Instituto Politécnico Nacional.

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Químico Farmacéutico Industrial
Bioquímica General

Sección 2 Martínez Pérez Samara A./Moctezuma Beltrán Julio/Romero

Hernández
Grupo: 3FM1

EFECTO DE LA CONCENTRACION DEL SUSTRATO SOBRE LA VELOCIDAD DE

REACCION E INHIBICION ENZIMATICA
Introducción Determinar la constrante de Michaelis Menten
(Km) mediante una gráfica utilizando los
La cinética enzimática estudia la velocidad de
métodos de M-M y L-W.
las reacciones catalizadas por enzimas. Estos
estudios proporcionan información directa Determinar el tipo de inhibición producida por
acerca del mecanismo de la reacción catalítica la anilina sobre la actividad invertasa.
y de la especificidad del enzima. La velocidad
de una reacción catalizada por un enzima Resultados
puede medirse con relativa facilidad, ya que en Tubo Absor- A.R V [s]
muchos casos no es necesario purificar o bancia (μmol/2mL) (U.I.) mol/L
aislar la enzima. Esta velocidad es 1 0.421 3.75 0.375 0.01
directamente proporcional a la concentración 2 0.619 5.37 0.537 0.02
3 0.828 7.35 0.735 0.03
del sustrato solo cuando esta concentración es
4 092 8.05 0.805 0.05
baja. Cuando la concentración del sustrato se
5 1.08 9.4 0.94 0.08
hace lo suficientemente elevada, de forma que
6 1.135 9.8 0.98 0.1
la enzima se satura, la velocidad de la reacción
Tabla 1. Efecto de la concentración de sustrato sobre la actividad
es de orden cero con respecto al sustrato. A invertasa.
concentraciones intermedias del sustrato, la
Tubo
reacción tiene un orden mixto. Absor- A.R
V (U.I.) [s] mol/L
bancia (μmol/2mL)
La actividad enzimática se puede inhibir, es 1 0.454 4.05 0.405 0.01
decir, reducir o eliminar la actividad enzimática 2 0.585 5.15 0.515 0.02
o catalítica de enzimas específicas. Los 3 0.688 6.1 0.610 0.03
inhibidores se clasifican en reversibles e 4 0.773 6.8 0.680 0.05
irreversibles, los irreversibles se clasifican a su 5 0.834 7.35 0.735 0.08
vez en: 6 0.906 8 0.8 0.1
Tabla 2. Inhibición enzimática.
● Inhibición competitiva.
● Inhibición acompetitiva.
● Inhibición mixta.

Objetivos.
∗ Nota: Las gráficas realizadas se
encuentran anexas al final del reporte.
Analizar el efecto de concentración de
sustrato, sobre la velocidad de reacción.
 ➢ Concentración de sustrato.
Vmáx = 0.98 Km = 0.0165
➢ Inhibición enzimática:
Vmáx = 0.80 Km= 0.0165
➢ Tipo de inhibidor: No competitivo.
Discusión
En la tabla 1 y 2 se muestran los resultados de
los valores obtenidos de la concentración de
azúcar reductor en unidades invertasa que se
interpolaron en la curva tipo (gráfica 1), así
mismo la velocidad que se obtuvo dividiendo la
concentración de azúcar reductor entre 10 ya
que fueron 5 minutos de incubación por dos
que refiere a dos productos obtenidos en la
reacción.
La gráfica 2 representa la relación entre la
velocidad enzimática con respecto a la
concentración de sustrato, se puede observar
que conforme la concentración de sustrato
aumenta la velocidad también aumenta pero
solo hasta cierto punto donde la velocidad
permanece constante, la cual llamamos
velocidad máxima, la curva azul muestra la
acción del inhibidor el cual se observa que en
presencia de inhibidor la velocidad enzimática
disminuye, ambas curvas tienen un valor de
Km igual por lo cual la anilina es un inhibidor
no competitivo.
En la gráfica 3 se puede observar de manera
lineal el valor de Vmáx y Km, los cuales son
más exactos, esto nos garantiza la veracidad
de los resultados.
Conclusiones
Al aumentar la concentración del sustrato en
una reacción enzimática, la velocidad también
va aumentando hasta cierto punto (Vmáx)
Los valores de Km Y Vmáx se obtuvieron
gráficamente, los cuales son 0.0165 y 0.98
respectivamente para una reacción enzimática
sin inhibidor, también los valores de Km y
Vmáx de 0.0165 y 0.80 respectivamente en
caso de la anilina como inhibidor.
Dados los valores obtenidos se concluye que
la anilina es un inhibidor no competitivo.
Bibliografía:
Voett. Prat. “Fundamentos de Bioquímica” 4ª
Edición. Editotorial Medica Panamericana, pp,
358-376 (2016)