UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARAÍBA

CENTRO DE BIOTECNOLOGIA

PRINCÍPIOS MOLECULARES E CELULARES

VISUALIZAÇÃO DE CÉLULAS DO TECIDO

SANGUINEO

GABRYEL CEZAR DA SILVA MARINHO

JOÃO PESSOA

2017
Sumário

INTRODUÇÃO ........................................................................................... 3
OBJETIVO .................................................................................................. 3
METODOLOGIA ....................................................................................... 3
DESENVOLVIMENTO ............................................................................. 4
CONCLUSÃO ............................................................................................. 4
INTRODUÇÃO
O sangue é um tecido vivo que circula pelo corpo, levando oxigênio e
nutriente a todos os órgãos. Existem especialidades que estudam o sangue.
A Hemoterapia é a ciência que estuda o tratamento de doenças utilizando o
sangue. Ele é produzido na medula óssea dos ossos chatos, vértebras,
costelas, quadril, crânio e esterno. Nas crianças, também os ossos longos,
como o fêmur, produzem sangue. Ele é composto por plasma, hemácias,
plaquetas, fatores de coagulação e células pertencentes ao sistema
imunológico, os leucócitos. Essas células, popularmente conhecidas como
glóbulos brancos, são divididas em: Linfócitos, monócitos, neutrófilos,
eosinófilos e basófilos, sendo os três últimos caracterizados como
granulócitos, e podem ser identificadas através do processo de confecção de
lâminas de esfregaço sanguíneo e sua coloração. Os leucócitos, além de
identificados através da técnica de esfregaço sanguíneo, podem ser
contabilizados utilizando a contagem manual na câmara de Neubauer em um
procedimento denominado contagem total de leucócitos. Essa técnica é
amplamente utilizada nas universidades, mas dificilmente aplicada em testes
laboratoriais de hemograma, onde o processo é realizado de forma
automatizada utilizando um contador de células automático.

OBJETIVO
Visualizar as células sanguíneas (esfregaço sanguíneo), identificar as
células leucocitárias e quantificar a contagem de leucócitos totais
(Câmara de Neubauer).

METODOLOGIA
1.1 Realizar a coleta de sangue em tubo de EDTA (composto
anticoagulante);
1.2 Transferir 200 µl de solução hipotônica de lise de hemácias com corante
(Líquido Turk) - Diluição 20X;
1.3 Transferir 10 µl da amostra de sangue para eppendorf;
1.4 Homogeneizar, transferir 10 µl da mistura para a 1ª área da câmara de
Neubauer, aguardar cinco minutos e visualizar a câmara de Neubauer no
microscópio óptico.

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1.5 A formula usada para calcular a quantidade de leucócitos em 1 µl é a
seguinte:

DESENVOLVIMENTO

A aula prática com o objetivo de visualizar células do tecido

sanguíneo ocorreu dentro das dependências da Universidade Federal da
Paraíba, mais especificamente no laboratório do Centro de Biotecnologia
sob a orientação da professora Dr° Priscila Lima Jacob. A professora
explicou a teoria necessária a compreensão do experimento além de
ensinar também a técnica correta de manuseio dos equipamentos.
Em primeiro lugar pipetamos 10 µl de sangue previamente colhido, que
estava armazenado em EDTA, e misturamos com 200 µl de Líquido de
Turk, em seguida utilizamos um misturador vórtice para agitar a solução
e com isso conseguir que houvesse a lise das hemácias. Logo depois
transferimos 10 µl da amostra de sangue para um eppendorf onde então
transferimos para a câmara de Neubauer, após cinco minutos fomos
visualizar a câmara no microscópio óptico. Devido ao curto tempo só foi
possível visualizar um dos quadrantes da câmara de Neubauer, entretanto
foi possível contar 76 leucócitos presente no quadrante, sendo assim:

Leucócitos por µl de sangue = 76 x 20 x 10/1 = 15.200 leucócitos em

apenas um quadrante.

CONCLUSÃO

Embora o tempo tenha sido insuficiente para realizar a contagem dos

quatro quadrantes da câmara de Neubauer foi possível sim visualizar
células que constituem o tecido sanguíneo.