“Año del Dialogo y La Reconciliación Nacional”

UNIVERSIDAD NACIONAL DE UCAYALI

Facultad ciencias agropecuarias
Escuela profesional de ingeniería agroindustrial

Informe N°04

Tema: aislamiento de mohos y levaduras

Curso: Microbiología General.
Profesor: Ing. M.s.c Pedro Pablo Villegas.
Integrantes: jayo moran, Yadira Ysabel

Ciclo: IV

Fecha De Ejecución: 14/12/2018

Fecha De Revisión: 28/12/2018

PUCALLPA – PERU
2018
I. INTRODUCCIÓN
En general, los hongos son microorganismos eucariotas1 pluricelulares
filamentosos, no presentan pigmentos fotosintéticos y son quimio
heterótrofos aerobios estrictos. A diferencia de las plantas, presentan un
bajo grado de diferenciación en los tejidos.
Poseen pared celular contiene quitina2 un polisacárido que le da rigidez
y es responsable de su morfología y en ocasiones celulosa. Algunos
hongos presentan cápsula, formada por polisacáridos, con propiedades
inmunógenas y anti fagocitarías.
Las hifas son tubos largos que están formadas por la pared celular de
quitina (componente mayoritario) y el citoplasma con sus inclusiones y
núcleos con la información genética. En el citoplasma se realiza la
actividad bioquímica del hongo.
Las hifas pueden estar separadas en células por paredes transversales
(septos) en los hongos superiores (Eumicetos), o carecer de paredes en
los hongos inferiores (Ficomicetos4)
El conjunto de hifas se llama micelio
TIPOS DE REPRODUCCIÓN
1. Reproducción sexual: (Hongos perfectos) Por unión de gametos5
, estado teleomorfo.
Zigósporas, Ascósporas, Basidiósporas.
Zigomicetos. Hongos que se reproducen sexualmente por
zigosporas. Constituyen el grupo
de Ficomicetos más evolucionado y mejor adaptado a la vida
terrestre.
Eumicetos (hongos superiores) abarcan a los ascomicetos y a los
basidiomicetos. Es característico de los mismos la posesión de un
micelio septado y la formación de
conidiosporas. No presentan células flageladas.
Setas (hongos erectos): En el momento propicio, y en lugares
cercanos a la superficie, las hifas del micelio vegetativo de un
hongo basidiomiceto, forman una masa de crecimiento (cuerpo
fructifero) de aspecto tisular denominado plecténquimas (setas). Es
la parte reproductiva de un conjunto más amplio. Una vez
desarrollado emite esporas de forma variable según las especies
(p.ej. 100.000 esporas/h durante 4-5 días).
2. Reproducción asexual (hongos imperfectos) Los hongos que
tienen reproducción asexual o desconocida (estado anamorfo) se
denominan Deuteromycetos.
a. Gemación en levaduras (unicelulares)
b. Fragmentación de las hifas (utilizado para resiembras en
laboratorio)
c. Esporulación por germinación de esporas
II. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
III. OBJETIVOS
IV. MATERIALES Y METODOLOGÍA

4.1 Materiales
Materiales
 matraz de Erlenmeyer

 tubos de ensayos

 pipetas
Equipos
 mechero
Insumos
 jugo de papaya
 agar (papa dextrosa)
 amortiguadora de fosfato
4.2 Metodología
Para realizar la siguiente práctica, seguimos los siguientes pasos:

Experimento N°01
 Primero desinfectamos la mesa que vamos a realizar el trabajo
con alcohol
 Después dos integrantes del grupo se lava la mano con alcohol
para desinfectar su mano, de esa manera no se contamine
rápido la muestra
 prendemos el mechero para desinfectar en la boquilla del
matraz que contenía la amortiguadora de fosfato
 Después botamos la amortiguadora, para luego agregar 100ml
de la muestra (jugo de papaya)
 en seis tubo de ensayo agregamos 9ml de agua
 en el primer tubo de ensayo agregamos 1ml de la muestra (jugo
de papaya), lo tapamos con papel aluminio y agitamos hasta
que la muestra este homogenizada
 en el segundo tubo de ensayo agregamos 1ml de la muestra del
primer tubo de ensayo, lo agregamos cerca al mechero para
que no se contamine rápido la muestra, y lo agitamos para que
se homogeniza.
 De esa manera realizamos en los 4 tubos de ensayos restantes
 Una vez terminado de realizar el mismo procedimiento en los 4
tubos de ensayo que faltaba, en una placa Petri abrimos
cuidadosamente para añadir la muestra ( jugo de papaya) y
medio milititro de papa dextrosa
 Lo movemos cuidadosamente para homogenizar la muestra y
esperamos a que se solidifique.
Metodología experimental
Experimento N°01

Aislamiento de mohos y levaduras

V. CONCLUSIÓN
Reconocimos los diferentes medios de cultivo y desarrollamos
competencias en los puntos clave que deben tenerse en cuenta antes,
durante y después de la preparación de un medio de cultivo

VI. RECOMENDACIONES
 Ir correctamente uniformado
 Prestar atención al docente
 Manejar cuidadosamente los materiales
 No comer en la hora de clase
VII. BIBLIOGRAFIA
 Universidad Nacional del Nordeste Trabajo Práctico Nº 4
FACULTAD DE AGROINDUSTRIAS Medios de cultivo Microbiología
General- Carrera Farmacia Año 2006
http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp4.pdf
 CULTIVOS DE BACTERIAS
http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/microgeneral/wp-
content/uploads/2017/02/04-CULTIVO-DE-BACTERIAS.pdf
 Universidad nacional de Colombia
http://bdigital.unal.edu.co/4999/1/albertorojastrivino.2011.pdf
 Britania
http://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a296
9ba1d3f5.pdf
 AGAR PAPA DEXTROSA – POTATO DEXTROSE AGAR (7149)
http://foodsafety.neogen.com/pdf/acumedia_pi/7149_sp_pi.pdf
 https://es.scribd.com/document/129284786/Informe-1-PDA
 MANUAL DE LABORATORIO PARA EL MANEJO DE HONGOS
ENTOMOPATÓGENOS
http://cipotato.org/wp-content/uploads/2014/09/AN65216.pdf

 AGAR PAPA DEXTROSA
Propósito de Uso
El Agar Papa Dextrosa es utilizado para el cultivo de hongos. Este producto está
conforme a los Requerimientos Armonizados de las Farmacopeas USP/EP/JP.
Resumen y Explicación del Producto
El Agar Papa Dextrosa (Potato Dextrose Agar, PDA, por sus siglas en inglés) es un
medio de propósito general para levaduras y mohos que puede ser suplementado con
ácidos o antibióticos para inhibir el crecimiento bacteriano. Es recomendado para uso
con métodos de conteo en placa para alimentos, productos lácteos y pruebas
realizadas en cosméticos. El Agar Papa Dextrosa (PDA) puede ser usado para el cultivo
de levaduras y mohos clínicamente significativos. La base (infusión de papa)
nutricionalmente rica, estimula la esporulación de los mohos y la producción de
pigmentos en algunos dermatofitos
Fórmula / Litro
Infusión de Papa (Potato Infusion) a partir de 200 g ...............4 g*
Dextrosa (Dextrose)................................................................ 20 g
Agar........................................................................................ 15 g
*4,0 g de extracto de papa es equivalente a 200 g de infusión de papas.
pH Final: 5,6 ± 0,2 a 25°C
Almacenamiento
Medio de cultivo deshidratado 10-35°C
Medio de cultivo preparado a 2-8°C
Procedimiento
Siembra
En superficie: inocular directamente la muestra
En profundidad: inocular una alícuota de la muestra directa o de su dilución.
Incubación
En aerobiosis, 20-25°C o 30°C-32°C según el método seguido, durante 5 o 7 dias

Agar estrato de malta

Medio utilizado para la enumeración de hongos y levaduras en diversas muestras de
alimentos. Si el medio utiliza para la enumeración de colonias de hongos se debe
preparar con ph 3,5 para suprimir el crecimiento de la flora bacteriana acompañante.
„ Receta del agar malta
„ Extracto de malta 20 g/L.
„ Agar 20 g/L
„ pH = 5,4
„ Sulfato de estreptomicina al 0,02%
„ (0,1 ml de la solución stock/100 ml de
medio).
Agar Nutriente
El Agar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para todo
tipo de bacteria. Es muy util porque permanece solido incluso a relativas altas
temperaturas. Además, el crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la
superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias pequeñas.
En un caldo de nutrientes, la bacteria crece en el líquido, y aparece como una
sustancia espesa, con colonias dificilmente observables. El agar nutritivo contiene
normalmente.
Receta NAD (Nutriente agar destrosa)
„ Agar nutriente 23g
„ Destrosa 5g
„ Agua destilada 1000 ml.
Agar mc conkey
Es un medio selectivo y diferencial utilizado para la recuperación de enterobacterias
y bacilos Gram negativos entéricos relacionados. Contiene sales biliares y cristal
violeta que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas y de algunas Gram
negativas exigentes. La lactosa es la única fuente de carbono. El indicador es el rojo
neutro. Las bacterias fermentadoras de lactosa formas colonias de diferentes tonos
de rojo. Los fermentadores fuertes de lactosa pueden provocar la precipitación de las
sales biliares por la gran cantidad de ácidos formados, lo que se observa fácilmente
en el medio por la aparición de zonas opacas alrededor de las colonias. Las bacterias
que no fermentan la lactosa forman colonias incoloras o transparentes.