
Serbuk bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium) dibungkus
dengan kertas saring dan diekstraksi dengan alat soklet menggunakan tiga
macam pelarut. Pelarut yang pertama menggunakan heksana dengan tujuan
melarutkan komponen non polar. Ampas hasil ekstraksi dengan heksana
dikeringkan dengan cara diangin­anginkan sampai kering. Pelarut yang kedua
yaitu kloroform dengan tujuan melarutkan komponen­komponen yang
mempunyai kepolaran sedang. Ampas hasil ekstraksi kloroform dikeringkan
dengan cara diangin­anginkan. Pelarut yang ketiga yaitu metanol dengan
tujuan untuk melarutkan komponen­komponen yang polar. Selanjutnya
masing­masing hasil ekstraksi dipekatkan dengan evaporator pada suhu 300C
dan diuji dengan Dragendorf. Berdasarkan tabel 3 ekstrak yang menunjukkan 

Page 49
34
uji positif dengan pereaksi dragendorf dipisahkan dengan menggunakan
kromatografi kolom, pertama­tama yang harus dilakukan adalah
mengaktifkan silika dengan mengoven silika sebanyak 10 gram pada suhu
110oC selama 4 jam. Kemudian silika gel dibuat bubur dengan menambahkan
pelarut n­heksana sebanyak 35 mL, diaduk sampai rata dan dimasukkan
kedalam kolom kromarografi dengan hati­hati, selanjutnya kolom diisi dengan
n­heksana dan ditutup rapat­rapat agar kolom tidak kering. Kolom didiamkan
selama satu malam dengan tujuan agar kolom kromatografi jenuh, homogen
dan tidak ada gelembung udara sehingga dapat memisahkan sampel dengan
baik. Larutan n­heksana yang berada diatas bubur diambil dengan cara
membuka kran pada bagian bawah kolom sampai tersisa ą0,5cm. Langkah
selanjutnya adalah memasukkan sampel ke kolom kromatografi, sampel
dibiarkan terjebak dalam fase diam dan diikuti eluennya. Hasil kromatografi
ditampung dalam botol setiap 1ml. 
Pemilihan eluen digunakan dengan cara coba­coba, yaitu membuat
komposisi perbandingan antara pelarut metanol, kloroform dan heksana yang
bertujuan untuk mendapatkan hasil perbandingan yang baik sehingga dapat
digunakan sebagai eluen pada kromatografi kolom yang ditunjukkan pada
gambar 5.
Berdasarkan hasil kromatografi lapis tipis pada gambar 5, diperoleh
pemisahan paling baik dengan menggunakan larutan pengembang
metanol:kloroform (1:15). Larutan pengembang metanol:kloroform(1:15) ini
digunakan sebagai eluen untuk kromatografi kolom. Hasil kromatografi kolom 

Page 50
35
ekstrak bunga krisan dalam metanol menghasilkan 63 botol (tabel 4). Untuk
botol 1–16 didapat larutan hasil pemisahan berwarna jernih. Botol 17–23
larutan berwarna coklat. Botol 24–45 larutan berwarna coklat jernih. Botol
46–54 larutan berwarna kuning jernih. Botol 55­63 larutan berwarna bening.
Kemudian botol hasil pemisahan kromatografi kolom diuji dengan KLT
menggunakan eluen metanol:kloroform(1:15) untuk mengelompokkan fraksi­
fraksi menurut nilai Rf yang sama (tabel 5) dan gambar pemisahannya
ditunjukkan pada gambar 6. Berdasarkan tabel 5, botol 1­16 merupakan fraksi
ke­1 yang tidak memiliki nilai Rf. Botol 17 merupakan fraksi ke­2 memiliki 3
noda dengan nilai Rf 0,775; 0,875; 0,95. Botol 18­19 merupakan fraksi ke­3
memiliki 5 noda dengan nilai Rf 0,3; 0,55; 0,65; 0,8; 0,95. Botol 20­23
merupakan fraksi ke­4 memiliki 6 noda dengan nilai Rf 0,05; 0,225; 0,48; 0,6;
0,73; 0,86. Botol 24­45 merupakan fraksi ke­5 memiliki 5 noda dengan nilai
Rf 0,09; 0,2; 0,29; 0,53; 0,78. Botol 46­54 merupakan fraksi ke­6 memiliki 3
noda dengan nilai Rf 0,3; 0,4; 0,53. Botol 55­63 merupakan fraksi ke­7 yang
tidak memiliki noda. Kemudian dilanjutkan dengan karakterisasi
menggunakan IR dan GC­MS.
b. Hasil karakterisasi spektrofotometer inframerah (IR) ekstrak bunga krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium)
Spektrum hasil IR dari kromatogram kolom disajikan pada gambar 7 

Page 51
36
Gambar 7. Spektrum IR dari Kromatogram Kolom Hasil Percobaan
Data interpretasi spektrum IR dari kromatogram kolom disajikan pada tabel
6
Tabel 6. Data Interpretasi Spektrum IR dari Kromatografi Kolom.
No.
Puncak serapan (cm­1)
Jenis vibrasi
1 1026,1 ; 2129,3
C=C alkena
2 1172,6 ; 1249,8
CO2R ester
3 1365,5 ; 1442,7 ; 1504,4
CH2/CH3 lekukan/bending
4 1651,0
C=O karbonil
5 2846,7 ; 2947,0
C­H siklik/ alkana
6 3394,5
­OH gugus asam
Berdasarkan tabel diatas dapat diperkirakan gugus­gugus fungsi dari
senyawa penyusun zat metabolit sekunder dalam ekstrak bunga krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium) adalah sebagai berikut : Pita lebar dan
kuat pada 3394,5cm­1 adalah petunjuk adanya guguus ­OH. Pita pada 

Page 52
37
2846,7 cm­1 dan 2947,0 cm­1 merupakan serapan gugus C­H alkana yang
diperkuat dengan pita pada 1365,5; 1442,7 ; 1504,4 cm­1
yang
menunjukkan –CH3/­CH2 bending/lekukan. Pita 1172,6 cm­1 dan 1249,8
cm­1 merupakan serapan gugus ester yang diperkuat oleh pita pada 1651,0
cm­1 yang menunjukkan adanya C=O karbonil dan pita 3394,5 cm­1 yang
menunjukkan gugus –OH. Pita pada 1026,1 cm­1dan 2129,3 cm­1
menunjukkan adanya serapan gugus C=C alkena.
c. Karakterisasi GC­MS ekstrak bunga krisan 
Pada tahapan ini ekstrak bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium)
yang diperoleh setelah diuji dengan IR kemudian diidentifikasi dengan
menggunakan kromatografi gas­spektrometri massa (GC­MS) SHIMADZU
QP­2010S yang dilakukan dilaboratorium kimia UGM yogyakarta.
Kondisi operasi kromatografi gas–spektrometri massa SHIMADZU QP­
2010S adalah :
Jenis pengion : EI (Electron Impact)
Jenis Kolom
: Rtx­5MS panjang 30 meter dan diameter 0,25 mm
Suhu kolom
: 70oC (5 menit) – 280oC (10 menit)
Laju kolom
: 0,5 mL/min
Gas pembawa : helium 13,7 kPa
Suhu detektor : 300oC
Suhu injektor : 280oC
Injektor mode : split suhu 70oC – 280oC 
Kromatogram GC­MS dari ekstrak bunga krisan (Chrysanthemum
cinerariaefolium) disajikan pada gambar 8. 

Page 53
38
Gambar 8. Kromatogram GC­MS dari Ekstrak Bunga Krisan 
(Chrysanthemum cinerariaefolium)
Data waktu retensi kromatogram GC­MS dari ekstrak bunga krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium) disajikan pada tabel 7.
Tabel 7. Data Waktu Retensi Kromatogram GC­MS dari Ekstrak Bunga 
Krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium).
No. Waktu retensi
(menit)
Kadar
(%)
No.
Waktu retensi
(menit)
Kadar
(%)
No. Waktu retensi
(menit)
Kadar
(%)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
3.947
4.087
5.119
7.126
11.206
12.319
12.674
12.898
14.047
14.345
14.447
15.585
16.232
17.272
17.785
0.51
0.71
4.16
0.46
0.44
0.34
0.39
5.47
0.57
0.39
0.55
0.88
14.22
1.14
2.58
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
17.858
17.968
18.337
19.102
19.162
19.374
19.807
20.066
20.162
20.302
20.454
20.729
20.892
21.068
21.268
0.73
0.76
2.49
0.48
0.57
0.66
1.44
2.51
2.52
2.13
1.25
0.77
0.47
4.59
1.15
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
21.441
21.508
22.525
22.626
22.915
23.052
23.210
23.291
23.628
24.212
24.706
24.783
28.282
29.585
32.891
1.31
0.79
1.77
2.98
3.01
1.54
12.66
2.06
2.56
4.03
2.66
1.95
4.43
1.30
1.62
Kromatogram GC­MS dari ekstrak bunga krisan (Chrysanthemum
cinerariaefolium) terdiri dari 45 puncak dominan, dari 45 puncak dominan 

Page 54
39
tersebut kemudian dilakukan penelusuan data spektrometri massa sebanyak
7 puncak yang memiliki %area diatas 4,00 % yaitu puncak nomor 3, 8, 13,
29, 37, 40 dan 43.
Puncak nomor 3 dengan waktu retensi (tR) 5,119 menit memiliki kadar
4,16%. Puncak nomor 8 dengan waktu retensi (tR) 12,898 menit memiliki
kadar 5,47%. Puncak nomor 13 dengan waktu retensi (tR) 16,232 menit
memiliki kadar 14,22%. Puncak nomor 29 dengan waktu retensi (tR) 21,068
menit memiliki kadar 4,59%. Puncak nomor 37 dengan waktu retensi (tR)
23,210 menit memiliki kadar 12.66%. Puncak nomor 40 dengan waktu
retensi (tR) 24,212 menit memiliki kadar 4,03%. Puncak nomor 43 dengan
waktu retensi (tR) 25,282 menit memiliki kadar 4,43%.
Penelusuran data spektrometri massa dengan bantuan komputer NIST
62 LIB terhadap 7 puncak dengan kadar diatas 4,00% menghasilkan
struktur senyawa yang disajikan pada tabel 8.
Tabel 8. Hasil Penelusuran Data Spektrometri Massa dari 
Kromatogram GC­MS.
No. Rumus
molekul
Berat
molekul
Nama
Struktur
1. C10H15O2
167
Asam trans­
krisantemik
C H
H 3 C
H 3 C
H
COOH
C H 3
H 3 C
H
2. C11H16O4
212
Asam trans­
piretroid
C
CH
H 3C
H
COOH
CH 3
H 3C
H
O
H 3C
O

Page 55
40
3. C11H14O2
178
Piretrolon
CH3
H
HO
O
CH2

4. C11H16O2
180
Jasmolon
CH3
H
HO
O
CH3

5. C10H14O2
166
Cinerolon
CH 3
H
H O
O
C H 3

Puncak nomor 3 dengan waktu retensi (tR) 5,119 menit memiliki kadar
4,16%. Spektra massa puncak nomor 3 dari kromatogram GC­MS disajikan
pada gambar 9.
Gambar 9. Spektra Massa Puncak Nomor 3 dari Kromatogram GC­MS
Dengan spektra massa puncak nomor 3, dapat diasumsikan bahwa
senyawa metabolit sekunder pada puncak nomor 3 mengalami fragmentasi
sebagai berikut: ion molekul pada m/e113 mengalami 2 pemecahan,
pemecahan pertama melepaskan •C (m/e 12) membentuk pecahan dengan 

Page 56
41
puncak m/e 101. Pemecahan yang kedua melepaskan •C2H6 (m/e 30)
membentuk pecahan dengan puncak m/e 83. ion molekul pada m/e 83
mengalami 2 pemecahan, pemecahan pertama melepaskan •C2H2O (m/e 42)
membentuk pecahan dengan puncak m/e 41. Pemecahan kedua melepaskan
•C2H2 (m/e 28) membentuk pecahan dengan puncak m/e 59, kemudian
puncak m/e 59 melepaskan •O (m/e 16) membentuk pecahan dengan
puncak m/e 43.
Fragmen­fragmennya diduga seperti pada gambar 10.
HC
H
C
C
CH3
H3C
C
OH
O
­C
HC
H
C
C
C
OH
O
­C2H2O
­C2H2
H2C
C
OH
O
­O
H2C
C
OH
HC
C
O
H2
C
C
CH3
H3C
C
OH
O
­2CH3
m/e =113
m/e =101
m/e =83
m/e =59
m/e =43
m/e =41
Gambar 10. Fragmentasi Senyawa Metabolit Sekunder 

Page 57
42
Berdasarkan Puncak Nomer 3.
Berdasarkan fragmentasi spektra massa puncak nomer 3 menghasilkan
bahwa senyawa puncak nomer 3 adalah asam trans piretroid dengan berat
molekul 212 dan kadarnya 4,16%.
Puncak nomor 8 dengan waktu retensi (tR) 12,898 menit memiliki
kadar 5,47%. Spektra massa puncak nomor 8 dari kromatogram GC­MS
disajikan pada gambar 11.
Gambar 11. Spektra Massa Puncak Nomer 8 dari Kromatogram GC­MS
Dengan spektra massa puncak nomor 8, dapat diasumsikan bahwa
senyawa metabolit sekunder pada puncak nomor 8 mengalami fragmentasi
sebagai berikut: ion molekul pada m/e 113 mengalami 4 pemecahan,
pemecahan pertama melepaskan •C2H5 (m/e 29) membentuk pecahan
dengan puncak m/e 84. Pemecahan kedua melepaskan ion molekul +C4H7
(m/e 55) membentuk radikal bebas dengan puncak m/e 60. Pemecahan
ketiga melepaskan •C2H8 (m/e 32) membentuk pecahan dengan puncak m/e
83, kemudian ion molekul pada m/e 83 melepaskan •C2H2O (m/e 42) 

Page 58
43
membentuk pecahan dengan puncak m/e 41. Pemecahan keempat
melepaskan •C2H4O2 (m/e 60) membentuk pecahan dengan puncak m/e 55.
Fragmen­fragmennya diduga seperti pada gambar 12.
C
O
OH
H3 C
­C4H7
HC
H
C
C
CH3
H3 C
C
OH
O
­C2H5
HC
H
C
C
C
OH
O
­C2H8
­C2H2O
C
O
HC
C
O
OH
H3 C
C
CH3
H3 C
CH
HC
H
C
C
H
C
OH
O
m/e =113
m/e =84
m/e =83
m/e =60
m/e =41
m/e =55
Gambar 12. Fragmentasi Senyawa Metabolit Sekunder 
Berdasarkan Puncak Nomer 8.
Berdasarkan fragmentasi spektra massa puncak nomer 8 menghasilkan
bahwa senyawa puncak nomer 8 adalah asam trans piretroid dengan berat
molekul 212 dan kadarnya 5,47%. 

Page 59
44
Puncak nomor 29 dengan waktu retensi (tR) 21,068 menit memiliki
kadar 4,59%. Spektra massa puncak nomor 29 dari kromatogram GC­MS
disajikan pada gambar 13.
Gambar 13. Spektra Massa Puncak Nomer 29 dari Kromatogram GC­MS
Dengan spektra massa puncak nomor 29, dapat diasumsikan bahwa
senyawa metabolit sekunder pada puncak nomor 29 mengalami fragmentasi
sebagai berikut: molekul pada m/e 372 mengalami 3 pemecahan,
pemecahan pertama melepaskan •C10H15O2 (m/e 167) membentuk pecahan
dengan puncak m/e 205. Pemecahan kedua melepaskan •C9H12O2 (m/e 152)
membentuk molekul dengan puncak m/e 220, kemudian puncak m/e 220
melepaskan •C2H6 (m/e 30) membentuk pecahan dengan puncak m/e 189,
kemudian puncak m/e 189 melepaskan •H2 (m/e 2) membentuk pecahan
dengan puncak m/e 187, kemudian puncak m/e 187 melepaskan •CH2 (m/e
14) membentuk pecahan dengan puncak m/e 173. Pemecahan ketiga
melepaskan •C11H15O4 (m/e 211) membentuk pecahan dengan puncak m/e
161, kemudian puncak m/e 161 melepaskan •H2 (m/e 2) membentuk
pecahan dengan puncak m/e 159. Ion molekul pada puncak dengan m/e 159 

Page 60
45
mengalami 2 pemecahan, pemecahan pertama melepaskan •C3HO (m/e 53)
membentuk pecahan dengan puncak m/e 105, kemudian puncak m/e 105
melepaskan •C2H2 (m/e 26) membentuk pecahan dengan puncak m/e 79.
Pemecahan kedua melepaskan •H2 (m/e 2) membentuk pecahan dengan
puncak m/e 145, kemudian puncak m/e 145 melepaskan •C (m/e 12)
membentuk pecahan dengan puncak m/e 133, kemudian puncak m/e 133
melepaskan •CH2 (m/e 14) membentuk pecahan dengan puncak m/e 119,
kemudian puncak m/e 119 melepaskan •C2H4 (m/e 28) membentuk pecahan
dengan puncak m/e 93, kemudian puncak m/e 93 melepaskan •C2H2 (m/e
26) membentuk pecahan dengan puncak m/e 67, kemudian puncak m/e 67
melepaskan •C (m/e 12) membentuk pecahan dengan puncak m/e 55,
kemudian puncak m/e 55 melepaskan •CH2 (m/e 14) membentuk pecahan
dengan puncak m/e 41. 
Fragmen­fragmennya diduga seperti pada gambar 14.
Berdasarkan fragmentasi spektra massa puncak nomer 29
menghasilkan bahwa senyawa puncak nomer 29 adalah asam trans
krisantemik dengan berat molekul 167 dan kadarnya 4,59%. 
Page 61
46
CH
H
C
C
CH3
H3C
C
O
H3C
O
H
C
C
H3C
C
O
CH
H2C
C
C
C
O
O
CH2
HC
CH
HC
CH2
CH3
H2C
H
C
C
CH3
H3C
C
O
CH
H2C
C
C
C
O
O
CH2
CH2
HC
H
C
C
C
O
CH
H2C
C
C
C
O
O
CH2
CH2
C
C
C
C
O
CH
H2C
C
C
C
O
O
CH2
CH2
C
C
C
C
O
C
H2C
C
C
H
C
O
O
CH2
HC
H2C
C
C
C
O
CH2
HC
CH
HC
CH2
CH3
C
HC
C
C
C
O
CH2
HC
CH
HC
CH2
CH3
C
HC
C
C
H
C
O
CH2
HC
CH
HC
CH2
H2C
C
C
H2C
O
CH2
HC
CH
HC
CH2
C
C
H2C
O
CH2
HC
CH
HC
CH2
C
HC
O
CH
HC
C
CH2
C
HC
O
C
CH2
­H2
­CH2
­H2
­H2
­C
­CH2
­C2H2
­CH2
­C3HO
C
HC
O
CH2 ­CH2
C
O
CH
H2C
C
C
C
O
O
CH2
HC
CH
HC
CH2
CH3
C
C
CH
HC
CH
HC
CH2
CH3
HC CH
HC CH
HC CH2
C
CH
O
­C2H2
m/e = 372
m/e = 205
m/e = 220
m/e = 189
m/e = 187
m/e = 173
m/e = 161
m/e = 159
m/e = 145
m/e = 133
m/e = 119
m/e = 93
m/e = 67
m/e = 55
m/e = 41
m/e = 105
m/e = 79
­2CH3
­2CH2

Gambar 14. Fragmentasi Senyawa Metabolit Sekunder
Berdasarkan Puncak Nomer 29. 

Page 62
47
Puncak nomor 37 dengan waktu retensi (tR) 23,210 menit memiliki
kadar 12.66%. Spektra massa puncak nomor 37 dari kromatogram GC­MS
disajikan pada gambar 15.
Gambar 15. Spektra Massa Puncak Nomer 37 dari Kromatogram GC­MS
Dengan spektra massa puncak nomor 37, dapat diasumsikan bahwa
senyawa metabolit sekunder pada puncak nomor 37 mengalami fragmentasi
sebagai berikut: ion molekul pada m/e 161 mengalami 2 pemecahan,
pemecahan pertama melepaskan •C4H6 (m/e 54) membentuk pecahan
dengan puncak m/e 109. Pemecahan kedua melepaskan •CH2 (m/e 14)
membentuk pecahan dengan puncak m/e 147. ion molekul pada puncak
dengan m/e 147 mengalami 3 pemecahan. Pemecahan pertama melepaskan
•C2H2 (m/e 26) membentuk pecahan dengan puncak m/e 121. Pemecahan
kedua melepaskan •C4H5 (m/e 53) membentuk pecahan dengan puncak m/e
95, kemudian puncak m/e 95 melepaskan •CH2 (m/e 14) membentuk
pecahan dengan puncak m/e 81. Pemecahan ketiga melepaskan •C3H2 (m/e
38) membentuk pecahan dengan puncak m/e 41 dan membentuk molekul
dengan puncak m/e 68. 

Page 63
48
Fragmen­fragmennya diduga seperti pada gambar 16.
H3C
CH2
O
H
CH2
­CH2
C
C
CH2
CH2
HC
C
H
H
C
CH2
C
H2C
O
­C2H2
­C3H2
C
O
CH
­C4H5
C
C
CH3
C
CH2
O
H2C
­CH2
C
C
CH3
C
CH2
O
HC
C
H
H3C
H
C
CH2
H3C
O
CH3
C
CH
HC
C
H
H
C
CH2
C
H3C
O
+
m/e =161
m/e =109
m/e =147
m/e =121
m/e =41
m/e =68
m/e =95
m/e =81
Gambar 16. Fragmentasi Senyawa Metabolit Sekunder 
Berdasarkan Puncak Nomer 37.
Berdasarkan fragmentasi spektra massa puncak nomer 37
menghasilkan bahwa senyawa puncak nomer 37 adalah piretrolon dengan
berat molekul 178 dan kadarnya 12,66%.
Puncak nomor 40 dengan waktu retensi (tR) 24,212 menit memiliki
kadar 4,03%. Spektra massa puncak nomor 40 dari kromatogram GC­MS
disajikan pada gambar 17. 

Page 64
49
Gambar 17. Spektra Massa Puncak Nomer 40 dari Kromatogram GC­MS
Dengan spektra massa puncak nomor 40, dapat diasumsikan bahwa
senyawa metabolit sekunder pada puncak nomor 40 mengalami fragmentasi
sebagai berikut: molekul pada m/e 180 mengalami 2 pemecahan,
pemecahan pertama melepaskan •C4H7 (m/e 55) membentuk pecahan
dengan puncak m/e 125. pemecahan kedua melepaskan •C2H3 (m/e 27)
membentuk pecahan dengan puncak m/e 153. ion molekul pada m/e 153
mengalami 2 pemecahan, pemecahan pertama melepaskan +C3H4O2 (m/e
72) membentuk molekul dengan puncak m/e 82. Pemecahan kedua
melepaskan H2O (m/e 18) membentuk pecahan dengan puncak m/e 135,
kemudian puncak m/e 135 melepaskan •C2H2 (m/e 26) membentuk pecahan
dengan puncak m/e 109. Ion molekul pada m/e 109 mengalami 3
pemecahan, pemecahan pertama melepaskan H2O (m/e 18) membentuk
pecahan dengan puncak m/e 91. pemecahan kedua melepaskan ion molekul
+C4H3O (m/e 67) membentuk radikal dengan puncak m/e 43. pemecahan
ketiga melepaskan •C3H6 (m/e 42) membentuk pecahan dengan puncak m/e 

Page 65
50
67, kemudian puncak m/e 67 melepaskan •C2H2 (m/e 26) membentuk
pecahan dengan puncak m/e 41.
Fragmen­fragmennya diduga seperti pada gambar 18. 
CH3
HO
H
O
CH2
H2C
H
C
C
H
C
H
H2
C
CH3
­C4H7
H
C
H
C
C
H
C
H
H2
C
CH3
C
O
­C3H6
­C3H4O2
­C4H3O
CH3
HO
H
O
H2
C
C
H
C
H
H2
C
CH3
­C2H2
­H2O
­C2H3
H2C
H
C
CH3
H
C
C
CH2
C
O
­C2H2
C
CH
O
HC
HO
H
O
H
C
C
H
C
H
H2
C
CH3
CH4
­H2O
H
C
H
C
C
H
C
H
H2
C
CH3
C
C
H
HC
O
C
H
C
C
C
H
H2
C
CH3
C
m/e =91
m/e =180
m/e =125
m/e =153
m/e =82
m/e =135
m/e =109
m/e =43
m/e =67
m/e =41

Gambar 18. Fragmentasi Senyawa Metabolit Sekunder 
Berdasarkan Puncak Nomer 40. 

Page 66
51
Berdasarkan fragmentasi spektra massa puncak nomer 40
menghasilkan bahwa senyawa puncak nomer 40 adalah jasmolon dengan
berat molekul 180 dan kadarnya 4,03%.
Puncak nomor 43 dengan waktu retensi (tR) 25,282 menit memiliki
kadar 4,43%. Spektra massa puncak nomor 43 dari kromatogram GC­MS
disajikan pada gambar 19.
Gambar 9. Spektra Massa Puncak Nomer 43 dari Kromatogram GC­MS
Dengan spektra massa puncak nomor 43, dapat diasumsikan bahwa
senyawa metabolit sekunder pada puncak nomor 43 mengalami fragmentasi
sebagai berikut: molekul pada m/e 166 mengalami 2 pemecahan,
pemecahan pertama melepaskan •C3H4 (m/e 40) membentuk pecahan
dengan puncak m/e 126. Pemecahan kedua melepaskan •C3H5 (m/e 41)
membentuk pecahan dengan puncak m/e 125, kemudian puncak m/e 125
mengalami 2 pemecahan, pemecahan pertama melepaskan H2O (m/e 18)
membentuk pecahan dengan puncak m/e 107. Pemecahan kedua
melepaskan •CH2O (m/e 30) membentuk pecahan dengan puncak m/e 95,
kemudian puncak m/e 95 melepaskan •CH2 (m/e 14) membentuk pecahan
dengan puncak m/e 81, kemudian puncak m/e 81 melepaskan •CH2 (m/e 

Page 67
52
14) membentuk pecahan dengan puncak m/e 67, kemudian pecahan m/e 67
melepaskan •C≡C (m/e 24) membentuk pecahan dengan puncak m/e 43,
kemudian pecahan m/e 43 melepaskan •H2 (m/e 2) membentuk pecahan
dengan puncak m/e 41.
Fragmen­fragmennya diduga seperti pada gambar 20.
O
CH3
OH
H
CH3
­C3H4
­C3H5
O
CH3
OH
H
CH2
­H2O
O
CH3
CH2
­CH2O
CH2
C
C
CH2
C
H3C
O
­CH2
O
CH3
OH
H
CH3
CH2
C
C
C
H3C
O
­CH2
C
H3C
O
C
C
H3C
O
C
C
HC
O
­C
C
m/e =166
m/e =126
m/e =125
m/e =107
m/e =95
m/e =81
m/e =67
m/e =43
m/e =41
Gambar 20. Fragmentasi Senyawa Metabolit Sekunder
Berdasarkan Puncak Nomer 43. 

Page 68
53
Berdasarkan fragmentasi spektra massa puncak nomer 43
menghasilkan bahwa senyawa puncak nomer 43 adalah cinerolon dengan
berat molekul 166 dan kadarnya 4,43%. 

Page 69
54
BAB V
SIMPULAN DAN SARAN
A. SIMPULAN
Dari hasil penelitian yang dilakukan dapat diambil kesimpulan sebagai berikut

1. Karakterisasi zat metabolit sekunder pada bunga krisan (Chrysanthemum
cinerariaefolium) dalam penelitian ini menggunakan metode ekstraksi.
Dari hasil analisis spektrometer inframerah (IR) dan kromatografi gas­
spektrometer massa (GC­MS) terhadap ekstrak bunga krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium) diketahui bahwa senyawa utama zat
metabolit sekunder yang terkandung dalam bunga krisan 
(Chrysanthemum cinerariaefolium) adalah asam trans krisantemik dengan
berat molekul 167 dan kadar 4,59% , asam trans piretroid dengan berat
molekul 212 dan kadar 9,63%, Piretrolon dengan berat molekul 178 dan
kadar 12,66%, Jasmolon dengan berat molekul 180 dan kadar 4,03%,
Cinerolon dengan berat molekul 166 dan kadar 4,43%.
2. Jenis pelarut yang cocok untuk karakterisasi zat metabolit sekunder pada
bunga krisan (Chrysanthemum cinerariaefolium) adalah metanol (pelarut
polar). 
B. SARAN
1. Sebelum menggunakan kromatografi kolom sebaiknya diuji terlebih
dahulu dengan kromatografi lapis tipis untuk mengetahui eluen terbaik 

Page 70
55
yang akan digunakan dalam kromatografi kolom sehingga diperoleh hasil
yang lebih murni.
2. Perlu dilakukan penelitian terhadap aplikasi pemakaian zat metabolit
sekunder sebagai bahan aktif pembuatan biopestisida dalam kehidupan
sehari­hari. 

Page 71
56
DAFTAR PUSTAKA
Achmad, Syamsul Arifin. 2004. Hutan Tropikal Indonesia dan Penelitian Kimia
Bahan Alam Dalam Penemuan Obat. Kelompok Kimia Organik Bahan
Alam Hayati Jurusan Kimia FMIPA Universitas Andalas. Padang:
Universitas Negeri Andalas.
Anonim. 1985. Pyretrin. Http://www.Bugpage.com
Anonim. 2001.
Waspada Lebih Baik Daripada Keracunan.
Http://www.tabliodnova.com
Anonim. 2005. Krisan, Si Ratu Pengusir Nyamuk. Http:// gunungkidul.net
Antonia Glynne, Jones. 2001. Pyrethrum. UK: The Journal Royal Society of
Chemstry.
Arsyad, M Natsir. 2001. Kamus Kimia: Arti dan Penjelasan Istilah. Jakarta: PT
Gramedia Pustaka Utama.
Budiyono, Suharto. 2001. Bahan Alam Pengendalian Hama. Yogyakarta: Bidang
Bina PTPh D.I Yogyakarta
Burright, Donald. 1988. Pyrethrum­Organic Methods Evaluation Branch OSHA
Analytical Laboratory. Utah: Salt Lake City. 
Daintith, John. 1999. Kamus Lengkap Kimia: Alih Bahasa Suminar Achmadi.
Jakarta: Erlangga.
Fessenden, R.J and J.S Fessenden. 1981. Organic Chemistry. Diterjemahkan Oleh
A.H Pudjatmaka.1992. Kimia Organik Edisi 3 Jilid 2. Jakarta:
Erlangga.
Gritter, Roy. J. 1991. Pengantar Kromatografi edisi Kedua; Alih Bahasa oleh
Kosasih Padmawinata. Bandung: ITB
Hammond, Stephen. 1999. Pyretrin (Pyrenone) Chemical Profile. New
York:Cornell University
Harborne, J.B. 1996. Metode Fitokimia Penentuan Cara Modern Menganalisis
Tumbuhan. Bandung: ITB 

Page 72
57
Kardinan, A., 2000, Pestisida Nabati, Tamuan dan Aplikasi, Jakarta. Penebar
Swadaya
Matsjeh, Sabiri. 2002. Kimia Hasil Alam Senyawa Metabolit Sekunder Tumbuhan
Flavonoid, Terpenoid dan Alkaloid. Jurusan Kimia FMIPA UGM.
Yogyakarta: Universitas Gajah Mada.
Masykuroh, Anik. 2005. Identifikasi Senyawa dalam Ekstrak Biji Buah Mahkota
Dewa dengan Pelarut Metanol. Tugas Akhir II. Jurusan Kimia FMIPA
UNNES. Semarang: UNNES. 
Natawigena, Hidayat. 1985. Pestisida dan Kegunaannya. Bandung: Universitas
Padjajaran.
Novizan, 2002, Membuat dan Memanfaatkan Pestisida Ramah Lingkungan,
Jakarta, PT. Agromedia Pustaka. 
Ong, De. 2003. Chemistry And Uses of pesticides 2
nd

edition­Modern Asia Edition
Reinhold. New York: Publishing Corporation.
Reginawanti. 1999. Krisan. Http:// www.deptan.go.id / ditlinhorti /makalah / bd
krisan. html
Robinson, Trevor. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Bandung: ITB.
Rukmana, Rahmat. 1997. Krisan. Yogyakarta: Kanisius Press.
Silverstein,R.M., G.C.Basseler And T.C. Moril. 1991. Spectrometric
Identifikation of Organic Compounds 4
th

Edition. New York:John
Wiley and sons Inc.
Sudjadi. 1985. Penentuan Struktur Senyawa Organik. Jakarta: Ghalia Indonesia 
Suharsimi, Arikunto. 1993. Prosedur Penelitian Suatu Pendekatan. Jakarta: Bina
Aksara.
Tim Dosen. 2003. Diktat kuliah Dasar Pemisahan Analitik. Semarang:Jurusan
Kimia FMIPA UNNES
Tim Dosen Kimia. 2003. Hand Out Pelatihan Instrumentasi GC­MS, NMR, FT­
IR, UV­Vis, dan X­Ray. Yogyakarta:Jurusan Kimia FMIPA UGM.
Widodo, A T ; Nanik wijayati. 2002. Penentuan Struktur Molekul. Jurusan Kimia
FMIPA UNNES. Semarang: UNNES. 

Page 73
58
Lampiran 1
Skema Cara Kerja
Bunga
Karakterisasi Zat Metabolik Sekunder Pada Ekstrak Bunga Krisan
(Chrysanthemum cinerariaefolium)
sokhlet
Methanol (a)
Heksana (b)
Kloroform (c)
Bunga kering
Oven 40
0

­50
0

C
Ekstrak
Residu 
Ekstrak 
Uji KLT
Kromatografi kolom
Fasa diam silika gel
Komponen
(fraksi)
GC­MS
IR
Pengelompokan fraksi­fraksi 

Page 74
59
Lampiran 1
Sertifikasi Bunga Krisan 

Page 75
60
Lampiran 2. 
Spektrum IR 

Page 76
61
Lampiran 3
Kromatogram GC­MS dari ekstrak bunga krisan 

Page 77
62

Page 78
63
Lampiran 4
Spektra massa puncak nomer 3 dari kromatogram GC­MS 

Page 79
64
Lampiran 5 
Spektra massa puncak nomer 8 dari kromatogram GC­MS 

Page 80
65
Lampiran 6
Spektra massa puncak nomer 29 dari kromatogram GC­MS 

Page 81
66
Lampiran 7
Spektra massa puncak nomer 37 dari kromatogram GC­MS 

Page 82
67
Lampiran 8
Spektra massa puncak nomer 40 dari kromatogram GC­MS 

Page 83
68
Lampiran 9
Spektra massa puncak nomer 43 dari kromatogram GC­MS 

Page 84
69
Lampiran 10
Foto Penelitian
Alat­alat yang digunakan
Hasil pemisahan kromatografi kolom
Ekstrak pekat dalam
metanol
Hasil ekstraksi dengan pelarut metanol,
kloroform, heksana
Eluen
Alat dan hasil yang diperoleh 

Page 85
70
Lampiran 11
Ijin Penelitian