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FACULTAD DE CIENCIAS
Tacna – Perú
1
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
PREFACIO
La presente publicación ha sido corregida con respecto a las primeras ediciones. Esto
ha sido necesario debido al desarrollo alcanzado por la Fisiología en los últimos años.
Nuevos acontecimientos en el mundo biológico han ilustrado de mejor forma
nuestros conocimientos, modificaciones de conceptos y tecnicas mantenidos durante
más de 30 años, descripción de nuevos contenidos, etc. Han sido el producto de la
incorporación de nuevas técnicas experimentales que han permitido llegar a los
límites insospechados dentro del conocimiento de los mecanismos moleculares a
nivel intracelular. La biología celular y molecular, la ingeniería genética y la
genómica, la inmunología y el radioinmunoensayo, entre otras disciplinas, han
contribuido en gran parte a este desarrollo.
La experiencia docente muestra que el éxito en la transmisión del saber depende en
gran medida del estilo con que se intenta, estilo que es propio de cada docente. Las
Universidades notables del mundo lograron prestigio por sus aportes al conocimiento
y complementariamente, no por enseñar una fisiología, o biología diferentes, sino por
transmitir los mismos contenidos “de una manera diferente”. La pretensión del autor
consiste en plasmar en el manual su preocupación por aproximarse a la mejor
docencia. Sin duda un manual prolonga y hace permanente la cátedra universitaria.
Por añadidura, constituye un instrumento que permite y exige su superación. En este
sentido la tarea para nosotros apenas se ha iniciado.
INDICE
3
Preparaciones Fisiológicas ..........................................................04
Fisiología de Membrana ..........................................................10
Potencial nervioso de acción ..........................................................13
Contracción muscular ..........................................................16
Gusto y Olfato ..........................................................21
Psicofísica de sensaciones ..........................................................30
Funciones reflejas ..........................................................35
Actividad refleja ..........................................................41
Sistema Digestivo ..........................................................53
Fisiología Digestiva ..........................................................61
Ventilación Pulmonar ..........................................................65
Miocardio ..........................................................73
Presión Arterial ..........................................................80
Electrocardiograma ..........................................................83
Elementos Formes de la Sangre ..........................................................87
Valor Hematocrito ..........................................................91
Velocidad de Sedimentación Globular ..........................................................96
Coagulación Sanguínea ........................................................102
Riñón y Medio Interno ........................................................107
Regulación pH y Líquidos corporales ........................................................118
Fisiología de Órganos Excretores ........................................................120
Sistema Endocrino en Insectos …………………………………….122
Electroencefalograma ........................................................124
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PREPARACIONES FISIOLÓGICAS
1. INTRODUCCIÓN.
2. MATERIAL
2.1.Reactivos:
- Ketalar y / o Alatal - Xilocaina 2 %
- Diazepan - Cloroformo
2.2.Equipo:
- Agujas hipodérmicas - Campana de vidrio
- Jeringas hipodérmicas - Algodón
- Balanza
2.3.Material Biológico:
- Rattus rattus
- Thelmatobius arequipensis
- Columba livia
3. METODOLOGÍA
3.1.Anestésicos Generales. ( vía intraperitoneal ) Pesar
una rata y determinar el volumen de anestésico:
Dosis a inocular:
Resultados:
5
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Datos basales
I Inducción
P. analgesia
P. delirio
II Anestesia
Quirúrgica
Plano 1
Plano 2
Plano 3
Plano 4
III Parálisis
Bulbar
Respiración Reflejos
Torácica Abdominal Párpado Pie
Pulso
Datos basales
I Inducción
P. analgesia
P. delirio
II Anestesia
Quirúrgica
Plano 1
Plano 2
7
Plano 3
Plano 4
III Parálisis
Bulbar
7
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3.3.Anestésicos Inhalados
Datos basales
I Inducción
P. analgesia
P. delirio
II Anestesia
Quirúrgica
Plano 1
Plano 2
Plano 3
Plano 4
III Parálisis
Bulbar
9
Respiración Reflejos
Datos basales
I Inducción
P. analgesia
P. delirio
II Anestesia
Quirúrgica
Plano 1
Plano 2
Plano 3
Plano 4
III Parálisis
Bulbar
3.4.Preparación Espinal
Resultados:
9
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FISIOLOGIA DE LA MEMBRANA
1.0 INTRODUCCION:
La vida celular depende de un continuo intercambio con el medio externo, ya que la célula debe
tomar de este, los nutrientes y expulsar hacia él, los productos de su metabolismo.
La membrana está constituida por una bicapa de moléculas lipídicas anfipáticas, orientadas
de forma tal que sus grupos polares quedan expuestos hacia las interfaces interna y externa,
mientras los grupos apolares se disponen hacia el interior, alejados del agua. La bicapa
lipídica se ve interrumpida en determinados puntos por la presencia de moléculas proteicas.
De acuerdo con la estructura molecular de las sustancias que atraviesan la membrana, el paso se
efectúa a través de la parte lipídica o de la proteica.
Cuando entre dos compartimentos separados por una membrana semipermeable existe una
diferencia de concentración de solutos, lo cual constituye un desequilibrio, el sistema
restablece el equilibrio moviendo el soluto y / o el solvente.
2.0 MATERIAL:
11
2.3.Material Biológico:
3.0 METODOLOGIA:
T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 T11
NaCl 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0
Agua 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0.0
Sangre 3 g 3g 3g 3g 3g 3g 3g 3g 3g 3g 3g
- Mezclar u homogenizar.
- Medir el porcentaje de hemolisis o crenacion.
- Graficar la curva de fragilidad, considerando los valores de hemolisis o
crenacion obtenidos frente a la os molaridad o concentración.
T1 T2 T3 T4
NaCl 0,17M 10 ml
Urea 0,3M 10 ml
11
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Glicerol 0,3M 10 ml
Sacarosa0,3M 10 ml
Sangre 3g 3g 3g 3g
- Agitar y dejar en reposo por 1 min, (en todas las soluciones el proceso debe
durar el mismo tiempo).
-
- Pesar una rata, cuy, conejo, perro o gato, en ayunas (24 h) y anestesiarlo, con
un anestésico general.
- Situar al animal en posición dorsal en una tabla de disección y fijarla con
esparadrapo.
- Hacer una incisión media abdominal y localizar la región pilórica duodenal.
- Perforar el mesenterio en esa zona y pasar por debajo del intestino un pedazo
de seda de aproximadamente 10 cm. Hacer sobre el intestino una pequeña
incisión en forma de V.
- Medir a partir de esta zona 10 - 15 cm, de asa duodenal y repetir lo anterior.
- Introducir una jeringa con solución Locke a 38 C por la incisión en V
superior y lavar la porción del intestino.
- Ligar el intestino con la seda por encima de la incisión en V inferior.
- Introducir por la incisión superior una jeringa con solución Locke glucosa a
38 C y tratar de que el segmento se llene de forma homogénea y que sus
paredes no queden demasiado distendidas por un exceso de volumen de
solución patrón.
- Cerrar la ligadura superior por debajo de la incisión.
- Colocar las vísceras de nuevo en el interior del animal y bañarle
frecuentemente con solución Locke a 38 C durante 30 min.
- Repetir las operaciones con la segunda rata agregando a la solución Locke
que va a introducir en el intestino 1 ml de solución de cianuro de potasio.
- Extraer el segmento intestinal, secarlo en un papel filtro y vaciar su contenido
en un tubo de centrífuga.
- Determinar la concentración de glucosa en el sobrenadante y en la solución
Locke original mediante una técnica bioquimica:
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1. INTRODUCCION:
La materia viva se caracteriza por ser capaz de responder ante los cambios en el medio
interno o externo con una variación de su actividad. Esta propiedad se conoce como
irritabilidad. Cuando la variación de la actividad celular frente al estímulo es de
naturaleza eléctrica, el fenómeno se denomina excitabilidad y está muy desarrollado
en las células nerviosas y musculares. Estas células especializadas tienen una gran
sensibilidad a los estímulos, su respuesta a ellos es una variación del valor del
potencial de membrana (PMR).
Las fibras nerviosas son electro excitables, por lo cual el estudio de la excitabilidad
se ha hecho básicamente aplicando a un axón un estímulo adecuado. La estimulación
eléctrica resulta ventajosa, ya que es fácil de producir, no causa daño a los tejidos y
todos sus parámetros son fáciles de controlar. Cuando sobre un axón se aplica un
estímulo eléctrico de intensidad, duración y velocidad de crecimiento adecuados, el
potencial de membrana va disminuyendo su magnitud y se hace menos negativo el
interior celular (despolarización), primero lentamente y una vez alcanzado un cierto
valor crítico, de forma brusca. Este valor del potencial de membrana se conoce como
umbral. El resultado de la despolarización brusca es invertir la polaridad de la
membrana, haciendo el interior positivo. Esta fase es seguida por una rápida
repolarización que tiende a llevar de nuevo el potencial de membrana al valor de
reposo.
Este tipo de cambio eléctrico es lo que se conoce como potencial de acción (PA) y es
capaz de propagarse a lo largo del axón. En el desarrollo de PA se suceden eventos
eléctricos e iónicos.
2. MATERIALES:
2.1. Reactivos:
- Solución Looke
- Suero fisiológico
- Solución Ringer rana
2.2. Equipo:
- Estimulador eléctrico
- Quimógrafo
3. METODOLOGIA:
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CONTRACCION MUSCULAR
1. INTRODUCCION
Las respuestas conductuales de los animales involucran casi sin excepción una u otra forma
de contracción muscular. La habilidad de moverse rápidamente es una de las características
fundamentales de la vida animal y es posible, gracias a la acción combinada de los músculos.
Bajo el término de contracción muscular se definen los eventos mecanoquímicos que tienen
lugar en el músculo y que producen en él acortamiento, tensión o ambas cosas, y le permiten
hacer un trabajo. En el proceso de contracción muscular se vinculan las propiedades
contráctiles de la célula muscular con las propiedades excitables de sus membranas.
Los músculos estriados están formados por miofibrillas y estas por miofilamentos gruesos y
finos dispuestos en un patrón estructural característico, donde aparece como unidad que se
repite a lo largo de la célula muscular, el sarcómero.
Los filamentos gruesos están formados por miosina y los finos por actina, troponina y
tropiomisina. En estado de reposo la concentración de iones Ca+ en el sarcoplasma es baja y
las proteínas contráctiles de los filamentos finos están en posición poco favorable a la unión
con la miosina. Con la excitación, los iones Ca+ concentrados en las cisternas terminales del
retículo sarcoplásmico son liberados. Las moléculas de troponina fijan iones Ca+ y esto
provoca un cambio conformacional que favorece la formación de un puente transversal entre
la actina y la cabeza globular de la miosina. Los iones Ca+, además, activan la ATP-asa
miosínica, de manera que el ATP es hidrolizado. La energía liberada en la hidrólisis es
utilizada en un giro de la cabeza globular de la miosina unida a la actina, desde una posición
en que el ángulo entre ellas es de 90 a otra en que este cambia a 45 . Con este giro se tira
del filamento fino hacia en centro del sarcómero y así se van deslizando estos filamentos uno
con respecto a otros.
2. MATERIAL
Reactivos:
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Equipo:
- Estimulador eléctrico Equipo de disección
- Quimógrafo Varillas de vidrio
- Microscopio Seda quirúrgica
- Portaobjetos
- Tabla de disección Soporte Universal con pinzas
- oteros Agujas
Material Biológico
- Bffo spinulosus
3. METODOLOGIA
Se utilizará una preparación ciático - gastrocnemio de anfibio. Se procederá a desmedular y
descerebrar, posteriormente corte la piel detrás de la cadera y retire la de los miembros
inferiores como quien invierte un guante. Se separan las dos patas cortando la pelvis
exactamente en la línea media. Con una varilla de vidrio separe el gastrocnemio de los tejidos
vecinos, busque el tendón de Aquiles, sujételo con un hilo y jale el talón. El extremo inferior
del músculo se levanta, y se separa el gastrocnemio del hueso y del tejido muscular de la
parte baja de la pierna, cortando la articulación de la rodilla con tijeras. Se disecan los
músculos de la cara dorsal del muslo hasta exponer el nervio ciático, cerca del fémur. Con
mucho cuidado, se diseca el nervio. Se separan el nervio y el gastrocnemio, de los demás
tejidos cortando el fémur y el tejido muscular por encima de la rodilla, y por debajo de su
unión con la pelvis. Las preparaciones neuromusculares de ambas patas se colocaran en
placas Petri de solución ringer anfibio.
Sumación Multifibrilar.
Aplicar estímulos aislados de intensidad creciente con el tambor estacionario del estimulador
de Harvard.
Entre contracción y contracción se mueve el tambor a mano aproximadamente a un cm de
distancia. Dejar pasar 10 seg. entre cada estímulo. Se va aumentando la intensidad del
estímulo.
Determinar el estímulo umbral, la intensidad de las respuestas y la intensidad capaz de producir
una contracción máxima.
Resultados:
17
Contracción Tetánica.
Aplique estímulos sucesivos cuya intensidad (subtetanizante) se suficiente para provocar
sacudidas simples de máxima amplitud. Dejar descanzar 20 seg entre estimulación.
Producir tetanizaciones frecuentes y observar los efectos de la fatiga. Resultados:
Contractura.
Mantenga el quimógrafo encendido y la palanca inscribiendo. Bañe externamente el músculo
con una solución saturada de ClK. Observar.
Lave la preparación con solución fisiológica.
Aplíquele un estímulo eléctrico para comprobar que se ha recuperado.
Repita el procedimiento anterior con solución de cafeína. Observe los resultados. Resultados:
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GUSTO Y OLFATO
1. INTRODUCCION:
El gusto y el olfato constituyen un grupo de sentidos caracterizados por su capacidad para
responder, de manera específica, al efecto directo de diversos tipos de compuestos químicos.
Tanto desde el punto de vista de su disposición estructural como de su especialización
funcional y su significado biológico, el gusto y el olfato presentan numerosos puntos en
común. Ambos son sensibles a estímulos de tipo químico (pertenecen al grupo de los
quimiorreceptores) y poseen, por tanto, la capacidad de detectar la presencia de sustancias
disueltas (iones o moléculas) en el medio ambiente.
La detección de compuestos químicos en fase gaseosa se lleva a cabo por medio de la olfación
(olfato), mientras que la presencia de las sustancias químicas en un medio líquido se pone de
manifiesto a través de la degustación (gusto). La olfación o el olfato posee una gran
importancia funcional, dado que permite la detección de moléculas que, procedentes de
puntos situados a distancias relativamente grandes, son vehiculadas hasta el perceptor a través
de corrientes aéreas o líquidas.
La quimiopercepción constituye la base de numerosas actividades del comportamiento,
incluida de manera particular en los animales, la comunicación interindividual. La función
más importante de la quimiopercepción está en relación con la búsqueda y captura de los
alimentos, así como los procesos que regulan su adecuada digestión. Al propio tiempo, los
sentidos químicos desempeñan un papel muy importante en la evitación de sustancias o
ambientes nocivos. En muchos animales, la detección de las sustancias químicas segregadas
por un individuo determinado forma parte del mecanismo de atracción sexual; para otra parte,
la secreción de sustancias químicas puede ser realizada tanto para atraer a una potencial
víctima como para alejar o rechazar a los posibles depredadores.
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las comidas o manjares es, por tanto, el resultado de sensaciones complejas, en las que
participan no sólo los estímulos de tipo gustativo, sino los táctiles, térmicos, olfatorios, etc.
Las cualidades propiamente típicas del sentido del gusto corresponden a los cuatro sabores
fundamentales: dulce, salado, ácido y amargo. Estas distintas cualidades o modalidades no
son percibidas de igual manera en todas las áreas o regiones gustativas, sino que ofrecen
diferencias de localización características. Así, la máxima sensibilidad para el dulce se
localiza en la punta de la lengua; para el ácido en la parte posterior del reborde lingual; para
el salado en la parte anterior del reborde lingual y, en menor proporción en la punta de la
lengua, y para el amargo en la base de la lengua. La intensidad de la excitación depende de
la extensión de la zona afectada o estimulada por el excitante, razón por la cual "paladeamos"
cuando deseamos percibir mejor un gusto débil.
De hecho, existe un número relativamente pequeño de sustancias, unas 50, que dan lugar a
sensaciones olfatorias puras; la mayoría de las sustancias o compuestos odoríferos originan
estimulaciones mixtas, en las que participa también el sentido del gusto, así como la
estimulación de las terminaciones libres del nervio trigémino de la mucosa nasal.
Cuando el individuo realiza movimientos respiratorios tranquilos, poco profundos, el aire
que está en contacto más inmediato con la región olfatoria está casi en reposo, por lo que tan
sólo una pequeña fracción de la sustancia odorífera inhalada llega a ponerse en contacto con
los receptores olfatorios. Para "oler" mejor llevamos a cabo inspiraciones intensas,
profundas, con objeto de movilizar una mayor cantidad de aire y, con ello, incrementar el
número de moléculas que entran en contacto con las células neurosensoriales.
La sensación odorífera no es igual para cualquier concentración de la sustancia que haya que
detectar. Cuando aumenta la concentración de una sustancia odorífera, se percibe, al
comienzo, una sensación olorosa indefinida ("se huele algo") para, a medida que se alcanzan
valores o concentraciones superiores, detectar la sensación olfatoria específica. En el primer
caso se alcanza el "umbral de sensibilidad" y en el segundo el "umbral de especificidad". A
continuación se indican los umbrales específicos para una serie de sustancias.
Naftalina 4 x 10-9
Acido acético 1 x 10-10
Vainilla 5 x 10-12
Acido butírico 1 x 10-12
Escatol 3.5 x 10-13
Mercaptano 4.5 x 10-14
El perro posee una sensibilidad olfatoria muy superior a la del hombre, presentando unos
umbrales olfatorios que son de 6 a 8 órdenes de magnitud inferiores a los de la especie
humana. El perro puede detectar concentraciones de compuestos odorífero del orden de
10.000 moléculas por centímetro cúbico de aire; teniendo en cuenta que esta masa se
distribuye entre unas 108 células o receptores olfatorios, se deduce fácilmente que debe
bastar, probablemente, una sola molécula para estimular un receptor olfatorio.
Los receptores olfatorios se adaptan con suma rapidez, lo que explica que, al entrar en una
habitación, se perciba claramente un olor determinado, mientras que al cabo de un cierto
tiempo no se note ya dicha sensación.
2. MATERIAL
• Terrones de azúcar o azúcar cristalizado
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• Disolución de sacarosa al 5%
• Disolución de ácido acético al 1%
• Disolución de cloruro sódico al 5%
• Disolución de quinina al 0.05%
• Disoluciones de ácido acético al 0.14, 0.16, 0.18, 0.20, 0.25 y 0.35 %
• Disolución de feniltiocarbamida al 1.3 % a partir de la cual se preparan, por
disoluciones sucesivas, disoluciones de concentración inferior.
• Botellas o botellines de cristal, color ámbar, para guardar las disoluciones de
feniltiocarbamida.
• Trozos de cebolla, patata, manzana.
• Miel
• Frasco con agua de colonia
• Frascos de boca ancha
• Vasos de vidrio para enjuagues con agua
• Vasitos de vidrio o de cerámica (desechar el material de plástico para evitar la
contaminación de las disoluciones que haya que degustar con productos aromáticos).
• Gasas estériles
• Cronómetro
• Electrodos no polarizables
• Batería de 6 V
• Pinzas finas
• Botella de agua
3. PROCEDIMIENTO
Aspectos generales de la estimulación gustativa
Con una gasa estéril, secar la superficie dorsal de la lengua de uno de los compañeros de
prácticas. A continuación, colocar un pequeño cristal o terrón de azúcar sobre la punta de la
lengua y comprobar el tiempo que transcurre desde este momento hasta aquel en que es
percibido el sabor del azucar.
Enjuagar abundantemente la boca con agua y secar de nuevo la lengua por medio de una gasa
estéril. Depositar una gota de una disolución de azúcar al 5% en la punta de la lengua y, de
nuevo, verificar el tiempo que transcurre hasta el momento de percibir la sensación. Anotar
los resultados correspondientes a cada prueba.
Resultados:
Terrón de azúcar:
Disolución de sacarosa:
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A lo largo de estas experiencias hay que evitar que el compañero "receptor" vea o conozca
el tipo de disolución que se le está aplicando cada vez. Por otra parte, es necesario insistir
en la necesidad de enjuagar profusamente la boca con agua al pasar de una disolución a otra.
Cuáles son las partes de la lengua más sensibles a cada una de las distintas disoluciones
ensayadas?
Punta de la lengua
Parte anterior del
borde lingual
Parte posterior del
borde lingual
Base de la lengua
Umbral de sensibilidad
Sobre la mesa de prácticas ordenar una bacteria de frascos que contenga disoluciones de
sacarosa, de concentración progresivamente creciente, que comprendan las siguientes
disoluciones: 1, 1.25, 1.5, 2, 2.25 y 3 %.
Depositar una gota de cada una de las disoluciones sobre la punta de la lengua, empezando
por la concentración inferior y seguir, en sentido ascendente, con las de concentración
progresivamente superior. Después de cada momento o dilución se percibe el sabor dulce del
azúcar.
Repetir la experiencia con sendas disoluciones de ácido acético, ordenadas en orden
creciente, de concentración de acuerdo con el siguiente esquema: 0, 14, 0, 16, 0, 18, 0.2, 0.25
y 0,3%.
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En este caso, depositar la gota de disolución sobre la mitad posterior del reborde lingual.
Registrar el momento en que se detecta el sabor ácido del acético.
En la tabla, anotar los resultados obtenidos en estas dos experiencias y compararlas con los
umbrales de sensibilidad para estas mismas sustancias que presentan los compañeros
fumadores (o no fumadores, según sea el caso) del grupo de prácticas.
1 0.14
1.25 0.16
1.5 0.18 0.2
2 0.25
2.5 0.3
3
Prueba de la feniltiocarbamida
El objetivo de esta prueba es el de identificar la disolución de feniltiocarbamida más débil
que es capaz de detectar cada individuo o participante. Con esta finalidad se ofrece a cada
alumno un pequeño volumen de una serie de disoluciones de feniltiocarbamida, de
concentración progresivamente creciente, hasta el punto en que es capaz de percibir el sabor
amargo de la disolución, perfectamente diferenciable del propio agua corriente. Las
disoluciones de feniltiocarbamida se preparan a partir de una disolución madre que contiene
1.3 g de sustancia por litro de agua potable y de la cual por diluciones sucesivas, se preparan
los siguientes tipos de disoluciones:
1 1,300 mg/l
2 325 mg/l
3 162,5 mg/l
4 81,25 mg/l
5 40,63 mg/l
6 20,31 mg/l
7 5,08 mg/l
8 1,27 mg/l
En el caso en que se detecte como "amarga" la disolución ensayada, se admite que la persona
es sensible a la acción estimulante de la feniltiocarbamida y se la califica como de
"degustador". Para determinar el grado de sensibilidad de dicha sensación se repite la prueba,
después de enjuagar profusamente la boca con agua, utilizando un pequeño volumen de la
disolución nº8; si nota todavía el sabor amargo, hay que repetir la prueba con una disolución
cuya concentración es la mitad de la anterior, y así sucesivamente. En el caso de que la
primera disolución (nº7) no sea percibida como de carácter amargo, se dan a probar al sujeto
disoluciones de concentración progresivamente creciente. La mayoría de las personas
percibe el sabor amargo a partir de alguna disolución cuya concentración supere unos valores
mínimos; sin embargo, algunos individuos no notan el sabor amargo en ninguna de las
disoluciones.
Los resultados del grupo de prácticas en conjunto, y en su día, los de la totalidad de la clase
se acumulan y tabulan conjuntamente en forma de histograma de distribución de frecuencias;
si el número de participantes es lo suficientemente amplio, es probable que se observe una
distribución bimodal. Al analizar las gráficas de las figuras es posible determinar el umbral
de sensibilidad (antimodo) a partir del cual la muestra de población estudiada puede ser
dividida en "degustadores" y "no degustadores". Conviene tener en cuenta que el umbral de
sensibilidad para la feniltiocarbamida es mayor en las mujeres que en los hombres, por lo
que los resultados deben ser calculados por separado para cada sexo. (Teóricamente el 70%
del grupo debería percibir el sabor, mientras que el 30% restante sería insensible a él)
El carácter, o capacidad, gustativo parece ser dominante sobre el no gustativo, siendo los
individuos no sensibles o poco sensibles a la feniltiocarbamida homocigotos de tipo recesivo.
Los compuestos del tipo de la feniltiocarbamida, derivados de la tiourea, son sustancias con
acción antitiroidea, habiéndose sugerido que el polimorfismo que se observa en la capacidad
para degustar este compuesto podría estar, de alguna forma, en relación con la actividad de
la glándula tiroides, así como con variaciones en la tasa de crecimiento y maduración del
sistema óseo. De hecho, se ha demostrado cierta correlación entre los niveles del yodo
proteico en el plasma y la capacidad gustativa para la feniltiocarbamida. Interprete sus
Resultados:
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Confusión olor-sabor
Antes de empezar la práctica, colocar en un frasco de boca ancha, bien tapado, unos trocitos
de cebolla. Solicitar a uno de los compañeros de mesa que cierre los ojos y se tape la entrada
de las fosas nasales; en estas condiciones, introducir por medio de unas pinzas, un trozo de
cebolla en la boca del compañero y preguntarle qué tipo de sabor experimenta.
Habitualmente, juzgando sólo por la consistencia del alimento, se interpreta que el fragmento
corresponde a un trozo de patata o de manzana. Al destapar las aberturas nasales y respirar
por la nariz se permite la llegada de los vapores de la cebolla a la región olfatoria y, en este
momento, se percibe claramente la sensación mixta olor-sabor de la cebolla.
(La experiencia puede realizarse utilizando trozos de patata o de manzana como elementos
de prueba)
Introducir un poco de miel o un fragmento de plátano en la boca de un compañero, mientras
éste mantiene cerrada la entrada de las fosas nasales. Preguntarle acerca de la sensación que
percibe; nos indicará que tan sólo nota un ligero sabor dulce.
Pedirle ahora que destape la nariz y realice un movimiento espiratorio a través de ésta; como
por encanto percibirá en estas condiciones el agradable "sabor" de estos alimentos.
Resultados:
1. INTRODUCCIÓN:
27
Las sensaciones son la reproducción subjetiva del mundo objetivo. El primer paso en este
proceso es la detección por medio de los receptores de una parte o aspecto de esa realidad
objetiva, ya sea luz, temperatura, tacto, sustancias químicas, etc. La detección de los
diferentes tipos de energía del medio externo la realizan receptores especializados. La
información captada por estos receptores y traducida en impulsos nerviosos se propaga a
través de los nervios periféricos y llega al sistema nervioso central, donde es elaborada
mediante una serie sucesiva de estaciones de relevo hasta llegar a los niveles superiores
donde se producen las sensaciones. Para cada modalidad de sensaciones existe una vía
específica de transmisión. De acuerdo con la vía que haya sido activada la sensación que se
produce será táctil, térmica, auditiva, visual, química, etc.
2. MATERIAL:
2.2. Equipo:
Baño María
Termómetros
2.3. Material Biológico: Homo sapiens. (ambos sexos)
3. METODOLOGIA:
3.1. Sensaciones mecánicas:
Resultados:
27
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-
Introducir los dedos índice de cada mano en un recipiente con agua a 30 C. Como
siente el agua, fría o caliente.
- Introducir inmediatamente el dedo índice de la mano izquierda en un recipiente con
agua a 15 C y el de la mano derecha en uno a 40 C. Mantenerlos durante 30 seg.
Describir sus sensaciones.
- Transferir nuevamente ambos dedos al recipiente con agua a 30 C. Describir sus
sensaciones y explicar.
Resultados:
CUESTIONARIO
1. Esquematice la integración funcional de las sensaciones tactiles.
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FUNCIONES REFLEJAS
INTRODUCCION:
Se conocen como reflejos a aquellas respuestas del organismo a cambios energéticos del
medio externo o interno que ocurren en forma rápida e involuntaria; por ejemplo, la flexión
de una articulación ante un estímulo nocivo. Muchas funciones de la vida vegetativa se
regulan también por vía refleja como la presión sanguínea, el llenado y vaciado de los
pulmones, la secreción y motilidad gastrointestinal, etc.
La base anatomofuncional de los reflejos es el arco reflejo, el que consta de: receptores que
captan la información, vía aferente por donde se envía la información al sistema nervioso
central, centro integrador constituido por conjunto de neuronas centrales que elaboran esta
información y vía aferente que lleva la orden de respuesta al efector, órgano encargado de
ejecutar.
MATERIAL:
Reactivos:
Sacarosa 15% y 30% Alcohol
ClH 0,3%, 1%, 0,5%, 0,25% Cl Na 0,9%
Novocaina
Equipo:
Estimulador eléctrico
Martillo de reflejos
Material Biológico:
Lepidópteros
Cucarachas adultas (Periplaneta americana)
Bufo spinulosus
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Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
METODOLOGIA:
33
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
Resultados:
Reflejo pupilar:
- Acercar al sujeto de experimentación a una fuente de luz natural o
artificial.
- Tapar uno de sus ojos con la palma de la mano y orientarlo que mire hacia
la luz. Observar lo que sucede con el diámetro pupilar del ojo descubierto.
- Destapar el otro ojo. Comparar.
- Pedir al sujeto de experimentación que cierre un ojo.
- Colocar sobre el otro ojo sus manos unidas por las puntas de los dedos
ligeramente flexionadas, de forma que no impida en su totalidad el paso
de la luz. Observar la pupila.
Resultados:
Reflejos de enderezamiento:
- Colocar al animal en posición de cúbito lateral sobre la mesa.
- Observar cómo se produce el enderezamiento.
- Vendarle los ojos con un paño o gasa. Repetir la experiencia. Observar.
- Colocado en la misma posición tratar de inmovilizarlo manteniendo la
cabeza sobre la mesa. Observar.
Resultados:
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Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
ACTIVIDAD REFLEJA
1. INTRODUCCION
Las funciones esenciales del sistema nervioso es la de captar, transmitir y elaborar
información procedente del interior de nuestro cuerpo, así como del medio que nos envuelve,
haciendo posible, en cada momento, la correcta adecuación entre las necesidades de nuestras
células y del organismo en su conjunto y los parámetros bioquímicos, físicos y
fisicoquímicos del medio ambiente. El sistema nervioso hace posible, además, la integración
y coordinación de los diversos órganos y sistemas corporales, permitiendo la interrelación
personal y con los demás seres y objetos que nos rodean, así como el desarrollo y ejercicio
de las facultades y funciones superiores del individuo.
Para regular e integrar toda la compleja serie de funciones corporales, el sistema
nervioso depende de su capacidad para detectar los cambios o variaciones que se producen
en el medio ambiente y responder a éstos, transmitiendo información sobre ellos a los centros
de coordinación desde donde se dan las órdenes oportunas para conseguir los efectos
adecuados.
La mayor parte de la información captada, transmitida y elaborada por el sistema
nervioso nos pasa totalmente desapercibida; este tipo de actividad, totalmente inconsciente
o involuntaria, recibe el nombre de actividad refleja. Entendemos por reflejo o acto reflejo
cualquier acto involuntario producido como respuesta a la acción de un estímulo (variación
en las condiciones del medio intra o extracorporal).
Los reflejos intervienen en multitud de funciones corporales y constituyen la base
sobre la que descansa nuestra actividad cotidiana; la regulación de la presión sanguínea, el
tamaño de la pupila, la secreción de enzimas digestivas, el mantenimiento de la postura, la
coordinación de los movimientos, etc, son actividades de carácter reflejo.
Cualquier reflejo implica la existencia de tres tipos de componentes:
1. Una neurona sensorial que conduce la información desde un sistema receptor hasta la
médula o el encéfalo.
2. Una serie más o menos extensa de interneuronas que conecta los elementos sensoriales con
otras células nerviosas.
3. Una neurona motora a través de la cual se conducen los impulsos, originados en el cerebro
o en la médula espinal, hasta el músculo o la glándula cuya actividad controla. La actividad
refleja comprende niveles de complejidad variable dentro del sistema nervioso central, desde
los simples reflejos de localización espinal hasta los complejos reflejos del equilibrio que
exigen la participación de centros superiores. La complejidad y precisión de una respuesta
refleja guardan relación con el número y variedad de estructuras que integran un arco reflejo.
La existencia de un reflejo normal indica la integridad de todos los elementos y vías que
lo constituyen – receptor, neurona sensorial, conexiones a nivel del sistema nervioso central,
fibras eferentes, músculos o efector, etc. Por este motivo, la exploración de los reflejos
reviste gran importancia diagnóstica para la correcta evaluación de las distintas funciones
del sistema nervioso. La ausencia, disminución, exageración o alteración cualitativa de un
reflejo pueden orientar acerca de posibles perturbaciones del sistema nervioso.
37
La exploración de la actividad refleja en el hombre presenta varios problemas y limitaciones.
Muchos tipos de actividad refleja, controlados por centros situados a nivel de la médula espinal,
pueden ser modificados considerablemente por la actividad de centros superiores. Por ello,
cuando se exploran los reflejos de integración espinal, el sujeto debe estar relajado, mental y
físicamente, con la atención alejada de la exploración que se le practica.
Por otra parte, es difícil explorar o evaluar el estado funcional de un solo acto reflejo;
nuestro organismo recibe simultáneamente información procedente de diversos sistemas
sensoriales. Por este motivo, es necesario examinar cada función con el máximo grado de
segregación de las demás para evitar que el sujeto, voluntaria o involuntariamente, muestre
un tipo de respuesta que no corresponde exactamente a la función explorada.
Finalmente, el paciente o persona objeto de examen debe recibir órdenes concretas y
claras, fáciles de comprender, con objeto de conseguir su máxima cooperación y obtener
respuesta coherente y precisas.
2. MATERIAL
Rana
Disolución de ácido acético al 0,5 %
Disolución de ácido acético al 0,3 %
Disolución de ácido acético al 30 %
Disolución de ácido clorhídrico al 1 %
Tabla de corcho
Tijeras
Pinzas o fórceps
Placa petri
Vasos de precipitados
Linterna
Martillo de reflejos
3. OBSERVACION
Comportamiento de una rana normal.-
Colocar una rana normal sobre la mesa del laboratorio o en el interior de aun frasco
de boca ancha. Observar su postura normal; Anotar la posición de la cabeza y de los ojos, así
como la de las patas anteriores y posteriores.
Situar un obstáculo insalvable delante del animal, al mismo tiempo que se le empuja
desde atrás. ¿Que tipo de trayectoria sigue en sus saltos?.
Colocar la rana sobre su dorso y comprobar el tipo de movimientos que realiza y la
rapidez con que se vuelve a su posición normal. El enderezamiento del animal se produce en
respuesta a estímulos de presión sobre el dorso y a la anómala posición de los ojos y del oído
interno (sistema de la postura y el equilibrio). Introducir a la rana en el interior de una pileta
llena de agua: observar su actividad natatoria.
Examinar, el tipo de movimientos respiratorios que realiza la rana. En este animal, el
aire necesario para la respiración interna penetra, en pequeña proporción, a través de la piel
y el suelo de la boca por medio de simple difusión, pero la mayor parte penetra en el interior
del organismo a través de los pulmones. La rana, desprovista de costillas y de diafragma,
inhala a través de la nariz manteniendo la boca cerrada y realizando un movimiento de
descenso de la base de la boca; en un segundo movimiento, el aire inhalado es engullido por
37
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los pulmones. Observar la frecuencia con que se mueven los pulmones y el suelo de la boca.
¿Es la misma?
Resultados:
2. Estimulación térmica.- Aplicar una aguja calentada por medio de un mechero de alcohol
sobre una de las patas; La pata se encoge también. Dejar la preparación en reposo durante
2 minutos.
Resultados:
3. Estimulación química.- Sumergir, un instante, las puntas de los dedos de una pata en una
disolución de ácido acético al 1 %. En respuesta al estímulo, la pata se retrae y permanece
encogida durante un tiempo.
Bañar repetidamente la parte de la piel que ha estado en contacto con la disolución con
agua del grifo o agua destilada con objeto de eliminar el ácido de la superficie cutánea.
Anote sus resultados:
Sumergir la pata derecha del animal hasta el tobillo en una disolución de ácido acético al 1
%. Determinar el tiempo, en segundos, que tarda la rana en retirar la pata estimulada. ¿Cómo
se comporta la pata contralateral? Enjuague la parte estimulada con agua.
Repetir el experimento con una disolución de ácido acético al 3 %¿Cómo reacciona
la preparación? ¿Qué efecto posee la variación de la intensidad del estímulo ¿Se descarga
mayor número de impulsos en respuesta a un estímulo más intenso Las disoluciones de ácido
acético empleadas en este experimento son muy débiles, parecidas a vinagre diluido?
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(Comprobar la débil acidez de la disolución colocando una gota sobre la lengua. ¿Qué
respuesta refleja se produce a nivel de las glándulas salivales?) Anote sus Resultados:
41
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
Reflejos Superficiales.-
Este tipo de reflejos de carácter polisináptico, bastante más complejos que los de
estiramiento, y pueden ser provocados por estimulación de receptores situados a nivel de la
piel o de estructuras superficiales.
Reflejo Plantar.-
Por medio de un objeto de punta roma rascar la planta del pie a nivel del borde externo.
En respuesta a la estimulación se produce la flexión de los dedos del pie. Cuando, por el
contrario, el dedo gordo se dirige hacia arriba y los demás dedos se extienden o separan entre
sí (signo de Babinski), hay que pensar en una lesión de la vía piramidal si se trata de un
adulto. Sin embargo, este signo es normal durante el primer año de vida, cuando todavía no
se ha completado la mielinización de las fibras del sistema piramidal. Resultados:
Reflejo Abdominal.-
Rascar las partes laterales de la pared abdominal. La contracción refleja de los
músculos abdominales determina la desviación del ombligo hacia el lado etimulado.
Resultados:
Reflejo Corneal.-
Con una pequeña torunda de algodón o con un trocito de papel, tocar suavemente la
superficie corneal o de la esclerótica. Los párpados se cerrarán inmediatamente. Si el
estímulo es muy intenso, se producirá lagrimeo.
Para realizar esta prueba pedir al compañero que mire a un objeto distante, mientras se estimula
mecánicamente la cornea.
Resultados:
43
Reflejos Orgánicos.-
Son también reflejos de carácter polisinático, más complejos que los superficiales y que
comportan la participación de un mayor número de estructuras, implicando un mayor grado
de coordinación.
Situar al sujeto a la luz de la ventana o de una lámpara de incandescencia (bombilla). Observar
el iris y el diámetro de la pupila.
Solicitar al compañero que se cubra o tape ambos ojos con las manos durante 2 minutos.
Transcurrido este tiempo, pedir al sujeto, que aún sigue con los ojos cerrados, que mire a un
objeto distante, mientras se le ordena destapar uno de los ojos. Observar la reacción de la
pupila. Acto seguido retirar la mano que cubre el ojo contrario y observar la reacción pupilar.
Esto constituye el reflejo pupilar directo.
A continuación, llevar al sujeto hacia una zona con menor intensidad de luz y pedirle de nuevo
que se tape los ojos (2 minutos). Transcurrido este tiempo, debe destapar y abrir
simultáneamente ambos párpados para de inmediato enfocar con una lámpara uno de los ojos,
mientras observamos la reacción de la pupila contraria. Es el llamado reflejo pupilar consensual.
Constituye un proceso coordinado que precisa la existencia de fibras que pasan de un ojo al
contralateral, a través del quiasma óptico. Resultados:
4. CUESTIONARIO
Cuales son las funciones esenciales del sistema nervioso
La mayor parte de las actividades del sistema nervioso son de tipo consciente o
inconsciente.
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Indicar que regiones del sistema nervioso deben estar intactas para permitir el adecuado
funcionamiento de los diversos mecanismos reflejos.
Indicar las distintas estructuras cuya lesión puede determinar la ausencia o disminución
de un reflejo propioceptivo
Indicar que estructuras deben estar intactas para que se produzca el reflejo corneal
SISTEMA DIGESTIVO
1. INTRODUCCION
La función del sistema gastrointestinal es la de transformar las grandes partículas y
macromoléculas de los alimentos en moléculas lo suficientemente pequeñas para que puedan
ser absorbidas e incorporadas a la sangre y, finalmente, utilizadas por las células de nuestro
organismo; los polisacáridos deben ser desdoblados en monosacáridos, las proteínas, en
aminoácidos y los triglicéridos, en ácidos grasos y monoglicéridos.
Los diversos procesos de adaptación y preparación de los alimentos para su absorción por el
intestino se llevan a cabo gracias a la acción combinada de las secreciones y de los
movimientos del tubo digestivo.
Las secreciones digestivas están constituidas por una serie de compuestos elaborados
por células especializadas que forman parte de glándulas ubicadas a lo largo de toda la pared
del tubo digestivo o bien integradas en órganos especiales, como el páncreas y el hígado. De
estos compuestos, los fundamentales para la acción digestiva son proteínas de carácter
enzimático, cuyo grado de actividad guarda relación con la proporción de sustrato (alimento)
disponible, con la temperatura y con la concentración de los iones hidrógeno del medio en
que actúan.
Los polisacáridos de la dieta, como el almidón o el glucógeno, son hidrolizados por
la acción de las amilasas y transformados en di y trisacáridos. La celulosa, polisacárido
presente también en la dieta habitual, no puede ser hidrolizado por las secreciones digestivas,
al carecer nuestro sistema de enzimas capaces de atacar los enlaces glucosídicos. Los di y
trisacáridos, procedentes da la hidrólisis del almidón o del glucógeno, así como los ingeridos
como tales en la dieta (sacarosa, lactasa, etc.), deben ser hidrolizados hasta monosacáridos
para su correspondiente absorción. Los azúcares ingeridos como monosacáridos no requieren
transformación alguna y son absorbidos directamente como tales.
La digestión de los polisacáridos empieza en la cavidad bucal. La amilasa segregada
por las glándulas salivales (la parótida, fundamentalmente) se mezcla con el alimento y
comienza la transformación del almidón y del glucógeno en maltosa e isomaltosa. La acción
hidrolítica de la amilasa salival continúa en el interior de la cavidad gástrica hasta que, al
mezclarse con el ácido clorhídrico, segregado por las células parietales del estómago, se anula
la actividad de la enzima.
Las proteínas de la alimentación son ingeridas principalmente formando parte de los
elementos celulares que integran los tejidos animales y vegetales, más o menos
desnaturalizados, siendo mínima la proporción de proteína ingerida en forma libre
(constituyen una excepción la clara de huevo, la caseína de la leche y una pocas proteínas
más). Las macromoléculas de proteínas son digeridas por enzimas segregadas por el
estómago (pepsina) y el páncreas (tripsina, quimiotripsina, etc.). Gracias a la acción de las
mencionadas <<proteinasas>>, las macromoléculas son transformadas en pequeños péptidos,
que, bajo la acción de diferentes <<peptidasas>> presentes en el borde en cepillo de las
células intestinales, son finalmente convertidos en aminoácidos libres.
Los lípidos constituyen un grupo heterogéneo de compuestos que poseen en común
su insolubilidad en el agua y su solubilidad en los solventes de carácter orgánico. La mayor
parte de los lípidos de la dieta son suministrado en forma de triglicéridos. La digestión de los
triglicéridos tiene lugar en el intestino delgado. No existen enzimas para la hidrólisis de los
lípidos ni en la saliva ni en el jugo gástrico; sin embargo, tanto la masticación e insalivación
como la digestión gástrica favorecen la digestión de los lípidos al desdoblar los polisacáridos
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y proteínas que los engloban o limitan en el interior de las células. La grasa, así liberada, no
es soluble en el agua y constituye una emulsión tosca y poco estable. Para que los triglicéridos
presentes en dicha emulsión puedan ser hidrolizados adecuadamente, es necesario el
concurso de las sales biliares. La lipasa pancreática convierte los triglicéridos en ácidos
grasos y monoglicéridos que son, más tarde, absorbidos por el intestino delgado.
Algunos de los constituyentes de las secreciones digestivas, como el ácido
clorhídrico, el bicarbonato, la bilis o el mucus, no poseen carácter enzimático, pero son
absolutamente necesarios para una correcta digestión. El ácido clorhídrico y el bicarbonato
contribuyen a crear el medio adecuado para la acción de las enzimas digestivas, las sales
biliares son necesarias para la formación de micelas con los ácidos grasos, el mucus es
esencial como elemento protector y lubricante de la mucosa, etc.
2. MATERIAL
• Tubos de ensayo
• Rotulador, lápiz graso o etiquetas autoadhesivas
• Gradilla para tubos de ensayo
• Pipetas de 2, 5 y 10 ml de capacidad
• Pipetas Pasteur
• Botella pequeña para recoger la saliva filtrada
• Embudo pequeño
• Gasa o algodón hidrófilo para filtrar
• Tres probetas graduadas de 25 ml de capacidad
• Baño de agua y hielo Baño de agua a 37°C
• Mechero de alcohol
• Placa de porcelana
• Cristales de cloruro de sodio
• Pequeño fragmento de tubo de goma
• Agua destilada
• Disolución de almidón hervido al 1 %
• Disolución de glucosa al 1%
• Disolución de ClH al 0,8 %
• Disolución de CO3HNa al 0,5 %
• Disolución de ácido acético al 5 %
• Disolución de bilis al 10 %
• Disolución de lipasa al 0,5 %
• Acido butírico
• Tributirina
• Butirato de etilo
• Disolución de Lugol
• Disolución de Benedict
• Papel indicador de pH
• Disolución indicadora de azul de bromotimol al 0,5 %
47
3. PROCEDIMIENTO
SECRECION SALIVAL.
47
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Digestión Intestinal
A nivel del intestino delgado son digeridos los tres tipos de principios inmediatos,
dado que el medio intestinal contiene enzimas capaces de hidrolizar los oligo y
polisacáridos, los lípidos y las proteínas.
La lipasa es una enzima que desdobla los triglicéridos en glicerol y ácidos grasos. La
bilis no poseen propiedades enzimáticas, pero contiene, en cambio las sales biliares
que son esenciales para la correcta digestión de las grasas. Las sales biliares, debido
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4. CUESTIONARIO
- Definir la función esencial del sistema digestivo.
51
- Cuales son los componentes más importantes de la saliva.
- A qué obedece el precipitado que se forma cuando se añade ácido acético a la saliva.
- A qué es debido el color azul que adquiere el almidón en presencia del yodo.
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Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
- A qué obedecen las diferencias observadas entre el tubo que contiene ácido
clorhídrico y el que contiene bicarbonato.
- Y sobre la tributirina.
- Y sobre la tributirina.
1.INTRODUCCION:
Todos los animales a excepción de los endoparásitos, utilizan como fuente principal la
energía que obtienen de la descomposición de moléculas orgánicas complejas que incorporan
del exterior.
En los animales más evolucionados el sistema digestivo realiza tres funciones básicas:
motilidad, secreción y absorción.
Estas tres funciones básicas no se manifiestan en todos los grupos zoológicos de igual forma.
En los animales menos evolucionados la motilidad se limita al movimiento de cilios que
ayudan a la progresión del alimento como ocurre en los pelecípodos. En moluscos más
evolucionados (gasterópodos y cefalópodos), al igual que en artrópodos y vertebrados, la
motilidad se debe a contracciones del músculo más o menos diferenciados. A medida que se
avanza en la evolución, la motilidad se hace un fenómeno cada vez más generalizado del tubo
digestivo.
En cuanto al proceso de degradación de los alimentos, muchos invertebrados lo realizan en
el interior de las células (digestión intracelular). En este caso las sustancias alimenticias son
incorporadas por fagocitosis o pinocitosis, y la degradación ocurre en el interior de las
vacuolas digestivas, desde las cuales se incorporan al citoplasma, sin que se secreten hacia el
exterior enzimas digestivas; esto ocurre en protozoos, poríferos, celenterados e incluso en
algunos invertebrados que poseen tubo digestivo diferenciado como pelecípodos y
gasterópodos.
Muchos animales desde los moluscos hasta los vertebrados realizan digestión extracelular.
En este caso, la degradación química ocurre en la luz del tubo digestivo por la acción de
enzimas que las células de las paredes de este tubo son capaces de secretar. La aparición de
la digestión extracelular está asociada a procesos de absorción, por los cuales las sustancias
digeridas atraviesan las membranas de las paredes del tubo digestivo y mediante la sangre
son distribuidas a los tejidos corporales. El proceso de absorción ocurre, en los animales
menos diferenciados, en las partes superiores del tracto, mientras que en los más
evolucionados va quedando relegado a las partes más posteriores.
2.0. MATERIAL:
Reactivos:
• Ringer
• Solución de acetilcolina a la 10-6 gr/L
• Solución de adrenalina 2 x 10-4 mol/L
• Solución de noradrenalina 2 x 10-4 mol/L
Equipo:
* Microscopio estereoscópico
Material Biológico:
* Rattus rattus
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3.0. METODOLOGIA:
Secreciones salivales:
- Anestesiar la rata con un anestésico general.
- Fijar el espécimen en la tabla de disección.
- Realizar un corte en la región media ventral de la mandíbula, retirando la piel y
los músculos milo hioideos y genio hioideos - Canular los conductos de Stenon
y Warton.
- Evaluar la secreción estimulando alternativamente con adrenalina,
acetilcolina y noradrenalina, en todos los casos por un tiempo de 5 minutos Anote
sus resultados:
Secreción biliar
- Anestesiar la rata con un anestésico general.
- Fijar el espécimen en la tabla de disección.
- Realizar un corte en la región media abdominal, retirando la piel y los músculos,
hasta visualizar el hígado.
- Canular el conducto cístico.
- Evaluar la secreción estimulando alternativamente con adrenalina,
acetilcolina y noradrenalina, en todos los casos por un tiempo de 5 minutos Anote
sus resultados:
55
Secreción pancreática
- Anestesiar la rata con un anestésico general.
- Fijar el espécimen en la tabla de disección.
- Realizar un corte en la región media abdominal, retirando la piel y los músculos,
exponiendo el páncreas.
- Canular los conductos de Wirson
- Evaluar la secreción estimulando alternativamente con adrenalina,
acetilcolina y noradrenalina, en todos los casos por un tiempo de 5 minutos
Anote sus resultados:
Secreción gástrica
- Anestesiar la rata con un anestésico general.
- Fijar el espécimen en la tabla de disección.
- Realizar un corte en la región media abdominal, retirando la piel y los músculos
hasta exponer el estómago.
- Canular a nivel del esfínter pilórico.
- Evaluar la secreción estimulando alternativamente con adrenalina,
acetilcolina y noradrenalina, en todos los casos por un tiempo de 5 minutos
Anote sus resultados:
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Secreción intestinal
- Anestesiar la rata con un anestésico general.
- Fijar el espécimen en la tabla de disección.
- Realizar un corte en la región media abdominal retirando la piel y los músculos
hasta exponer los intestinos.
- Canular el segmento intestinal.
- Evaluar la secreción estimulando alternativamente con adrenalina,
acetilcolina y noradrenalina, en todos los casos por un tiempo de 5 minutos Anote
sus resultados:
57
VENTILACION PULMONAR
1. INTRODUCCION
La energía necesaria para la actividad celular se obtiene en última instancia a través
de la oxidación de los alimentos, desempeñando el oxígeno un papel esencial en este proceso.
Como resultado de la degradación oxidativa de las sustancias nutritivas se libera una serie de
productos residuales, entre los que destacan, fundamentalmente, el bióxido de carbono y el
agua. Cuando el consumo de O2 por parte de los tejidos aumenta, y se incrementa
paralelamente la producción de CO2 debe aumentar también la intensidad del intercambio
gaseoso pulmonar.
El aumento de actividad respiratoria en relación con la intensidad del metabolismo
corporal exige un sistema de regulación sensible y preciso para poder ajustar, en cada
instante, el contenido de la sangre a la demanda tisular. Nuestro organismo cuenta con
sistemas de detección y medida de los niveles de O2 y H en sangre que, manteniendo
constantemente informados a los centros respiratorios, determinan una adaptación de la
ventilación pulmonar a las necesidades energéticas de cada momento. Otros factores de tipo
químico, como las catecolaminas, así como influencia de tipo nervioso contribuye también a
modular la frecuencia e intensidad de la ventilación pulmonar.
Entre los factores reguladores de tipo químico, el CO2 es el dotado de mayor poder
estimulante de la respiración: un incremento de tan solo un 0,2 % en la concentración de CO2
del aire alveolar produce un aumento del 100 % en la ventilación pulmonar. La estimulación
por el bióxido de carbono de los quimiorreceptores situados a nivel de la aorta y de las
carótidas y a nivel del bulbo raquídeo determina la realización de movimientos respiratorios
profundos encaminados a eliminar el exceso de CO2, con ello se reduce la tasa de bióxido de
carbono en sangre y la respiración vuelve a su ritmo basal.
Por otro lado, cualquier variación en la concentración de CO2 determina un cambio
en la concentración de hidrogeniones y, por tanto, en el valor del pH de la sangre a través de
la siguiente reacción:
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2. MATERIAL
• Sistema para respiración en circuito cerrado.
• Disolución saturada de hidróxido cálcico.
• Acido clorhídrico concentrado.
• Centrífuga.
• Tubos para centrífuga
• Pipetas Pasteur
• Perillas de goma
• Espirómetro
• Espirogramas
3. PROCEDIMIENTO
Efecto del CO2 y del O2 sobre la Respiración.
Uno de los componentes de la mesa actúa como sujeto de experimentación respirando
a través de la boquilla correspondiente al extremo proximal del dispositivo, al mismo
tiempo que se mantiene abierto, el extremo distal del circuito aéreo experimental
desconectado el tapón del frasco de vidrio la boquilla se sujeta con los dientes
manteniendo la boca cerrada al mismo tiempo se impide el paso de aire a través de
las coanas nasales por medio del pinzamiento de la abertura nasal con los dedos
pulgar e índice o con unas pinzas de goma, durante la inspiración el aire penetra a
través de una de las válvulas mientras que el efecto de succión mantiene cerrado la
otra válvula, al espirar, el aire sale a través de la válvula que a permanecido cerrada,
durante la fase inspiratoria puesto que es la única capaz de abrirse hacia fuera en
respuesta al aumento de presión, esta prueba se realiza entre fases o condiciones
distintas
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ESPIROMETRIA
El espirómetro es un aparato que permite medir volúmenes respiratorios así como
determinar el consumo de oxígeno. El sujeto respira a través de la cavidad bucal en un
sistema cerrado constituido esencialmente por un cilindro o campana, llena de aire o de
oxígeno, que se desliza de manera telescópica en el interior de otro cilindro lleno de agua.
Dentro del dispositivo así constituido se coloca un recipiente con hidróxido bárico u otro
tipo de sustancia capaz de absorber el CO2. Un sistema de válvulas obliga al aire espirado a
pasar a través del absorbente, al paso que permite la captación de oxígeno por parte del sujeto
cuando éste realiza una inspiración. Con cada movimiento respiratorio, la campana o cilindro
que contiene la mezcla gaseosa oscila en sentido vertical. A medida que el sujeto va
respirando, se reduce el volumen de oxígeno y el nivel del cilindro móvil desciende
rápidamente, debido a que el bióxido de carbono del aire espirado es eliminado
inmediatamente por combinación con el absorbente.
Un sistema de inscripción permite el registro, sobre un quimógrafo o una cinta móvil,
de los movimientos respiratorios realizados. En general, la resistencia del aparato es mínima
y, en condiciones ideales, no afecta el flujo aéreo ni los volúmenes medidos. En la
determinación de volúmenes respiratorios o cuando se realizan pruebas de corta duración es
preferible emplear aire en lugar de oxígeno, puesto que el oxígeno puro deprime la
ventilación pulmonar. En los pasos en que se determina el consumo de oxígeno se realizan
pruebas de cierta duración, el espirómetro se llena de oxígeno.
El sujeto que se somete a la exploración espirométrica debe sujetar bien, la boquilla
del espirómetro con los dientes, por medio de una pinza colocada en la nariz se impide la
respiración por vía nasal; de esta manera, el flujo aéreo tiene lugar solo por la boca y a través
del circuito cerrado del espirómetro.
Realizar un registro en condiciones basales y, seguidamente registre el volumen de
reserva inspiratorio y el volumen de reserva expiratorio. Sobre los registros realizados o
sobre otros pre elaborados, determinar los siguientes parámetros:
• Frecuencia respiratoria
• Volumen corriente
• Capacidad vital
61
• Volumen minuto
61
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RESPIRACION ARTIFICIAL.
Cuando, en determinadas circunstancias, se produce un paro respiratorio es
absolutamente necesario instaurar una serie de medidas encaminadas a garantizar el
adecuado intercambio gaseoso pulmonar: La asfixia completa de duración superior a 5
minutos determina la producción de lesiones cerebrales irreversibles (excepto en el caso del
recién nacido), por lo que en casos de apneas debe restaurarse de forma inmediata la
ventilación pulmonar. Simultáneamente y con idéntica rapidez, debe corregirse cualquier
fallo que aparezca, de manera paralela, en el sistema cardiovascular ya sea debido a un paro
cardiaco o a grave hipotensión; es evidente que, si la sangre no llega a los tejidos, de nada
sirve intentar su buena oxigenación a nivel del lecho capilar pulmonar.
Entre las circunstancias en las que se requiere la práctica de la respiración artificial
destacan el caso de los ahogados, el, de los individuos que han sufrido una descarga eléctrica
(paro cardiaco y respiratorio), el de los pacientes que han ingerido una sobre dosis de
narcóticos (bloqueo o anestesia de los centros respiratorios) y el de aquellas que han inhalado
gases tóxicos o no respirables.
Si bien hoy en día se dispone de aparatos, denominados respiradores, que permiten
asistir, e incluso sustituir, la mecánica respiratoria del paciente, el biólogo o médico debe
estar capacitado para, en situaciones de emergencia, poder practicar la respiración artificial
por medios manuales.
Entre las diversas variantes de respiración artificial el método de elección es el
denominado de boca a boca, que se describe a continuación. En la respiración boca a boca,
como en cualquiera de las otras variantes de respiración artificial, debe asegurarse el libre
paso del aire a través de las vías aéreas, eliminando cualquier tipo de obstrucción que pueda
presentarse. La obstrucción de las vías aéreas es habitual en el paciente apneico,
inconsciente, debido a la relajación de las partes blandas de la faringe y la caída de la base
de la lengua hacia atrás. Este tipo de bloqueo se corrige colocando el cuello del paciente en
hiperextensión y deprimiendo al propio tiempo la mandíbula inferior, con lo que la base de
la lengua se mantiene separada de la pared faríngea posterior. Por otra parte, por medio de
los dedos conviene limpiar la cavidad bucal de las secreciones mucosas, o de las masas
arrastradas por los movimientos del vómito, que pudieran encontrarse en ella.
Para practicar la respiración artificial, es necesario, en primer lugar, cerrar o bloquear
las aberturas nasales por medio de pinzamiento con los dedos pulgar e índice de una mano.
A continuación, abrir los más ampliamente posible la boca y colocarla sobre la del paciente
63
de manera que los labios ajusten herméticamente sobre la piel para evitar que el aire escape
a través de la zona de contacto. Como alternativa, puede reducirse a cerrar la boca del
paciente con la mano practicando la respiración a través de la nariz. Si no se desea entrar en
contacto físico con el paciente puede practicarse la respiración a través de un paño, o gasa,
colocando sobre la boca o, en su caso, la nariz.
Insuflar el aire en el aparato respiratorio del paciente y observar si la caja torácica se
expande de manera satisfactoria. En el caso de que la pared torácica no se distienda en
respuesta a la inyección de aire, hay que pensar en la presencia de algún obstáculo al paso
del aire que debe ser corregido inmediatamente. Comprobar si la cabeza y mandíbula inferior
está en posición correcta y repetir la maniobra; si aun así continúa sin observarse el paso del
aire, colocar rápidamente al paciente de lado y golpear repetidamente su espalda entre ambos
omóplatos con objeto de conseguir la liberación de alguna sustancia extraña atrapada a nivel
de las vías respiratorias altas. Asimismo comprobar que no existe secreciones o masas
alimenticias a nivel de la cavidad bucal. Si la distensión torácica es adecuada, se retira la
boca y se gira la cabeza a un lado para inspirar al mismo tiempo que se intenta percibir si
sale aire a través de la boca del paciente, indicativo de una espiración pasiva por parte de
éste.
Este tipo de insuflación intermitente se continúa a un ritmo de 12 – 15 respiraciones
por minuto en el adulto hasta que el paciente empiece a respirar por sí mismo. La cantidad
de aire inyectado en el aparato respiratorio de la víctima en cada ciclo debe ser
aproximadamente el doble de la correspondiente al volumen corriente, Si se trata de un niño,
se realizan movimientos respiratorios menos profundos (apropiados al tamaño del individuo)
y de frecuencia ligeramente superior (alrededor de 20 por minuto).
En el caso de que, después de unos minutos de practicar la respiración artificial, el
color de la piel del paciente no mejore es necesario revisar el estado del sistema
cardiovascular. Un pulso casi imperceptible y unas pupilas dilatadas indican una circulación
inadecuada y exigen la inmediata aplicación de masaje cardiaco externo. Para ello se
comprime la parte baja del esternón a nivel del “V” espacio intercostal ejerciendo presión
con la palma de la mano de manera que la pared torácica se deprime unos 3 – 5 cm. Esta
maniobra, repetida aproximadamente cada segundo, permite conseguir una circulación
sanguínea adecuada para la fase crítica.
4. CUESTIONARIO
Definir:
Volumen corriente o volumen de ventilación pulmonar
Volumen residual
63
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
Capacidad vital
Por qué motivo no debe administrarse oxígeno puro a un paciente con insuficiencia
respiratoria
Enumerar los principales factores de tipo nervioso que modulan la ventilación pulmonar
65
Apnea
Anoxia
Asfixia
65
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
MIOCARDIO
1. INTRODUCCION:
La circulación de la sangre cumple diversas funciones, entre las que destaca el transporte de
oxígeno, de sustancias nutritivas y de los elementos hacia los tejidos; a su vez, sirve de medio
para eliminar los residuos metabólicos celulares a través de los órganos de excreción. La
sangre, por medio de su capacidad fagocítica e inmunitaria, protege el organismo frente a
las infecciones. Finalmente, en los animales de sangre caliente, la circulación sanguínea
contribuye a regular la temperatura corporal.
El aparato circulatorio está constituido, en los vertebrados, por un sistema tubular cerrado a
lo largo del cual se desplaza continuamente la sangre. La fuerza que propulsa la sangre a
través de dicho sistema es la enérgica contracción de los ventrículos, que funcionan como
una doble bomba impelente. La elasticidad de las arterias, junto con las variaciones en su
calibre y la acción de los músculos que rodean los vasos sanguíneos constituyen también
dispositivos hidrostáticos importantes.
El corazón está constituido por dos bombas, de carácter muscular, conectadas en serie.
Dichas bombas, que se contraen rítmica y con un volumen de expulsión ajustable a las
distintas situaciones fisiológicas, corresponden a: 1) el ventrículo derecho, que propulsa la
sangre hacia los pulmones donde se produce el intercambio de gases entre aquélla y el medio
externo (circulación pulmonar o menor y 2) el ventrículo izquierdo, encargado de impulsar
la sangre que irriga todos los tejidos del organismo (circulación sistemática o mayor). Un
ajustado sistema de válvulas determina el flujo unidireccional de la sangre a través del
corazón.
La acción de bombeo por parte del corazón es intermitente, pero incesante.
El corazón se contrae -y relaja- unas 100.000 veces cada día, desplazando más de 10.000
litros de sangre a través de un circuito de casi 100.000 kilómetros, constituido por las
arterias, arteriolas, capilares, vénulas y venas de nuestro organismo.
La eficiencia del corazón como bomba depende de la correcta sucesión de fenómenos de
excitación, contracción y relajación que se producen, de manera ordenada y coordenada,
primero en las aurículas y luego en los ventrículos.
El músculo cardíaco está dotado de las propiedades del automatismo, ritmicidad,
conductibilidad (dromotropismo) y contractilidad (inotropismo).
Estas propiedades están desarrolladas en grado diverso en las distintas estructuras del
miocardio. El nódulo sinusal es, entre las estructuras de tipo marcapaso, la que ha
desarrollado al máximo la capacidad de la autorritmicidad. Las fibras, o red, de HisPurkinje
son especialmente aptas para la conducción rápida de los impulsos. Las fibras musculares -
fibras miocárdias ordinarias- poseen la máxima capacidad contráctil, con una capacidad de
conducción considerablemente inferior a las del sistema de His-Purkinje y carentes de la
propiedad del automatismo.
El estímulo que pone en marcha el corazón -marcapaso- se origina en la zona donde confluye
la vena cava superior con la aurícula derecha. En las aves y mamíferos, esta zona corresponde
a una parte del sistema de excitación, que recibe el nombre de nódulo sinusal o de Keith y
Flack. En los anfibios y reptiles, dicho marcapaso constituye una cavidad venosa pulsátil, el
seno venoso, situada inmediatamente antes de la aurícula.
67
La actividad rítmica, intermitente, del marcapaso, es debida al parecer, a una reducción
progresiva en la conductancia para los iones potasio, que presenta la membrana de sus células
constituyentes. Las células ordinarias -contando entre ellas los nervios y las fibras musculares-
son capaces de originar y de conducir impulsos en respuesta a un estímulo externo; si éste es
adecuado, tiene lugar una entrada masiva de Na+ en el interior de la célula, con lo que se invierte
la polaridad de la membrana, quedando su parte exterior cargada negativamente con respecto a
la parte interna. Una vez recuperada, la membrana celular alcanza su valor de potencial de
reposo, estable. Las células marcapaso, en cambio, muestra un vapor de potencial de reposo que
disminuye lenta, pero progresivamente, con el tiempo (potencial diastólico inestable)
experimentado, aun en ausencia de estímulos, una despolarización espontánea y generando, de
manera rítmica y automática, impulsos que, conducidos a todo el miocardio, determina la
frecuencia con que se contrae el corazón.
Pero el normal funcionamiento del corazón es necesario, entre otros factores, mantener una
concentración adecuada de iones en el medio que rodea las células. Este hecho, reconocido
ya por Ringer a finales del siglo pasado, obliga a que el líquido empleado para nutrir las
células del miocardio deba contener en la debida proporción iones Na+, Ca++, Cl-, CO3H-,
para mantener en forma correcta su normal actividad.
2. MATERIAL:
Corazón de cerdo
Bandeja de plástico
Equipo de disección
Regla de plástico, milimetrada
Rana
Tabla de corcho
Baño de agua
Placa Petri
Disolución de Ringer
Disolución de cloruro potásico al 1%
Disolución de cloruro cálcico al 1%
Disolución de cloruro sódico al 1%
PROCEDIMIENTO:
Colocar el corazón en la bandeja con la punta del órgano, el ápex, dirigida hacia el
observador; el extremo opuesto constituye la base del corazón. Sobre el eje formado por el
ápex y la base, girar el corazón hasta localizar un acumulo de grasa dispuesto en diagonal
sobre la superficie ventricular. Por debajo de dicha masa corren los vasos coronarios
encargados de la irrigación del miocardio; constituye, además, la demarcación superficial que
delimita el ventrículo derecho del izquierdo. Comprobar la consistencia de la pared a ambos
lados. Se aprecia alguna diferencia?
67
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
En la base del corazón, y sobresaliendo un poco por delante de los ventrículos se observan
unas estructuras que remedan un tanto unas aletas; son las orejuelas que forman parte de las
cámaras denominadas aurículas. A nivel de la base se encuentran también los vasos
sanguíneos que entran o salen del corazón. Introducir las pinzas de disección a través de la
vena cava superior(anterior) y de la vena cava inferior (posterior) y observar en qué cavidad
desembocan. Comprobar el calibre y la consistencia de la pared de las grandes venas que
confluyen a nivel de la aurícula derecha. Dar la vuelta a la pieza y examinar la parte posterior
del corazón. Localizar las venas pulmonares; introducir una pinza a través de ellas y
determinar en qué cámara desembocan.
Colocar de nuevo el corazón en la posición inicial. Localizar la arteria pulmonar y determinar
de qué cavidad sale; precisar el diámetro del vaso y anotar la consistencia de sus paredes.
Localizar la arteria aorta, determinar su lugar de origen y precisar el calibre del vaso, anotar
la consistencia de sus paredes, comparándola con la de las paredes de la arteria pulmonar.
Comenzando a nivel de la vena cava superior, practicar una incisión a lo largo del borde
derecho de la aurícula y del ventrículo derechos. Eliminar los coágulos que puedan
encontrarse en el interior de las cavidades. Observar los siguientes detalles:
1. Ausencia de válvulas a nivel de la desembocadura de las venas.
2. Grosor de la pared auricular.
3. El tabique interauricular.
4. Disposición y orientación de las valvas que constituyen la válvula tricúspide.
5. Las estructuras tendinosas unidas a las valvas y conectasdas, por otra parte, a los
músculos papilares. Cuántos músculos papilares hay?
A continuación, practicar una incisión a nivel del borde izquierdo de una vena pulmonar que
se prolonga lo largo de la aurícula y del borde externo del ventrículo izquierdo hasta llegar
a la punta del corazón; alcanzando dicho punto, proseguir la incisión en sentido ascendente
y en dirección a la aorta.
De esta manera se obtiene un corte en forma de U que permite examinar con comodidad la
disposición interna del corazón izquierdo. Examinar las siguientes estructuas:
1. Ausencia de válvulas a nivel de las venas pulmonares.
2. Grosor de la pared auricular.
3. Disposición y orientación de las valvas que constituyen la válvula mitral.
4. Grosor de la pared ventricular; compararla con la del lado derecho.
5. Disposición y orientación de las válvulas semilunares a nivel de la salida de la aorta.
6. Apreciar la relación entre las válvulas semilunares aórticas y el velo septal de la
válvula mitral.
Comprobar también la consistencia que presenta la pared de la aorta y compararla con la de
la arteria pulmonar. Esquematice sus observaciones:
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Efecto de la temperatura
69
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
Como ocurre con cualquier tipo celular, la actividad metabólica del corazón depende de la
temperatura. Los cambios en el automatismo son, entre todas las propiedades funcionales,
los que reflejan de una manera más evidente los efectos de variaciones en la temperatura
sobre la actividad del corazón.
Empleando un cuentagotas añadir líquido de Ringer mantenido a 0 C a la preparación:
comprobar la frecuencia cardíaca y anotar el valor obtenido en la tabla adjunta. Dejar que la
temperatura del corazón se equilibre con la del ambiente y determinar de nuevo la frecuencia
cardíaca. A continuación, depositar sobre el preparado disolución de Ringer mantenida a 27
C; observar la frecuencia cardíaca y anotar los resultados:
CUESTIONARIO
1. Porqué el latido del marcapaso debe ser más rápido que el de otras partes del corazón
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Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
PRESION ARTERIAL
INTRODUCCION.
La presión arterial puede ser definida como la fuerza ejercida por la sangre sobre la pared de
las arterias. La presión arterial varía continuamente a lo largo del ciclo cardiaco, el máximo
valor de presión arterial se alcanza durante el periodo de expulsión sistótica y el mínimo, al
final del periodo de diástole; al primero se le da el nombre de presión sistólica o máxima y
al segundo el de presión diastólica o mínima. Una lectura típica de presión arterial se expresa,
por ejemplo, de la siguiente manera: 120/80 mmHg. La diferencia numérica de los valores
de la presión sistólica y de la presión diastólica constituye la presión del pulso o presión
diferencial. La presión arterial media aritmética de los valores de las presiones sistólica y
diastólica. La presión arterial media funcional es mucho más difícil de determinar
correctamente debido a la distinta duración de los períodos de sístole y de diástole. La
presión arterial media funcional , que determina el grado de irrigación o perfusión periférica,
puede estimarse con una aproximación aceptable por medio de la fórmula:
P media funcional=Ps+2Pd/3
OBJETIVOS:
1. Esta practica tiene por objetivo primordial iniciarse en los procedimientos de medida
de la presión arterial, comprobando las limitaciones y ventajas de cada uno de los
métodos empleados y verificando los distintos factores que deben ser tenidos en cuenta
para realizar una correcta medición.
2. En segundo lugar, pretende poner de relieve algunos de los factores que modifican los
valores obtenidos en condiciones basales y que influyen sobre los complejos sistemas
responsables de la regulación de la presión arterial.
PROCEDIMIENTO:
La presión arterial se mide habitualmente a nivel de la arteria humeral, estando el sujeto de
cubito espino. La mesa de exploración debe disponerse de tal manera que el registro pueda
realizar sobre uno de los brazos. El brazo debe estar en abducción, ligeramente flexionado
y descansado sobre una superficie regular. El punto donde se aplica el manguito del
esfingomanómetro debe estar situado al mismo nivel que el corazón; en cambio, no es
necesario que el aparato de registro esté situado al mismo nivel que la bomba cardiaca. El
manguito, completamente desinflado, se coloca alrededor del brazo de manera que la parte
que contiene la bolsa hinchable de caucho ocupe la cara anterointerna del brazo. El mangito
debe ajustarse al brazo de manera uniforme, aunque sin apretar, y con su borde inferior a
unos 3-5 cm de espacio antecubital.
75
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
ELECTROCARDIOGRAMA
INTRODUCCION:
El corazón está dotado de la propiedad del automatismo, es decir, es capaz de originar por
sí mismo el estímulo necesario para su propia contracción. La propagación de la onda de
excitación a través de las distintas estructuras cardíacas va acompañada de variaciones en
el potencial eléctrico de sus células constituyentes. Los cambios de potencial eléctrico
producidos en la membrana celular pueden ser detectados a nivel de la superficie corporal
por medio de un galvanómetro adecuado. De esta manera, se observa una serie de
deflexiones o variaciones eléctricas que reflejan la resultante de los cambios de potencial
experimentados, en el transcurso del tiempo, por las distintas células a lo largo de los
sucesivos puntos de excitación. El registro de dichas variaciones de potencial constituye el
electrocardiograma (ECG).
OBJETIVOS
El registro de la actividad eléctrica del corazón constituye un proceso relativamente sencillo;
sin embargo, la interpretación correcta de los registros obtenidos requiere un grado de
conocimientos considerable acerca de la fisiología y fisiopatología del sistema
cardiovascular. Esta práctica pretende servir de introducción a las técnicas empleadas para
conseguir el registro electrocardiográfico y de inicio en la interpretación de los patrones
obtenidos a nivel de las derivaciones empleadas habitualmente en la clínica humana.
MATERIAL
Polígrafo equipado con osciloscopio
Electrodos de extremidades
Electrodo para derivaciones precordiales
Gel conductor
Trazado electrocardiográficos obtenidos sobre papel.
PROCEDIMIENTO:
Examinar el aparato de registro y observar los diferentes controles de que está provisto. Si
bien la apariencia cambia de un tipo de aparato a otro, todos los electrocardiógrafos poseen
los siguientes elementos comunes:
1. Un selector de derivaciones que permite, a voluntad, observar o registrar las derivaciones
habituales. En el aparato que hay que utilizar, el selector puede pasar por las posiciones 1(DI),
2(DII), 3(DIII), aVF, aVL, aVR y V (aparte de otras de las cuales prescindimos en esta
práctica).
2. Un sistema de compensación (balance) por medio del cual se pueden atenuar potenciales
no deseados.
3. Un sistema de referencia (standardize) que permite introducir pulsos de 1 mV en el sistema
electrónico del aparato.
4. Un sistema de amplificación (gain) por medio del cual la deflexión originada por un
potencial de 1 mV se ajusta de tal manera que alcance 1 cm de altura.
En los electrocardiógrafos clínicos, las deflexiones producidas se registran directamente
sobre papel milimetrado que se desplaza a una velocidad prefijada, constante. El aparato
empleado en ésta práctica permite, además, observar las deflexiones sobre una pantalla
77
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
La mayoría de los electrocardiógrafos están constituídos de tal manera que los voltajes
obtenidos por medio de derivaciones monopolares experimentan una amplificación
adicional de 3/2; en este caso, los registros electrocardiográficos correspondientes van
precedidos del prefijo a (de ampliado), es decir, aVR, aVL y al'F.
En las derivaciones monopolares, las conexiones en el interior del aparato están hechas de
tal manera que, cuando el electrodo explorador detecta una positividad relativa, se produce
una deflexión positiva (desviación hacia arriba) en el electrocardiograma.
V1 Electrodo colocado inmediatamente por fuera del reborde esternal derecho, a nivel del IV
espacio intercostal.
V2 Electrodo situado inmediatamente por fuera del reborde esternal izquierdo, a nivel del IV
espacio intercostal.
V3 Electrodo situado sobre un punto equidistante entre la posición de V2 y V4.
V4 Electrodo situado en el punto de intersección de la línea media clavicular del lado
izquierdo con el V espacio intercostal. Coincide con la zona habitual del latido de la punta.
V5 Electrodo situado en el punto de intersección de la línea axilar anterior del lado izquierdo
con la horizontal que pasa por el punto V4.
V6 Electrodo situado en el punto de intersección de la línea media axilar izquierda con la
horizontal que pasa por el punto V4.
OBSERVACION:
Ajustar el aparato hasta conseguir que en la pantalla aparezca un trazado
electrocardiográfico aceptable. Con el selector colocado en la posición 2 (DII) observar el
tipo de deflexiones asociadas a cada ciclo cardíaco.
Cerciorarse de que el trazado es correcto, sin artefactos; las oscilaciones debidas a la
contracción de los músculos esqueléticos y a la presencia de interferencias eléctricas suelen
ser los elementos perturbadores más habituales.
Observar el tipo de ondas o deflexiones que aparecen en cada una de las derivaciones de
extremidades; nombrar cada uno de los componentes y señalarlos en la figura 27. Analizar
79
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
Efecto de la postura
Observar el trazado electrocardiográfico cuando el sujeto permanece en reposo y en decúbito
supino, y determinar la frecuencia cardíaca. Repetir la determinación cuando el sujeto se
pone de pie y permanece en dicha posición por espacio de unos minutos. En qué sentido se
modifica la frecuencia cardíaca al pasar de la horizontal a la posición erecta?
Registro electrocardiográfico
Adherir los trazados electrocardiográficos sobre los recuadros correpondientes a cada una
de las derivaciones señaladas en ésta página.
INTRODUCCION
La sangre puede ser considerada como un tejido líquido en el cual los componentes celulares
se hallan suspendidos en un medio líquido. La concentración y distribución de las células
presentes en la sangre periférica cambia en relación con una gran variedad de situaciones
fisiológicas y de procesos patológicos. Por este motivo, el conocimiento de la naturaleza e
intensidad de la respuesta hematológica a un determinado proceso es de gran importancia
para el diagnóstico de la enfermedad así como para el control de su evolución. Debido a su
fluidez, la sangre puede ser extendida sobre un portaobjetos en forma de una película muy
delgada, de tal manera que constituya una capa monocelular. El examen de la extensión de
sangre constituye un aspecto importante del estudio del paciente en cualquier tipo de
enfermedad.
81
OBJETIVOS
Esta practica tiene por objeto la preparación y estudio de extensiones de sangre humana y de
algunos animales
MATERIALES
- Etanol 96 % - Algodón estéril - Gasas estériles
- Paño limpio o kleenex - Lancetas desechables, estériles
- Láminas portaobjetos - Mecheros de alcohol
- Frascos cuentagotas - Disolución de Wright
- Vasos de precipitados - Aceite de inmersión
- Microscopio - Agua tamponada(pH 6.7)
PROCEDIMIENTO
Preparación de los portaobjetos.-
Enjuagar y limpiar los portaobjetos con un paño limpio, eliminar los restos de humedad y
de grasa flameando los portaobjetos por ambos lados con la llama de un mechero. Sujetar
siempre los portaobjetos por los bordes laterales para evitar la contaminación de la
superficie.
Extensión de la sangre.-
La extensión de las células hemáticas puede hacerse a partir de una gota de sangre obtenida
al puncionar con una lanceta estéril el pulpejo del dedo medio. Con objeto de aumentar el
flujo sanguíneo, conviene practicar un suave masaje sobre las partes blandas. Es necesario
que la piel del dedo esté seca y caliente, de lo contrario no se obtiene sangre suficiente y en
condiciones adecuadas. Si la piel está mojada, la sangre no forma gotas regulares y se
desliza a lo largo del dedo en pequeños regueros.
Limpiar el pulpejo de dedo con un algodón mojado en alcohol y secarlo con un trozo de
algodón estéril. Sujetar el pulpejo de dedo con firmeza y con la lanceta estéril practicar una
incisión en sentido perpendicular al de las líneas dérmicas. Con una gasa estéril eliminar la
primera gota de sangre, dado que puede contener líquido tisular, o bien otros contaminantes,
y no proporciona una imagen correcta del cuadro hemático. Practicar un suave masaje sobre
el pulpejo del dedo y apretar ligeramente las partes blandas hasta que empiece a fluir la
primera gota de líquido.
Con cuidado, dejar caer una gota de sangre (de unos 3 – 5 mm de diámetro) sobre uno de los
extremos de un portaobjetos limpio, el cual se mantiene apoyado sobre una superficie
resistente. Sujetar el otro portaobjetos, provisto de un borde liso, entre el pulgar y el dedo
medio y apoyarlo sobre el primero a nivel del extremo opuesto al que contiene la gota de
sangre, de tal manera que constituyan entre ambos un ángulo de unos 30°. Desplazar ahora
el portaobjetos en dirección a la gota de sangre, tan pronto como el borde inferior contacte
con la gota de sangre y ésta, por acción capilar, se extienda a todo lo ancho del ángulo de
contacto, mover rápidamente el portaobjetos en dirección contraria. Notar que la sangre se
desplaza por detrás del borde del portaobjetos extensor.
Para conseguir una extensión regular es necesario desplazar el portaobjetos extensor de
manera uniforme y rápida. Si la extensión es demasiado gruesa, hay que reducir el ángulo
de contacto entre el portaobjetos extensor y el de soporte y/o desplazar el primero con mayor
rapidez. Si, por el contrario, la extensión resulta demasiado delgada, desplazar el
portaobjetos extensor con menor rapidez y/o aumentar el ángulo de contacto. Es
81
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
recomendable realizar como mínimo dos extensiones y trabajar con la obtenida en mejores
condiciones.
Tinción de las Células.-
La extensión, una vez secada al aire, se tiñe por medio de la disolución de Wright compuesta
por una mezcla de un colorante básico, azul de metileno, y un colorante ácido, eosina.
Colocar el portaobjetos que contiene la extensión de sangre sobre la boca de un vaso de
precipitados pequeño y cubrir la totalidad de su superficie con la disolución del colorante.
Transcurridos 4 minutos, añadir igual volumen de agua tamponada y mezclar ambos líquidos
soplando sobre la superficie. Al cabo de unos 3 minutos, inclinar el portaobjetos y lavar la
extensión con agua destilada hasta que aquélla adquiera color rosado. Retirar el portaobjetos
del vaso y secar la parte inferior con papel filtro. Dejar la extensión, así teñida, y seque al
aire; a continuación proceder al examen microscópico.
OBSERVACION
Se realizará con el objetivo de inmersión (X100), el cual se introducirá en el interior de una
gota de aceite de cedro previamente depositada sobre el portaobjetos. Los objetivos de
inmersión se distinguen por la presencia de un anillo de color situado sobre su mitad inferior.
Eritrocitos.-
Los eritrocitos o células rojas son los elementos más abundantes en la sangre y aparecen
como discos bicóncavos, ligeramente rosados; no poseen núcleo ni gránulos
citoplasmáticos. Poseen un diámetro medio de 7 ½ micrómetros.
Leucocitos.-
Las células blancas, leucocitos, teñidas con el colorante de Wright presentan diferentes
aspectos característicos.
Los granulocitos neutrófilos presentan gránulos finos, pequeños, de color rosado distribuidos
sobre un fondo citoplasmático de color lila. El núcleo, de color azul púrpura oscuro, puede
presentar de dos a cinco lóbulos, así mismo conectados por delgados hilos.
Son los leucocitos más abundantes.
Los granulocitos eosinófilos se caracterizan por presentar gruesos gránulos citoplasmáticos
de color rojo naranja. El núcleo, de color azul púrpura pálido, puede presentar dos o tres
lóbulos conectados entre sí por delgados filamentos.
Los granulocitos basófilos contienen gránulos de color púrpura oscuro que cubren
parcialmente el núcleo. El núcleo, color azul púrpura pálido, posee dos o tres lóbulos,
también conectados entres sí por delgados hilos.
Son los leucocitos menos abundantes.
Los linfocitos poseen un citoplasma azul celeste, sin gránulos. El núcleo redondo o
ligeramente indentado, es de color púrpura azul y ocupa casi por completo todo el espacio
celular.
Los monocitos poseen un citoplasma gris azulado, sin gránulos. El núcleo, de color violeta
azulado pálido, puede ser redondo, doblado o en forma de herradura. Los monocitos son las
células de mayor tamaño presentes en la sangre.
Plaquetas.-
Aparecen como agrupaciones de forma irregular y con el aspecto de gránulos de color púrpura
rojizo, intenso.
Fórmula Leucocitaria.-
83
Con los objetivos de bajo y mediano aumento y con el de inmersión, examinar la extensión
e identificar los distintos tipos celulares. Desplazando lentamente el portaobjetos, contar
hasta 100 glóbulos blancos o leucocitos, clasificando y anotando en un cuadro los distintos
tipos observados.
La preparación se desplaza progresivamente por delante del objetivo, de manera que cada
célula sea tabulada solamente una vez. Para el recuento celular se comienza en el ángulo
superior izquierdo de la extensión y se mueve la preparación dos campos del microscopio
hacia la derecha. A continuación, se desplaza un campo microscópico hacia abajo y se
cuenta las células en este y en los dos campos consecutivos situados a la izquierda y así
sucesivamente, siguiendo una trayectoria en zigzag.
Las zonas ideales para realizar el recuento son aquellas en que los hematíes aparecen
relativamente individualizados sin formar acumulo o pilas.
La fórmula leucocitaria indica el porcentaje de distribución de cada tipo leucocitario en la
sangre periférica. Las variaciones observadas en la distribución de los leucocitos así como
en el número total de células por milímetro cúbico reflejan desviaciones del estado
fisiológico y puede ayudar a establecer el diagnóstico adecuado.
Ejercicio de Diagnóstico.-
En cada mesa de trabajo realizar una extensión de sangre procedente de un presunto paciente;
determinar la fórmula leucocitaria correspondiente.
Anotar las respectivas cifras en una tabla y comparar los datos obtenidos con los resultados de
sus compañeros y con las cifras consideradas habitualmente como normales.
En una sección correspondiente a comentarios indicar si el cuadro hematológico que presenta
el paciente está dentro de los límites de normalidad o no.
Sangre de otros Vertebrados.-
De manera análoga a la descrita para los elementos formes de la sangre humana examinar
algunas extensiones de sangre perteneciente a otros vertebrados, en los peces, anfibios,
reptiles y aves, los hematíes de forma elíptica, poseen núcleo, en los mamíferos incluidos
los primates el núcleo se pierde antes de que los eritrocitos pasen a la circulación; en general
las células blancas de todos los vertebrados presentan características semejantes con estos
datos determinar si la sangre determinada pertenece a un mamífero CUESTIONARIO
1. Cual es la proporción aproximada entre células blancas y rojas.
2. Que partes de la célula se tiñen con el colorante ácido y cuales con el colorante básico.
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Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
7. En la muestra problema cual son los tipos leucocitarios presentes en mayor proporción.
HEMATOCRITO
1. INTRODUCCION
La sangre es un líquido complejo, constituido por diversos elementos, con un peso específico
medio de 1,055 g/ml.
Una muestra de sangre, que se mantiene incoagulable por medio de la adición de heparina
o de un secuestrante de los iones calcio, se separa por efecto de la gravedad en diversas
capas de acuerdo con el peso específico de sus distintos constituyentes. Los eritrocitos, con
un peso específico de 1,090, ocupan la parte inferior del tubo; por encima de ellos se sitúan
los leucocitos, con un peso específico de 1,050 y por encima de éstos, las plaquetas o
trombocitos; por último, la parte superior del tubo está ocupada por el plasma cuya densidad
o peso específico oscila entre 1,026 y 1,030.
La sangre sometida a la simple acción de la gravedad se separa, en cierto grado, en sus
distintos constituyentes por sedimentación. Sin embargo las fuerzas que se oponen a la
sedimentación de los elementos formes, principalmente la viscosidad del plasma y las
corrientes de convección, son relativamente importantes, por lo que, en estas condiciones,
la separación no acaba de ser completa. Cuando, por el contrario, la sangre se somete a la
acción de un campo gravitatorio intenso, por medio de centrifugación, las fuerzas que se
oponen a la sedimentación quedan, proporcionalmente, reducidas a valores ínfimos y los
distintos constituyentes se separan rápidamente de acuerdo con su peso específico. La
nitidez con que se segregan los distintos constituyentes de la sangre depende de tres factores
principales: el tiempo de centrifugación, la intensidad del campo gravitatorio o fuerza
85
centrífuga aplicados y el volumen ocupado por los hematíes. Si bien la interacción entre
estos factores es compleja, se pueden definir unas condiciones mínimas necesarias para
conseguir la correcta separación de los hematíes. El tiempo de centrifugación necesario para
conseguir la sedimentación completa de los eritrocitos cuando el volumen ocupado por éstos
es inferior a 75% del total, varía en relación inversa con la magnitud del campo gravitatorio
aplicado en la forma que se describe a continuación:
(El campo gravitatorio que actúa sobre la parte distal de un tubo sometido a centrifugación
se calcula multiplicando el número de revoluciones al cual gira la centrífuga por el radio de
rotación medido a nivel de la punta del tubo, de acuerdo con la siguiente expresión:
En la cual “Cg” representa la magnitud del campo gravitatorio, “n”, las revoluciones por
minuto y “r”, el radio de rotación del tubo medido en centímetros).
Aún después de una prolongada e intensa centrifugación permanece, todavía una cierta
proporción de plasma atrapado en los espacios que quedan entre los eritrocitos. Ello es
debido a que la curvatura o esfericidad de los hematíes impide su total empaquetamiento y,
por tanto, da lugar a la existencia de un cierto volumen intercelular cuya magnitud depende
de la proporción de células así como de su tamaño, geometría y grado de deformabilidad.
Se estima que la proporción de plasma atrapado en los intersticios celulares puede
representar hasta un 2% del volumen de una determinada muestra de sangre. A pesar de
ello, debido a las dificultades que entraña su valoración exacta, este hecho se ignora en las
determinaciones habituales en clínica.
El valor del hematocrito puede ser definido como el porcentaje en volumen ocupado por los
eritrocitos en una determinada muestra de sangre. El valor del hematocrito varía con
relación al número y tamaño de los hematíes así como con el volumen de plasma, oscilando,
en condiciones normales, entre el 47 + 7 % en los varones adultos sanos y el 42 + 5 % en las
mujeres adultas sanas.
Un valor hematocrito elevado refleja un aumento en el número total de hematíes circulantes
o bien una reducción en el volumen plasmático. Los elevados valores de hematocrito que se
observan en casos de cólera, por ejemplo (con un valor hematocrito del 65% o más), son
debidos a las considerables pérdidas de líquido por las heces, con la consiguiente reducción
del volumen plasmático. Por otra parte, un valor hematocrito bajo refleja habitualmente una
reducción en el número de eritrocitos circulantes o bien un incremento en la proporción de
volumen plasmático.
El valor hematocrito constituye un índice indirecto de la capacidad de transporte de oxígeno
por parte de la sangre y es uno de los parámetros más importantes y precisos que pueden
utilizarse para detectar una anemia o una policitemia. El valor hematocrito es más exacto y
menos laborioso de determinar que el recuento de hematíes y, debido a lo sencillo de la
técnica, puede ser realizado en cualquier consultorio médico.
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2. MATERIAL
Material Biológico:
Sangre entera de: Homo sapiens, vacuno, ovino, porcino, equino, camélidos sudamericano,
pez, anfibio, reptil, ave Otros:
Algodón hidrófilo estéril
Etanol 96
Lancetas desechables, estériles
Pasta de modelar (plastilina)
Tiritas
Tubo capilar para hematocrito, heparinizado
Centrífuga para hematocrito
Tubo de hemólisis
Disoluciones de ClNa de la siguiente osmolaridad:
200 mosM.
300 mosM.
900 mosM.
2. PROCEDIMIENTO
En la actualidad pueden utilizarse dos procedimientos para la determinación del valor
hematocrito: el procedimiento de Wintrobe o macrométodo, en el cual se emplea un tubo
graduado de unos 2 ml de capacidad, o bien el procedimiento del microhematocrito, más
usado en la actualidad, para el cual se requieren tan sólo 50 ul de sangre y un pequeño tubo
capilar de vidrio. En el primer caso se recurre al uso de una centrífuga convencional para
sedimentar los eritrocitos, mientras que en el segundo se requiere una centrífuga especial, en
la cual los tubos capilares se disponen sobre una platina horizontal y orientados en sentido
radial a partir de su eje.
Microhematócrito
En este procedimiento se recurre al uso de tubos capilares, de unos 7.5 cm de longitud por
1 mm de diámetro interior, recubiertos interiormente de una capa de heparina para evitar la
coagulación de la sangre.
(Si no se dispone de tubos heparinizados, puede procederse a su preparación en la forma
que se describe a continuación: A partir de un tubo capilar [empleado para determinar el
punto de fusión] de un diámetro interior de 1 mm se rompen pequeños fragmentos de unos
7 cm de longitud. Por acción capilar se llenan dichos fragmentos con una disolución de
heparina en agua destilada, a una concentración de 0,1 mg/ml. Los tubos que contienen la
disolución de heparina se colocan en una estufa a 56 C o bien en una incubadora a 37 C,
hasta que desaparezcan los últimos restos de agua, y se guardan en frascos tapados
herméticamente hasta el momento de su utilización.)
Por medio de algodón impregnado con alcohol o con un detergente limpiar la piel del lóbulo
de la oreja o pulpejo del dedo medio y eliminar el exceso de líquido; dejar que la piel se
seque adecuadamente con objeto de evitar que el líquido desinfectante diluya o hemolice la
muestra de sangre. Por medio de una lanceta estéril practicar una pequeña incisión sobre la
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zona; la incisión debe ser lo suficientemente profunda para asegurar un flujo suave, pero
copioso de sangre; cuando la sangre empiece a fluir de nuevo, colocar uno de los extremos
del tubo capilar sobre la gota de sangre, con ángulo de unos 45, dejando que ésta ascienda,
por capilaridad, hasta llenar los dos tercios, aproximadamente, del tubo (al fin debe quedar
1 cm libre en cada uno de los extremos del tubo). Retirar éste y cerrar uno de sus extremos
por medio de pasta de modelar o bien fundiendo el vidrio por medio de una fina llama.
Limpiar de sangre la zona en que se ha practicado la incisión y desinfectar la pequeña herida
con alcohol o con alguno de los antisépticos habituales. Situar el tubo capilar sobre la platina
de la centrífuga para microhematocrito con el borde cerrado orientado hacia su parte
periférica. Anotar el número de la hendidura donde se coloca el tubo con el objeto de poder
identificar la correspondiente muestra de sangre. Como los tubos pesan muy poco en
relación con el peso de la platina, no es necesario proceder a su equilibrado o balanceo,
pudiendo centrifugar hasta 24 tubos simultáneamente. Después de cerrar la platina y colocar
la tapa protectora sobre ésta, poner la centrífuga en marcha; debido a la gran velocidad de
rotación, la fuerza centrífuga generada es unas 12.000 veces superior a la de la gravedad,
con lo cual la separación de la sangre en elementos formes y plasma se consigue en unos 5
minutos.
Los tubos para microhematocrito pueden ser centrifugados también en una centrífuga
convencional para tubos de ensayo. En este caso sin embargo, es necesario colocar los tubos
capilares en el interior de un tubo de ensayo para evitar que la pared del capilar se rompa;
por otra parte es preciso prolongar el tiempo de centrifugación hasta 30 minutos, como
mínimo, para conseguir una separación aceptable.
Dado que los tubos para microhematocrito no están graduados, es preciso determinar la
longitud ocupada por la columna de hematíes y la longitud ocupada por el volumen total de
sangre con objeto de calcular los porcentajes correspondientes. Para mayor comodidad
puede utilizarse un sencillo dispositivo (basado en el principio de los triángulos semejantes)
que puede obtenerse comercialmente o bien construirlo uno mismo sobre papel milimetrado.
El lado o borde derecho del triángulo está graduado en cien divisiones. Un cierto número de
estas subdivisiones están unidas por medio de sendas rectas superior de la columna de
plasma enrase exactamente con el lado superior del triángulo. El valor hematocrito se lee
directamente determinando el punto de intersección sobre el borde calibrado de la línea que
pasa por la zona que separa los hematíes del resto de la sangre.
En esta práctica se utiliza un lector especial que permite leer directamente en un dial
graduado el valor hematocrito de la muestra de sangre.
Colocar el tubo capilar en la hendidura central del aparato, de manera que la parte
correspondiente a los eritocitos quede a la derecha del lector y la línea de división entre
eritrocitos y el resto de la muestra de sangre coincida con la raya vertical negra situada en el
centro del brazo metálico. Limitado así el tubo, girar el disco del lector de tal manera que
los lados del ángulo del disco pasen por las líneas que limitan los extremos distales de la
columna de eritrocitos y de la columna de plasma del tubo capilar.
En estas condiciones, el valor hematocrito se lee directamente en el dial situado en la parte
delantera del aparato.
Resultados:
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1. 200 mosM.
2. 300 mosM.
3. 900 mosM.
A continuación añadir 1 ml de sangre mantenida incoagulada, a cada uno de los tubos así
preparados; dejar los tubos en reposo durante unos 10 minutos. Agitar los tubos
invirtiéndolos suavemente. Por capilaridad, transferir una muestra de sangre de cada uno de
los tubos a sendos capilares para microhematocrito. Cerrar uno de los extremos de los tubos
capilares y centrifugar durante 5 minutos. Determinar el valor hematocrito observado en
cada caso y relacionarlo con la concentración osmótica del medio con el cual se ha puesto
en contacto la muestra inicial de sangre.
1. INTRODUCCION:
En una muestra de sangre, mantenida incoagulable, los elementos formes sometidos a
la simple acción de la gravedad sedimentan poco a poco hacia el fondo en relación con
la densidad o peso específico de cada tipo celular. La velocidad con la densidad o peso
específico de cada tipo celular. La velocidad con que sedimentan los eritrocitos está
determinada por las características peculiares de cada muestra de sangre y constituye
un parámetro de gran utilidad clínica, conocido con el nombre de velocidad de
sedimentación globular.
La velocidad con que sedimentan los elementos formes de la sangre, como la de
cualquier partícula que cae en el seno de un fluido determinado, depende de varios
factores que pueden ser correlacionados por medio de la fórmula de Stockes. Una
partícula determinada cae o desciende en el seno de un líquido con una velocidad
creciente, debido a la aceleración de la gravedad, hasta alcanzar un valor límite, en el
cual el efecto de su peso es equilibrado exactamente por la resistencia que opone el
medio a su desplazamiento. En estas condiciones, la velocidad de caída es igual a V =
M G n r donde M es la masa de la partícula: G, la fuerza gravitatoria normal: n, la
viscosidad del medio y r, el radio de la partícula.
dado que la masa de la partícula es proporcionalmente a su volumen, podemos escribir:
V=
siendo “d” la densidad y “d”, la densidad del medio de dispersión:
Podemos comprobar fácilmente que, para un sistema determinado, la velocidad de caída es
proporcional al cuadrado del radio de la partícula, aceptando que ésta sea esférica.
De acuerdo con los parámetros señalados en la última ecuación, la velocidad de
sedimentación de los elementos formes de la sangre guarda relación con:
1.El radio de la esfera o partícula
2.La densidad de la partícula o elemento forme.
3.La densidad del medio en el cual aquellas se desplaza, es decir, el plasma.
4.La viscosidad del medio (el plasma).
En la mayoría de los casos, los tres últimos parámetros pueden ser considerados como
constantes o muy similares entre las distintas muestras de sangre, por lo que las diferencias
en la velocidad de sedimentación estarán en relación, fundamentalmente, con variaciones en
el valor del primero de ellos.
Los eritrocitos constituyen conglomerados de tamaño variable, cuyas dimensiones
determinan la velocidad con que sedimentan los glóbulos rojos en su conjunto (conviene
diferenciar estos conglomerados de las agrupaciones que tienen lugar durante el proceso de
la aglutinación en el cual las células se hallan unidas entre sí de manera irreversible y no
puede ya separarse una de otra). En una muestra de sangre normal, los hematíes se disponen
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2. MATERIAL:
Etanol 96
Algodón hidrófilo estéril
Sistema para punción venosa Vacutainer, con agujas estériles y desechables
Tubos Vacutainer con citrato sódico, para determinar la velocidad de sedimentación
globular.
Tubos de Westergren
Soporte para tubos de Westergren
Disolución isotónica de cloruro sódico (suero salino fisiológico)
Disolución de fibrinógeno en suero salino Cronómetro
3. PROCEDIMIENTO:
Existen diversos procedimientos para determinar la velocidad de sedimentación. De
todos ellos, el más habitual es el de Westergren, que es el empleado en esta práctica.
En el procedimiento de Westergren se utiliza citrato sódico como anticoagulante y
tubos largos y delgados como cámaras de sedimentación. Los tubos de Westergren
pueden ser considerados como pipetas de 300 mm de longitud y 2.5 mm de diámetro
91
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interior, graduadas en milímetros desde cero a 200 mm; en conjunto, tienen una
capacidad de alrededor de 1 ml.
Para determinar la velocidad de sedimentación debe procederse de la manera
siguiente:
Con las debidas precauciones de asepsia y siguiendo el procedimiento descrito en la
práctica de coagulación, extraer unos 5 ml de sangre de una de las venas
93
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Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
COAGULACION SANGUINEA
1. INTRODUCCION
La coagulación de la sangre es el resultado de la compleja interacción, una serie de
reacciones enzimáticas que se suceden de manera coordinada siguiendo una determinada
secuencia. En última instancia, la coagulación sanguínea representa la constitución, a partir
del fibrinógeno, de una trama o red de fibrina que, englobando los distintos constituyentes
de la sangre, amplía, estabiliza y consolida sobre la pared vascular el tapón plaquetario
formado durante la segunda etapa de la hemostasia, El proceso de la coagulación constituye
un sistema de amplificación biológica, en el cual un pequeño número de moléculas del
compuesto iniciador del proceso induce la activación en cascada de toda una serie de
factores o pro-enzimas, culminando con la producción explosiva de trombina, responsable
directo de la transformación del fibrinógeno en fibrina.
De manera esquemática, en el proceso de la coagulación sanguínea podemos distinguir las
siguientes etapas:
1. Liberación de tromboplastina tisular o formación de su equivalente a partir de los propios
componentes de la sangre. En ambos casos se constituye un factor que, con el concurso de
otros elementos, provoca la transformación de una sustancia inactiva, presente en el plasma,
en "protrombinasa" activa, enzima proteolítica que hidroliza selectivamente determinados
enlaces específicos de la molécula de protrombina.
En esta primera fase se hallan involucrados gran número de factores presentes en el plasma.
La formación del producto final de esta etapa, la protrombinasa, o activador de la
protrombina, puede conseguirse a través de la activación de dos vías o sistemas: el sistema
intrínseco o el sistema extrínseco. El sistema intrínseco o endógeno recibe este nombre
debido a que todos los factores necesarios para su activación se encuentran en la sangre
circulante, mientras que el sistema extrínseco o exógeno, que representa un cortocircuito o
vía rápida, requiere para su activación el concurso de un complejo lipoproteico liberado a
partir de los tejidos lesionados (tromboplastina tisular). Ambos sistemas son
complementarios y necesarios para la hemostasia fisiológica.
2. Formación de la trombina a partir de la protrombina. La intensidad con que la
protrombina, presente siempre en la sangre, es transformada la trombina depende
fundamentalmente de la cantidad del correspondiente activador ("protrombinasa") formado
en la etapa precedente. Para esta reacción, así como para algunas de la etapa precedente, es
imprescindible la presencia de iones calcio.
3. Conversión de fibrinógeno en fibrina. En esta etapa, la trombina hidroliza de manera
selectiva cuatro enlaces peptídicos correspondientes a sendos polipéptidos del fibrinógeno
y determina la conversión de esta molécula en un monómero soluble de fibrina. Esta relación
es inhibida por la heparina.
4. Condensación o polimerización de la fibrina. Las moléculas o monómeros de fibrina se
unen unas con otras a través de sendos enlaces peptídicos y constituyen un retículo o malla
de fibrina insoluble que aprisiona en su interior el plasma y los elementos formes de la
sangre. Esta etapa es asimismo inhibida por la heparina.
5. Retracción del coagulo. Los haces o filamentos de fibrinas se doblan o retraen
adhiriendose unos a otros, reduciendo el volumen del coágulo y exprimiendo un líquido
97
claro que constituye el suero. Esta reacción empieza pocos minutos después de la formación
del coágulo y se completa al cabo de unas horas.
En la figura 12 se representa un esquema general del proceso de la coagulación diferenciando
los dos sistemas de activación, intrínseco y extrínseco. En esta figura se indican los distintos
factores de la coagulación con la respectiva designación, a base de números romanos,
recomendada por el Comité Internacional sobre Factores de la Coagulación, establecido en
1954. La numeración de los distintos factores no guarda relación alguna con su posición en
la secuencia de reacciones del proceso de la coagulación y obedece simplemente al orden
con que fueron descubiertos.
2. MATERIAL
• Etanol 96
• Algodón hidrófilo estéril
• Tiritas
• Sistema para punción venosa (Vacutainer) con agujas estériles y desechables
• Centrífuga
• Disolución de heparina al 1%
• Disolución de cloruro cálcico 0.025 M
• Disolución de tromboplastina-calcio
• Mezclar a partes iguales, tromboplastina tisular y cloruro cálcico 0,025 M
• Mezcla de fosfolípidos, equivalente a los fosfolípidos liberados por los trombocitos
(cefaloplastina activada)
• Sistema amortiguador de Michaelis, a pH 7,35.
• Disolución recalcificante, constituida por:
• Cloruro cálcico 0,40 g
• Cloruro sódico 8,00 g Agua destilada c.s.p. 1,000 ml Disolución de trombina:
• 10 unidades NIH/ml en tampón de Michaelis (pH 7,35)
• Vaso con hielo y agua
• Baño de agua a 37 C
• Tubos de hemólisis
• Gradilla para tubos
• Pipetas
• Cronómetro
EXTRACCION DE LA SANGRE VENOSA:
Para todas las pruebas que hay que realizar en esta práctica se requiere un mínimo de sangre
que se extrae por medio de punción venosa, a nivel de la vena antecubital del brazo. La
sangre se extrae por medio de dos tubos que se conectan sucesivamente a la aguja de
punción. Ambos tubos contienen citrato sódico, o EDTA, como anticoagulante. Finalizada
la extracción, se mezcla cuidadosamente la sangre con el anticoagulante evitando la
formación de espuma.
Procedimientos para la punción venosa
1. Disponer sobre la mesa todos los elementos necesarios para la punción: aguja, soporte de
plástico para la aguja, tubos de extracción, algodón hidrófilo, alcohol, torniquete, tiritas, etc.
2. Localizar la vena más adecuada para la punción.
3. Colocar el torniquete alrededor del brazo, por encima del repliegue del codo.
4. Por medio de un trozo de algodón impregnado en alcohol, limpiar la piel correspondiente a
la zona de la punción.
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Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
5. Una vez evaporado el alcohol, puncionar la vena introduciendo la aguja con el bisel dirigido
hacia arriba.
6. Aflojar el torniquete.
7. Sosteniendo con firmeza el soporte de plástico, presionar el tubo contra el extremo posterior
de la aguja hasta conseguir que ésta perfore el tapón de goma; el tubo se va llenando de sangre
debido a la succión producida por el vacío que existe en la cámara o tubo de extracción.
8. Retirar el tubo cuando éste se haya llenado casi por completo de sangre e invertirlo
inmediatamente con objeto de conseguir la mezcla del anticoagulante con la sangre. Siguiendo
el procedimiento indicado, llenar un segundo tubo de sangre.
9. Retirar el torniquete
10. Retirar la aguja juntamente con el soporte de plástico
11. Colocar un trozo de algodón sobre el punto de la punción, secar la sangre que pueda
fluir y aplicar, por último, una tirita sobre la zona.
El primer tubo contiene tromboplastina tisular, arrastrada por la sangre al salir de la vena. Se
utilizará para estudiar el efecto de la temperatura sobre el tiempo de coagulación.
El segundo tubo se centrifuga inmediatamente a 3.500 revoluciones por minuto durante 20
minutos. De esta manera se constituye en la parte superior del tubo un medio líquido libre
de plaquetas, el cual es transferido por medio de una pipeta de Pasteur, a un tubo de
hemólisis (aspirar sólo las tres cuartas partes superiores del volumen plasmático). A través
de los procedimientos indicados han sido eliminados del plasma una serie de elementos
necesarios para la coagulación de la sangre:
1. La tromboplastina tisular por arrastre con los primeros milímetros de sangre extraída en el
primer tubo.
2. Los factores plaquetarios y los fosfolípidos (aportados normalmente in vivo por los
trombocitos) por centrifugación.
3. Los iones calcio por combinación con el citrato sódico, o el EDTA, (quelación). La mayoría
d pruebas empleadas en el estudio de la coagulación sanguínea intentan reproducir in vitro lo
que con toda probabilidad sucede in vivo, controlando de manera precisa las condiciones del
proceso y reduciendo a un mínimo el número de variables. Entre las pruebas de laboratorio
destacan; el tiempo de coagulación, que estudia el proceso general de la formación del coágulo
sanguíneo; la prueba o tiempo de Quick, que nos permite detectar alteraciones o deficiencias
en el sistema extrínseco, y la prueba de la cefalina, que nos permite descubrir alteraciones o
deficiencias en la serie de reacciones que integran el sistema intrínseco.
Factores que afectan el proceso general de la coagulación
Para ello se utiliza la sangre obtenida en el primer tubo de extracción, desprovisto de iones
calcio (eliminados por combinación con el citrato sódico o EDTA). Se transfiere 1 ml de
esta muestra de sangre a cada uno de los cuatro tubos de hemólisis preparados al efecto. Dos
de estos tubos se colocan en un baño de agua a 37 C, se deja un tercero a temperatura
ambiente y el cuarto se coloca en un baño con agua y hielo.
Cuando la temperatura de la sangre se ha equilibrado ya con la del medio respectivo,
adicionar 0,1 ml de Cl2Ca 0.025 M a todos los tubos, excepto a uno de los mantenidos en el
baño de agua caliente. A partir de este momento determinar el tiempo de coagulación en
cada uno de ellos inclinando los tubos a intervalos regulares. El proceso de la coagulación
se considera completo cuando los tubos pueden invertirse por completo y no se observa
pérdida o deslizamiento de líquido por las paredes.
99
Adicionar heparina al tubo mantenido en el baño de agua caliente y cuyo contenido
permanece todavía líquido. A continuación, hay que añadir 0,1 ml de Cl2Ca 0,025 M, incubar
a 37 C y determinar el tiempo de coagulación.
Tiempo de Quick:
El tiempo de Quick mide en realidad la velocidad con que se forma trombina a partir de
protrombina en presencia de los factores V, VII y X. Conocida también con la denominación
de "tasa de protrombina", esta prueba constituye un índice de la intensidad de formación de
la trombina a través del sistema extrínseco de activación.
En un tubo de cristal (tubo de hemólisis), introducido previamente en un baño de agua a
37 C, depositar 0,1 ml de plasma. Incubar durante unos 2 minutos, tiempo necesario para
alcanzar el equilibrio térmico, y a continuación adicionar 0,2 ml de la disolución de
tromboplastina-calcio. Simultáneamente, poner en marcha el cronómetro y agitar
suavemente el tubo para conseguir la mezcla de los distintos componentes. Detener el
cronómetro en el momento exacto en que se observe la aparición del coágulo de fibrina y
determinar el tiempo transcurrido desde el momento en que se adicionó la tromboplastina.
Repetir la prueba empleando un plasma control. (De hecho, la prueba debe realizarse por
duplicado tanto para el plasma control como el plasma objeto de estudio.)
El tiempo de protrombina para el plasma normal se establece habitualmente en 14 segundos,
siempre que para realizar la prueba se utilice un extracto tisular de suficiente actividad. Un
tiempo de protrombina comprendido entre 12 y 15 segundos se considera normal e indica
que el plasma estudiado posee un sistema extrínseco adecuado. Un alargamiento del tiempo
de protrombina obedece a un déficit en alguno de los factores del sistema extrínseco o
exógeno (factores VII, V, X y II) o bien a una concentración de fibrinógeno en plasma
inferior a 100 mg%. El tiempo de protrombina es también superior a lo normal en presencia
de inhibidores de la coagulación, como ocurre en el caso del tratamiento con heparina o en
el lupus eritematoso.
Prueba de la cefalina
El tiempo necesario para conseguir que un plasma recalcificado llegue a formar un coágulo
de fibrina en presencia de una cantidad adecuada de fosfolípidos constituye el denominado
tiempo o prueba de cefalina. (Esta prueba se conoce también con el nombre de tiempo de
tromboplastina parcial.) Esta prueba mide la actividad de los factores plasmáticos implicados
en el sistema intrínseco de formación de protrombinasa, reemplazando a los factores
plaquetarios por la mezcla de fosfolípidos y actuando como factor de activación inicial el
contacto con la superficie de cristal de los tubos empleados.
En un tubo de hemólisis, colocado previamente en un baño de agua a 37 C, depositar:
0,1 ml de plasma desprovisto de plaquetas
0,1 ml de tampón de Michaelis a pH 7,35
0,1 ml de la dispersión de fosfolípidos
Mezclar bien los distintos constituyentes e incubar la mezcla a 37 C durante 5 minutos. A
continuación añadir 0,1 ml de cloruro cálcico 0,025 M y al propio tiempo, poner el
cronómetro en marcha. Agitar ligeramente el tubo para asegurar la mezcla del contenido y
dejarlo en reposo durante 30 segundos. A partir de este momento observar con atención el
tubo y parar el cronómetro en el momento en que aparezca el coágulo formado.
Proceder de manera análoga con una muestra de plasma control.
El tiempo de cefalina de un plasma normal varía entre 40 y 60 segundos según el reactivo
empleado. Los plasmas cuyo tiempo de cefalina supere en menos de 8-10 segundos al del
plasma control se consideran como normales, indicando la existencia de un sistema
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Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
1. INTRODUCCION:
La función primordial de los riñones es la de mantener una adecuada y estable composición
del medio interno. El riñón lleva a cabo esta función controlando el volumen y la
composición del plasma; como resultado de esta actividad reguladora, el riñón excreta un
líquido, orina, constituído fundamentalmente por agua en la cual van disueltas una serie de
sustancias de pequeño peso molecular (productos metabólicos, sustancias extrañas,
elementos inorgánicos, compuestos en exceso, etc.). El riñón es el órgano a través del cual
son excretados la mayor parte de los compuestos no volátiles y el guardián último que
garantiza la estabilidad y conservación del medio interno.
Del punto de vista estructural y funcional, el riñón está constituído por un gran número de
pequeñas unidades que reciben el nombre de nefronas. Cada nefrona puede ser dividida en
dos partes perfectamente diferenciadas: una de carácter vascular, el glomérulo, y otra de
carácter epitelial, el túbulo renal. El túbulo renal presenta tres segmentos: un túbulo
contorneado proximal, un segmento delgado o asa de Henle y un túbulo contorneado distal,
que desemboca en un tubo colector. Cada riñón posee más de 1 millón de nefronas,
alcanzando cada una de ellas una longitud total de 4 a 5 cm, por lo que los túbulos de cada
riñón alcanzan en conjunto una extensión superior a los 50 km.
La orina resulta de la actuación de tres procesos fisiológicos: filtración, reabsorción y
secreción. A medida que atraviesa los glomérulos, se produce la filtración de la sangre a
través de la membrana glomerular debido, en parte, a la existencia de un gradiente de presión
entre las arteriolas renales y la cápsula de Bowman. El análisis del filtrado glomerular indica
que su composición es similar a la del plasma, excepto por la práctica inexistencia de
proteínas, presentes solamente en pequeñísima concentración. El filtrado, constituído por
agua, sales, glucosa, aminoácidos, sustancias de desecho, etc., recorre el túbulo renal, donde
la mayoría de las sustancias son parcial y selectivamente reabsorbidas y restituidas a la
sangre. Por otra parte, a nivel de ciertos segmentos del túbulo, las células epiteliales segregan
productos residuales o en exceso desde los capilares sanguíneos a la luz tubular. La acción
combinada de estos tres procesos da lugar a la formación de un líquido, distinto del filtrado
glomerular, constituido fundamentalmente por agua, en la cual están disueltos unos 50 g de
soluto, principalmente sales y derivados nitrogenados no proteicos. El volumen de orina
excretado oscila, en condiciones normales entre 1,100 y 1,500 ml por día.
La función renal está bajo el control de varios compuestos de carácter hormonal, entre los
cuales destacan la hormona antidiurética o vasopresina y la aldosterona.
La hormona antidiurética mantiene el volumen de líquido corporal, así como su
osmolaridad, dentro de estrechos límites compatibles con el adecuado funcionamiento del
organismo en conjunto. Cuando la osmolaridad de la sangre aumenta en un 1% se incrementa
la secreción de hormona antidiurética y el riñón reabsorbe mayor cantidad de agua, como
consecuencia la concentración osmótica del plasma tiende a normalizarse y el volumen de
orina excretada se reduce. Por otra parte, la ingesta de una gran cantidad de agua, que es
absorbida rápidamente por el intestino, da lugar a la dilución de la sangre, lo cual frena o
inhibe la secreción de hormona antidiurética; a consecuencia de ello, el riñón reabsorbe
menor cantidad de líquido, corrigiéndose la dilución del plasma, el individuo excreta un
mayor volumen de orina, de menor densidad o peso específico. Dentro de ciertos límites,
cuanto mayor sea la dilución del plasma, más profusa será la diuresis.
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2. MATERIAL:
• Para cada grupo de participantes activos:
• Agua corriente potable (una botella de 1 l)
• Agua destilada
• Cápsulas con 1,5 g de cloruro sódico
• Disolución de bicarbonato sódico al 0,4 %
• Paquete de cigarrillos
• Whisky, Vodka, Ron u otra bebida con un elevado contenido de etanol.
• Vasos para bebida
• Recipientes para la recogida de orina (vasos de
precipitado o de plástico)(numerados y agrupados en series de 7 cada una)
• Probetas graduadas de 100 ml de capacidad
• Densímetros para orina (urinómetros)
• Tiras de papel indicador de pH
• Gradilla para tubos de ensayo
• Tubos de ensayo Termómetro para líquidos
3. PROCEDIMIENTO:
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• Volumen
• Peso específico
• pH
Volumen de orina
Transferir la orina recogida en cada período a una probeta graduada y medir el volumen de
líquido excretado. Expresar los resultados en un gráfico en forma de ml de orina formada
por minuto y en relación con el volumen total de orina producida (valor acumulativo).
Peso específico
Introducir el urinómetro o densímetro en la probeta de manera que, cuando esté en reposo,
flote sobre el líquido sin tocar las paredes del recipiente. Leer directamente el valor indicado
en la escala del dispositivo (tomar como cifra correcta la correspondiente a la intersección
de la parte inferior del menisco líquido con la varilla del densímetro): La cifra obtenida debe
incluir tres decimales.
Comprobar la calibración del hidrómetro o urimómetro introduciendo el instrumento en
agua destilada, cuya densidad a 4 C es igual a 1.000; corregir por medio de adición o
sustracción, el error de calibración.
Si el volumen de orina es insuficiente para conseguir la flotación del densímetro, añadir un
volumen igual de agua destilada a la muestra de orina. Para determinar el peso específico
de la muestra original, hay que duplicar las cifras correspondientes a los decimales del peso
específico de la muestra diluida. Así, un valor de 1.020 para la muestra diluida corresponde
a un peso específico de 1.040 para la muestra original.
105
Comprobar la temperatura de la muestra de orina contenida en la probeta. Si la temperatura
de la muestra es distinta a la temperatura de calibración del instrumento, hay que proceder a
una pequeña corrección; por cada grado de diferencia entre la temperatura de calibración y
la de la muestra es necesario añadir o sustraer, en su caso, 0,001 unidades a la cifra de
densidad leída en el aparato. Expresar los resultados en el gráfico adjunto. Se entiende por
peso específico la relación entre el peso de una sustancia o disolución y el de un volumen
idéntico al agua a la misma temperatura. El peso específico guarda una relación directa, pero
no proporcional, con el número de partículas en disolución. Dado que cada tipo de sustancia
eliminada por la orina contribuye de forma distinta al peso específico de la muestra, esta
medida no refleja, con la misma exactitud con que lo hacen las determinaciones de la
osmolaridad, el número total de partículas por unidad de volumen.
No obstante, habida cuenta que constituye un procedimiento sencillo y práctico, la
determinación del peso específico de la orina resulta de gran utilidad clínica.
El peso específico de la orina está en relación con la cantidad y calidad de los alimentos
consumidos, cantidad de líquido ingerido y excretado, estado metabólico, ambientales, etc.
El peso específico oscila habitualmente entre 1,015 y 1,025 (300-900 mOsm/1), pudiendo
alcanzar en determinadas situaciones valores extremos comprendidos entre 1 001 y 1,040
(50 mOsm/1 y 1.400 mOsm/1).
105
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Aspectos organolepticos
107
La orina presenta habitualmente un color pajizo claro o ambarino (amarillo ámbar) debido,
fundamentalmente, a la presencia de urobilinógeno, uno de los productos resultantes de la
degradación metabólica del grupo hemo, constituyente prostético de la hemoglobina.
El color de la orina puede variar en diversas circunstancias. La orina casi incolora es debida,
normalmente, a la dilución de los pigmentos provocada por la excreción de una gran cantidad
de agua. En caso de diabetes insípida, en los cuales falla la reabsorción de agua por la parte
distal de los túbulos renales, el paciente puede eliminar 5, 10 ó hasta 15 l de orina,
extremadamente diluída y clara por día.
La orina de aspecto turbio o lechoso puede obedecer a la presencia de gotitas de grasa, pus,
bacterias, etc.
La orina de color rojizo sugiere la presencia de derivados del grupo hemo, como la
uroporfirina, la uroeritrina, la propia hemoglobina, etc. Dichos compuestos pueden aparecer
en la orina como consecuencia de hemorragias internas, o un shock traumático, o en casos
de porfirina congénita (estado patológico caracterizado por una orina de color vinoso).
La orina adquiere un color amarillo café o amarillo verdoso cuando contiene pigmentos
biliares, como ocurre en casos de ictericia.
La orina puede presentar otros colores, correspondiendo a situaciones patológicas,
alteraciones metabólicas o la ingesta de productos extraños.
Observar el color y la transparencia (transparente, turbia, opaca) de las muestras de orina y
anotarlos.
107
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
Cuando se ingieren disoluciones hipertónicas o, como en este caso, sal común, los
osmorreceptores son estimulados intensamente y, a través de un incremento en la sección de
hormona antidiurética, se reabsorbe mayor cantidad de agua a nivel del túbulo distal y del
tubo colector y se elimina menor volumen de orina, de peso específico superior. La vida
media de la hormona antidiurética es de alrededor de unos 10 minutos, siendo metabolizada
principalmente en el hígado y los riñones.
El etanol inhibe la secreción de hormona antidiurética, por lo que la ingestión de cerveza,
vino o bebidas alcohólicas de graduación superior, como brandy, ginebra, ron, whisky, etc.,
da lugar a un notable incremento de la diuresis. Por otra parte, diversas sustancias, entre las
que se encuentra la nicotina, favorecen la liberación de hormona antidiurética; por esta
razón, después de fumar dos o tres cigarrillos se observa una importante reducción en el
volumen de orina excretado.
A partir de los resultados obtenidos, hay que estimar el tiempo requerido para conseguir
eliminar completamente las disoluciones ingeridas por los distintos grupos de participantes
en la prueba. Al realizar esta valoración, debe tenerse en cuenta que, en condiciones
ordinarias, la velocidad de formación de la orina es de, aproximadamente, 1 ml/kg/hora.
4. CUESTIONARIO
• Cual es la unidad morfológica y funcional del riñón, definir brevemente sus distintas partes
y estructuras.
• Indicar el mecanismo por medio del cual tiene lugar fundamentalmente el intercambio de
cada una de las siguientes sustancias entre la sangre y el líquido tubular:
• Y en el balance salino.
109
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
• Cuanto tiempo se requiere para eliminar el agua ingerida, restituyendo el balance hídrico.
• Las disoluciones hipertónicas son absorbidas más lentamente que el agua corriente, por
qué.
• Que efecto posee la ingestión de sal o de una disolución salina hipertónica sobre la
osmolaridad del plasma.
• Como actúa.
111
• Analizar los cambios producidos en la excreción de orina (volumen peso específico, etc.)
después de un ejercicio intenso. Describir la participación en este proceso de:
El flujo renal
La situación hemocional
La sudoración
La osmolaridad del plasma
• Durante el ejercicio muscular, un 50 % o más del flujo renal es desviado hacia la piel (con
objeto de disipar el exceso de calor producido) y los músculos. En que sentido afectan
dichos cambios o adaptaciones circulatorias la intensidad de filtración glomerular:
• Comparar la sensación de sed en los individuos que han realizado el ejercicio con la del
resto del grupo y explicar las diferencias.
1. INTRODUCCION:
111
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
pH = pK+log HCO3-
CO2
Los centros respiratorios bulbares son muy sensibles a las contracciones de CO2 e
iones H en la sangre. Cuando el pH baja se estimulan los centros respiratorios,
aumenta la frecuencia y la profundidad de la respiración y se elimina el exceso de
CO2. Por otra parte, cuando la concentración de iones H o el CO2 disminuye, la
frecuencia y profundidad de la ventilación disminuye, con lo que aumenta la
concentración de CO2 y la de iones H.
2. MATERIAL:
2.1. Reactivos:
Solución 1 mol/L de ClH
Solución 1 mol/L de KOH
Solución de pentobarbital sódico
3. METODOLOGIA:
- Anestesiar el animal con solución de pentobarbital sódico a razón de 35
mg/kg de peso corporal.
- Fijarlo a la tabla de disección con la parte ventral hacia arriba.
- Hacer una incisión media torácica y exponer los músculos del tórax.
- Enganchar un alfiler doblado en V a los músculos de la región esternal.
Amarrar con un hilo y atarlo por el otro extremo a la palanca de registro.
113
Registrar los movimientos respiratorios que ocurren durante la respiración
tranquila, con la ayuda del quimógrafo.
- Inyectar por vía intraperitoneal 1,5 mL de solución de ClH 1 mol/L.
Registrar.
- Esperar que se restablesca la respiración normal e inyectar 1 ml de solución
de KOH 1 mol/L. Registrar.
- Repetir la operación varias veces.
113
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INTRODUCCION:
Los órganos excretores más evolucionados intervienen de manera activa en el
mantenimiento de un medio interno constante mediante la regulación de la
concentración de determinados electrolitos, la osmoloridad y el volumen de los
líquidos corporales. Además, constituyen una de las vías fundamentales a través de
las cuales se eliminan los desechos del metabolismo celular. En los órganos
excretores se producen la orina, constituída por diferentes electrolitos y desechos
nitrogenados que en muchos casos se elimina en forma de solución acuosa.
MATERIAL:
115
2.1. Reactivos: Ringer
insecto
Solución de indigo carmín 2%
Solución salina 9 g de ClNa/100 mL de agua
2.2. Equipo:
Microscopios estereoscópicos
METODOLOGIA:
3.1. Demostración de la secreción de indigo carmín en túbulos del Malpighi de
cucarachas:
- Inyectar en la cavidad abdominal de tres cucarachas intactas 1,5 ml
de solución de indigo carmín y esperar 5 min.
- Colocar una cucaracha inyectada, con el lado ventral hacia arriba, en
una placa Petri con parafina en el fondo (cortar alas y patas) y fijarla
por medio de alfileres entomológicos
- Retirar con las tijeras toda la cutícula del abdómen, localizar el tubo
digestivo y observar los túbulos de Malpighi que desembocan en el
intestino.
- Extraer con las pinzas unos cuantos túbulos y colocarlos sobre el
vidrio reloj con solución Ringer insecto.
- Observar al microscopio si hay acumulación de colorante en el
interior de los túbulos.
- Repetir la operación con la segunda cucaracha a los 10 min. de
inyectada y luego con la tercera a los 20 min. Anotar.
3.2. Osmorregulación:
- Utilizar tres grupos de alumnos:
a. Grupo control de que toma 100 mL de agua fría.
b. Grupo que toma solución hipertónica: 9 g de ClNa/100 mL de
agua.
c. Grupo que toma solución hipotónica: 1000 mL de agua fría.
Todos los alumnos deben vaciar la vejiga antes de comenzar
la experiencia.
- Colectar la orina de los tres grupos a los 20, 40, 60 y 80 min. de
comenzada la experiencia. Si se puede extender a 120 min. De cada
muestra anotar el volumen y la densidad.
- Construir curvas relacionando los valores de densidad y volumen de
la orina contra tiempo en individuos normales, que tomaron solución
hipotónica e hipertónica. Discutir los resultados.
115
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
1. INTRODUCCION:
El sistema endocrino de los insectos alcanza un alto grado de desarrollo. Posee
todos los elementos que se encuentran en los vertebrados: células neurasecretoras,
órganos neurohemales y glándulas endocrinas de origen no nervioso. Las células
neurosecretoras se encuentran fundamentalmente en el protocerebro y en el ganglio
subesofágico, aunque también aparecen dispersas en la cadena nerviosa ventral. El
órgano neurohemal más desarrollado lo constituye corpora cardiaca, a las cuales en
algunas órdenes de insectos se les contribuye, además, función glandular. Los elementos
endocrinos de origen no nervioso están representados por corpora allata y las glándulas
ecdisiales.
Los axones de las células que se encuentran en esta zona se decusan, forman
un quiasma y salen del ganglio cefálico formando dos nervios denominados corpori
cardiaci I. Los axones de las células neurosecretoras que se encuentran situadas
lateralmente a la zona de para intercerebralis, viajan sin decusarse en forma de dos
nervios denominados corpori cardiaci II. Mediante estos dos pares de nervios las
neurohormonas llegan a corpora cardiaca. El conjunto formado por corpora cardiaca
y allata se conoce como el complejo retrocerebral y presenta diferentes características
morfológicas según la especie.
Las células neurosecretoras y corpora cardiaca pueden distinguirse por su
color azul pálido. La localización de las glándulas ecdisiales es distinta en los
diferentes órdenes de insectos. Estas glándulas excepto en los apterigotas
desaparecen en la etapa adulta.
2. MATERIAL:
2.1. Reactivos:
Eter etílico
Ringer insecto
117
Fijador de Bouin acuoso
2.2. Equipo:
Microscopio estereoscopio
2.3. Material Biológico:
Periplaneta americana
Spodoptera frugiperda (larva)
3. METODOLOGIA:
3.1. Componentes del sistema endocrino de insectos:
- Fijar el insecto (cucaracha o larva) a la placa Petri previamente
anestesiado con éter; No dañar la región cefálica. Sumergirlo en
solución Ringer insecto.
- Desgarrar la membrana del cuello y localizar el ganglio cefálico.
Observar que para intercerebralis presenta un color azuloso más claro
típico de la neurosecreción.
- Localizar los nervios corpori cardiaci I y moverlos con la pinza. Se
verá que corpora cardiaca (órgano neurohemal) presenta la misma
coloración que las células neurosecretoras. En lepidópteros corpora
cardiaca son dos órganos independientes y en cucarachas están
fusionadas.
- Practicar en la larva de lepidóptero una incisión media dorsal a todo
lo largo de la región torácica. Añadir unas gotas de fijador de Bouin
acuoso y se observará sobre los primeros troncos traqueales
transversos (detrás de la cápsula cefálica), unas estructuras en forma
de racimos de uvas que son las glándulas ecdiasiales.
117
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ELECTROENCEFALOGRAMA
INTRODUCCION:
Las células del sistema nervioso, al igual que el resto de las células de nuestro
organismo, muestran una serie de fenómenos eléctricos característicos. La corteza cerebral,
constituida por una extensa colección de neuronas y células de glía, muestra una actividad
eléctrica continua, no uniforme, constituida por oscilaciones más o menos rítmicas de los
potenciales eléctricos observables sobre toda la superficie cortical; sobre esta actividad
constante se superponen una serie de respuestas, más localizadas, constituidas por
potenciales de mayor intensidad que están asociados al aumento de actividad de los sistemas
receptores. El primer tipo de manifestación eléctrica obedece a potenciales eléctricos
originados de manera espontánea, en el sentido de que se desconoce su origen exacto
(potenciales espontáneos), mientras que el segundo tipo de actividad corresponde a
potenciales inducidos por una estimulación de tipo sensorial (potenciales evocados).
Aunque la existencia de potenciales a nivel de cerebro era conocida hace más de un
siglo, fue el psiquiatra alemán Hans Berger quien, en 1929, demostró haber
conseguido registrar por primera vez la actividad eléctrica del cerebro humano
mediante el empleo de electrodos conectados al cuero cabelludo. (Berger estuvo
realizando sus registros en el más absoluto secreto, durante 5 años, empleando en
muchos de sus ensayos a su propio hijo, antes de publicar sus observaciones en 1929).
El trazado obtenido, constituido por ondas de amplitud y frecuencia características,
se denomina electroencefalograma (EEG), habiendo sido demostrada ya por Berger
su utilidad como medio para evaluar el estado funcional, normal o patológico, del
cerebro humano (fig.55).
La actividad eléctrica espontánea del cerebro que se observa en un registro
electroencefalográfico no es debida a la simple adición de los potenciales de acción
de los millones de neuronas que integran el cerebro; por el contrario, como se
sugieren ciertos datos experimentales, parece que los cambios rítmicos del
electroencefalograma se correlacionan más bien con oscilaciones de los potenciales
dendríticos de grandes poblaciones neurales, las cuales estarían sometidas a la
regulación de la formación reticular, que actuaría como marcapaso.
Los potenciales eléctricos del cerebro humano son muy débiles, del orden de los 50
uV (los del corazón son de intensidad aproximadamente diez veces mayor); por este
motivo, dichos potenciales deben ser ampliados considerablemente para poder ser
registrados y analizados. Esto se consigue con el empleo de un aparato especial,
denominado electroencefalógrafo, que permite amplificar las señales eléctricas
captadas a nivel de la superficie craneal, a la vez que elimina o filtra los potenciales
eléctricos cuya frecuencia no esté comprendida dentro de los límites mostrados
normalmente por la actividad eléctrica cerebral.
119
El registro electroencefalográfico constituye hoy una técnica perfectamente
establecida, totalmente inocua para el sujeto explorado, y representa un tipo de
exploración básica para el estudio de los pacientes en los que se sospecha una
alteración encefálica producida por lesión o enfermedad cerebral o por perturbacioes
en el estado general del individuo.
OBJETIVOS
En esta práctica se pretende conseguir los siguientes objetivos:
MATERIAL
El componente básico del sistema de exploración es el electroencefalografo, aparato
capaz de detectar, ampliar y registrar las diferencias de potencial existentes entre dos
puntos de la superficie o del interior del cráneo o bien entre uno de estos puntos y un
punto o electrodo de referencia. El electroencefalógrafo consta, esencialmente de los
siguientes elementos:
1. Electrodos de registro
La actividad eléctrica del cerebro se explora a nivel del cuero cabelludo por medio
de electrodos metálicos, habitualmente de plata.
2. Sistema de amplificación
Los débiles potenciales recogidos por los electrodos son amplificados por un
dispositivo que, con un mínimo de distorsión, incrementa considerablemente el
tamaño de las señales eléctricas. Debido a su pequeña intensidad, los potenciales
bioeléctricos cerebrales podrían ser fácilmente eclipsados por potenciales
procedentes de otras fuentes, como la red de suministro eléctrico, otros aparatos
eléctricos contiguos, potenciales originados a nivel de los músculos del propio
individuo explorado, etc. Con objeto de superar estas limitaciones, el sistema de
amplificación está provisto de una serie de circuitos que aumentan las señales que
muestran una diferencia de potencial a nivel de los dos electrodos de registro (no hay
coincidencia de fase entre las señales de entrada), al paso que atenúan las señales
eléctricas que, con relación a tierra, presentan el mismo potencial en ambos
electrodos (hay coincidencia de fase en las señales de entrada, dado que ambas
proceden de la misma fuente).
119
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
PROCEDIMIENTO
OBSERVACION
Si bien esta práctica se centra fundamentalmente en torno al estudio del registro
encefalográfico de un adulto en estado de vigilia, se analizarán también las
características del EEG durante el sueño.
Vigilia
El estudio de la actividad eléctrica cerebral registrada a través del cuero cabelludo en
un sujeto adulto revela la existencia, en estado de vigilia, de un continuo aspectro de
frecuencias comprendido entre los 4-5 c/s y los 40-45 c/s, frecuencias que se suceden
e intercalan de forma gradual y continua.
La división de este espectro de frecuencias, permite distinguir los siguientes tipos de
ritmos electroencefalográficos (tabla 19 y fig.57)
Ritmo alfa (8-13 c/s)
Se obsesrva únicamente cuando el sujeto está en reposo, inactivo mentalmente y con
los párpados cerrados.
Predomina especialmente en las regiones occipital y frontal, si bien en algunos
adultos se observa en todas las áreas.
Beta 14 - 25 5 - 20
Alfa 8 - 13 10- 150
Theta 4 -7 10- 200
Delta 0.5- 3 50- 300
121
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
Sueño
La iniciación del período de somnolencia va asociada a la desaparición del ritmo alfa,
que es sustituido por frecuencias más lentas, es decir, por ondas de menor frecuencia y
mediana amplitud.
El sueño moderadamente profundo puede reconocerse por la presencia de ondas de
mayor amplitud, cuyas frecuencias oscilan entre 1 y 4 c/s. Intercalado entre estas ondas,
aparecen los denominados husos de sueños compuestos por ondas repetitivas, que tienen
una frecuencia de 9-13 c/s; duran de 0,5 a 5 segundos y aparecen a intervalos de 5-15
segundos. Por lo general, tanto los husos como las ondas lentas tienen una distribución
topográfica más extensa que las del sueño ligero.
El sueño profundo se caracteriza por una actividad lenta de 0,5 a 2 c/s y de gran amplitud
(ondas delta); dichas ondas aparecen, por lo general, sincrónicamente en todas las
regiones de la cubierta craneal.
Las ondas lentas del sueño son a veces reemplazadas por otras parecidas a las del período
de vigilia; sin embargo, el sueño no sólo no se interrumpe, sino que incluso está elevado
el umbral necesario para conseguir despertar al individuo por medio de estímulos
sensoriales. Debido a estas características, este período recibe el nombre de sueño
paradójico; durante este período se producen movimientos erráticos de los ojos, lo que
ha motivado que se le denomine también fase de sueño con movimientos rápidos de los
ojos o sueño REM (rapid eye movements). Parece que en esta etapa tienen lugar los
fenómenos oníricos (ensueños)(fig.58).
Pruebas de estimulación
1. Apertura y cierre de los ojos
123
Por medio del simple mecanismo de abrir los ojos se observa que el ritmo alfa,
característico del registro encefalográfico del adulto en estado vigil y con los ojos
cerrados, desaparece del trazado, siendo reemplazado por un tipo de actividad irregular,
desincronizada, de bajo voltaje. Este fenómeno recibe el nombre de respuesta de paro,
bloqueo alfa o desincronización del trazado. Este tipo de respuesta puede obtenerse,
incluso con los ojos cerrados, por medio de la estimulación ambiental o verbal, o cuando
se exige un esfuerzo mental por parte del sujeto explorado (p.ej., la realización de una
pequeña operación aritmética). La persistencia del ritmo alfa al abrir los ojos indica un
ritmo anómalo, un déficit en la integración neuronal o una falta importante de visión
(fig. 59).
2. Hiperpnea
El aumento de la frecuencia y de la profundidad de los movimientos respiratorios
durante un período de unos 3 minutos da lugar a una alcalosis respiratoria y,
secundariamente, a una reducción del flujo sanguíneo cerebral, lo que conlleva,
paradójicamente, una hipoxia del tejido cerebral y un aumento de la excitabilidad
neuronal. Esta prueba es particularmente importante porque permite descubrir, sobre un
trazado aparentemente normal, alteracione de tipo epiléptico o anomalías de carácter
focal o difuso.
3. Estimulación sensorial
123
Manual Práctico de Fisiología Animal Blgo. Víctor Carbajal Z
Durante las crisis convulsivas que acompañan el ataque epiléptico (grand mal y petit
mal) aparecen notables alteraciones en el electroencefalograma (fig.60 y 61). En los
ataques de petit mal, que corresponden a períodos o fases o "ausencias", caracterizados
por la pérdida momentánea de la capacidad para reaccionar, aparecen descargas difusas,
rítmicas, con una morfología mixta, compuesta por dobletes que se superponen a ondas
redondeadas, lentas (morfología puntas/onda). Las crisis convulsivas del grand mal
corresponden a ataques epilépticos en los cuales aparecen convulsiones generalizadas,
con contracciones tónico-clónicas,precedidas por un "aura"; en estos casos el registro
electroencefalográfico muestra una gran cantidad de puntas rítmicas, generalizadas, con
una frecuencia de descarga superior a las asociadas con el petit mal. Es importante tener
en cuenta que, durante los períodos entre crisis, un porcentaje importante de los
pacientes (entre el 20 y el 40%) muestran un registro electroencefalográfico
prácticamente normal.
Las crísis epilépticas se caracterizan por ser espontáneas, episódicas, recurrentes y
paroxisticas. En la epilepsia existe un foco, un conjunto de neuronas, cuya
despolarización sincrónica determina la aparición de una serie de ondas agudas, o
puntas, en el electroencefalograma. Diversos factores pueden provocar crísis
convulsivas parecidas a las del ataque epiléptico, que, a diferencia de estas últimas,
remiten espontáneamente al no existir un mecanismo que las perpetúe.
En un 90% de los pacientes con tumores cerebrales aparecen alteraciones
electroencefalográficas, cuyas características dependen del tipo y localización del
tumor. La existencia de un electroencefalograma normal y de un scanning normal
excluye la presencia de un tumor, o un absceso, supratentorial. El registro
electroencefalográfico es anormal en casi todos aquellos casos en los que existe alguna
reducción o limitación en el grado de conciencia. En general, cuanto mayor es la
afectación de la conciencia, más alterado se halla el electroencefalograma.
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.