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PRÁCTICA No.

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ALGUNAS PROPIEDADES QUÍMICAS DE LOS LÍPIDOS

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Departamento de Bioquímica, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de
San Carlos de Guatemala, Carrera de Química Farmacéutica.

INTRODUCCIÓN
Los lípidos son el grupo estructuralmente más diversos de biomoléculas, que presentan como
principal característica el ser insolubles en agua y solubles en solventes orgánicos. Dichas
biomoléculas no se presenta como polímeros; sin embargo pueden observarse con cierto grado de
complejidad, formados por la unión de varias moléculas de menor tamaño, entre estos se
encuentran ácidos grasos, glicerol, ácido fosfórico y azúcares. Muchos lípidos contienen regiones
polares y no polares en la misma molécula, provocando que sean moléculas anfipáticas, permitiendo
la formación de bicapas, las cuales proveen la arquitectura de las membranas. Las propiedades
químicas de estas biomoléculas son importantes debido a que dependiendo de su estructura
química, así serán las funciones biológicas que ejerzan; además, constituyen las membranas
biológicas, las cuales participa en casi todas las actividades celulares (Nelson & Cox, 2013). Dichas
características químicas se determinaron experimentalmente con el fin de evaluar el grado de
permeabilidad de ciertos lípidos, su grado de insaturación y la determinación de glicerol y colesterol.
Dentro del examen cualitativo, los lípidos con menor difusión de colorante fue el colesterol y ácido
esteárico; además de ser los lípidos con menor coloración en la prueba de insaturación. Asimismo,
en la prueba de colesterol el único de lípido en ser negativo fue el aceite de girasol.

METODOLOGÍA
Se evaluó el grado de permeabilidad de Cuando se calienta glicerol con bisulfato
diferentes lípidos anfipáticos, utilizando un potásico se produce el aldehído acroleína, el
colorante que permitiera ver la difusion a cual tiene un olor característico. Esta reacción
traves membrana simple entre solventes ocurre tanto en glicerol libre como en ésteres
inmiscibles.(Nelson & Cox, 2013) Se midió el de glicerol. (Hemming & Hawthorne, 2001) La
grado de insaturación, por medio de la presencia de colesterol se determinó
halogenación de los dobles enlaces presentes, utilizando la prueba de Lieberman-Burchard
evidenciando su presencia en la solución de por deshidratación a colesterileno que posee
yodo a través de la decoloración de la un color azul verdoso observable. (Véjar,
misma.(Hemming & Hawthorne, 2001) 2005)
RESULTADOS

Tabla No. 1​: Modelo de membrana

Tubo Intensidad de Observaciones


difusión​1

Colesterol ++ -Presenta color


celeste claro en la
parte del agua

Acido esteárico + -Presentó menor


coloración que
todos, en la fase
del agua

Aceite de maiz ++++ -Su color llega a


ser azul en el agua

Aceite de girasol ++++ -Presenta


burbujas en la
interfase
-Coloración azul la
parte del agua

Aceite de oliva +++ -Cuenta con color


celeste en el agua

Control ++++ -Se observó color


azul en el agua
Fuente: ​Datos experimentales, obtenidos en el laboratorio de Bioquímica, T-12, USAC.

1= Intensidad de difusión interpretado con cruces, donde ++++ es la mayor intensidad; + es la menor.

En la tabla No.1 se observa el grado de permeabilidad que tiene los diferentes lípidos según su grado
de difusión del colorante. Mientras, mayor coloración presentaba el tubo en la fase del agua, mayor
fue la difusión de colorante y viceversa.

Tabla No.2:​ Prueba de insaturación


Tubo No. de gotas Intensidad de color​1

Colesterol 1 +++

Acido estearico 1 ++++

Aceite de maiz 1 +

Girasol 1 +

Oliva 1 ++
Fuente: ​Datos experimentales, obtenidos en el laboratorio de Bioquímica, T-12, USAC.

1= Intensidad de difusión interpretado con cruces, donde ++++ es la mayor intensidad; + es la menor.
En la tabla No. 2 se observan los resultados de la prueba insaturación, por medio de la decoloración
de una solución de yodo, para estimar el grado de insaturación de cada ácido graso. A mayor grado
de insaturación, menor intensidad de color del yodo (rojo) presenta la disolución del ácido graso.

Tabla No. 3​: Determinación de glicerol

Tubo Descripción de olor

Solucion 1 Intenso y desagradable


Fuente: ​Datos experimentales, obtenidos en el laboratorio de Bioquímica, T-12, USAC.

En la tabla No. 3 se observa el resultado al determinar si presentaba glicerol el tubo, dicho


instrumento de laboratorio contaba con una solución de glicerol, por lo que la prueba fue positiva al
presenta un olor característico.

Tabla No. 4:​ Determinación de colesterol de varios lípidos

Tubo Prueba de Intensidad de color​3 Coloracion


Liebermann -
Burchard

Colesterol +​1 ++++ Verde-negro

Ácido esteárico + ++ Verde con una


tonalidad amarilla en
el fondo del tubo

Aceite de maiz + +++ Verde con una


tonalidad amarilla en
el fondo del tubo

Aceite de oliva + + Verde claro

Aceite de girasol -​2 N.A​4 Café claro


Fuente: ​Datos experimentales, obtenidos en el laboratorio de Bioquímica, T-12, USAC.

1= Resultado positivo
2= Resultado negativo
3= Intensidad de difusión interpretado con cruces, donde ++++ es la mayor intensidad; + es la menor.
Aplicado unicamente a resultados positivos
4= No aplica

En la tabla No. 4 se observan los resultados obtenidos de la prueba de Liebermann-Burchard


realizada a diferentes lípidos, tomando como prueba positiva cuando presentaban coloración verde
y negativa si era amarilla o café claro. El colesterol se utilizó como grupo control.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS que están presentes en algunos aceites


vegetales (Carbajal, 2007). El aceite de oliva y
Para el modelo de membrana, el colesterol el aceite de Girasol presentan resultados
presentó un resultado positivo celeste claro positivos con alta difusión (Ver tabla No.1), en
(Ver tabla No.1), esto sucedió porque se comparación con el Ácido Esteárico y el
produjo una pérdida de agua y una colesterol. Esto por la presencia de
protonación del colesterol, por lo que en Colesterileno. (Devlin, 2004).
medio anhidro se constituyen polímeros de
hidrocarburos no saturados de intenso color El índice de yodo es una escala utilizada para
verde azulado (Devlin, 2004). Se realizó la definir el grado de insaturación de un
prueba con el Ácido Esteárico, la cual resultó compuesto orgánico que contiene enlaces
positiva pero con el menor grado de color (ver diénicos. La positividad de esta reacción indica
Anexo No.2), esto pudo suceder por la la presencia de ácidos grasos de la serie
presencia únicamente de enlaces sencillos etilénica, la cual se manifiesta por la
entre carbonos, no dobles enlaces, por lo que desaparición del color del yodo, debido a que
su grado de insaturación es bajo (Carbajal, enlaza en el doble enlace. (Sancho, Bota y
2007). Para la prueba del Aceite de Maíz se Castro, 1999) En la experimentación se agregó
observa que presentó al fondo del tubo una una mayor cantidad de yodo del necesario
coloración amarilla (ver anexo No.2), esto para saturar los dobles enlaces de cada
sucede por la presencia de β-sitosteroles muestra y en la misma proporción, por lo que
se esperaba que a mayor insaturaciones grupo cromóforo como producto de la
presentará la muestra, mayor seria el índice reacción, en donde el colesterol se convierte
de yodo y por tanto menor intensidad de en colesterileno y el grupo -OH se deshidrata,
color presentaría (rojo del yodo) la solución. creando una conjugación extendida. (Castillo,
Los resultados (Ver tabla No.2) fueron los 2017) (​ver Anexo No. 4 y anexo No. 5 ​). Esta
esperados, ya que se esperaba que el orden prueba se considera cualitativa y cuantitativa,
creciente de intensidad de color del yodo ya que además de demostrar la presencia o
(rojo-rosado) de las disoluciones fuera el ausencia de colesterol, fue posible tener un
siguiente: aceite de girasol < aceite de maíz < estimado cuantitativo acerca de la presencia
aceite de oliva < colesterol < ácido esteárico. del mismo, indicado por la intensidad de color
Lo que coincidió con lo práctico, a pesar de de los resultados; sin embargo se puede tener
que se observó que el aceite de girasol y el un resultado concreto mediante
aceite de maíz presentaban casi la misma espectrofotometría (Campbell, Shawn, 2005).
intensidad de color (Ver tabla No.2 y anexo Por lo tanto, observó que el lípido con más
No.3). Esto se debe a la composición de cada colesterol en su estructura fue el ácido
muestra, ya que el aceite de girasol está esteárico; por el contrario, el aceite de girasol
compuesto por el 67% de grasas fue el único que no contiene colesterol en su
poliinsaturadas, el aceite de maíz por un estructura.
58,7% de ácidos grasos poliinsaturados, el
aceite de oliva en un 8,4% de grasas
poliinsaturadas , en cuanto al colesterol solo CONCLUSIONES
posee una instauración es su estructura y al ● Los aceites vegetales presentaron los
ácido esteárico es un ácido graso saturado resultados mayor intensidad de color
(Botanical-online, sf). Esto explica la en la prueba de membrana, en
intensidad de coloración roja del yodo de comparación con el Ácido Esteárico y
cada disolución y el color similar intensidad en el Colesterol.
entre el aceite de girasol y maíz. (Ver tabla ● En la prueba de saturación el orden
No.2 y anexo No.3) decreciente de saturación de las
muestras fue: aceite de girasol >
Al calentar el glicerol con bisulfato potásico aceite de maíz > aceite de oliva >
se produce el aldehído acroleína, el cual tiene colesterol > ácido esteárico.
un olor característico, en la práctica realizada ● En la prueba de saturación el orden
se el olor del producto fue un olor intenso y creciente de intensidad de coloración
desagradable que coincide con el olor de las muestras fue; aceite de girasol
reportado en la literatura, por lo que se < aceite de maíz < aceite de oliva <
produjo el aldehído de acroleína esperado ya colesterol < ácido esteárico.
que se utilizó glicerol como reactivo. ● Se encontró la presencia de colesterol
(Hemming & Hawthorne, 2001)) en el ácido esteárico y los aceites de
maíz, oliva y girasol.
Al realizar la prueba de Liebermann-Burchard ● Se formó acroleína por medio de la
en los lípidos se encontró un resultado deshidratación de glicerol.
positivo, indicando presencia de colesterol, ● En un estimado cuantitativo se
para todos los lípidos excepto para el aceite encontró que el lípido con más
de girasol (Ver Tabla No.4). Dicha prueba es colesterol fue el aceite de maíz
positiva cuando se presenta un color verde, el ● El único lípido que presentó ausencia
cual se observa debido a la presencia de un de colesterol fue aceite de girasol.
REFERENCIA
Botanical-online. (s.f.). ​Aceite de maíz.
Recuperado de;
https://www.botanical-online.com/mai
zaceite.htm
Botanical-online. (s.f.). ​Composición del aceite
de girasol. Recuperado de;
Fuente: ​Datos experimentales, obtenidos en
https://www.botanical-online.com/acei
el laboratorio de Bioquímica, T-12, USAC.
te_de_girasol_composicion.htm
Botanical-online. (s.f.). ​Composición del aceite
En el anexo No. 1 se observa la formación de
de oliva. Recuperado de;
la bicapa por parte de diferentes lípidos en el
https://www.botanical-online.com/com
minuto 0, siendo el orden de los tubos el
posicion_aceite_de_oliva.htm
siguiente: control, aceite de girasol, ácido
esteárico, colesterol, aceite de maíz y aceite
Carbajal, A. (2007). ​Manual de Nutrición y
de oliva.
Dieta​. Barcelona. Universidad
Complutense de M adrid​.
Anexo No. 2: ​Modelo de la membrana al
Castillo, I., (2017) ​Reacciones del colesterol.
minuto 60
Recuperado de
https://es.scribd.com/document/36202
0796/Reacciones-de-Colesterol
Campbell, M., & Shawn, O., (2005)
Biochemistry.​ ​Singapore: Thomson Asia
Pte Ltd.
Devlin, T. (2004). ​Bioquímica.​ Barcelona.
Reverté.
Hemming, F., & Hawthorne, J. (2001). ​Análisis
Fuente: ​Datos experimentales, obtenidos en
de lípidos​. Zaragoza: Acribia.
el laboratorio de Bioquímica, T-12, USAC.
Nelson, D. y Cox, M., (2013) ​Lehninger,
Principles of Biochemistry.​ W.H.
En el anexo No. 2 se observa el resultado final
Freeman and company: New York
del modelo de membrana de diferentes
Sancho, J., Bota, E. y Castro, J. (1999).
lípidos al pasar 60 minutos, siendo el orden de
Introducción al análisis sensorial de los
los tubos: control, aceite de maíz, aceite de
alimentos. España: Ediciones de la
oliva, aceite de girasol, colesterol y ácido
Universidad de Barcelona.
esteárico.
Véjar, E. (2005). ​Prácticas de bioquímica
descriptiva.​ México: Universidad de
Anexo No. 3: ​Prueba de insaturación
Sonora.

ANEXOS
Anexo No.1: ​Modelo de la membrana al
minuto 0
Fuente: ​Castillo, I., (2017) ​Reacciones del
Fuente: ​Datos experimentales, obtenidos en colesterol. ​Recuperado de
el laboratorio de Bioquímica, T-12, USAC. https://es.scribd.com/document/362020796/
Reacciones-de-Colesterol
En el anexo 4, se observa los resultados de la
prueba de insaturación, por medio de la En el anexo No.5 se observa la reacciones del
decoloración del yodo, en donde se observa colesterol al realizar la prueba de
que a mayor insaturación, menor intensidad Lieberman-Burchard, el cual da como
de color presenta la muestra. producto colesterileno.

Anexo No. 4: Resultados de determinación de


colesterol para varios lípidos

Fuente: ​Datos experimentales, obtenidos en


el laboratorio de Bioquímica, T-12, USAC

En el anexo no. 4 se observa el resultado a la


prueba de Liebermann-Burchard. Se
observan, de izquierda a derecha: colesterol
(control), aceite de maíz, ácido esteárico,
aceite de oliva y aceite de girasol.

Anexo No. 5: ​Reacción de colesterol a


colesterileno.

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