PRÁCTICA DE LABORATORIO

DETERMINACIÓN CLORO RESIDUAL EN AGUA POTABLE Y

CUANTIFICACIÓN COLIFORMES TOTALES Y FECALES
Fanny Angélica Beltrán Bermúdez, Milton Guillermo Molano Gonzalez. Sergio Lynett Hernandez,
Jorge Pérez Valverde, Michael Franco Gelvez, Daniel Roa

RESUMEN

Uno de los peligros más comunes relacionados con el agua para consumo humano es su nivel de
contaminación ya sea por factores fisicoquímicos o ambientales, en el presente informe se presentarán los
resultados experimentales obtenidos al someter muestras de agua cruda y potable a pruebas de laboratorio
con el fin de determinar el contenido de coliformes totales mediante la técnica del Número más probable
NMP. Para el análisis físico-químico y microbiológico se analizaron 12 muestras (por duplicado). La
metodología se llevó a cabo con muestras de agua, provenientes del Municipio de Fusagasugá en el mes de
febrero de 2019. En los parámetros establecidos en la resolución 2115 y los coliformes fecales se
encuentran fuera del límite establecido por la normatividad vigente.

Palabras clave: Calidad del agua, agua potable, agua cruda, contaminación del agua, Coliformes Totales,
Cloraminas, E. Coli, Fusagasugá.

DETERMINATION OF RESIDUAL CHLORINE IN DRINKING WATER AND QUANTIFICATION OF TOTAL

AND FECAL COLIFORMS

ABSTRACT

One of the most common hazards related to water for human consumption is its contamination level, whether
due to physicochemical or environmental factors. In this report, the experimental results obtained by
submitting samples of raw and potable water to laboratory tests will be presented. In order to determine the
content of total coliforms by the technique of the Most Probable Number MPN. For the physical-chemical and
microbiological analysis, 12 samples were analyzed (in duplicate). The methodology was carried out with
water samples from the Municipality of Fusagasugá in the month of February 2019. In the parameters
established in Resolution 2115 and the fecal coliforms are outside the limit established by the current
regulations.

Keywords: Water quality, drinking water, raw water, water pollution, Total Coliforms, Chloramines, E. Coli,
Fusagasugá.

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1. INTRODUCCIÓN 5 Balón aforado de Ácido acético concentrado. 50

100 mL. mL
Gran parte del agua cruda no cumple con las
características necesarias para catalogarla apta 10 Erlenmeyer de Solución Buffer fosfato. 100
para el consumo humano. Uno de los factores
125 mL. mL . Preparación. Disolver en
contaminantes más comunes en ella es la
presencia de bacterias como el E. Coli, causando aproximadamente en 40 mL de
gran impacto al medio ambiente y la salud, estas agua destilada 2.4g de
tienen la capacidad de sobrevivir tiempo fosfato ácido disódico y 4.6g
considerable en el agua, por lo tanto cualquier tipo
de fosfatodiácido de potasio.
de tratamiento debe hacerse después de verificar
muestras de agua en laboratorio, ya que se deben Adicionar 0.08g de la sal
conocer sus características para determinar la disódica de EDTA disueltos en
cantidad de químicos a utilizar en el proceso, los 40 mL de agua destilada.
tiempos de retención, etc., evitando dosificaciones Completar a volumen en un
nocivas. El método permite determinar la dosis
matraz aforado de 100 mL.
óptima de cloro que debe agregársele a un agua
cruda para que cumpla con el cloro residual
después de la salida de una PTAP, De acuerdo a la
5 peras de succión Solución Indicadora de Sulfato
normatividad vigente.
ó succionador. de N,N dietil p-fenilendiamina:
2. MATERIALES Y METODO Disolver 0.11g de Sulfato de
N;N dietil p-fenilendiamina y
2.1. Materiales, equipos y reactivos 0.02g de EDTA disódico en un
vaso de precipitado con
Materiales y Reactivos
aproximadamente 50 mL de
Equipos agua destilada y adicionar 1
mL de ácido sulfúrico
Espectrofotometro Yodato de Potasio 1g. concentrado. Luego, llevar a
Visible. Previamente seco un matraz aforado de 100 mL
completando con agua
5 Bureta de 25 mL Yoduro de Potasio 20 g. destilada.
5 Pinza para HCl 6N. (100 mL). 5 Espátula. Solución caldo Brilla. 500 mL
bureta. (Ver especificaciones del
envase)
5 Nuez doble. Almidón Soluble 5%m/V. 25
mL. Disolver 1.25 g almidón en 5 Vidrio de Reloj Solución de NaCl 0.85 % m/V.
15 mL de agua destilada, 200 mL esterilizado
calentar la solución y agitar
constantemente hasta disolver
todo el almidón, dejar enfriar y
aforar a 25 mL. 5 Gotero. Solución Buffer fosfato. 100
mL . Preparación. Disolver en
5 Pipeta aforada de Tiosulfato de Sodio 0.025N. aproximadamente en 40 mL de
10 mL 250 mL (1.55g en 250 mL de agua destilada 2.4g de
solución) fosfato ácido disódico y 4.6g
de fosfatodiácido de potasio.
Adicionar 0.08g de la sal

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disódica de EDTA disueltos en 81 tubos de ensayo tapa rosca con campana de

40 mL de agua destilada. Durham invertida y 9 mL de Caldo Brilla previamente
Completar a volumen en un esterilizado
matraz aforado de 100 mL.
1 mechero.
1 Balón aforado de Almidón Soluble 5%m/V. 25
500 mL mL. Disolver 1.25 g almidón en 6 Pipeta graduada de 5 ml previamente esterilizada.
15 mL de agua destilada,
calentar la solución y agitar
constantemente hasta disolver 15 Frascos ámbar de capacidad de 500 mL.
todo el almidón, dejar enfriar y
aforar a 25 mL.

5 Pipeta graduada Tiosulfato de Sodio 0.025N. 2.2. Metodología

de 10 mL. 250 mL (1.55g en 250 mL de
solución)  Cuantificación de CRL por la técnica del
DPD en agua potable.
 Cuantificación de cloraminas, CRL y Cloro
8 Balones aforados Ácido acético concentrado. 50 Total en agua potable.
de 10 mL ó 25 mL o mL  Determinación de Demanda de Cloro en
25 mL. agua cruda.
 Cuantificación de coliformes totales por
NMP/mL en agua potable y agua cruda.
 Determinación cualitativa de coliformes
20 Tubos de Solución KIO3 0,025N (Disolver fecales por EMB en agua potable y agua
cruda.
ensayo 0.0896 g KIO3 disueltos en 100
previamente mL) “Los esquemas de procedimiento se incluyen en el
lavados y purgados anexo 1.”
con agua destilada,
dejar secar
3. RESULTADOS Y ANALISIS
invertidos.
3.1. estandarización del tiosulfato de sodio
2 Gradilla. Agar Bilis Verde Brillante, para
monitorear E.coli previamente
esterilizado.

Prueba Valor (mL) Na2S2O3

1 10,5
4 Tubos de ensayo 50 mL HCl 6N
con 9 mL de NaCl 2 11,3

0.85% m/V 3 10,7

previamente 4 10,4
esterilizados con
5 10,35
tapón de algodón
PROMEDIO 10,65

N 0,2346

3
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3.2. titulación del Hipoclorito

3.5. Cálculo de la absorbencia con la muestra de

agua potable
= aprox 0,030 mg/ml = 30 PPM

mL Sample = 10 mL del Hipoclorito Lectura NCl3 Presente

A Cloro libre
Muestra V (mL) B-A NH2Cl
1 0,5 C-B NH2Cl2 + ½ NCl3
N Cloro libe + ½ NCl3
2 0,2
2 (N-A) NCl3
3 0,5
C-N NHCl2
4 0,35

5 0,25

PROMEDIO 0,36

Concentración 30 PPM

3.3. Disoluciones de cloro

Concentración PPM V (mL) Necesario 3.6. Cuantificación de CRL, Cloraminas Cloro total
en agua potable
0.3 0,25

0.6 0,5 Especie Concentración ppm

1.5 1,25
Cloro libre 0,0206
2 1,67
Tricloruro de nitrógeno 0,793
3 2,5
Monocloramina 0,34

Dicloramina 0,05
3,4, Curva de calibración
CL2ppm Absorbancia
Los valores se calcularon con la ecuación de la
0.3 0,019
curva de calibración.
1 0,071

1.5 0,111
Realizando la comparación de acuerdo a los
parámetros establecidos en la resolución 2115 del
2 0,142 2007 se puede observó que para el Cloro residual
3 0,2176 no cumple con los valores permitidos, ya que esta
establece para el cloro residual un valor entre 0,2 y

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2 mg/L. En el caso de las cloraminas están por
debajo del valor máximo de cloruros que es de 250
mg/L
3.7. Determinación de cloro en agua cruda
Se Contaron 68 unidades formadores de Colonia
en un cuadrante, por lo que se estima un total de
272 UFC, lo cual nos indique que debería realizare
una buena desinfección para poder considerar que
esta apta para consumo humano.

Muestra Valor Absorbancia Demanda 3.8. Coliformes fecales

Blanco (Agua cruda) 0,093 de Cloro (ppm Cl2)

2 ppm 0,103 1.435

3 ppm 0,144 1.995

Los valores se calcularon con la ecuación de la

curva de calibración.
4. Coliformes fecales.

Figura 3: Muestra agua potable

En foto se puede apreciar que solo se observa

burbuja en el duplicado disolución (10^-1)
Cuantificación de coliformes totales NMP/mL en
agua potable.

Dilución # de tubos (+)

-1
10 1
Figura 1: Muestra de agua potable -2
10 0

Se contaron 6 unidades formadoras de colonia lo 10-3 0

cual indica que el agua no sería apta para consumo
humano, ya que como lo establece la resolución
2115 del agua de estar libre de coliformes fecales.
Cabe anotar que se debería realizar otra muestra
para comprobar la veracidad de esta.
NMP/mL 4
El cálculo se realizó en base a la table de NMP.
Lo anterior permite evidenciar que la muestra de
agua no es apta para consumo humano ya que con
tiene coliformes totales, sin embargo debería
realizarse un ensayo adicional para comprobar que
no hubo error humano al desarrollar el
procedimiento

Figura 2: Muestra de agua cruda

Figura 4: Muestra agua cruda

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En la imagen se puede apreciar que los 6 tubos 4.2.2. Tener material de laboratorio suficiente y
presentaron burbuja por lo que se asume que los 3 esterilizado para evitar contaminación que
(faltantes) también deberían presentar burbuja. pueda alterar la muestra.
4.2.3. Realizar una segunda prueba para
Cuantificación de coliformes totales NMP/mL en determinar la veracidad de los resultados
agua cruda. obtenidos

Dilución # de tubos (+)

5. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
-1
10 3
[1] Romero Rojas Jairo Alberto., Calidad del Agua
10-2 3
3° Edición, Editorial Escuela Colombiana de
10-3 3 Ingeniería..

NMP/mL > 1100 [2] Demanda bioquímica de oxígeno – 5 días,

El cálculo se realizó en base a la tabla de NMP.
Lo anterior nos confirma que debe realizara una
buena etapa de desinfección para garantizar que el
agua sea apta para consumo humano.
4. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
4.1. CONCLUSIONES
4.1.1. El Cloro residual de la muestra de agua
potable no cumple con los valores
establecidos en la resolución 2115 del
2007.
4.1.2. Las cloraminas están por debajo de valor
máximo permito en la Resolución 2115 del
2007
4.1.3. El agua potable no cumple con los valores
de Coliforme totales ni coliformes fecales
determinados en resolución 2115 del 2007
4.1.4. El agua potable no es apta para consumo
humano de acuerdo con la resolución 2115
del 2007
incubación y electrometría - instituto de hidrología,
meteorología y estudios ambientales ministerio de
ambiente, vivienda y desarrollo territorial –
república de Colombia subdirección de hidrología -
grupo laboratorio de calidad ambiental.
[3] Demanda química de oxígeno por reflujo
cerrado y volumetría- instituto de hidrología,
meteorología y estudios ambientales ministerio de
ambiente, vivienda y desarrollo territorial –
república de Colombia subdirección de hidrología -
grupo laboratorio de calidad ambiental.
[4] Operation of the Single Measuring System -
OXITOP Instruction Manual WTW.
ANEXO:
INFORMACION ADICIONAL DEL FORMATO
Anexo 1: Se anexa Procedimiento experimental
en diagrama de flujo PDF
Anexo 2: Tablas de datos tomados en el laboratorio
y Tablas de resultados PDF

4.2. RECOMENDACIONES

4.2.1. Realizar la toma de muestras y trasporte

según la Guía del IDEAM para garantizar
que los parámetros no varíen al realizar la
práctica de laboratorio.