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MODALIDAD DE ESTUDIOS: PRESENCIAL

ÁREA ACADÉMICA: BIOLÓGICA Y BIOMÉDICA

TITULACIÓN / CARRERA: INGENIERÍA QUÍMICA

TECNOLOGÍA DE PRODUCTOS VEGETALES Y ALIMENTOS

INFORME DE PRACTICA

NOMBRE DEL ESTUDIANTE: Carlos Steven Lapo Sozoranga

FECHA: 04 de febrero de 2019

DOCENTE: PhD. Chabaco Patricio Armijos Riofrio

PERIODO ACADÉMICO:
Octubre 2018 – Febrero 2019
EXTRACCION DE ALCALOIDES APARTIR DE LA PLANTA “HUPERZIA BREVIFOLIA”

Carlos Steven Lapo Sozoranga

Tecnología de productos vegetales y alimentos, Escuela de Ingeniería Química


Universidad Técnica Particular de Loja.

INFORMACIÓN

Recibido 04 de febrero de 2019

RESUMEN
El presente proyecto tiene como propósito plasmar un estudio cuantitativo, con la finalidad de aislar los
alcaloides de otros metabolitos secundarios de interés (siendo los causantes del efecto alucinógeno y
farmacológico); a partir de la planta de “Huperzia brevifolia”. Iniciando con la maceración con etanol y
agua destilada, la técnica de cromatografía en capa delgada TLC, se usó como reveladores rayos UV y
Dragendorff para sabes si contiene alcaliodes, los resultados mostrados indican que la planta “Huperzia
brevifolia” posee alcaloides con un rendimiento de 0,04% y de 3 compuestos: Tolueno (2,5 ml), Acetato
de Etilo (2 ml) y Tridimetilamina (0,5 ml). De acuerdo con literatura consultada varios de los metabolitos
identificados en esta especie son biológicamente activos.
ABSTRACT
The present project has a quantitative purpose, a quantitative study, the objective of the alkaloids of other
secondary metabolites of interest (such as those causing the hallucinogenic and pharmacological effect);
from the plant of “Huperzia brevifolia”. Starting with the maceration with ethanol and distilled water, the
technique of thin layer chromatography TLC, we use as developers of UV rays and Dragendorff to know
if it contains alkalis, the results shown indicate the plant "Huperzia brevifolia" has alkaloids with a yield of
0, 04% and 3 compounds: Toluene (2.5 ml), Ethyl Acetate (2 ml) and Tridimethylamine (0.5 ml). According
to the consulted literature, several metabolic assets in this species are biologically active.

Palabras Claves:
Extracción, Alcaloides, “Huperzia brevifolia”, Etanol, Dragendorff.

desempeñan funciones ecológicas y se


1. INTRODUCCIÓN caracterizan por sus diferentes usos y
aplicaciones como medicamentos,
Las plantas son organismos autótrofos, insecticidas, herbicidas, perfumes,
conjuntamente del metabolismo primario colorantes, entre otros. Reciben también la
presente en todos los seres vivos, poseen un denominación de productos naturales
metabolismo secundario que les permite (Gonzáles, 2005).
producir y acumular compuestos de
naturaleza química diversa. Estos El metabolismo secundario se puede definir
compuestos derivados del metabolismo como la biosíntesis, la transformación y la
secundario se denominan metabolitos degradación de los compuestos endógenos
secundarios, se distribuyen diferencialmente mediante proteínas especializadas las
entre grupos taxonómicos, presentan cuales se han formado como resultado de los
propiedades biológicas, muchos procesos de diferenciación y se clasifican
según su significación biológica y función en extracto es acuoso, se añade 1 gota de ácido
la célula productora (Lozano, 2009). clorhídrico concentrado, (calentar
suavemente y dejar enfriar hasta acidez).
Se consideran plantas medicinales a las
Con la solución acuosa ácida se realiza el
especies vegetales, de calidad y cantidad de
ensayo, añadiendo 3 gotas del reactivo de
principios activos tienen propiedades
Dragendorff, si hay opalescencia se
terapéuticas comprobadas empíricas o
considera (+), turbidez definida (++),
científicas en beneficio de la salud humana.
precipitado (+++). Es positivo al proporcionar
“Huperzia” es una generación cosmopolita un color naranja (Gonzáles, 2005).
con aproximadamente 300 especies en el
2. Materiales y Metodología
mundo y cerca de 150 en el neotrópico.
Muestra de la planta
Las Lycopodiales son plantas pequeñas que Reino Plantae
tienen una distribución geográfica amplia y División Lycopodiophyta
son cosmopolitas. Se conocen Familia Lycopodiaceae
aproximadamente unas 500 especies Género Huperzia
agrupadas en diferentes géneros. Especie brevifolia

La especie “Huperzia brevifolia” proponen


una distribución extensa, desde Alaska hasta Material/Equipos Sustancia
la provincia de Tierra del Fuego, en - Rotaevaporador - Agua
Argentina, se la puede encontrar en páramos - Decantador - Etanol
húmedos de los siguientes países Costa - Embudo - Dragendoff
Rica, Colombia, Venezuela, Ecuador, Perú. Buchner - Cloroformo
- Cámara de - Diclorometano
Los alcaloides se definen como sustancias rayos UV - Hidróxido de
nitrogenadas, básicas de origen natural y de - Vaso de amonio
distribución restringida cuyo átomo de precipitación
nitrógeno se encuentra formando parte del - Varilla de vidrio
sistema heterocíclico, poseen actividad
farmacológica, porque tienen incidencia Se realiza la selección de la muestra la cual
directa sobre los distintos sistemas que es de 5 kg y esta se procede a ser macerada
conforman el organismo además de estas en una relación de 8:2 en la cual se usa una
características, provienen de la síntesis de solución de etanol agua. Se macere en
un aminoácido. Siendo uno de los grupos estado estacionario con cambios de la
más diversos de metabolitos secundarios solución cada 24 horas hasta que
encontrados en los organismos vivos. La dragendorff salga negativo (-), pasado es
diversidad estructural y la variedad en la este proceso llevo a cabo una filtración para
actividad biológica, hacen de los alcaloides retener alguna fracción de solidos de la
los grupos más importantes entre las planta en la solución. Se traslada muestra de
sustancias naturales de interés terapéutico. solución donde se contiene los alcaloides al
rota-evaporador Buchi modelo R-210-215
Permite reconocer en un extracto la para eliminar el etanol contenido y una parte
presencia de alcaloides, para ello, si la del agua hasta que quede una pasta
alícuota del extracto está disuelta en un homogénea (664,75).
solvente orgánico, este debe evaporarse en
baño de agua y luego se disuelve en 1ml de Se procede a la obtención de la fracción de
ácido clorhídrico al 1 % en agua. Si el alcaloides contenida en pasta anteriormente
obtenida para lo cual se acidifica con acido
sulfúrico al 5%, regulado el pH hasta que que por motivo de este problema de
esta llegar a 1 a 2 (pH inicial 4.06, pH final recolección nos dio un rendimiento de 0.04%
1,790) para así filtrar los sólidos contenidos el cual es muy bajo sabiendo la cantidad de
(torta) hasta que dragendorff salga negativo muestra de planta el cual es de 5Kg.
(-) y se lo purifico la parte acuosa acida con
diclorometano con 3 lavados de 150mL con
un tiempo de 10 minutos y se lo procedió a
decantar donde la parte orgánica
(diclorometano) y se conserva la fase acuosa
acida ya que contiene los alcaloides,
seguidamente se procede a subir el pH con
Hidróxido de amonio a 11 (pH inicial 1,868,
pH final 11,023) para así lavarlo con
cloroformo con 7 lavados de 150 mL hasta
que dragendorff salga negativo(-), con esto
las sales pasan a la parte orgánica y la parte
acuosa alcalina se desecha.
La parte orgánica(cloroformo) donde se TLC 1 TLC 2
encuentra la fracción de alcaloides, se rota-
evapora para así obtener la base libre con
Se realizaron pruebas con cromatografía de
uno peso de 1.77g.
capa fina(TLC) en las cuales la fase móvil fue
Se realiza pruebas de TLC donde la fase combinación de los siguientes disolventes
móvil será la combinación de los siguientes tolueno, acetato de etilo, Trietilamina, con la
disolventes tolueno, acetato de etilo, ayuda de la cámara de rayos UV podemos
Trietilamina donde se podrá observa con observar como se separan los componentes de
ayuda de una cámara de rayos UV los la base libre, se realizaron 2 en las cuales se
diferentes alcaloides y para reconocerlos se puede observar en la primera TLC una sustancia
mientras en la segunda se observa como subido
les pasa con dragendorff.
las sustancias, la primero solo se la coloco una
vez en la fase móvil mientras que el segunda
3. Discusión de resultados fueron 3 veces. Posteriormente se le realizo
prueba de dragendorff donde se no se pudo
reconocer los alcaloides ya que se necesitaba
Peso de planta 5Kg otro detector para las TLC con la fase móvil,
Peso de Torta 88,70g mientras solamente con la base libre diluida con
Peso base libre 1,77g diclorometano se observa que si contiene
pH de muestra 4,066 alcaloides.
pH acidificado 1,790
pH alcalino 11,023
Rendimiento:
1,77𝑔
R%=5000𝑔 𝑥100 = 0,04%

El puede observar que el rendimiento es muy


bajo, esto puede deberse a la condición de la
planta o condiciones climáticos, ya esto
influye mucho a la hora de obtención de
metabolitos secundarios, y se podría decir
Ecuador. Universidad Técnica
Particular de Loja. Recuperado de:
http://dspace.utpl.edu.ec/bitstream/1
4. Conclusiones 23456789/1840/3/Guam%C3%A1n
%20Guam%C3%A1n%20Ana%20L
 Las condiciones de las uc%C3%ADa.pdf
plantas son muy ◦ Gonzáles, T. (2005). Análisis de
importantes a la hora de metabolitos secundarios de
obtención de metabolitos Lachemilla orbiculata (Ruiz & Pavón)
secundarios ya que podrían Rydb. (Rosaceae) en dos
varias en el rendimiento. localidades de los Andes del
Ecuador. [archivo PDF]. Quito.,
 El rendimiento de la planta Ecuador. Pontificia Universidad
fue de 0,04 %. Católica del Ecuador. Recuperado
de:
 Comprobar bajo el reactivo http://repositorio.puce.edu.ec/bitstream/
dragendorff para observar si handle/22000/4937/tesis%20tania%20
gonzalez.pdf?sequence=3&isAllowed=
la muestra contiene
y
alcaloides. ◦ Lozano, M. (2009). Estudio
Etnobotánico cuantitativo de
especies alucinógenas de la familia
5. Recomendaciones Lycopodiaceae utilizadas por los
Rikuthampiyachakkuna (visioneros)
de la etnia de Saraguro en la
 Usar la protección adecuada provincia de Loja. [archivo PDF].
(mascarilla, guantes y gafas) al Loja., Ecuador. Universidad técnica
momento de manipular el NH3. Particular de Loja. Recuperado en:
 Tener el cuidado respectivo al http://dspace.utpl.edu.ec/bitstream/123
manejar los rotoevaporadores. 456789/1703/3/final%20tesis%20antoni
 Usar otro revelador además de o%202010.pdf.
dragendorff ya que no puedo ◦ Pino, N.; Álvarez, R. & Prado, G.
reconocer los alcaloides de la TLC (2017). Determinación de
de la fase móvil. metabolitos secundarios por
cromatografia en capa delgada a
 Realizar correctamente la
especies con uso etnomedicinal
recolección la muestras de la planta
como estrategia pedagógica en el
para así aprovechar al máximo la
aula de clase. [archivo PDF]. Chocó.,
obtención de los metabolitos
Colombia. Recuperado de:
secundarios.
http://dspace.utpl.edu.ec/bitstream/123
456789/1840/3/Guam%C3%A1n%20G
uam%C3%A1n%20Ana%20Luc%C3%
6. Bibliografía
ADa.pdf
◦ Guamán, A.; Armijos, C.; Malagón,
O. & Andrade, M. (2009). Isolation of
Alkaloids From five Hallucinogenic
Species the uses of the
Lycopodiaceae Family in Ancestral
Medicine by Rikuyhampiyachak
(visionaries) in the Saraguro Culture-
Ecuador. [archivo PDF]. Loja.
7. ANEXOS

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