MBLG0, LUIS ALffiRT0 SANCHEZ AI.IGULO MBLGO.

JOSE LUIS GUTIERREZAPONTE

PRACTICA NUMERO 01
ra *il É¡^r

[I4ATERIALT,$, IN$TRUffiETüTO$ Y EQIJ¡Pü$ SEL LABORATORIO NE SffiLOGIA

It\¡TRODuCClÓ|t|:

fl MATÉRIAL DÉ V¡DR}O, es la parte del insfumento cuyo uso es indispensable en

todo laboratorio de Biología. Existe una gran variedad de este material, cuyas formas y

dimensiones uan a depender del uso a qr:e están destinados. De igual forma existe

numerq$a$ marcas de fabricacíón , todas ellas deben cumplir *cn ciertos requisitos para ser

considerados cümo material de calidad. Enfe los requisitos que deben pnseer es que debe

ser de buena ralidad, neutro, resistente a la acción mesánica y a cambios de temperaiura,

transparentes, de superficie lisa, sin rayadura, qus contengan una minima cantidad de

álcati libre y que tengan bajo coeficiente de dilatación. [nbe las rnaffas que cumplen c0n

estas requisitos tenemos: PYRIX, VYCCR, KltulAX, GINA GLASS, l{lMBLE, etc.

Enhe los materiales de vid*o más indispensable en un laboratorio de biología tenernos:

)' Varillas de Vidrio Macizo.

F Beacker o Vasos de PrecipitaciÓn.

F' Tubos de Leishton )> Jeringas y Agujas Hipodérmicas.

ts Frascos viales para Hemocultivos,

>' Placas de Brewer. Vacunas, Cultivos de Tejidos.

serológicas o de medida. > Placas de Roux.

ts Morteros y Pilones.

F Frascos Para almacenamiento de

reactivss.

Guia de Prácticas de BIOLOGIA CELULAR UNIVTRSIDAD LOS ANGFLES DE CHIMBOTK

MBIG0. LUIS ALBERTO SANCHEZ ANGULü t'r1BLGO. JO$E LUIS GUTIERREZ APONTE

OTROS MATFRIALES DT \IIDRIÚ:

flxisten otrü$ materiales de vidrio ccma: Embudas üon cuello corto 0 largo, goteros,

iunas de reloj de diverscs diámetros, termérnetros clÍniccs y de ambiente, ampotletas para

almacenar cultivns, s¡leros y vscunas en líquidos a lia{ilizados, cápsulas de porcelana con

fondo plano c redondo, cámara y pipeta cuentaglóbulos.

MATTR¡ALHS DE OTR,A. NATURALf;ZA;

F Espátulas de rnetal con mango de madera,

i [stuches cilindricos o cubilares,

'P üanastillas o cestos de m*tal.

b Trínodes.

EQUIPOS E ¡I{$TN.UMHNTO$;

F Autociave.

r Aparato de Arnald-Koch.

,> Baños de agua.

F incubadoras y Hornos: Incubadoras de convección por gravedad, Mecánica^

> Centrifugas.
F Ullracenfifugación,
ts' Espeutrofotórnetra,

F Liofilizador, Potenciómetro, Refigeradoras y cüngeladoras.

,,- Equipo de filtración

CIBJETIVOS:

@ Reccnocer lcs principales maieriales, insfu'umentos y equipos del laboratoris de

Biolouia.

GUiA dC PráCtiCAS dC BIOLOG|A ÜTLUIAR 2 UNIVTRSIDAD LOS ANGELES DE CHIMBOTE

fidBLGO, LUIS ALBTRTO SÁNCHTZ ANGULü II/E;LTO, JO$[ LUIS GUTITRREZ APONIT

ruOTA |I¡IPüRT,{HTE:

Tado elequipa que $e empl*a en lüs fabajos prácticos permanecerá en el laboratorio y

por nínguna razón debs ser sacadc fuera de el. $i algún alumnc¡ o rniembro de una mesa

observa la ausencia de cualquier pieza del material, debe dar cuenta inmediatamente al

nrofesor.

Pnincipale* fflateriales, lnstrurnentos y f;r¡uipcs del $-aboratorio de Biología de la

Universidecl fios Ángel*s cJe thimbote

EQUIFü$ I IhISTR{JME$ITOS DE L-ABORATCRIO

Estufa'MEhíMERT Lupas simples.

Baña Marfa. Cronirmefo.

Espectrofoti¡metro. Reioj.

Fctocorímeiro. Lupas estereascópicas.

Cenirifuga para iubos. Micrétomo "AMIRICAN OPTlfiAL""

Cenf ífu ga para micr,rhematocrito. Horno

Cocina eléirica. Autoclave.

-$ARTOTIUS..
Balan¿a anal ítíca Refrig¡erador.
*OHAUS'.
Balan¿a de un sols platilla Cámara TJS "NEUBAUER"

Balanza de dos plaiiltos "OHAllS". Estuche de disección.

Agitador magnético,

Guia de Prácticas de Bl0L0GlA CELULAR UNIVERSIDAD LO$ ANGELES DE THIMtsÜTI

MBLG*. LUI$ ALBEIITO SÁI.JCHT; ANGUI.O MBLGü. JOSF LUIS GUTIIRREZ APOIITE

MATHf.IIAL iIF VIilRiO:

kifasato, Buret¿,rs graciuadas.

Matraces vaf umétricas. Pipeters graduaa'as.

Balanes vokrmÉtricas. Pipetars serológicas,

Probetas g.¡raduadas. Pip*tas de shali,

Fiol*s voluméfricas. Pipeftrs Fasteur.

Vaso de precÍpitacirirr. Pipetas de decaniación

Copa gmcluada. Term(:mebo rectal,

Frascos ds inca ancha. TermC:,mefo oral

Frascori gotero. TermiLme8o de laboratorio.

Frascos para reactivos. Gcten:s.

Flacas petris. Tubas¡ de ensayo.

Tubas rcfiigrlrante, P¡sggr)s "üüPLlf{'.

Uradensimetro l-ánlinas p'ytaobjnlto:i y laminill;rs cubre r:bjetos.

Embudr: Fuchner. Lámin as nscavedas para reaccirln*s serológicas

Embudos,ie separación.
Mortern.

MATE$I|AL DE MET,SL Y MADERA:

Fuentes de ace¡o inoxidable. [spátulas.

Fuente de prtr*elana. Escohillas.

Cajas p'oria laminas. Mechr:lro de atcahol.

Gradill¿rs para tubos de ensayo. Mechrvo de bunson.

Tiras de papel cle pl{. Bisturís.

Pinza de fr,{ahr. Hojas de bisturís

Pinza de rnadera. Tijera,

Pinza de metal. Contametro.

Pinzas de disección, Asa bacteríológica,

Tenazas rie metal

Guia de Prácticas de Bl0LüG|A CELUI-AR UNIVE:RSIDAD LOS ANGELES DE CHIMBOTE

MBLGO, LiJIS ALBERTO SÁNCHEZ ANGULO I\,tgLGO. JOSE LUIS GUIf ERRFZ APONTE

TÁmIru*S: EQUIPOS DE LABORATORIO

Guía de Prácticas de BIOLOGiA tfLULAR 5 UNIVIRSIDAD LOS AF¡GELES DÉ CHIMBOTE

MFLGO, LUIS ALsERIO $Ai!CHFZ ANGULO fu1BLGÜ. JOSE LUIS GUTJERRFZ APÜNTE

Lámina 2

Guia de Prácticas ¿je BtoLoGiA CELULAR 6 UN|VERSTDAD LCS ANGELES DÉ CHIMBOTE

MBLGO. tUIS ALEIERTO SANCHEZ ANGULC MTiLGO. JCISü LUiS GUTIERRI¿ APONTE

Lámina 3

GUiA dE PIáCt|CAS tic BIOLOGiA CELULAR 7 UNIVERT}IDAD LOS A¡¡GELES DE CI'IIMBOTE

I,,IBLü0. LUIS ALñIR TÜ SAhICI-IEZ Af{GULO i\4Bl-G0. JOSF LLJIS GU-flERRE.Z APO¡ITE

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Lárnina 4

GUíA dE PráCI|CAS dC BIOLOGiA CETULAR 8 UNruTRSIDAD LOS ANGÉLES DE 1]H ÍIIHOTE

MBLGO, LUIS ALBIRTO $ANTHEZ ANüULO MBLGO JOSE LUIS GUTIIRRE¿APONTE

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Lámina 5

GUiA dC FráCtiCAS dE BIOLOGiA CELULAR 9 UNIVERSIDAD LOS ANGFLTS DE CHIMEOIE

fvlBLGO. LU¡$ ALBERTO SANCHEZ ANGULO M8LGO. JOSE LUIS GUTIERREZ APüNTE

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Lánrina 0

Guía de P|ácticas c]e BIOLOGÍA CüLULAR 1O UNIVERSIDAD LOS ÁNGTLES DE CHIMBOTE

MSLGO, tUIS ALBERTO $ANCHEZ ANGULÜ [4BLGO. JOSE LUIS GUTIERREZ APONTE

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Lá¡nina 7

GUIA dC PTáCI|CAS dE BIOLOGÍA CELULAR 11 UNiVERSIDAD LOS ANGELES DE CH¡MBOTE

I¡BLGO. LUIS ALBIRTO SANCi-iFZ ANGULÜ lul*LGO. iOSf LUIS GUTiERREZ AP0NTE

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Guia rie Prácticas d* BIOLOGíA CELULAR 12 UNIVERSIDAD LOS ANGELES DE CH}MBOTI

 MBLGü. LIJIS ALBSRTO SANCHTZ ANGUTO túl8lGO. JOSE LUIS GUTIHRREZ AFONTE

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Guia de Prácticas de Bl0LCIGiA üFLULAR 13 UNIVER$IDAD LCIS Af'lG[tES DE CHIIVIBOTE

¡'{31{;ü. LLIIS ALBE:RI'ü SANCIIÉZ A.I'IGULü |VIBL.GO ,:OSI LUIS GUTIERRT;i APCNTF

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practicas
Guia di: de BÍ0LOGIA CELULAR 14 UNIVERSTDAü LCIS ANGFLES DE (lHli\ilBOT[
MBLGO. LiJIS ALBERTO SANCHEZ ANGULO MBLGü. JOSE LUI$ GUTIERREZ APONTE

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Lámina 11

Guía de Prácticas de BIOLOGIA CELULAR UNIVTRSIDAn Ios ÁruE*LES DE CHIMBOTE

MBLGO. LUIS ALBERTO SANCHEZANGULO MBLGO. JOST LUIS GUTTRREZAPONTE

PRACTICA NÚMERO 02

BEMü$TRAT¡úru üE LA PRfr$ñNTIA SF glüf;LEffiEruTCIS Fru LA MATTRR V[VA:

t,H,0yN

I$¡TRODUCSION:

Todos lss seres vivas están c*nsiÍtuidos, cualitativa y cuantilativamenie por los mismos

elementcs quimicos. De todos lss elementos qüe se hallan en la corie¿a terrestre, sólo

unos 25 son componentes de los seres vivos . Esta ccnfima Ia idea de que la vida se ha

desanoftado sobre unos elem*nlcs concretos que pcseen unas propiedades físico-
quírnicas idóneas acordes con lcs proce$o$ químiccs que se desarolfan en los seres vivos.

Se dennmi nan elgmgnttg bi$énieps. q hloelemenlgj¡.a aq uel los etementos qu ímicos q ue

forman parte de los seres vivos. Atendiendo a su aúundancla (no importanciai se pueden

agrupar en tres categorías:

* Bioelernentosprimarios.

e Sioelementossecundario*.

* 0ligaelementss.

OTRO S
ELHMENTCI$
¿-/c
C ALCIO
¿Vo

HIDROGENO
10%
NITROCE¡¡O
S "/o

üBJHTIVO$:

s Demostrar mediante un análisis cualitativo orgánico elemental, ias elementos

biogenésicos de la materia orgánica,

Guía de Prácticas de Bl0LOG|A CÉLULAR 15 UNIVERSIDAD LCIS ANGELE$ üT CHIMBOTT

 MBLGO. LUIS ALBERTO $ÁNCHEZ ANGULO MBLGü, JOsÉ LUIs GUIIERRE¿APON]

fr. MATERTAL v mÉronü$:

A. Rüco¡{ocl*tlEruTo sgL üA,RfrsF{ü, HtpHósE$Es, oxícg¡uo y NffRóGHNo Et{
LA ÍUATERIA VIVA:

4.1 MÁTERIALES:
I, fdaterial biolégicc:

- 5 g de levadura de pan; proporcionada por los alurnnos.

2. $dateriales, instrumentos y equipos de laborstorio:

- Gradilla para tubos de ensayo.

- Finzas de madera.

- Tubss de ensayo f 3 x 1ü0 mm.

- il¡lechero de bunsen o aicohol.

A,? PRSCÉDIL$IENTü:
1, En un tubo de ensayo secc, colscar 3 g. de levadura.

7, Con la ayuda de una pinza someier al calar de un mechsrn por algunos

minutos.

3. Después de cafeniar, en la parte alta del tubo se notará unas gctitas de agua il-l

y O), asi mismo se desprenden vapor*s blanquecinos de un olor caracterísiica

"a cuefftü quemadc'{N}.

4. Reiirar el tubo de ensayo del mechero y observar un residuo de color negro {C}.
5. Fsquematizar la obser¡adc.

GuiadePrácticasdeB|ÜL0Gi¿crLULAR16UNlVERs|DAD.0$Á-ffi
MSLGO, LUl$ ALBEITIü SÁNC}{ilZ AI.¡GULC F'IT|LG$. JÜST LUI$ GUTIER|IFZ APOÍ{TI

M AF]$IJLTAüÜ$:

Guia de Prácticas de BIOLOGIA CTLULAR 17 UNIVIRSIT}AD LüS ÁNGELES D[ CHIIJBOTT

M*LGO. I.I.JIfi ALBER]ü $ÁNCHTZ AITIGULCI MSLGO. JCISÉ I.UIIJ GUTIIRREZ AF'ONTE

lv. Dr$tu$$CIN:

Guia de Pr*cIicaI; de BIÜLOGÍA CHLULAR 1B UNIVERSIDAÜ LOS ANGELE$ D[ CHI¡]IBOTE

MBLGO. LI,JI$ ALBFRTO SÁNCHEZ ANGULO MBLGO. JO$É LU¡S GUTIIRREZ APONTE

V. CON¡CLU$IONES:

V¡. REFERES{CIA$ BIBLIOGRAFTCA$:

GUiA dE PráCüCAS dC BIOLOGíA CELULAR 19 UNIVER$IDAD LÜS ÁN¡EEiTg DE CHIMBOTT

MBLGO. LUIS ALBERTO $ÁNCFIEZ ANGULü MBI.GO. JOSÉ LUIS GUTIERREZ APONTE

CUf;STIOSARIO

1, ¿8ué caracterísiicas presentan ios Bioelementos?

2. ¿Gué función cumplen los bioelernentos?

3. ¿Por que se consideran al C, H, 0 y N como bioelementcs primarias?,

4. ¿Qué importancia tienen los oligoelenLentos?.

5. Esquematiza la üonfiguración tetraédrica de los enlaces del carbano

Guia de prácricas de BI0LOGIA CELULAR 20 uNtvtR$tüAD LOs Árucrrrs DE CHIMBOTE

MBLGO. I.U IS ALBT.RI"O SÁN CHÉZ ANGULO MI}LGO. ,IOSÉ LU¡S GUTIERREZ APONTH

PRAÜTICA NÚMHFCI 03

B$MCILÉCIJLA$ ORGÁruKA,$ DE LA MATHRIA VIVA

"cé,Rffio}{lnrRATos"

fNTRSü!UCCf)$dr

Los Glúcidos o Carbohidratos, llamados asi por que muchos contieneR aclemás del
Carbono; Hidrogeno y Oxígeno en la misma proporción que el agua, están oonsiderados

corno L¡na función mixta: alcohol- aldehida a alcahol acetona, debi¡Io a que contiene en $u

mol*cula un grupo carbonilo {aldehida o cetona) adicionado a vario¡¡ giupos alcohólicos o

bien pueden originarlos por hidrélisis.

Los carbohidratos son moléculas fundamentales de almacenamiento de *nergía en la

mayoria de los seres vivos. Además forrnan parte rJe diversas eslructuras de las células

vivas; l::s paredes de las ¿álulas v*galales jóv***r;, poi *jempls, son aproximadamenf*

4ü% celulosa, que es el compuesto orgánico más común en la biosfera. ;3e presentan
de¡;cle moléculas muy simples üümo los azúcares, hasta aquellers gigantes
macromoléculas, corno los almiclones y la celulcsa, fclrmando parfe de los conrdituyentes de

la célula, libres o ligadas fisica o químicamente a proleinas 0 grasas,

Hn algunas tejidos son men$s del 'i% del peeo seco de Fa céh.¡la; mientras que *n otros,

están en un 15% {por ejemplo: el Higado). $in emhargo, los Carbchidratos son los
compuestcs orgánicos que más abundan en la naturaleza y s* encuentran en fas planlas

en fiayor canticlad que en fos animales.

üesrle el punto de vista fisiológicc fos carbohidratos son los primeros productos de la
fotosíntesis, prriporcionan energia para las actividades celulares rnediante su
desintegracién en la respiración y además intervienen ccmo maleriales esenciales en los

piocesos de biosintesis, para la obtención de las grat;as, ácidos nucleicos y proteírras. Sus

propiedades quimicas y físicas sirven de criterias para identificar $u rcspectiva presencia en

un determinada érgano.

GuíadePráciicasdeffi
MBLGO, I-LIIf; ALBEFITO SÁNÜHTZ AFIGUI.O h4BLGO, J,3SE LUIS GUTIIR¡lEZ AF ONTÉ

,a patok:gía más conún relacionadi¡ con el metal:lalisrnt¡ de los carbohi,Jtatos {hidratr:s

de carbcno) es ia lliabete* ffiellltus, sindronre caracterizad{} por una secrec;iÓn anon*al de

insulina q{re se r*f}eja en una tendencia i* la iriperl¡licamia (asociada con giucrrrsuria} y

secunclariamente en una variedad de' nlanifestacioners metabólicas y vasculares. ,Aigunos

diaL,áticos se aEravan rápidam*nte :iutrriendo camplicacir:rre$ t¿tle$ como ceioacidosis y

alleraciones vascr:lares, puciienda llegar al c:oma diabrirticr¡, mientr:¡s que otros i:adecen una

intoler¡rncia a ia glucosa no progresiva cr)n €'scasos síntonlas dei sincirome.

E: diagnósl,iccl precoz v el cantral cle los pacientrls diabélico:s, lienen por ohjeto evitar

la c,etc¡acidosis y las complicacione$ 'da los sintornas resultanies de la hiD*rglir:emia,

meCliarrte el tralamiento adecuadr:,

llnr otra paite. el exceso de insufina en sanf¡r€) ipor excesc de dosis o por scbre
procluc,;ión) pro*uc;e una hi¡rlogiicemia (que üil casCIs extrc,rnos puede llevar a I shock), oor

lo que es de surna inrpoÉancia el seguimierfo de ios diai:éticos insulinodependintes. Dadtt

que existeh múlti¡rles factares causal¡:s rJe hiper o hipr:glicemia, debe considerarse en cada

caso ia cnndición fisiotógica y/o la patcrlogía presente fln el pac¡ente en cuestión.

[:n la prina cle personas normales no existen ;antirlades detectables de azúcares

reductcras; €)n personfrs enfermas {diabéticasi $i e:; p,ssibls detectar la presencia de estos

azúcares en orina (glucosuria), medinnte méiodos sencilios y de haja costo^ l-e sustansia

reductola mas cornún es la fllucosa,

Ftl deierminadc¡s casos de enferrnedad si es posihle observar reacciones positivas con

intensidad va¡-iahle, y en las cuales se pueden reali¿ar determínscisnes cuantitativas de los

azúr:ares,

üBJET'IVOS:

l)ernostrar la pnrsencia de glucosa en orina rnediante la reacción de fehling,

tieconocer el aimidón medíante la reerccion de Lugol.

Demostrar la pn:sencia de glúcidos en tejidas vegetales nlediante la reac*ión de f*hlirrg,

Guia de Prácticas de fflOLOGíA CELULAR 22 UNIVEITSII¡¡\D LOS A¡IGELES DH THTMBÜTE

M8LGO.I-UI$ ALBERTO SANCHñZ ANGULC ¡IBLGO. JOSÉ LUIS GUTIERREZ APONTE 4

II" ffiATNRIAL Y MHTOFO$:

A. D* trRMINAüIÓN BH A¿UTAR[:|; REDI"ICTORES IflEO¡Ff{TH LA REI{CCIÓFü DE

FFI"{LING:

4",! ilIATERIAI.F$:

1, Material biolégi*o:

- Orina de una psfsüna diabética {propor:;i*nada por las alurnn*s).

2. Materialesn instrumefllss y equipos de laboratsrío;

- Gradilla pata tubos de ensayo.

- Finzas de madera.

- Fipeta serológica x 5 mL,

- Pipeta serológica x 1 mL i: pipeta pasteur {para cada muestra de orinai,

- Tubos de ensayo 13 x 1ü0 mm.

- Vaso de precipitación x 250 mL,

- tocina eiéctrica ó mechero de bunsen r: ahohol.

3. Reactivos de lahoratorio:
* Agua hervida {baño maila}.

- Reactivo de FEHLIhIG isolución A y solucién *).

4.1 PROTEÜIMIENT$:
1. En un {ubo de ensayc (para cada pacieniei colc¡car ü.5 mL. i10 gotas} de orina.

2. Agregar 5 mL, de la salución de fehling {2,5 mL. de sol. A y 2.5 mL" de¡ $ol, B}.

3. Me¡clar el preparado {invirtiendo el tubo rle eneayo} y colocar en bañc maria

{agua hirviendo) elurante 5 minutos.

¡Nota importantrl
Si se utilizara ru:echero de afcohol o de bunsen, pñra cafentar lc¡s tübos de

en$ayCI, se debe iener presente las siguientes fIRECAUCIONES:

- No calentar fiiamenie el fando deltubn, por que el líquido puede iialpicar,

- Calentar la parle intermedia con mcvimi*ntos rotatÍvos.

- Estar pendiente de lo que pueda pa$ar *n la mezcla,

- No dirlgir la hoca del iubo hacía uno o algún compañero(a), nlientras se

calienta la mezcla,

GUíA dE Prácticas de BIOLOGIA TILULAR 23 UNIVEFISIDAD LOS ANGELTS DE CHIMBOTE

 MBIGO. I.I.JI{i ALfrTIiT{] SANCHEZ Ai']GULÜ [{BI-GO. JÜSE LUfS GUTiERRIZ APONTH

4. $ac¿¡r los tubos üon una pin;:a de madera y lue;go c,riac*rlas en la llradiffa para

enfrial a temperatura anbiente,

5. Flealizar la leclura según el cuadr'o adjunic,,

c{}L{FFI ¡tE:tl.JLTAn{)

I
Arul Negativo.

{/\zul verdos;o f iuell:¡s,

Aproximadanente 0"5% de susia*cia r*ductora.

Iirercle
[rarclo verdu¿co Apraximadarirente 1,ü% de sustancia re¡ductora.
i
l\n:arillo Aproximadar¡rente 1.5% de sustancia reductora.
f
/iproximadarnente 2.0% de s ustan cia redu ctsra-

8. RSCISí{I]CIFfrITNTO ilil1AI.¡UIDüN MHilI,qNTF LA RE,ACCION CIñ LUü$L:

A,i nüATERItrt-ES:

1. Mat*riial biahigico:

- $uspensión de almidón i¡:reparado por la cátedra)

7. Mat*riales, inst¡iumentos y equipos de lilboratorio:

Gradilla para fubos de ensayc.

- Pipeta seroltrgica x 5 mL.

- Fípeta serolirgica x 1 mL .l pipeta paste ur.

- l"ubos de en*avo 13 x 1ü0 mrn.

3. Reactivos de laboratorio;
- $olución de Lusol,

,¡{" 1 PRüü Efi}l i1f lEhlT0;

1, Cofocar en un tubo de enserya 5 mL. de la e;uspe.nsión de almidón.

2, Agregar de2*4 gotas de lugol,

3. Obsern¡ar fa aparíción de un color azul-vjoláceo,

-
Guía de Práctiiai d- ntolocíA cELIJLÁR-* Tq üNtvrtsiil¡¿iLos-n¡le rrrs¡i:}ffiincñE
 MBLGO. LUIS ALÜf;RTO SÁNCFIEZ ANGULO MBLGO. JOSÉ LUIS GUTIERREZ APONTE

c. FFT*RMINAcIóN üE sructnos {GLUco$A y ALndtDóN} FN ónc¿n¡os

VEGFTALES:

4.1 MATERIALE$:
1. lUlaterial biológico:

- ü1 Manzana yio uva (proporcionada por los alumnas),

- ü1 yuca ylo papa (proporcionada por los alumnos).

2. lVlateriale*, instrumentos y equipos de laboratorio:

- Gradilla para tubos de ensayo.

- Pinzas de madera.

- Pipeta serológica x 5 mL.

- Pipeta serológica x 1 rnl o pipeta pasteur {para cada muestra de arina}.

- Tubo de ensayo 13 x 1Sü mm.

- Tubo de ensayo 16 x 150 mm.

- Vaso de precipitación x 250 mL.

- Cccina eléctrica é mechero de bunsen o alcohol.

3. Reactivos de laboratorio:
- Agua heruida {bafro meria}.

- Reactivo de FtHLING isolucion A y solución B),

- Soiución de Lugot,

4.1 PROCEDIII{IHNT$:
1. Can la ayuda de un moriero realizar un machacado de los órgancs vegetales,

Vertiendo scbre el moilero unas gotas de agua, con la finalidad de preparar un

homogeneizado,

2. Pasar 1 - 2 mL" de cada homogeneizado a dos tubos de en$ayo,

respectivamente.

3. Posleriormente determinar la presencia de glucosa y almidón según los pasos

que se siguen en la experiencia "A" {reacción de fehlingi y en la experiencia "B"

{reaccién de lugol).

Guía de Prácticas de BjOLOGíA CELULAR 25 UN|VTRS|DAD Los Át\lcflrs Dt CH|MBOTE

 MBLGO, LUIS ALSERTO SANTHEZ ANGULO M8LGO. JOST LUIS GUTIERREZ APüNTE

III. RÉSULTADOS:

A. BñTIRfutrINACIéN DE A¿UCAftE$ RTNUCTORE$ MEüIENTH LA REATCIO¡{ Dfr

" FEHLING:

B. RECONüCIffiIE}¡TCI ilEL AL$dIÜON MHD¡ANTE LA RfrATGIÓN DE LUGOL:

Guía de Prácriias oe BloLoGíA cüLULAR lo-_ur,¡lvrnsn¿u rosTÑegLrs DE cHfMBoTF

 MBLSO. LUIS ALETRTO SÁNCi- ¿ ANGULO MTLGO, JOSÉ LUIS GUTIERREZ APONTT

c. nETgRsn$dActóN DF Gluasü$ {GLucüsA y ALM¡DóN} EN ónc¿ruos

VFGf;TALE$:

-__-*ti
Guía de Prácticás ¡- BtoLoGiÁcELULAR uNIüHRs¡D'AD LoslÑ"cf;LEs DE cHtuBorE
 ITIBLGO. L|JIS ALBERTO $ÁNCHIZ ANGULO ft4BLGO, JOST LUIS GUTITRREZ APÜNTE

IV, DISCLJSTÓN:

Guia de Prácticas ¿e efC*ociÁirLuLnn*

- 2s__-ÚNtÚERsiilÁiif0#N $ DE"cH[ttBorE
 MBLGü. IUIS ALBERTO SÁNCHEZ ANüULÜ MSL{3O. JOSE LLIIS GUTIÉRRE:Z APONTT

v. cot{GLu$toNE$:

VI. REFf;RHNCIAS IIIBLIOGRÁFIü,AS:

Guía de piáiticJlce-aoroéin cELULAR -* zs uNrvrnsrnÁn ros -irFrruiloTE

MSLCO. LUIS ALBNRTü SÁNCHEZ ANGULC IüEL{IO.JOSE LU;S GUTITRREZ APONTÉ

cuEs"ilOilArilo

1. ¿Quá caract:risiicas presentan los carbohiCratos?

2. ¿Quá es un a¿úcar nliuctur y que tipo rle azucarets se c)fi1[rcrian comc] tal?

3. ¿Es norn:al encontrai.glucosa en orínai). ¿por quó?,

4. ¿Quá características estructurales presenta el almldan? y ¿quÉ parie de su lnolócula

reaccir:nr¡ con el luuol?,

. .. 1,,..

5. Esquemattza la formula lineal y ciclica rte la molécula de glucosa.

Guía de Prácticas de B|OL0GÍA üELULAR 30 UNlVilRSlDAll L0$ Á¡¡CrmS ilE Ct-litvtñ¡OTE

MBLGO. LUI$ ALBFRTü SANCHE¿ ANGULO fuIBLGO. JÜSÉ LUIS GUTI*.RNTZ AFONTÉ

PRACTICA NUMER{) OI$

s$mol*culn$ ongÁhült*l* nH LA ffiATññEA vlv*

"L.iPrD0$"

r. INTR$ür,¡ccrót¡:
Los l..ipidos $ofl un gri.rpo heterogéneo de sustani:ias orgánicas originaclas en la celula

viva, ccrnpuestas generalmente por carbono, l-lidrógeno y Oxigeno; además pueden

contener también fósforo, nitrógeno y azuke. $on insolubles en ffgua y solubles en

disclventes orgánicos, como éter, clcroformc, benr:eno, etc. Su proceso de digesliÓn

conrparalivamente con ias ntras mol*cula$, es bastante lento y emulsifican por acción de la

bilÍs en el intestinc¡. Psr hidrólisis dan ácidos grasos y alcohol {de diferente tipo}, Pueden

fo¡"rnar peróxidos, presentan un olor y sabor desagradable, proceso conacido como

ranciriez. Se encuentra una alta participación de "H".

{-as gl"asas ¡"¡eutras son las más abundantes en la naluraleza, contienen $olaments C,
H y O. Sa dividen sn grasff$, aceites y cera$. Los lípidos neutros, sólidos a temperatura
ambiente, son les grasas y reras, mi*ntras qu* ios lí,quida* son los aceites" Tanto gtasas

como aceiles se presentan en animales y uegetafes. Las cera$ en la cuticulEl de algunos

frutos {manzana, por ejenrplo}, hojas y pétalos de algunas flores, y en farma más

abundanfe en los panales de las abejas.

Las Acidos Grascs $aiurados princÍpales, prese,rfes en las grasas animales, son el
ácido palmítico: 0Hr(CHI)r+COOH y el ácido esteárico: üHa{CHz}roCOOH c¡ue también se
presentan en; mohos, bacierias y algunas plantas, El Acido Graso No Selturado más
abunrlanle en la naturaleza es el ácido oleicn: cHl{cl-lz}iül-l * cH(cHz}úooH.

[-as FosfclÍpjdss constituyen una gran variedad de lipidos que ademá$ ce C, l-1, yü
contienen fósforo y en rnuchos casCIs también Nitr'ógeno, los más conc¡cirlos son las
lecitinas {hígado, r:erebro, yema de husvo, germen de trino, rrerduras} y las cef:iiinas {tejido

muscular y nervioso de lns animafes).

Guía de Prácticas de B|OLOGiA CrLULAR 31 UNIVTÍ{SIT]AD LOS Á¡¡CEMS DFi CHIMSOTT

h4BLGÜ. LLIIS ALBEF:TO SÁ¡JCHüZ AI{GULO MBI GO. JOSÉ LUI$ GUTIERF:EZ APONTE

Íiap,anificación, Es una reacción típica de los ácidrs grariü$, en la cual teacciorlan con

álcalis y dan lugar a una sirl-"de ácido_grago,.qrle $er denotnina jabÓn. Las rrcláculas de

jabón presentan simultáneamente una ;:cna lipofila o 'tifrófoira, que rehuye el r:ontacto con

el agua, y una ¿ona hidrófila o polar, qu* se ori*nta hacia ella, lo que' se denomina

cornpr:fi amiento anfipáticrr.

¡r:l[i]:¡ !lJ'i{ ii, rlir:úlii..i

,*lri: - irlFi iifr - '-,r-¡r-r I-i ¡- Hi"L - L..l-{ ; i'l
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ÜFl:f -,il"i :in - if.rJL-r l"f¡ l{i,r "t-l}{r-li

.i;bir¡ r :ili:¡r¡r:r

OBJET'IVO$:

[]emostrar las prcpiedades solubiliciatj e insolubilidad de los lípidos.

üe¡rnostrar la n;accién de saponificac:iún de kx lÍpidos.

Rt¡conocer el erfecto emulsificante de ias sales bifÍales sobre los Iípidos,

fl. MATHRI*rL Y lUHliSnOS:

A, BI:TERM¡NATIÓN FH LAS PROPIE$ADE$ DE IIII$OLUtsILIüAD Eilf AGUA Y

$;Of-uiBlt.lDÉiil EN sCILvE$tTE$ {}RGÁNttos:

4.1 ffiATERIALñ$:
1. Matenial biológicro:

- 10 mL. Aceiie vegetal (prc,poril¡onado por las aiumnos).

- 0,$ nll. de Bilis iproporcicnadri par los alumnos).

Gnía de Prácticas de ük)LoGíA üELUL¡\R sz UNtVEft$lnAD LOS Árrlcflfs DF: CH|MBOTF

MBLGü. LUIS ALBTRTO SÁNCHEZ ANGULO MBLüO. JO$É LUIS GUTIERREZ APONTE

2. ffiateriales, instrumentos y equipos de laboratorio:

- Gradilla para tubos de ensayo,

- Pipeta seralóglca x 5 mL.

- Fipela serofógica x 1 ml.

- Fo¡ta pipeta.

- Tubos de ensayo 13 x 100 mm"

3. Reactivos de laboratorio:
- Agua destilada

- Bencina.

- Aceiona.

- Cloroforma.

4.2 PROCEDIMIENTO:

TUBOS BE E¡{SAYO

COMPONENTE$ I tl ¡lt tv V VI
m[- lmL) {mL}
Aceite. it\ tt !\
0.5 0.5 0.5

Agua. J.U

Bencina. tn
Acetona, 1n

Cloroforma. ?n

NaOH 20CI1c (Saponificación] 3.0

Bitris (Emuisificación)

AGITAR SUAVEMENTE Y OBSTRVAR AGITAR

FUERTEMENTE

GUíA dE PráCIíCAS dC BIOLÜGIA CELULAR 33 UNIVERSIDAD LOS Ái'ICTiTS DE CHIMBOTE

 MBLGO. LUIS ALBTRTO SANCHEZ ANüULO I.,IBLGO. JCST LUIS GUTIERREZ APONTE

ilt, Rrsul'iAs0$:
¡I'd$üLUEILIOAF Eñ¡ AGUA

SüLUBIL¡SAN EN SOLVFhITES CIRGÁruICOS

cri- ñPtá*i*. d- B'otoeh cELULAR

-- 34 uñrürnsiñÁfLüs"ÁñéELCDE¡HiMBoÍE
MfiLGO. LUIS ALBERTO SÁNCHE¿ AI'IGULO MBLGO. JOSE LUIS GUTIERREZAPÜNTE

RFACü IOF{ DE $APOru IF¡CAC IÓN Y *M U LSI Ff CACIÓFI

GUÍA dE PráCtiCAS dE E|OLOGIA CELULAR 35 UNÍVERSÍDAD LOS ANGñLES DÉ CH{MBOTT

 MBLGO. LUIS ALBERTO SÁNCHTZ ANGULO NJBLGO, JO$E LUIS GUTIERREZ APONTT

IV. DI$CU$IÓN:

-_
Guia de Prácticas *á aiolocn c-rLuaÁR t6 ÜñiürnsióÁu losÁNGELEs DE cHir\4Borr
 MBLGO, LUI$ ALBERTO $ÁNCilEZ AhIGULO MTLGO. JÜSÉ LUIS GUTIERRTZ APONTT

v. c0f{ctu$t0ilÉ$:

V¡, REFEREHTIAS BIBLIOGRAFICA$;

Guía de Prácticas de BIOLOGÍA CELULAR 37 UNÍVERSIDAD LOS ÁNEHUS DE CHIMBOTE

 MBLGO. LUIS ALBERTO SÁNCHEZ ANGULO MBLGÜ. JOSE LUIS GUTIFRREZ AFONTE

CUESTIONARIO

1, ¿Quó caracierísticas presentan las lipidos?

2. ¿Porqué los lipidos son insolubles en agua?

3. ¿Por qué los lipidos son soh.¡bles en solvenies orgánicos?

4, ¿En que consisie la reacción de emulsificación los lipidos?

5. Dibujar fa estructura de un ácido graso.

Guia de Práclicas de BIOLOGíA CELULAR 3B UNIVERSIDAD LOS Áruerms üE CIIIMBOTE

MBtGCI, LUIS ALSTRTO $ANCHEZ ANGULO MBLGO. JOSÉ LUIS GUTIERREZ APONTH

PRACTICA NÚMERO 05

ffiIOMOLÉCI¡LA$ ORGÁMEA$ DH LA MATERTA VIVA

,.PRÜTEiNA$"

I. INTRODUTTIÓN:

Las Proteinas son macromoléculas cornplejas constituidas por polipÉptidos formados

por unidades quimicas l]amadas aminoácidas. Son compuestos orgánicos complejos que

se encuentran c0rn0 constituvenles esenciales de los seres vivos,

$u nombre provlene del vocablo griego proteios que significa "de primer ofden", puesto
que forma la materia esencial de todo ser vivo: el pratopfasma. Quimicamente coniiene

aproximadarnente un 50% de Carbono,ZSalo de Oxígeno,7Ya de f{idrógeno y un 16% de

Nitrogeno. Con frecuencia presenlan fambién azufre y fósforo, u a vecs$ pequeñas

cantidad*s dó metales pesados como: hierro, *obre, manganesc, etc.

San solubles en agua cuando adoptan una conformación globular. La solubilidad es

debida a los radicales {-R} libres de los aminoácidos que, al ionizarse, estabiecen enlaces

débiles {puentes de hidrógeno} ccn las moléculas de agua. Así, cuando una prcteína se
sslubiliza queda recubierta de una capa de nroléculas de agua {capa de salvatación} que

impide que se pueda unir a otras proieinas lc cual provocaría su precípítación

iinsolubilizaclón). Esta propiedad es la que hace posible la hidratacién de los lejidos de ios
seres vivos,

Tienen un comportamiento anfétero y estc las hace capaces de neutralizar las

variaciones de pH del medio, ya que pueden compodarse somo un ácido a una base y por

tanto liberar o retirar protones {l-l-} det medio donde se encuentran.

La desnaturalización de una proteína se refiere a Ia ruptura de las enlaces que

mantenian sus estructuras cuaternaria, lerciaria y secundaria, conservándcse solamente la
prirnaria. Én estos casos las proteínas se transforman en filamentos lineales y delgados

Guia de Prácticas de Bl0l-OGíA CELULAR 39 UN1VERSIDAD LOS ANGELIS DE CHIMBOTE

 MBLGO. LUIS ALBERTO SANCHEZ ANGI.,,LÜ MBLGO. JOSE LUIS GUTIERRIZ APONTI

que $e entrelazan hasla farmar oompuestos fibrasos e insolui:les en agua, Los agenles que

pueden desnaturalizar a una proieina pueden sen calor excesivo; sustancias que modifican

el pH; alteraciones en la concentración; alta salinidad; agitacién molecular; etc... Fl efecto

más visible de óste fenómeno es que las proteinas se hacen m*nos solubles o insolubfes y

que pierden su actividad biolégica. La mayor parte de fas proteinas experimentan

desnaturalizaciones cuando se calienta¡ entre 50 y 00 AC; otras se desnaturalizan también

cuando se enfrian por debajo de los 10 a 15 AC, La desnaturalizacién puede ser revetsible

{renaturalizacién} pero en muchos cas0s ss irreversible.

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OBJFTIVüS:

Demostrar las pr*piedades fÍsicas y quim¡cas que presentan las prcteinas,

Detetminar fa presencia de proteinas mediante fa reacción de biuret.

Giiía de Frácticas de BtOLOGiA CHLULAR 40 UNIVERSIDAD LOf; ANGELES DE CHIMBOTE

MBLGCI. Lufli AI.BERTO SÁNCHEZ ANIGULO MTLGü. JOSÉ LUIS GUTII:RREZ APONTE

II. MATERIAL Y $dÉTODOS:

A. SEMOSTRACÓN DE LAS PROF|HDADf;$ Fí$ICAS Y QUíMITA$ DE I.A$

P,ROTHI$IA$:

¡..1 MATf;RIALE$:
1. Ídaterial biológico: {proporcionada por los' alumnos}.

- 01 l-luevo de gallina, Preparar una sotución mn la clara del huevo

"ovcalbumina" al 1 üYo'.

2. f,dateriales, instrumentos y equipos de lnboratorio:

- Afgodén.

- Embudo mediano

- Va¡jeta

- Grudilla para tubos de ensayo.

Pisz*d*lrlal*sta.
- l:ipeta serol*gica x 10 mL.

- Pipeta serológica x 2 mL,

- Probeta x 10ü mL.

- TUL¡os de ensayo 13 x 100 mm.

* Vaso de pre*ipiia*ión x ?5ü mL,

- üocina eléetrica.

3" React$vos de lahoratorio:

- Agua hervida (bafro Marilli.

- Agua destítada,

- Acido clorhídrico HCL 3N ó A.P.

- NaOH 50%

- Acetato de plomo 10%.

_-
crra d* F¿rfi-a* dr BtoLoci[EELULAR 41
- uNlwRsffiMBoTE
I\4BLGC. :-I.JI$ AL BERTO SANCH[Z ANGULO h,IBLGO. JüSE LUIS GUTIüRÍ1ÉZ APONTT

A,i| PROTEFIISIFNTO:

Tt¡tso$ DE EfüSAYO

!Acetato de ;rlono 10%.

i-, ñl
] Caleniar en bañe Maria X 5 minutos
l

I
L_.*_.*--
DSTI:RMINi.\üIÓN DE I.A FRES!:I\ICIA DT PROTEíN¡AS M¡.UANTT LA R.E/rT}TIOI'I

DE FIUÉÉT:

8.1 MATERIAT-ES:
1 , $¡laterial biológico: (propcrcionada ¡:or los alumnos),

- üvoalbuminiral 1{l%,

- 20 mL. de leche fresca.

- 5 rnl d suero sanguíne*,

?, illate'riales, instr{.tmentot y equipos de [aboratsris;

- Algodón.

- F,gujas 21 11,1r* y l-igaclum.

- C,radilla para tubori de enriayo.

- Pipeta serolégica x 5 mL.

- Pipeta serclógica x 1 mL,

- Pipeta pasteur

- Tubos de ensayo'13 x tü0 mm.

3. Reactivos de latr'oratorio;
- Agua destilada.

- Hidróxido de sodio al 3S % {NaOH 3CI%},

- Sulfato de cobre al1o/n.

Guía de Prácticas de BlüLüGlA CILULAR 42 uNtvEf:{slDr\il LOs Árucnrs D[: c|"ilMBOTE

 I\jIBLGO, LUIS ALBERTO SANCHÉZ ANGULÜ M8LGO. JOST LUIS GUTIERFIEZ APONTE

B"? pROCEi}$flIENTO:

.IUBT.¡$
DF EFI$AYO

$sluoión de avoalburnina 1ü%.

¡
4^ !
v.v
!

Suero sanguineo 1.0

{n 1.ü

I-J()M OGENEIZAR
Sull'alo de cobre af 1%, 4.5 gotas aprox.)
ilü
OBSERVAR EL CAMBIO DE COLOR

pRorElruA
= A¿Ul_ vlor_Acec pEpToNA
= RosADo

FUNNAffiENTO NH LA REACTIC}¡{ DE ISIURETI

[sta reacción ta dan aquellas sustancias cuyas moléculas tienen clos grupoli carbamllos

(-CC-NHz) unidos entre sí en forma directa o por intrrrmedio de un áiomo de nitrógenc o

carbon0. !-as sustancias que en lugar d*i grupo *C0-lrlHe contienen

-CS-Nl{z o CH¡-NHz,
puer{en dar también en fcrma semejante esta reacción, aunque ilCI sean sustancias
prateÍcas.

Hn general la reacciÓn de Biuret, es buen test para prateínas y polipéptidos

{excepto
dipépticlos) que dan esta reacción por tener pares de grupos *CO-Nl-l: en $us moléculas.

Dos grupos carbamilos, se unen con et hidróxido rle cabre {Cu(OH}:) fornrado por el
hidrÓxids de sodío y sulfato de cobre que lngresa a la reaccjón para formar r;l complejo:

'Biurel-Ouprosóclico", de color púrpura viofácea o viole{a rosado.

Las sales de anlonio inlerfieren ésta reacción debirlo a qr.re el amanio reacr:iona con el

hidrÓxido de sodio, para dar un color azul sscuro; perCI puecle evitarse agregando exceso

de hidrÓxido de sodio. La reacción de Biuret, es ampliamente usada para deteminar

proteínas en maieriales hiológicas: suero sanguíneo, albúrnina de huevc (ov,ralbunrina),
ol¡

prád";J;slb-ió*GiÁ-GruLAR
_-+r-
cuía d* ürqrvrrisiüÁ¡G$ñGElelnr-cnr.vtfiorr
MBLGO LUIS AL¡3ERTü $ANCHilZ ANGULO ¡lüLGo. JOSE LUls GUTIHRFi:Z APONTE

ll{, Rf$Lnt.T¡XDüS:

NEffiGST'RACIÓN DE LA$ PROIIIIIDAT}CIS Fi$ICAS

'r Qu¡n4lcA$ DH Llrs PRüTFiiqi\s

GUiA dC FIiiCiíCAS dE BIÜLOGIA CELUI-AR 44 UNTVEF$IDAD LOS ÁruCTMS DE CIjI¡/18ÜT[

 MBLGO, LUIS ALBERTÜ SANCHTZ ANGULO MBLGO, JOSÉ LUIS GUTIERREZ APONTE

DETERMINASIOru DE LA PRE$ENTIA DE FROTEI${A$

MEDIAFITf; LA RHATTIÓN DH BIURET

I mzuruR--lilTNlvE BorE
MBLGO, LUIS ALBERTO SANCHEZ ANüULO MBLGO. JOSE LUIS GUTIERREZ APCINTE

IV- DI$CUSIüN:

Guía cle Prácticas oe etolocíA CriÚrÁñ** l$ - uNtvERstDÁDlüs Á-ruorGl DE cilr,'tBoG

rdglco. Lllls ALBIRTo $ÁNcHEZ AltGULo IvlBt-Go. Jcs* LUls GUT,ERREZ AFONTE

v. co¡{clU$l0f{E$:

VI. REFf;REhICIAS BIBTIOGRAFIü.4.S:

Guia de Frác{icas de sfoloGiA crLULAft 47 $f'{fi/Él{sÍDÁ$ LOS Ái'fGELES DL CHTMBOTE

¡llBLGo, Luts ALBrFirü $ÁNüHHZ ANGULü [fBl-GO. i{]sÉ LUiÍi GUT|TRFIFZ A.PüNTE

Ct,}H$TIONARICI

1. ¿Qiró caracleristicas presentan las proteínas?

2. ¿Qué entiende L¡sit¡d por desnaturalizaciÓn de le¡s

prrlhinas?

3. ¿Pcr qr.ré las prcteina$ $s cürnpgttan corrlo rnoléculas;ilnfotérícas?

4. ¿Qué es un amirroácido y cuales son?.

5. Esquenralizar o diliujar la ¡'eacción química entre düs aminoácidos e indicer sl enlace

peptidieo formado y las molécuias de agua que se libera.

*ig-
eri' á' l;"*rñ,ilÉKtlogíA GluuiR-- üñiüEFl$'ñÁn LCññGÉLFS DE"cHrr¿CTr
MBLGO. LUI$ ALBERTCI SÁNCHEZ A¡\¡GULO MBLGO. JÜSÉ LUIS GUTIIRI{EZ APO¡JTE

PRACT¡ÜA NüfuIERÜ ü{i

tsIOMOI*TULAS OffiGANII3AÍ} NH LA IdATSRIA ViVA:

-HhlZItrIA$"
B IOTATAIjZA AüRü$

I. INTRC}DUTCÚN:
Fara reaccicnar, las ¡¡cléculas deb*n po$esr suficiente energía, la energía de
actlv'acüón, a fin de chscar con suficieilte fuerca para $upsrar su repulsión mutua y debÍlitar

los enlaces químir:os exisientes. Las enzimas a*tí¡an ccnto catalizadcres; disminuyen la
energía de aciivaciún increrneniando encrmemente ler velocidad a la que se i:roducen las

reacsione* químicas en las células. Una reacción na catalizacla requiere rná* energía de

activación qr¡* ilna catafizada, c0m0 una reaccíón enzimática. La menor energia de
activación en presencia del catalizador fiecuentemenirr está dentro del intervalo de energia
que posesn las moléculas, de tal modo que la rear:ción puerle ocurrir rápidamente, sin
adición o lon poca adición de energia.

Las enzirnas son grand*s maléculas de proteínas globulares cuyo modo de pfegamiento

asegura que ürupos particulares de aminoácidas fixmen un sitis activo. Cuando las

enzimas pierden su estructura tridimensional caracteristica, $e dice que están

desnaturalizadas, Las moláculas reaclivas, conocidas como sust¡ato, se ajustan con
precisión a este sitio activo. Aunqxe fa conformacién de una enzima puede cambiar
lemporalmente en sl cursc de una reaccién, no se altera permanentemente.

La velocidad de lar; reacciones enzinnáticas tambiÉn se ve influida por la termperatura y

por el pFl, que afectan la atracción entre los aminoácidos de la molécula proteir:a y también

enke el sitio activo y el sustraio. i¡luchas enzimas requieren de eofactores, qil$ pu*den ser

iones sitnples, tales como Mgz+ s Ca2*, o como rnolécuias crrgánicas no prcteicits conocidas

como coenzinnas. Muchas coenzimas, corno el NAD, funcionan romo transpoitadores üe

electrones, y diferentes coenzimas pnantienen a lari eleclrones en niveles energéticos

figeramente distinios. Muchas vitaminas san parte de ct¡enzimas.

Guía de Prácticas de BIOL0GíA CELULAR 4$ UN1VEITSIDAD LOS Á¡TIEEUS DT THIMBOTE

MBLGO. I..UIS AIBI:FITÜ SÁNCHEZ ANüUL* fi,{.3LGO, JOSÉ LtItS GUTf EFIRSZ APONTT

En la inter¿rcdón enlre la enzima y el sustrato, el nitir: aativo de la enzirra se ajusia a la

superficie enfrentada de la nnaló*ula cle sacaio$a. El ;ljuste rls tan aqacto, que una r*oldlcula

compuesta, por el*mplo, de dos subunirladr;s de gl.tmsa, no $e veria afectildir por l¿¡ acciÓn

de esta enzima.

Lns enzÍrnas se clasifican pü{ su actividad en catalitha {}n: Oxidrrn;ducta$*s,

Hidrol¡rsas, l.iasas, Transferasas, lsomex"aseis y ligasa:;.

llntre lils r¡xirlareductfl$a$ se encuentran las hidropetoxidasa*, las que a su vez $$

su͡rJividen en. F CIroxidasas y Catalasas. La catalasa {}s una enzinta que se enr]uenttit en las

celulas de los leli,Jas animales y ve¡¡etales. L.a funr:ión rJs esia enzima en ins tejídos es

nec.esaria porque durante el metabolisrno celular, se forma una mol*cula toxica que es et

peréxiclo de hidrógenc, HeOe {agua oxigenadai. Esta *;lnzima, la catalasa, l0 dersccinlpone en

agu.a y oxig*no, pcrr [0 qus se sofuciona el problenia.

l-¡r raacciórlde Ia catakl$a $,)bre elHrü2, es la s(¡uiente:

* Fü.:i S: . :*F{3{} + {i}*

cm*m"f;xtsw

l-a *xistencia de cafalasa en loti tejidos.animail,:$, s,3 aprovecha para ulilizar el agua

oxigenada com't desinfectante cuando se echa sohre uner herída, Como muchars d* las

bacJ:eriss patúgenas son anaerobins {no pueden vivir con rrxigeno}, mlteren csn el

desprendimienh rie oxigen* qus $e produce cuanda ln catalasa de l*i; tejídcn ¡¡ciú¿isobre el

agua cxigenada,

s$JfiiTtvo$:
s Drlmostrar ta actividacl enz:imática de ios tejidcm animales y v*getales, rnediante l¿t

acción iJe ln catalasa en el peróxido de hidrógena.

s llemostrar [a rjesnaturerlización prateica de la cati¡lasa al increm*nlar la ternpetatura,

s liNpticar la importancia de fa catafa*a *n elarganismo humano.

Guia de Frácticas dr: lll0LOG[A üELULAR 50 UNIVER$IDAü LOS ANGELil$ DE CH{MBOTT

MBLGO. LUIs ALBTRT* $ÁNCHEZ ANGULS MBLGO. JOSI LUIS GUTItrftREZ APONTE

ll, tulATERlAL Y fr¡IFTOFO$:

A. AtTtUn,AD rruAffiÁTl#A üF LA CATALASA DE TEJIDOS AI.¡IMALH$ Y

VEGHTALES SOBRE Tt PHNÓX¡FCI DE H¡DRÓGf;NO:

4.1 MATERIAL*$;
1" fulateilal biolégico: {proporcionada por ios alumnos}.

- 01 l-ligado de pollo

- 0l Solanum fuierosr¡m
*papa'.

2. Materiales, instrumentos y equipos de lahoratorio:

- Cuchillo,

- Bagueta.

- Gradilta para tubos de ensayo.

- Pinza de madera.

- Pipeta serológica x 5 mL^

- Pfaca petri.

Tubos de ensayo 13 x 1ü0 mm.

- Balanza de triple brazo.

3, Reactivos de lahoratorio:
- Feróxido de hidróqeno,

4.2 PROCEDIMIHNTO:
1. üortar en varios tracitos el higado y ta papa.

2. Pesar y colocar 5 g de cada trocitos en un iubo de en$ayo difelente, Así corno

se explica en la siguiente iabla:

TUBOS DE Eil¡SAYO
TOMPONEh¡TES
I
II ||l
{mLi {mL} {mL}
(\l
Higado de pcllo {5 g.)

Fapa {5 g,J sl
Peroxido de hidrógeno {HeO:) j'l Í
INCUBAR A TEIVIPHRAT1JRA AMBIENTE
Obseruar los productos formados e interpretar la
actividad de la catalasa

GUiA dE PráCtiCAS dE BIOLOGíA CELULAR 51 UNIVERSÍDAD LOS ÁruETMS DE CHIMBOTT

MBLGO. LUIS ALBHRTO SÁNCHEZ ANGULO MBLGO. JOSÉ LUIS GUTIERREZ APONTE

ffi*m
Trecitos
hr}adg
Añadir
egus oxiüenmde
$e praduce un
intenso burbujec

fi" üf;N,4ü$TRAüIÓ$ü SE tA FF$ruATURALIZACÚN üE LA TATALA$A:

h/ediante esta experiencia, vamos a demastrar una propiedad fundamental de

las proteínas, qus es la desr¡aturalizaqión. Ya qu* la catalasa químicamente es una

proieína, podemos desnaturalizarta al someterla a alias tempetaturas. Puedes

recordalla en la práctica de prnleinas. Af perder [a eslructura terciaria. perderá tambien

la función y como consec{lencia su función cataliilca, por lo que nc podrá descomponer

el agua *xigenada y no ss observará ningún tipo de reacc¡ón cuandl hagamos [a

experiencia anterior ccn muestras de tejidos her/idos. .

H,1 MATHRIALE$:

1. ffiaterial biolégicc:
- 01 Higado de pollo {proporcicnada por los alumnos}.

2. &lateriales, lnstrumentos y equipos de laboraforis:

- Cuchilto,

üagueta.

- Gradilia para tubos de ensayo.

- $¡lechero de alcohol.

- Pinza para tubo de ensayo.

- Pipeta serclógica x 5 mL.

- Pipeta serológica x 10 mL.

- Placa oelri.

Guía de Prácticas de BIOLOGiA CELULAR 52 UNIVERSIDAD LOS ANGILES DE CHIMBOTE

 MBLSO. LUI$ ALBERTÜ SANCFIEZ Ah¡GULCI MTLGü. JOSÉ LUIS GUTIERÍEEU,AF'ONT[

- 'lut¡as
de ensayo 13 x'100 mm.

- Vaso de precipitacién.

3. Reactivos de laborato¡io:

- Agua hervida para baño maria.

- Peróxido de hidróseno.

F.P PRüCEDIMIENTü;

1, Colocar en un tubo de ensayo vaiiori trocit:s cte higado {5 g. aprox.).

2. Anadir 10 rnl de agua destilada.
3. Flervir la muestra durante cinco minnlo$ fen baño maría ü *n un rnechero de
alcohol)

4. Retírar el agua sübrante.

5. Añaclir 5 mL, de agua oxigenada.

6. Observar e interpretar el resultado.

*¡@ ilH @@j **&tr

L4
Hfoado Af,¡adir Ns
Hervir t¡ocitos hervido &gu& haY renccidn
de hígado oxigensrla
durante 5 minutos

Guia de Prácücas de t3lOLOGiA CELULAR 53 UNIVERSIDAD LOS ÁNSTLTS DE CHIMBOTE

MBLGO. LUIS ALBT:RTO SÁNCI{EZANGULü MHLGO" JOSÉ LUIS GUTIEFITEZAPONTE

ffi. RII$ULTAUO$:
,&CTÍVIDAF Ffi LA TATALASA DF. TFJIDüS Á.NIMAI.E$ Y I/ETIHTALHS Í;üBRH EL

PERÜX1üO DH HITIR{}SFHI}

Gr''r d;prá,rtcas d€ BtoLOmüEtULAR- s4 UNtvflRstüpo L0II-NGTLHS rE CI{|MB0TE

MBLGO. Li.]I$ ALBERTO SANCHFZANGULT M*LGO. JSST LUIS GUTfERREZAPONTÉ

DESruATURALI¿AEÉN ffi LA üATAL,qSA

IMSÜTE
MBLGÜ LUIS ALBERTO $ANTI-IFZ ANGLJLO I'IBLGC' JÜSÉ LUIS üUTIERREZ AFÜJ''ITE

IV, DI$CU$ION:

ári- ,i* Prárrrr. * Blürocin crLuLen 50 UNIVERSIDAD Lcs ÁNGFLES DE CtllMBoTE

MBLGO. LUIS ALBERTO $ÁNTHEZANGI.JLO IVIBLGO. JOSE LUIS GUTIERREZ APONTE

V. CONSLUSIOHE$:

U. RETHRENTTA$ BIBLIOG-RAFISA$:

Guia de Prácticas de BI0LOGfA CELULAR 57 Uf{IVERSInAD LOS Ál'¡erlrS DE CH|MBOTE

MBLGO. LUI$ ALBIRTO SÁ¡JTHf;Z ANGLJLO M3LGO. JOSÉ LU¡S GUTiERREZ APONTE

CUFSTIONARIO

1. ¿Qué caracierísticas presentan las enzimas?

2. ¿8ué función cumple elsítio activo de ias enzimas?

3" $egún la clasificación de las enzirnas. ¿A qué grupo pertenece la catalasa?

4. ¿Por qué es importante la catalasa en nuestrc organismo?

5. ¿Que Función cumple el hígado en nuestro cuerpo?

S, ¿Qué sustancias qu[micas se pueden utillZar para desnaturaiizar a las enzimas?

Guía de Prácricas de H0LOG|A CILULAR 5B UNIVER,S|DAD LOS Ár.¡CElrS üE CfilMBOTE