BIOLOGIA GENERAL

GUIA DE LABORATORIO Nº 2
ESTUDIOS Y RECONOCIMIENTO DE LAS BIOMOLÉCULAS QUE FORMAN
PARTE DE LOS ORGANISMOS VIVOS*

ACTIVIDAD: EXPERIMENTAL

1. OBJETIVOS
 Determinar la presencia, de carbohidratos, lípidos, proteínas, ácidos nucleicos
en diversas muestras biológicas.
 Verificar algunas propiedades de las biomoléculas mediante algunas
reacciones bioquímicas.
 Describir la importancia de las biomoléculas en los seres vivos
 Verificar el cambio de conformación de algunas proteínas cuando son
afectadas por la temperatura, pH y sales.

2. INTRODUCCION

Los bioelementos son aquellos elementos que mayoritariamente están presentes en

la materia viva; son: carbono (C), oxígeno (O), hidrógeno (H), nitrógeno (N), y en
menor, medida, fosforo (p), azufre (S), magnesio (Mg), calcio (Ca), sodio (Na),
potasio (K) ,y cloro (Cl). Los cuatro más abundantes, C; H; O y N constituyen un
95% de las estructuras biológicas. Los restantes elementos forman el 4,9% en tanto
que el 0,1% restantes está compuesto por los denominados oligoelementos, como
hierro (Fe), manganeso (Mn), cobre (Cr), zinc (Zc), flúor () y Iodo (I). Todos se
encuentran en el organismo en formas de moléculas más o menos complejas, que,
desde el punto de vista químico se clasifican en orgánicas e inorgánicas. Entre las
inorgánicas encontramos el agua, los gases (O2) y (CO2), cationes (Ca++, Na+, K+,
etc.) y sus respectivas sales (fosfatos, carbonatos, bicarbonatos, sales de amonio).
Entre las orgánicas se destacan los carbohidratos, lípidos, proteínas, ácidos
nucleicos, los metabolitos intermedios y las vitaminas.

Los carbohidratos o glúcidos (azucares) son una fuente primaria de energía para los
seres vivos, lípidos, moléculas orgánicas hidrofóbicas que, al igual que los
carbohidratos, desempeñan papeles importantes en el almacenamiento de energía y
como componentes estructurales; proteínas que son moléculas muy grandes
compuestas de cadenas largas de aminoácidos conocidas como cadenas
polipeptídicas. Los 20 aminoácidos diferentes que conforman las proteínas varían de
acuerdo con las, propiedades de sus grupos laterales, lo que provoca la síntesis
inmensa de variedades moléculas proteicas, cada una de las cuales cumple una
función altamente específica en los sistemas vivos; los ácidos nucleicos: ácido
desoxirribonucleico (DNA) y ácido ribonucleico (ARN), que son macromoléculas
formadas por nucleótidos, que a su vez son moléculas complejas formadas por un
grupo fosfato, un azúcar de 5 carbonos y una base nitrogenada. Los ácidos
nucleicos son los que transmiten y traducen la información genética.

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*Tomado de: Martínez Neis y Blanco Germán. 2001 Manual de Laboratorio de Biologia general y celular.
Universidad del Magdalena
Los nucleótidos también desempeñan papeles centrales en los intercambios de
energía que acompañan a las reacciones químicas dentro de los sistemas vivos.
Todas estas moléculas; carbohidratos, lípidos, proteínas contienen nitrógeno y
azufre; los nucleótidos así como algunos lípidos contienen nitrógeno y fósforo

3. MATERIALES Y EQUIPOS

Estos son unos materiales sugeridos:

Biológicos: azúcar, pan, pedazo de pescado, miel leche pura, levadura, orina
normal y diabética, huevos, mantequilla, limón, vinagre, aceite de cocina,
zanahoria, gelatina, y semen.

Laboratorio: pipetas o jeringas, goteros punta larga, cajas petri, gradillas, navajas,
cuchilla, guantes, morteros, calentadores, eléctricos, tubos de ensayo , pinzas para
tubos de ensayos beakers, erlenmeyer, papel filtro, cinta pH, cinta para rotular,
papel absorbente, toalla, agitador, embudo buchner o centrífuga.

Reactivos: soluciones A y B de Fehling o reactivo de Benedict, reactivo de Biuret (A

y B), Lugo, Sudán III, ácido nítrico concentrado, Solución de glucosa al 10%, Sodio,
Cloruro de Sodio, Acido Clorhídrico, agua destilada, Hidróxido de Amonio y Nitrato
de Plata.

4. PROCEDIMIENTO

I. DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS:

A. Azúcares
1. Lavar, rotular y preparar varios tubos de ensayo.
2. Al tubo # 1 agregar 5 ml de agua destilada
3. Al #2, agregar 5 ml de solución de glucosa o fructosa
4. A cada tubo adicionar 20 gotas de reactivo de Benedict o Fehling A y B; agitar y
describir lo observado en cada uno de los tubos. Calentar los tubos, cuidando de
alejar del rostro el extremo del tubo y no apuntar a sus compañeros
5. Describir lo sucedido y su posterior explicación.
6. Realice el mismo procedimiento con los tubos que contengan por separado 5 ml
de cada una de las siguientes, sustancias: leche, miel, orina normal, orina diabética,
gelatina, semen, extracto de zanahoria
Describa lo observado y su posterior explicación.

B. Polisacáridos
1. Lavar, rotular y preparar varios tubos de ensayo.
2. Al, tubo # 1 agregar 5 ml. de agua destilada
3. Al #2 agregar 5 ml de solución de almidón y agite el tubo
4. A cada tubo agregar 5 gotas de solución de lugol.
5. Describir lo observado y su explicación.
6. Realizar el mismo procedimiento con tubos que contengan por separado 5 ml.:
leche, miel, orina normal, orina diabética, gelatina, clara de huevo y triturado de
pan, maíz o papa colocados en cajas petri
7. Describa lo observado en cada uno de ellos

II. DETERMINACIÓN DE LÍPIDOS:

PARTE A.
1. Rotular dos tubos de ensayo y agregar 3 ml de aceite de cocina.
2. Al tubo # 1 agregar 5 ml de agua.
3. Al tubo # 2 agregar 3 ml de n-hexano o éter de petróleo.
4. Agitar vigorosamente cada uno de los tubos.
5. Observar y discutir los resultados

PARTE B.
1. Distribuya una pequeña cantidad de aceite en el papel filtro o el tipo de papel en
donde empacan el azúcar.
2. Colocar el papel al trasluz.
3. Observar y describir lo observado.
4. Realice el mismo procedimiento por separado con una gota de leche y un poco de
mantequilla disuelta

PARTE C.
1. Lavar, rotular y preparar varios tubos de ensayo.
2. Al # 1 agregar 5 ml de agua destilada con tinta roja
3. Al # 2 agregar 5 ml de aceite de cocina.
4. Agregar a cada tubo 10 gotas de Sudán III, espere 30 minutos.
5. Describir lo observado y su explicación.
6. Realizar, el mismo procedimiento con tubos que contengan por separado 5 ml de
cada una de las siguientes sustancias, leche, orina normal, orina diabética, clara de
huevo, miel, homogenizado de pescado, mantequilla.

III. DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS:

PARTE A.
1. Lavar, rotular y preparar varios tubos de ensayo.
2. Al # 1 agregar 5 ml de agua destilada.
3. Al # 2 agregar 5 ml de clara de huevo.
4. A cada uno de los tubos agregar 5 gotas de ácido nítrico concentrado
5. Describir lo observado en cada uno de los tubos y su posterior explicación.
6. Aplicar la misma prueba, a tubos que contengan por separado las siguientes
sustancias: leche, miel, gelatina, orina normal, orina diabética, clara de huevo y
homogenizado de pescado.
7. Realice el anterior procedimiento, pero esta vez, cambie el ácido nítrico por
reactivo de Biuret.
8. Describa lo observado en cada uno de los tubos; establezca comparaciones y sus
respectivas explicaciones
PARTE B.
1. Lavar, rotular y preparar cuatro tubos, de ensayo.
2. A cada uno de ellos agregar 5 ml de clara de huevo.
3. Al tubo # 1 adicional unas gotas de limón o vinagre.
4. Al # 2 agregar solución de hidróxido de sodio al 10%.
5. Al # 3 agregar solución de cloruro de sodio al 20%.
6. Calentar al # 4 hasta ebullición. Anotar y describir lo observado y su explicación
7. El anterior procedimiento se puede realizar también con sangre o leche

IV. DETERMINACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS:

Extracción y caracterización.

1. Colocar en un Erlenmeyer 10 gr de levadura o de hígado de pollo y agregar 10 ml

de hidróxido de sodio al 40%.
2. Dejar en contacto durante 30 minutos calentando a baño maría (B.M.) y agitando
periódicamente.
3. Agregar luego 20 ml de agua destilada calentada 50 - 60 Cº.
4. Filtrar por un trozo de tela.
5. Colocar el residuo en un vaso de precipitado y agregar 15 ml de agua destilada
(50 – 60 Cº).
6. Filtrar nuevamente en la tela, recogiendo sobre el filtrado anterior.
7. Agregar al filtrado ácido clorhídrico concentrado hasta débil reacción ácida al
tornasol.
8. Verter sobre el líquido igual volumen de alcohol (etanol).
9. Recoger el precipitado de ácido nucleico sobre papel filtro en un Buchner, o
sepáralo por centrifugación
10. Lavar con pequeñas porciones de alcohol. Si se desea caracterizar los
constituyentes del ácido nucleico se debe colocar el precipitado en un Erlenmeyer,
agregarle 30 ml de ácido sulfúrico al 10% y calentar a B.M 30 minutos.
11. En caso de mucha evaporación agregar agua.
12. Para caracterizar las bases púricas a: 3 ml de la solución agregarle hidróxido de
amonio hasta reacción alcalina y luego, gota a gota solución de nitrato de plata al
10%.
13. Observar los resultados y su explicación.

5. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. Para cada una de las pruebas realizadas describa sus fundamentos químicos
2. El cabello presenta características proteicas, que ocurre con estas proteínas cuando una
persona se hace un ondulado o una permanente. Explique.
3. ¿Por qué es importante que los seres vivos consuman o produzcan grasas? ¿Cuál es la
diferencia entre las grasas animales y las vegetales?, Cómo se relaciona esta diferencia con la
función que cumplen? Explique sus respuestas.
4. Explique la función que cumplen los lípidos en las semillas.
5. Si te comes un pedazo de papa o pan, ¿En que se convertirá en el momento en que actúen
las enzimas digestivas? Explique.
 Tabla general para reportar la presencia de biomoléculas en los alimentos

Benedict o
SUSTANCIA Fehling
Sudán III Ácido Nítrico Lugol Biuret

Miel
Leche
Orina normal
Orina diabética
Gelatina sin dulce
Extracto de zanahoria
Clara de huevo
Triturado de pan
Triturado de maiz
Triturado de papa
H. de pescado
Mantequilla
Para la DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS:
Agua destilada
Solución de glucosa o fructosa
Reactivo de Benedict o Fehling A y B
Agua destilada
Lugol

Para la DETERMINACIÓN DE LÍPIDOS:

n-hexano o éter de petróleo.
Agua destilada.
Papel filtro
Agua destilada tinta roja
Sudán III

Para la DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS:

Agua destilada.
Ácido nítrico concentrado
Reactivo de Biuret.
Hidróxido de sodio al 10%.
Solución de cloruro de sodio al 20%.

Para la DETERMINACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS

Hidróxido de sodio al 40%.
Agua destilada calentada
Ácido clorhídrico concentrado
Embudo Buchner, o Centrifuga
Alcohol (etanol).
Ácido sulfúrico al 10%
Hidróxido de amonio
Solución de nitrato de plata al 10%.