Miércoles, 13 de febrero de 2019

Universidad Autónoma de Tlaxcala

Licenciatura en Química Clínica.

Facultad de ciencias de la salud.

Laboratorio de Microbiología

Docente
QFB. Rubicela Rojas Juárez

Equipo
4
Practica
No.3
Técnicas de tinción: diferencial y específicas.

Integrantes
Daniel Lima
Jesus Eduardo Lima
Erick Bernardo
Cristian Cocoletzi
Iván Sánchez
Ricardo Pérez
Miércoles, 13 de febrero de 2019

PLAN DE PRACTICA
Entender el por que de las tinciones diferenciales de rutina en el área de
Microbiología como son la Tinción de Gram y de Ziehl- Neelsen, también conocida
como tinción para bacilos ácido-alcohol-resistentes resultan útiles para evidenciar
la morfología y diferenciación estructural bacteriana con base a su afinidad tintorial.
OBJETIVOS
1. Realizar las técnicas de preparación, fijación y tinción Gram
2. Comprender la importancia que tienen Gram y Ziehl -Neelsen para la
caracterización e identificación de las bacterias.
3. Identificar la composición química de la pared celular de las bacterias.
INTRODUCCION

Nuestro propósito con la tinción de Gram es detectar básicamente el tipo de pared

celular de la bacteria que estamos analizando en ese momento. Aunque esta
técnica tiene ciertas limitaciones pues existen bacterias que no presentan pared
celular, como es el caso del género Mycoplasma. Además, a veces, otros factores
como la edad de la muestra o el protocolo de la tinción pueden interferir en los
resultados de la tinción, por lo que siempre se recomienda usar controles y realizar
pruebas más exhaustivas en el caso de que se quiera identificar la bacteria.

MATERIALES Y REACTIVOS

1 probeta de 100 ml
1 vaso de precipitados de 100 ml
1 mechero
1 asa de siembra
5 portaobjetos
Piceta con agua destilada
Microscopio compuesto de campo claro
Azul de metileno alcalino
Aceite de inmersión
Cultivos sólidos de diferentes microrganismos
Miércoles, 13 de febrero de 2019

DESARROLLO
1) Cubrir el frotis con 2 gotas de cristal violeta durante 30 segundos a 1
minuto.
2) Lavar cuidadosamente el frotis con agua de la llave o destilada para
eliminar el exceso de colorante.
3) Sacudir un poco y sin dejar secar cubrir con 2 gotas de lugol por 30
segundos.
4) Lavar cuidadosamente el frotis con agua.
5) Inclinar el portaobjetos y aplicar gota a gota el decolorante (alcohol-
acetona) dejando que escurra hasta que no fluya más tintura.
6) Inmediatamente lavar con agua.
7) Aplicar 2 gotas de safranina durante 30 segundos.
8) Lavar nuevamente con agua, eliminar cuidadosamente el exceso de agua
con una toalla de papel y dejar secar al aire.
9) Observar en el microscopio la muestra a 4X 10X 40X.
Miércoles, 13 de febrero de 2019

OBSERVACIONES Y RESULTADOS
Vemos como es la forma de la bacteria después de colocar correctamente las
cantidades de las sustancias requeridas en este método con lo cual podemos
entender un poco mas del proceso y de la necesidad de colocar lo más exacto
posible las sustancias y retirarlas de la misma forma.
DISCUSIÓN Y CONCLUCIONES
Logramos obtener el objetivo de nuestra practica lo cual queda demostrado por las
imágenes que presento nuestra muestra dando la coloración roja y violeta lo cual
nos indica que tenemos una bacteria con un resultado gram negativa.
REFERENCIAS
S/A. (25 de marzo del 2016). tinción de Gram . 09 de febrero del 2019, de ciencia
today Sitio web: https://cienciatoday.com/tincion-de-gram/
S/A. (3 de julio del 2017). Técnicas de tinción. Fundamentos . 09 de febrero del
2019, de DANIVAL Sitio web:
http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioTinciones.htm
S/A. (5 de Abril del 2017). LAS BACTERIAS GRAM POSITIVAS. 09 de febrero del
2019, de OK DIARIO Sitio web:
https://okdiario.com/curiosidades/2017/01/26/bacterias-gram-positivas-697551