TÉCNICA DE LABORATORIO PARA LA IDENTIFICACIÓN

DE E. HISTOLYTICA
OBJETIVOS GENERALES
El alumno de medicina aprenderá la realización del método de laboratorio para la
toma de muestra en el estudio de la amiba en fresco el cual le permitirá identificar
la E. Histolytica, agente causal de amebiasis,

MARCO TEÓRICO
Amebiasis
La amebiasis es una infección humana producida por el protozoario Entamoeba
Histolytica y afecta sobre todo al intestino grueso.
El diagnóstico de la amebiasis se realiza demostrando la presencia de trofozoítos
o quiste.
Los quistes resisten condiciones adversas. Son las formas infectantes para el
hombre porque resisten la acidez gástrica. Esta acidez los rompe y dan origen a
trofozoítos. Llegan a la luz del colon e invaden la pared. Se reproducen por
división binaria. Salen con las materias fecales en forma de quiste inmaduros (1
núcleo) o maduros (4 núcleos), pasando previamente por pre-quiste.

TROFOZOITO

PREQUISTE QUISTE
Ciclo biológico

Patología
 Los trofozoítos invaden mucosa del colon.
 Se multiplican llegando a la submucosa.
 Destruyen tejidos en forma horizontal y se sobre infecta con
bacterias provocando microabscesos.
 Puede haber perforación y vuelco del contenido colónico a la cavidad
peritoneal con producción de peritonitis séptica y química. Es la causa
más común de muerte.

FUNDAMENTO
El método en fresco se basa en la utilización de solución salina fisiológica para
conservar condiciones similares a la del cuerpo humano y de esta manera poder
observar los trofozoítos.
Se debe realizar utilizando montajes en solución salina y en una pequeña cantidad
de yodo Lugol. Los montajes en solución salina tienen la ventaja de que retienen
la movilidad de los trofozoítos; sin embargo, la identificación definitiva de
trofozoítos o quistes en estos preparados es difícil pues las estructuras internas
son con frecuencia poco identificadas.
El yodo Lugol se emplea para destacar las estructuras internas de los parásitos
presentes. El yodo tiñe el núcleo y los organelos intracitoplasmáticos de manera
que son más fáciles de visualizar.
 MATERIALES Y REACTIVOS
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Aplicadores de madera
 Microscopio
 Lugol
 Solución salina
 Muestra de heces

DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
 En un portaobjetos limpio y desengrasado se colocan separadamente, una
gota de solución salina y de Lugol.

 Con el aplicador de madera se toma una pequeña porción de materia fecal

y se mezcla con la solución, con el mismo aplicador se retiran las fibras y
otros fragmentos gruesos, procurando hacer una suspensión.

 Colocar el cubreobjetos

 Repetir estas operaciones en la gota de Lugol.

 Observar en el microscopio con los objetivos de 10x y 40x

 Recorrer la laminilla siguiendo un sentido direccional

Nota: es importante que las preparaciones no sean densas, si no transparentes.