Agar MacConkey

la actividad practica se lleva a cabo dentro del laboratorio donde se concentran todos los
conocimientos obtenidos en la teoría para que con el aprendizaje por descubrimiento
implicando las competencias genéricas de un estudiante universitario tendrá un egreso
satisfactorio con los conocimientos obtenidos que le facilitaran a un mejor nivel de aprendizaje

OBJETIVOS

 Aprender a elaborar un reactivo denominado medio de cultivo

 Observar los diferentes tipos de de bacterias de gran positivas y negativas
 Conocer el tipo de bacterias y conocer el medio de cultivo

MARCO TEORICO

El agar MacConkey es un medio de cultivo selectivo para separar selectivamente bacilos Gran
negativos. El cristal violeta disminuyen el crecimiento de organismos Gran Positivos lo que
permite la selección de bacterias Gran Negativas. Las bacterias entéricas que tienen la
habilidad de fermentar lactosa pueden ser detectadas utilizando el carbohidrato lactosa y
el indicador de pH rojo neutro (EcuRed, 7 de septiemebre de 2018)

Es un medio de cultivo específico para cepas que fermentan la lactosa y bacterias de Gran
Negativas los ingredientes para este medio so los siguientes: colorante cristal violeta, sales
biliares, colorante rojo neutro, peptona, lactosa y clorudo se sódico (Britania, 2015)

USO

Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo,
aerobios y anaerobios facultativos a partir de muestras clínicas aguas y alimentos. todas las
especies de la familia esterobacteriaceae desarrollan en el mismo (Group, 2016)

CONTENIDO Y COMPOCION
Formula (g/l)
Peptona 17.0
Pluripeptona 3.0
Lactosa 10.0
Mezcla de sales brillantes 1.5
Cloruro de sodio 5.0
Agar 13.5
Rojo neutro 0.03
Cristal violeta 0.001

MATERIALES

 guantes látex
 Barbijo
 Bata para laboratorio
  Tubo de ensayo
 Pipetas de 10ml
 Barrilla de vidrio
 Placas de vidrio
 Tapones de algodón
 Asa de siembra
 Mechero
 Gradilla
 Microscopio
 Incubadora
 Autoclave
 Tinción de gran (cristal violeta, lugol, alcohol acetona y safranina)
 Cubre objetos
 Porta objetos
 Aceite de inmersión
 Agua destilada
 Balanza
 espatrulas
 Matraz Erlenmeyer de 50 mL
 Matraz Erlenmeyer de 250 o 300mL
 Probeta de 100 o 250 mL
 Papel kraft o de estraza
 Maskin-tape
 Plumones indelebles de punto grueso

PROCEDIMIENTO

1. Reconocer el envase para las cantidades y volúmenes requeridos, preparar el agar

macconkey suspendiendo los polvos en agua destilada. para los envase (matraz)
donde disolver el contenido
50g 100ml
X 50ml
Resultado = 2.5g
2. Disolver durante 1 a 2 minutos con una barrilla de vidrio
3. Autoclave a 121 °C durante 15 minutos
4. Verter a las placas de cultivo 15 a 20ml en la placa, tubo de ensayo y dejar solidificar (
en la incubadora)
5. Sacar una muestra del agar con una asa de siembra esterilizado a un porta objetos y
disolver los grumos de la muestra
6. Hacer el extendido con un palillo de madera.
7. Dejar secar a temperatura ambiente o fijarlas utilizando un mechero.
8. Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado tres veces
aproximadamente).
9. Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar un minuto.
 10. Enjuagar con agua no directamente sobre la muestra
11. Agregar lugol y esperar un minuto aproximadamente.
12. Agregar alcohol acetona y esperar entre 5 y 30 segundos según la concentración del
reactivo (parte crítica de la coloración). (las gram - se decoloran, las gram + no)
13. Enjuagar con agua.
14. Tinción de contraste agregando safranina o fucsina básica y esperar un minuto. Este
tinte dejará de color rosado-rojizo las bacterias gram negativas.
15. Lavar levemente con agua
16. Se deja secar y se observar en el microscopio agregándose aceite de inmersión a un
objetivo de 100x para identificar los tipos de bacterias

RESULTADOS

 No ubo resultados por una mala tencion de gram o un mal cultivo

CONCLUCION

Bibliografía
Britania. (2015). mac conkey agar. laboratorio de britania:
http://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a2ed674cf661.pdf.

EcuRed. (7 de septiemebre de 2018). agar. california: https://www.ecured.cu/Agar-agar.

Group, M. (2016). MacConkey Agar. palmeras:

http://www.mastgrp.com/IFUS/IFU328_SPA.pdf.