INTRODUCCION

CAPÍTULO 10

Formulación de polvos liofilizados.

 VENTAJAS Y DESVENTAJAS DEL SECADO CONGELADO

 ATRIBUTOS Y REQUISITOS DE UN PRODUCTO SECO A CONGELACIÓN
 COMPONENTES DE FORMULACION EN PRODUCTOS SECOS A CONGELACION
 CONCENTRACIONES DE ESTABILIZANTES
 CRISTALINOS Y EXCIPIENTES AMORFOSOS
 Manitol
 MÁS SOBRE ESTABILIZACIÓN DE EXCIPIENTES EN FORMULACIONES LIOFILIZADAS
 PASOS EN EL DESARROLLO DE UNA FORMULACIÓN Y PROCESO SECOS A CONGELACIÓN
 CONSIDERACIONES DE EMBALAJE
 CO-SOLVENTES

CAPÍTULO 20

Procesamiento por liofilización (liofilización)

 ETAPAS DE SECADO A CONGELACIÓN

 Etapa de enfriamiento / congelación
 Etapa de secado primario
 Etapa de Secado Secundario
 ETAPA DE ENFRIAMIENTO / CONGELAMIENTO
 Recocido
 Tasa de enfriamiento
 Otros aspectos de la etapa de congelación
 ETAPA DE SECADO PRIMARIO
 Pasos de secado
 Consecuencias del Secado Primario Inadecuado
 SECADO DE SECADO
 Temperatura del producto
 Presión de cámara
 Humedad de la cámara
 Tasa de sublimación
 EQUIPO
Formulación de polvos liofilizados.

Con el advenimiento de los medicamentos biotecnológicos, la formulación de liofilización y el

desarrollo de procesos se han embarcado en nuevos niveles de importancia en la industria
parenteral. Aproximadamente el 40% de los productos biofarmacéuticos comerciales se
liofilizan; este porcentaje probablemente seguirá aumentando con el tiempo. El secado por
congelación y la liofilización significan lo mismo. El secado por congelación puede ser más
preciso porque el proceso implica tanto la congelación de una solución como la eliminación del
disolvente de esa solución que implica procedimientos de secado. La liofilización significa "amar
el estado seco", pero el título no enfatiza el segmento de enfriamiento / congelación. La
liofilización implica:

1. Compuesto, filtrado y relleno de formulaciones de medicamentos como soluciones en

viales históricamente, aunque ahora se están utilizando más jeringas como recipiente
primario para productos liofilizados. La mayor parte de la discusión en este capítulo se
centrará en que el vial es el paquete primario.
2. Insertar un cierre de goma parcialmente ranurado en el cuello del vial (Fig. 10-1) y
transferir los recipientes a una cámara de secado por congelación. Si el vial, así como las
jeringas o los cartuchos, formarán parte de un dispositivo de doble cámara (polvo
liofilizado en un compartimento, solución diluida en el otro compartimento, separado
por un émbolo de goma), no se insertará ningún cierre de goma antes de la liofilización.
3. Enfriar el producto a una temperatura predeterminada que asegure que la solución en
todos los contenedores en el liofilizador se congele.
4. Ajustar la temperatura de la estantería / estanterías del liofilizador lo más alta posible
sin que la temperatura de ningún envase del producto esté por encima de su
"temperatura crítica" (temperatura eutéctica, temperatura de transición vítrea,
temperatura de colapso).
5. Aplicar un vacío predeterminado que establezca la diferencia de presión requerida entre
la presión de vapor del frente de sublimación del producto y la presión parcial de gas en
la cámara de liofilización que permite la eliminación de hielo congelado de todos los
contenedores de productos: el proceso de sublimación.
6. Aumentar la temperatura de la plataforma una vez que todo el hielo está sublimado
para eliminar toda el agua restante es parte de la composición del soluto a un nivel de
humedad residual predeterminado para conferir estabilidad a largo plazo del producto
farmacéutico.
7. Inserción completa del cierre de goma en el contenedor a través de la bajada hidráulica
de los estantes de la secadora.
8. Retirar todos los contenedores liofilizados, completar el sellado (o para jeringas /
cartuchos que agregan la tapa de goma), e inspeccionar cuidadosamente cada unidad
del producto (criterios de inspección para productos liofilizados cubiertos en el capítulo
22, Tabla 22-4).

Este capítulo se centrará en la formulación de productos liofilizados, mientras que el capítulo 20

se centrará en el proceso de liofilización.

VENTAJAS Y DESVENTAJAS DEL SECADO CONGELADO

Se requiere secado por congelación para los ingredientes farmacéuticos activos que no son lo
suficientemente estables en el estado de la solución. Insuficientemente estable significa que el
medicamento se degradará excesivamente en solución dentro de un período de tiempo no
modificable para comercializar el producto como una solución lista para usar. Muchas moléculas
pequeñas y grandes son lábiles en presencia de agua y en el transcurso de varios días, varias
semanas se degradarán a un punto que es inaceptable, por lo general más de 10% de actividad
por pérdida o la potencia en comparación con la cantidad declarada en la etiqueta de
ingrediente activo. Si no fuera por la tecnología de liofilización, muchos agentes terapéuticos
importantes no estarían disponibles comercialmente.

Figura 10-1: Tapones parcialmente ranurados en viales de solución antes de cargarlos en el

liofilizador

Las tablas 10-1 y 10-2 presentan dos listas de productos comerciales liofilizados. La Tabla 10-1
presenta información general sobre estos productos, mientras que la Tabla 10-2 se enfoca más
en las formulaciones cuantitativas específicas para cada producto. No son exhaustivos y no
estarán actualizados en el momento de esta publicación, pero brindan excelente información
representativa sobre los productos formulados congelados que se utilizan con éxito para salvar
y afectar vidas.

Además de superar los problemas de estabilidad al convertir una solución en un polvo seco, el
secado por congelación también ofrece las ventajas de procesar el producto en forma líquida.
Los polvos estériles también pueden producirse mediante otros procesos (no cubiertos en este
libro), como el secado por pulverización, el secado por congelación por pulverización o la
cristalización estéril seguida del llenado del polvo. Sin embargo, el secado por congelación
ofrece ciertas ventajas sobre otros procesos de producción de polvo, incluido el hecho de que
el producto se puede secar sin la necesidad de temperaturas elevadas, la esterilidad del
producto se logra y mantiene más fácilmente, los contenidos del material seco permanecen
homogéneamente dispersos y los tiempos de reconstitución en general son mas rapidos
Además, para los medicamentos que son sensibles al oxígeno, el secado por congelación es una
mejor alternativa para producir polvo, porque el ambiente durante el proceso de secado por
congelación puede ser una condición libre de oxígeno y un gas inerte puede llenar el espacio de
cabeza del contenedor antes y durante el cierre de El contenedor.

El secado por congelación también tiene ciertas limitaciones, tal vez el costo más importante en
comparación con otros procesos que producen polvo y, ciertamente, es más costoso que el
llenado y tapado de líquidos. Los compuestos volátiles en la formulación podrían eliminarse si
se requieren altos niveles de vacío y se sabe que un alto vacío aumenta los niveles extraíbles del
cierre del tubo. Se sabe que las etapas de congelación y secado causan problemas de estabilidad
con algunas proteínas que generalmente se pueden superar utilizando estabilizadores llamados
crio o lioprotectores. Debido a que el producto se ha esterilizado previamente antes de cargarlo
en la cámara de liofilización, la esterilidad debe mantenerse durante el proceso de carga y
descarga y también durante el proceso de secado por congelación. Debe demostrarse la
capacidad de mantener condiciones asépticas durante estos procesos, así como la validación de
la esterilización de la cámara de liofilización y todas las conexiones y los gases que conducen a
la cámara.

ATRIBUTOS Y REQUISITOS DE UN PRODUCTO SECO A CONGELACIÓN

El producto ideal de secado por congelación tiene una apariencia estética muy agradable (es
decir, torta intacta, color de apariencia uniforme y apariencia) (Fig. 10-2), resistencia suficiente
del ingrediente activo, estabilidad química y física, sequedad suficiente y otras especificaciones
que se mantienen durante todo el período de validez del producto, una porosidad suficiente que
permite tiempos de reconstitución rápidos y la ausencia de microorganismos (esterilidad),
pirógenos y material particulado después de la reconstitución. Además, después de que el
medicamento esté en solución, debe permanecer dentro de ciertas especificaciones
predeterminadas (por ejemplo, potencia, pH, libre de material particulado) durante un cierto
período de tiempo antes de la administración. El tiempo mínimo deseado para la estabilidad de
la solución después de la reconstitución es de 24 horas a temperatura ambiente, aunque muchos
productos, especialmente los biofarmacéuticos, tienen una temperatura ambiente
insuficientemente estable y deben refrigerarse incluso para estos cortos periodos de tiempo.
Además, los requisitos europeos que generalmente se han aplicado en todo el mundo requieren
productos sin conservantes antimicrobianos para ser utilizados (administrados)
"inmediatamente", que generalmente se refieren a las tres horas posteriores a la reconstitución.
Los productos liofilizados reconstituidos con diluyentes que contienen conservantes
antimicrobianos se pueden almacenar por mucho más tiempo dependiendo de la estabilidad del
medicamento en la solución que de los posibles problemas de contaminación microbiana.

Los requisitos de formulación liofilizada generalmente son diferentes dependiendo de si el

ingrediente activo es una molécula pequeña o grande. La formulación de un producto liofilizado
que contiene una molécula pequeña a menudo no necesita aditivos, dependiendo de la cantidad
de ingrediente activo por envase. Por ejemplo, muchos productos antibióticos liofilizados
contienen solo el antibiótico. Si el componente activo de los productos liofilizados está presente
en una pequeña cantidad (generalmente menos de 100 mg) donde, si se liofiliza solo, su
presencia sería difícil de detectar visualmente, entonces se utilizan aditivos. Esto es cierto para
muchos productos liofilizados de moléculas pequeñas, por ejemplo, los que contienen agentes
anticancerosos, y prácticamente siempre es cierto para productos liofilizados de moléculas
grandes. El contenido sólido del producto original idealmente debe estar entre el 5% y el 30%.
Por lo tanto, los excipientes a menudo se agregan para aumentar la cantidad de sólidos. Tales
excipientes se llaman "agentes de carga"; El agente de carga más utilizado en las formulaciones
liofilizadas es el manitol. Sin embargo, la mayoría de las formulaciones liofilizadas deben
contener otros destinatarios debido a la necesidad de amortiguar el producto y / o proteger el
ingrediente activo de los efectos adversos de la congelación y / o secado. Por lo tanto, los
agentes de tamponamiento tales como fosfato de sodio o potasio, acetato de sodio y citrato de
sodio se usan comúnmente en formulaciones liofilizadas. La sacarosa, la trehalosa, el dextrano
y los aminoácidos, como la glicina, suelen ser protectores protectores. Otros tipos de excipientes
estabilizantes a menudo requeridos en formulaciones liofilizadas son agentes tensioactivos o
agentes de unión competitivos. Otras razones para agregar excipientes a las composiciones
secadas por congelación, aunque típicamente son parte de la formulación diluyente en lugar de
la formulación liofilizada, son los agentes de ajuste de tonicidad y los conservantes
antimicrobianos para aplicaciones de dosis múltiples.
Cada una de estas sustancias contribuye a la apariencia característica del producto seco
terminado (tapón), por ejemplo, si la apariencia del producto terminado es opaca y esponjosa o
cristalina, firme o friable, expandida o encogida, o uniforme o estriada. Por lo tanto, La
formulación de un producto para liofilizar debe incluir consideraciones no solo de la naturaleza
y las características de estabilidad requeridas durante el estado líquido, tanto recién preparadas
como reconstituidas antes de su uso, sino también las características deseadas en el producto
seco, ya que se libera para uso comercial y se distribuye. al usuario final.

Una "regla general" para los productos liofilizados que contienen moléculas pequeñas es "la más
seca y mejor" porque la mayoría de los problemas de estabilidad con moléculas pequeñas están
relacionados con la humedad. Sin embargo, para productos liofilizados que contienen moléculas
grandes, "más seco no es necesariamente mejor". Cada molécula es diferente, pero en general
para las moléculas grandes, los efectos de la congelación y el secado pueden ser tanto o más
perjudiciales para el constituyente activo como el potencial para degradación hidrolítica

FORMULACIÓN DE COMPONENTES productos liofilizados –

COMPONENTES DE FORMULACION EN PRODUCTOS SECOS A CONGELACION

Las moléculas de fármaco liofilizadas, evidenciadas por el requisito de estar liofilizadas, son
moléculas relativamente inestables. Incluso en estado seco, las formulaciones liofilizadas
generalmente requieren aditivos para mantener el pH, la isotonicidad o la protección contra los
efectos adversos del proceso de congelación y ordenación. También pueden requerirse aditivos,
no para fines de estado seco, sino para mantener la estabilidad y, en algunos casos, la solubilidad
del fármaco en solución después de agregar un diluyente de reconstitución. Dichos aditivos para
mejorar la estabilidad y solubilidad de la solución incluyen tampones, agentes de acción
superficial y agentes complejantes. Para que los medicamentos reconstituidos sirvan como
productos de dosis múltiples, un sistema conservante antimicrobiano debe ser parte de la
formulación liofilizada o parte del diluyente de reconstitución. La Tabla 10-3 enumera ejemplos
de aditivos de formulación en formulaciones liofilizadas.

Las formulaciones liofilizadas que contienen moléculas pequeñas no requieren ningún aditivo,
debido a la gran cantidad de fármaco que se liofiliza (generalmente más de 100 mg por envase),
o los aditivos requeridos son para fines relativamente simples, como la adición de polvo al polvo.
amortiguando la formulación, proporcionando isotonicidad, o quizás ayudando a mantener la
lubricación del fármaco. Los desafíos de la formulación para formulaciones de moléculas
pequeñas son relativamente simples, al menos para los científicos experimentados en
formulación.

La estabilización de moléculas grandes durante el secado por congelación requiere mucho más
experiencia de formulación y desafío. Las formulaciones liofilizadas de moléculas grandes suelen
contener uno o más de los siguientes aditivos: agentes de carga, lioprotectores, surfactantes y
tampones. Algunas formulaciones liofilizadas de moléculas grandes, típicamente cuando el
contenido de proteína está tan diluido (niveles bajos de mg de tong / mL), contienen albúmina
de suero humano o algún otro componente que sirva como ligantes competitivos para minimizar
la pérdida de proteína debido a la adsorción a Fabricación de superficies (filtros, tubos, bolsas
de mezcla desechables, acero inoxidable) y superficies de recipientes primarios (vidrio y frote).
Ciertos aditivos como el manitol y la sacarosa también pueden servir como modificadores de la
tonicidad. Las sales se evitan usualmente porque disminuyen la temperatura crítica de la
formulación (temperatura de transición vítrea o muy baja) y se sabe que causan efectos de
destabilización dependientes de la concentración en las proteínas. La Tabla 10-2 presenta una
lista de formulaciones de proteínas liofilizadas, no para ser exhaustivas sino para dar al lector
una idea de la composición cualitativa de estas formulaciones.

Algunas moléculas de proteínas pueden verse afectadas negativamente por el proceso de

liofilización, es decir, el proceso de congelación y / o secado puede hacer que la proteína se
desnaturalice y agregue y pierda la potencia. Se ha encontrado que ciertos estabilizadores de
excipientes minimizan o previenen los problemas causados por la congelación y / o el secado.
Los excipientes que estabilizan la proteína contra los efectos de la congelación se llaman
crioprotectores.

La teoría primaria, aunque no está completamente aceptada, para explicar los efectos
crioprotectores de ciertos aditivos, se denomina teoría de "soluto excluido" o "exclusión
preferencial" (1-3). Algunos científicos han sugerido que los solutos que ayudan a evitar que la
proteína se disocie durante la congelación lo hacen porque se excluyen de la superficie de la
proteína, como pueden demostrar los experimentos de diálisis (donde la proteína y el excipiente
no se encuentran juntos en el dializado). Cuando se excluyen los solutos de la superficie de la
proteína, aumenta el potencial químico tanto de la proteína como del soluto. Esto presenta un
entorno termodinámicamente desfavorable para la forma desnaturalizada de la proteína, ya que
la forma madura es una forma desplegada y proporciona una mayor área de superficie al
disolvente. La forma nativa, con menos área de superficie, es por lo tanto favorecida
termodinámicamente.

Otra forma de explicar los efectos de los crioprotectores es el hecho de que inducen una
hidratación preferencial de la superficie de la proteína porque al no unirse a la superficie de la
proteína, esto favorece que las moléculas de agua se unan preferentemente y esto ayuda a
estabilizar el proteinstato nativo.

Los azúcares (sacarosa, lactosa, glucosa, trehalosa), los polioles (glicerol, manitol, sorbitol), los
aminoácidos (glicina, alanina, lisina) y los polímeros (polietilenglicol, dextrano, polivinilpirroli) se
presentan como posibles crioprotectores. Los mejores o, al menos, los crioprotectores más
preferidos parecen ser polietilenglicol (PEG) (peso molecular 3350 Daltons), sacarosa y
trehalosa.

Para las proteínas que requieren tanto la crioprotección como la lioprotección, puede ser
sensato emplear tanto un agente como el PEG junto con un azúcar. Un ejemplo de un producto
terapéutico comercializado con esta combinación es la venoglobulina-S, que contiene PEG y
sorbitol. Una posible advertencia al uso de PEG en formulaciones liofilizadas es la posibilidad de
una separación de fase líquido-líquido inducida por la congelación de la concentración, un
evento implicado en el despliegue de proteínas (4).

Las proteínas pueden no desnaturalizarse o experimentar ninguna pérdida de potencia durante

la congelación o en el estado de congelación, pero pueden experimentar efectos adversos
cuando se produce el proceso de sublimación y cuando se almacenan en estado seco. Tales
proteínas necesitan estabilizantes llamados lioprotectores. Los licoprotectores parecen
estabilizar las proteínas de los efectos del secado y el estado seco por lo que se denomina
hipótesis de "sustituto del agua" o hipótesis de "vitrificación". Los azúcares son excelentemente
protectores. Proporcionan una matriz vítrea que retarda los movimientos moleculares y reduce
las reacciones nocivas (5,6). También disminuyen los contactos proteína-proteína e inhiben las
reacciones perjudiciales dependiendo de dichos contactos (por ejemplo, la agregación) (7–9).
Los azúcares sirven como sustratos de reemplazo de agua que forman enlaces de hidrógeno a
proteínas en estado seco (4). La hipótesis de reemplazo de agua o sustituto está respaldada por
estudios de estado sólido que exploran técnicas como la infrarroja de transformada de Fourier
(10), la absorción de agua (11,12) y la calorimetría de disolución (13). Es probable que los
azúcares tengan todos estos roles mecánicos posibles. En su capacidad para estabilizar
proteínas.

A menudo, el mismo excipiente puede proporcionar tanto crio- y / o lioprotección. Un ejemplo

de crioprotección es el efecto de estabilización de la sacarosa, trehalosa, sorbitol y gelatina
sobre una preparación de adenovirus recombinante (14). Un ejemplo de lioprotección es el
efecto estabilizador de la lactosa y otros azúcares en la hormona de crecimiento humano
recombinante (rhGH) (15). Sin embargo, la lactosa, azúcar en reducción, no se prefiere debido a
su potencial formación de aductos.

En ambas teorías del estado seco, es importante que el excipiente estabilizador, el lioprotector,
exista en el estado amorfo, de ahí el nombre de "vitrificación" (formación de vidrio). La
estabilidad de la proteína en el estado seco resulta de la proteína existente con un soluto amorfo
en una matriz rígida y rígida, donde el contenido de agua en la matriz también ayuda a estabilizar
la proteína. Obviamente, un exceso de agua y la proteína se degradarán por procesos químicos
(por ejemplo, , desamidación), pero las proteínas necesitan cierta cantidad de agua para
mantener una estructura secundaria y alta. Por lo tanto, los excipientes que permanecen
amorfos durante el proceso de liofilización molecular interaccionan molecularmente con la
proteína amorfa y juntos la matriz confiere estabilidad a la proteína para la estabilidad a largo
plazo en estado seco. Se ha demostrado que, para una estabilización óptima, el azúcar
excedente debe permanecer en la misma fase amorfa que contiene el péptido o la proteína
(todos los mecanismos anteriores son compatibles con esta observación). Por ejemplo, la
cristalización de manitol se ha implicado en explicar la estabilización incompleta de la rhGH
liofilizada (16) y la estructura de la albúmina de suero bovino, la ovalbúmina, la \ beta -
lactoglobulina y la lactato deshidrogenasa (LDH) después de la liofilización (17). Además de la
cristalización, la separación de fases amorfas también puede ocurrir, particularmente en el
estado congelado.

Una vez que los excipientes cristalizan, ya no interactúan molecularmente con la proteína y no
pueden protegerla. Los excipientes amorfos, combinados con la proteína, tienen una
temperatura de transición vítrea (Tg) única en estado seco. Si la temperatura de
almacenamiento excede la temperatura de transición vítrea, el estado físico de la matriz seca
cambia de un sólido vítreo a un sólido gomoso que puede ocasionar un colapso o un colapso
parcial de la torta liofilizada. El colapso del producto no es necesariamente perjudicial para la
estabilidad de algunas proteínas, aunque la elegancia farmacéutica sigue siendo un importante
parámetro de calidad de los productos liofilizados.

La conversión gradual de excipientes del estado amorfo al cristalino ocurre cuando hay
movilidad molecular adecuada para la nucleación y el crecimiento de cristales (12). Movilidad
molecular es un término usado para describir el movimiento de moléculas en una formulación.
El agua actuará como un plastificante para disminuir la temperatura de transición vítrea de los
sólidos amorfos y aumentar la movilidad molecular del sistema amorfo (18). La movilidad
molecular ocurre típicamente cuando el sólido amorfo se almacena a una temperatura mayor
que su temperatura de transición vítrea, pero también ocurre a temperaturas inferiores a la
temperatura de transición vítrea de ciertos sólidos amorfos (19,20). La movilidad molecular de
las moléculas de proteína se puede medir mediante la resonancia magnética nuclear de 1H en
estado sólido (21), la temperatura de movilidad crítica basada en la relajación por resonancia
magnética nuclear (22) y la resonancia magnética nuclear en estado sólido a 13C (23). Todas
estas técnicas miden la capacidad de agua en las formulaciones liofilizadas y esto se puede
correlacionar con la estabilidad de la proteína.

Los aditivos en una formulación pueden prevenir la cristalización de carbohidratos. Los ejemplos
incluyen polímeros de alto peso molecular (p. Ej., Dextrano y polivinilpirrolidona, (24) y
proteínas (p. Ej., Somatotropina bovina recombinante (BST) (12). Los polímeros pueden
aumentar la temperatura de transición vítrea, disminuyendo así la movilidad del soluto amorfo,
mientras que proteínas como BST) se cree que interfieren con las tasas de nucleación o con el
número de núcleos formados para soportar el cristal.

La alfa1-antitripsina (rAAT) es un ejemplo de una proteína recombinante que se debe liofilizar,

pero no necesita crio o lioprotección (25). Es interesante que algunas proteínas usen crio y / o
lioprotectores, mientras que otras no lo hacen (Tabla 10-2). Las formulaciones sin crio y / o
lioprotectores son verdaderamente estables (p. Ej., Alteplasa, inhibidor de la proteinasa? 1,
glucagón, gonadotropina coriónica humana) sin la necesidad de estos estabilizadores o pueden
no ser tan estables y deben estar refrigeradas en estado sólido (por ejemplo, aldesleucina,
asparaginasa)

CONCENTRACIONES DE ESTABILIZANTES

Si se necesita crioprotección, la concentración relevante del estabilizador en solución antes de

la congelación debe ser del orden de 0,3 M o superior. Si se requiere la lioprotección, la
concentración relevante depende del nivel de proteína presente. El estabilizador de azúcar debe
estar en la proporción adecuada a la proteína (ya sea una relación molar para satisfacer los sitios
de "unión" del agua o la proporción en volumen si el mecanismo o mecanismos de degradación
relevantes se relacionan directamente con la dinámica del vidrio y la dilución de la proteína en
una matriz sólida inerte). En la práctica, una proporción de masa de aproximadamente 1: 1
(azúcar: proteína) generalmente se necesita para una estabilización adecuada,
independientemente del mecanismo o mecanismos que puedan estar funcionando.

Hay algunos datos que sugieren que la cantidad de azúcar para una protección óptima debería
ser suficiente para satisfacer los sitios de la proteína seca que tienen una fuerte afinidad por el
agua (por ejemplo, residuos orpo cargados). Los estudios de absorción de vapor de agua en
proteínas sólidas describen este nivel como una "capa de agua" (11,26). Satisfacer estos sitios
(al proporcionar suficientes azúcares amorfos para interactuar con ellos en el estado seco)
estabiliza las proteínas. Por ejemplo, la rhGH contiene aproximadamente sesenta y seis sitios de
unión fuertemente por agua por molécula de proteína; aproximadamente esta cantidad de
diversos azucares requeridos para la máxima estabilización del liofilizado en el almacenamiento
acelerado (16). El anticuerpo monoclonal humanizado recombinante (rhuMAb), una molécula
mucho más grande que contiene aproximadamente 500 de estos sitios de fuerte unión al agua,
una proporción de aproximadamente 360 a 500 moles de proteína mol de azucarero
proporcionó la mejor estabilidad de almacenamiento para la proteína liofilizada (27). Las
formulaciones con combinaciones de sacarosa (20 mM) o trehalosa (20 mM) y manitol (40 mM)
tuvieron una estabilidad comparable a aquellas con sacarosa o trehalosa sola a 60 mM. Las
formulaciones con manitolalona fueron menos estables.

Con el fin de proporcionar protección en el estado seco, un azúcar estabilizador generalmente

debe permanecer metamorfos en la misma fase que la proteína. Aun así, los azúcares de
cristalización (por ejemplo, manitol) se utilizan ampliamente, ya sea como agente de carga o
para promover la estabilidad. A este respecto, puede emplearse una combinación de excipientes
estabilizantes amorfos y cristalizantes. En este caso, la presencia del agente amorfo podría servir
para retardar la cristalización del otro. Por ejemplo, se informó para el rhuMAb liofilizado que
una combinación de sacarosa y manitol proporcionaba estabilización, siempre que la cantidad
total de azúcar satisficiera el nivel citado anteriormente (28). ENBREL proporciona un ejemplo
de un producto biofarmacéutico comercializado en forma liofilizada y que contiene una
combinación de manitol y sacarosa.

Además de los azúcares, también se emplean proteínas como la gelatina y la albúmina para
proporcionar una estabilización general en productos biofarmacéuticos liofilizados. En
particular, la albúmina humana (purificada a partir de plasma) se encuentra ampliamente en
productos biofarmacéuticos (y, por sí misma, también se considera un producto
biofarmacéutico).

CRISTALINOS Y EXCIPIENTES AMORFOSOS

En general, una formulación liofilizada que es predominantemente cristalina "se verá" mejor, es
decir, se verá más elegante farmacéuticamente que una formulación que es
predominantemente amorfa. Los solutos cristalinos también son mucho más fáciles de secar
porque el agua se adsorbe en la superficie del soluto. en lugar de dentro de la estructura
molecular del soluto, como es el caso de los amorphoussolutes. Sin embargo, las formulaciones
amorfas ofrecen ventajas de estabilidad si el ingrediente activo es una proteína, minimiza el
potencial de secado excesivo del producto y puede absorber la humedad durante un tiempo que
puede liberarse del cierre de goma.

El contenido de humedad de un producto liofilizado es obviamente una propiedad importante

para el monitoreo. En general, demasiada humedad significa que el producto eventualmente
colapsará y el ingrediente activo se degradará químicamente. Cada producto liofilizado debe
estudiarse para las especificaciones de humedad requeridas para la estabilidad a largo plazo en
estado seco. Las especificaciones de humedad residual para la mayoría de los productos están
dentro del rango de 0.5% a 3.0%. La cantidad de humedad residual no es tan importante como
donde reside el agua en la matriz liofilizada y qué tipo de morfología sólida existe. Si la matriz es
cristalina, el agua existe como agua superficial y no es probable que sea problemática. Sin
embargo, si la matriz es amorfa, o si el activo es amorfo con el resto de la matriz cristalina, el
exceso de agua puede interactuar molecularmente con el fármaco y causar una degradación
inaceptable.

El uso juicioso de excipientes puede influir enormemente en la estabilidad del producto. La

metilprednisolona se liofilizó en presencia de manitol o lactosa (29). Aunque el contenido de
humedad en los dos pasteles era idéntico, la tasa de hidrólisis era mayor cuando el agente de
carga era manitol. El manitol cristalizó durante la liofilización y tuvo poca o ninguna interacción
con el agua en el microentorno del fármaco. De hecho, el manitol cristalizado es esencialmente
anhidro, y cualquier agua residual se localizará solo en la fase del fármaco amorfo. Sin embargo,
la lactosa no se cristalizó y sirvió para interactuar con el agua residual, evitando así que
interactúe con e hidrolizando el medicamento. El grado de cristalinidad del agente de carga
puede tener un efecto significativo en la distribución del agua en la matriz liofilizada.

La distribución de la humedad residual en el producto secado terminado es tan importante como

el contenido total de agua. El contenido de humedad se midió inmediatamente después de la
liofilización en tres secciones de un producto liofilizado (parte superior, media e inferior del
tapón), así como la humedad a lo largo de la pared del vial (30). Encontraron que el contenido
de humedad en la sección superior era menor que el contenido de humedad en la sección
inferior y que el contenido de humedad más bajo de todo el tapón existía a lo largo de las
paredes del vial (Fig. 10-3). Por lo tanto, el secado a lo largo de las paredes del vial se produce
más rápido que el secado en el núcleo del tapón. Propusieron que un secado más rápido a lo
largo de las paredes del vial es el resultado de la contracción del producto observado durante el
secado, lo que proporciona una vía de baja resistencia para el escape de vapor a lo largo de la
pared del vial.

Muchas formulaciones liofilizadas contienen tres componentes sólidos: el activo, un agente de

formación de cristales y un estabilizador amorfo. Un buen ejemplo es la formulación para la
hormona del crecimiento humano, donde tanto el manitol como la glicina son aditivos con
cristalización de manitol durante el secado por congelación y la glicina que permanece amorfa.
Una revisión de las formulaciones enumeradas en la Tabla 10-2 muestra que varias contienen
más de un agente / estabilizador de carga que ayuda a mantener un componente amorfo y
forman una matriz amorfa protectora con la proteína.

Manitol

El manitol, que es un excipiente importante utilizado en formulaciones liofilizadas, es el tema

de los manipuladores. La cristalización de manitol está muy influenciada por la velocidad de
congelación (31-33), la concentración (32) y otros excipientes presentes en la formulación, tales
como sacarosa, trehalosa, ácido cítrico, hidroxipropil - cicliclodextrina, polisorbato 80 (34) y
tampones de fosfato y polímeros (33)

La sacarosa afectará especialmente el grado de cristalización del manitol y causará niveles más
altos de hidrato de manitol y la humedad residual resultante (35).

El manitol cristaliza en diferentes formas polimórficas en función de la concentración (en función

de otros componentes en la formulación) y la velocidad de congelación. Las concentraciones
bajas de manitol formaron el polimorfo \ alpha, mientras que las concentraciones más altas
favorecieron la formación del polimorfo \ delta (36). Al menos tres polimorfos de manitol están
presentes en diferentes proporciones en el producto liofilizado, dependiendo de la velocidad de
congelación. La congelación rápida produce el polimorfo predominantemente, mientras que las
velocidades más lentas (0.5 ° C / min) favorecen la formación del polimorfo. El recocido del
producto congelado hará que el polimorfo sea el más prominente. El almacenamiento de un año
hará que el polimorfo se convierta en una combinación de polimorfos y. No existe evidencia de
que la formación de las formas polimórficas \ alpha, \ beta o \ gamma del manitol, sola o en
varias combinaciones, tenga algún efecto sobre las características de secado / procesamiento,
la apariencia de la torta y la estabilidad de la producción.

Se puede formar un hidrato de manitol durante la liofilización, particularmente en condiciones

no conductoras para producir manitol cristalino bien desarrollado, por ejemplo, bajas
temperaturas y soluciones concentradas (37). Esto parece imposible, pero los autores muestran
pruebas térmicas y cristalográficas de una forma hidratada de manitol que sobrevive a un ciclo
de congelación y sequedad. Thishydrate es metaestable, capaz de convertirse en polimorfos
anhidros de manitol al calentarse. Mientras no se investigó específicamente, estos autores
teorizaron que los hidratos de manitol pueden potencialmente reducir las tasas de secado de
las formulaciones que contienen manitol y pueden redistribuir el agua residual a la sustancia
farmacéutica tras la cristalización del manitol durante el almacenamiento en condiciones
aceleradas. Debido a que la formación de hidratos de manitol varía mucho de un vial a otro,
incluso en En el mismo lote, esto también podría causar problemas con la variación de los niveles
de humedad de un frasco a otro. El recocido durante la etapa de congelación es el mejor método
para promover la cristalización de la forma anhidra y reducir o eliminar el hidrato de manitol.

La formación del hidrato de manitol formado durante la congelación puede desolvatarse y

convertirse a la forma anhidra realizando un secado secundario a 40 ° C o más (38). En este
documento también se destacó que las mezclas de manitol y sacarosa en una proporción de 4 a
1 produjeron con éxito formulaciones liofilizadas estables de cuatro proteínas (daniplestim,
leridistim, promegapoietin y progenipoietin) utilizando una temperatura de producto de secado
primario de -10 ° C. El manitol cristalino permite que el secado primario se realice a
temperaturas superiores al Tg de sacarosa amorfa en la formulación.

Mantener el manitol en estado amorfo durante la liofilización para lograr una estabilización
óptima puede lograrse (39). Todas las enzimas estudiadas se protegieron cuando el manitol se
mantuvo metamorfos, pero se volvieron inestables con un aumento en la cristalinidad del
manitol. El manitol en tortas liofilizadas que contenían enzima y tampón de fosfato de sodio
permaneció amorfo a bajas concentraciones (<200 mM), aunque el recocido de la solución
congelada dio lugar a la cristalización de manitol. Sin embargo, el manitol en concentraciones
más altas (> 250 mM) en esta formulación enzimática-fosfato cristalizó y no tuvo efectos
protectores sobre la conservación de la actividad enzimática después del secado por
congelación.

MÁS SOBRE ESTABILIZACIÓN DE EXCIPIENTES EN FORMULACIONES LIOFILIZADAS

Los plastificantes (los ejemplos incluyen glicerol, propilenglicol, etilenglicol o DMSO)

modificarán el disacárido y los vidrios lioprotectores poliméricos (40). El mecanismo de
estabilización proteica propuesto se atribuyó a lo siguiente: los plastificantes llenan pequeños
volúmenes dejados abiertos por el formador de vidrio del huésped más grande (o más rígido),
lo que restringe el movimiento y, por lo tanto, ralentiza la dinámica rápida del vidrio y la
posterior degradación de la proteína. Este enfoque tiene una aplicación limitada debido a las
cantidades relativamente grandes de plastificante requeridas, y también debido a la sugerencia
de que los oligómeros de peso molecular más bajo, como el etilenglicol, son mejores
estabilizadores.

La rafinosa no licuará un fármaco inestable, así como la sacarosa o la trehalosa (41). Esta
observación fue en contraste con otros estudios (42-44) que mostraron que la rafinosa es tan
efectiva como la astrehalosa y superior a la lactosa, la maltosa y la sacarosa para estabilizar
varias enzimas. Una posible explicación de estas diferencias puede implicar diferencias en las
condiciones de deshidratación y en la capacidad de almacenamiento.

El manitol y la glicina en soluciones congeladas influirán entre sí en la cristalización (45). Se

demostró que la glicina tenía una tendencia inicial más fuerte a cristalizar, mientras que era más
fácil influir en la cristalización del manitol. Las sales tampón, como el fosfato de sodio, inhibieron
la cristalización de manitol y glicina. La actividad de LDH se correlacionó con el grado de
cristalización de estos excipientes (fig. 10-4).

Las formulaciones de LDH que contienen maltodextrina protegieron la LDH contra la inactivación
durante el secado por congelación debido a la naturaleza amorfa de estos almidones
parcialmente hidrolizados (46). También se informó que las metododextrinas son mejores
lioprotectores para la LDH que la sacarosa o la maltosa, aunque el mecanismo es desconocido.
Los efectos de estabilización de los aditivos amorfos sobre las proteínas liofilizadas son bien
aceptados sobre la base de varias publicaciones. La galactosidasa se estabilizó con inositol
mientras este receptor permaneciera amorfo, pero si el inositol cristaliza durante el
almacenamiento, la actividad de la enzima disminuye (47). La cristalización del inositol se evitó
mediante la adición de polímeros tales como dextrano, Ficoll y carboximetilcelulosa de sodio.

La estabilización de las proteínas liofilizadas no solo depende de los parámetros de la

formulación y del proceso de deshidratación, sino que también depende a veces de la
formulación del medio de reconstitución (48). La agregación del factor de crecimiento de
queratinocitos después de la reconstitución con agua puede ocurrir rápidamente, pero varios
aditivos como los polisacáridos sulfatados, surfactantes, polifosfatos y aminoácidos en el medio
de reconstitución reducirán significativamente esta agregación.

se aplicó para predecir la temperatura de transición vítrea de un tripéptido modelo en presencia

de diferentes azúcares (sacarosa, lactosa, trehalosa y maltosa) tanto en soluciones congeladas
como en productos inlofilizados (49). La correlación fue excelente entre las proporciones
pronosticadas y reales de Tg para varios de tripéptido a azúcares. Los autores también
mostraron un efecto significativo del cloruro de sodio sobre la Tg 'del tripéptido en solución
congelada, pero ningún efecto después de la liofilización. La figura 10-5 de este documento
demuestra el efecto plastificante del agua al disminuir la temperatura de transición del vidrio.

se aplicó para predecir la temperatura de transición vítrea de un tripéptido modelo en presencia

de diferentes azúcares (sacarosa, lactosa, trehalosa y maltosa) tanto en soluciones congeladas
como en productos inlofilizados (49). La correlación fue excelente entre las proporciones
pronosticadas y reales de Tg para varios de tripéptido a azúcares. Los autores también
mostraron un efecto significativo del cloruro de sodio sobre la Tg 'del tripéptido en solución
congelada, pero ningún efecto después de la liofilización. La figura 10-5 de este documento
demuestra el efecto plastificante del agua al disminuir la temperatura de transición del vidrio.

Todos los solutos se concentran durante el proceso de congelación. Si los solutos se cristalizan,
se separan de los solutos que no cristalizan. Por lo tanto, solo los solutos que no cristalizan
tienen ningún contacto molecular con una proteína en estado congelado. La concentración
durante la congelación puede tener varios efectos adversos posibles. Estos incluyen los efectos
desnaturalizantes de las sales en las proteínas, la cristalización de los componentes del tampón
que cambian el pH y la desnaturalización por congelación de algunas proteínas si no están
protegidas por excipientes crioprotectores.

La protección del azúcar de la proteína liofilizada (albúmina de suero bovino) se propuso

aplicando una ecuación de tipo Langmuir al analizar los datos de estabilidad para sugerir una
dependencia del contenido de la proteína-hélice en estado seco de la capacidad del azúcar para
formar una matriz amorfa con moléculas de proteína (50). La hipótesis era una suposición de
que la interacción de un azúcar y una proteína es una interacción saturable de tipo adsorción
que una ecuación de Langmuir puede modelar. La capacidad de la matriz de azúcar amorfa para
preservar el contenido de hélice \ alpha de la proteína se determinó mediante espectroscopia
infrarroja de transformada de Fourier (FTIT) que midió la magnitud del cambio en los contenidos
de la estructura secundaria de la proteína en relación con la de la proteína nativa. La
dependencia del contenido de hélices? (C? Hélice) sobre el contenido de azúcar (Csugar) podría
representarse mediante la ecuación

donde K indicó la capacidad de la matriz de azúcar amorfa para asociarse a un punto de equilibrio
con la proteína, y la hélice C0 y la hélice Cmax indicaron el contenido de hélice \ beta en ausencia
de azúcar y niveles saturados de azúcar, respectivamente. Los efectos de la conservación de los
azúcares podrían caracterizarse por K y Caxx-hélice, mostrando que ambos valores tendían a ser
más altos al disminuir los valores de T para el azúcar amorfo. Una matriz de azúcar amorfa con
valores de T más bajos es estructuralmente más flexible. En este estudio, la sacarosa (Tg65 ° C)
mostró un mayor efecto estabilizador en comparación con la trehalosa (Tg80 ° C). Sin embargo,
de este estudio no se puede concluir que la sacarosa sea un estabilizador superior.

No todos los azúcares son elecciones sabias como estabilizadores para proteínas y péptidos
liofilizados. Los azúcares reductores, como la glucosa, la lactosa y otros monosacáridos, pueden
formar aductos con la proteína en el primer paso de la reacción de Maillard. La glucosa causó
modificaciones covalentes rápidas de la relaxina humana, donde se formaron aductos
covalentes de glucosa con varios aminoácidos en las cadenas laterales de la proteína (51). La
glucosa también causó una cantidad significativa de escisión de serina del extremo C-terminal
de la cadena B de la relaxina. Estas reacciones de degradación no ocurrieron si se utilizara
manitolor trehalosa en lugar de glucosa como agentes de carga y estabilizadores.

La hemoglobina es un ejemplo de una proteína que no está protegida por excipientes amorfos
durante la liofilización (52). La sacarosa, la trehalosa, el Tween 80 o el Triton X-100 tuvieron poco
efecto protector contra el daño inducido por la separación de fases durante el secado por
congelación de las soluciones de hemoglobina. Sin embargo, los solutos de cristalización como
el manitol pudieron estabilizar la hemoglobina al segregar la solución concentrada de
congelación en dominios microscópicos que bloqueaban la propagación y la nucleación de los
eventos de separación de fases

PASOS EN EL DESARROLLO DE UNA FORMULACIÓN Y PROCESO SECOS A CONGELACIÓN

El desarrollo de productos liofilizados implica la combinación de la ciencia de la formulación y el

desarrollo del proceso. No se puede desarrollar la formulación sin coordinación con el desarrollo
del ciclo de secado por congelación. Y, por supuesto, el ciclo no se puede finalizar sin que se
seleccione una fórmula final. Los pasos generales involucrados en el desarrollo de productos de
secado por congelación son los siguientes:

1. Determine la temperatura crítica del fármaco solo utilizando métodos analíticos

térmicos como la calorimetría diferencial de barrido, la resistencia termoeléctrica o la
microscopía por congelación. Esta temperatura será la base inicial para determinar los
puntos de ajuste iniciales de la temperatura de congelación y secado primario. La Figura
10-6 muestra un termograma en el que la temperatura de transición vítrea para el
manitol amorfo y la temperatura eutéctica para el manitol cristalino se resuelven. La
Figura 10-7 muestra dos fotos de un producto que se liofiliza con microscopía de secado
por congelación, donde se puede ver fácilmente el colapso del producto en la segunda
 foto. Por lo tanto, el producto debe mantenerse a temperaturas inferiores a la
temperatura donde se observa el colapso hasta que todo el hielo se haya sublimado
durante el secado primario.
2. Congele la droga sola y determine qué sucede.
3. Si se necesitan excipientes, comience con los excipientes comúnmente conocidos que
producen aceptables pasteles con velocidades de reconstitución rápidas, tienen
temperaturas de colapso mínimas y proporcionan el producto final deseado con
respecto a la naturaleza del sólido (cristalino frente a amorfo).
4. Llevar a cabo pruebas de estrés iniciales (por ejemplo, ciclos de congelación y
descongelación, estudios de agitación) para detectar las formulaciones iniciales para
eliminar las peores. Se usó la congelación y descongelación para determinar los efectos
de las condiciones de solución (pH, sal), la concentración de proteínas, las velocidades
de enfriamiento y calentamiento y los materiales de contención sobre el potencial de
agregación de un anticuerpo IgG2 (53). Las muestras estresadas en recipientes de
plástico o vidrio contenían cantidades bajas de agregados. El almacenamiento en
contenedores congelados de teflón o comerciales, sin embargo, llevó a niveles
significativamente más altos de formación agregada.
5. Las formulaciones deben tener un contenido sólido entre 5% y 30% con un objetivo de
10% a 15%.
6. Determine la temperatura máxima permitida permitida durante la congelación y el
secado primario (Te / Tg ’/ Tc) de la formulación provisional. De nuevo, consulte las
Figuras 10-6 y 10-7 que muestran cómo se obtienen estas temperaturas críticas.
7. Seleccione el tamaño de vial adecuado y llene el volumen.
8. Seleccione el cierre de goma apropiado, uno que tenga una baja transmisión de vapor
de agua, no absorba el vapor de aceite y un diseño superior que minimice la adherencia
al estante.
9. Una vez que la formulación y el paquete se seleccionan provisionalmente, determine los
parámetros apropiados de proceso de secado por congelación, por ejemplo, la velocidad
de congelación, la necesidad de recocido, la presión durante el secado primario, la
presión durante el secado secundario y el sellado al vacío o nitrógeno.
10. Optimice la formulación y el proceso en base a la información de estabilidad tanto
durante como después del procedimiento de liposucción y después del almacenamiento
en estado seco.

Los expertos (54) en el desarrollo de formulaciones liofilizadas de productos biofarmacéuticos

proporcionan reglas de formulación somebásicas a seguir:

1. Use un disacárido no reductor (sacarosa o trehalosa) que forme una matriz amorfa con
la proteína en estado sólido. No use azúcares reductores (lactosa, glucosa,
maltodextrinas) ya que estos pueden degradar las proteínas a través de la reacción de
Maillard.
2. Use un agente tensoactivo no iónico como el polisorbato 20 u 80 (55).
3. Use un agente de carga cristalizante como el manitol o la glicina, pero no use agentes
de carga cristalizantes solos con la proteína.
4. No use aditivos voluminosos como el dextrano aunque tengan altas temperaturas de
colapso. Son demasiado voluminosos para interactuar con la proteína y formar una
matriz amorfa.
CONSIDERACIONES DE EMBALAJE

El envase primario para productos liofilizados es el vial de vidrio. Los viales y jeringas de plástico
(de doble cámara) también pueden ser sistemas de empaque primario para productos
liofilizados, pero la gran mayoría de las formas de dosificación liofilizadas están contenidas en
viales de vidrio.

Los viales de tubo son preferibles a los viales moldeados por soplado porque la configuración
del fondo del vial es más plana y más delgada, lo que permite un mejor contacto con la superficie
del estante y una transferencia de calor más eficiente del estante al producto.

Los cierres de caucho más comunes para la liofilización son configuraciones de ventilación
simple (estilo iglú) o de ventilación doble (de dos patas) (Fig. 10-8), aunque existen cierres de
ventilación triple e incluso de hasta 12 salidas. Según DeGrazio (56), aunque el área de
ventilación total es la misma para estas configuraciones, las configuraciones de 1, 2 o 3 salidas
son más eficientes en la conductancia del vapor de agua que sale del vial en comparación con el
cierre de 12 salidas.

Un problema común con los tapones ventilados (ranurados) (cierre) es la tendencia a

desprenderse de la apertura del vial, ya que es posible que el tapón no esté lo suficientemente
asegurado ya que está parcialmente insertado. Este problema existe justo después de que el
tapón se haya insertado parcialmente en la línea de llenado, luego se seguirá cargando el
producto en el liofilizador. Hay un "surco" dentro del cuello del tapón que se supone que ayuda
a "agarrar" el cierre parcialmente insertado con el cuello del vial. Tales "ranuras" son menos
prominentes con los cierres de ventilación múltiple en comparación con el cierre de ventilación
simple que simplemente tiene más área de superficie de la ranura.

Otros dos problemas comunes con los cierres de caucho y los productos liofilizados durante la
fabricación son (i) el cierre no se inserta completamente en la abertura del vial después de que
se completa el ciclo de liofilización, y (ii) el cierre se pega al estante después de que los estantes
hayan bajado a Permite la inserción completa del cierre en el vial.

The West Company ha desarrollado un tapón especial para productos liofilizados (LyoTecTM) en
el que la superficie superior del tapón se trata con FlurotecR ™ que evita que el tapón se adhiera
a las placas de presión superior de los estantes de liofilización, que de otro modo requerirían
una intervención manual Viales del liofilizador. El segmento de tapón que hace contacto con la
abertura del vial de vidrio no está recubierto para permitir la máxima integridad del cierre del
recipiente (ver Fig. 7-10).

CO-SOLVENTES

El alcohol butílico terciario (TBA) ofrece ventajas cuando se usa como co-disolvente con agua
(57). Se usó TBA para permitir que la torta liofilizada del antibiótico, tobramicina, se aflojara
fácilmente como un polvo que fluye libremente para que los contenidos se puedan verter del
vial en la cirugía ortopédica (58). La aplicación de una velocidad de congelación lenta permitió
la cristalización del disolvente TBA antes de secar, con recocido después de la congelación,
reduciendo significativamente el nivel de TBA residual en la torta final.

Teagarden publicó un excelente artículo de revisión sobre el uso de co-solventes no acuosos de

secado por congelación (59). Si bien el uso de co-solventes en preparaciones liofilizadas se ha
utilizado en al menos 20 productos (Tabla 1 en el documento de Teagarden), pocos están
disponibles comercialmente. Un producto que se comercializa actualmente, CaverjectR ™ Sterile
Powder, se prepara utilizando una solución de co-solvente (20% v / v de terc-butanol / agua)
que se liofiliza.

El uso de co-solvente en formulaciones liofilizadas ofrece algunas ventajas, pero Teagarden debe
considerar las limitaciones significativas según lo revisado y resumido aquí y en la Tabla 10-4.Los
niveles de solventes residuales en el producto terminado pueden ser un problema, pero los
pasos pueden Tomarse para controlar las cantidades. Mientras que los niveles de terc-butanol
residual en una matriz cristalina están generalmente en el rango de 0.01% a 0.03%, los sistemas
amorfos pueden contener 3% de residuos o más. Estos niveles pueden disminuirse en
formulaciones amorfas al (i) humidificar el sólido seco para disminuir la temperatura de
transición del vidrio, permitiendo la cristalización de la matriz y la posterior liberación rápida del
terc-butanol residual; (ii) agregar una etapa de recocido para permitir que cualquier hidrato de
terc-butanol no congelado restante se cristalice y produzca un producto más uniforme; o (iii)
aumentar realmente la cantidad de terc-butanol en la formulación a un nivel por encima de la
concentración umbral requerida para la cristalización eutéctica del disolvente. Se ha
demostrado que estos pasos reducen la cantidad de terc-butanol residual a niveles de 1% o
menos.

TÚ HACES TODAS
LAS DIAPOSITIVAS,
YO ME HE TOMADO
EL TIEMPO DE
TRADUCIR TODO ….
GRACIAS :D