Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
Artikel Penelitian
Halaman 2
2 Jurnal Kimia
HAI
N
H
N
H3C
F 1: Struktur e Evodiamine.
2. Hasil dan Diskusi 2.2. Parameter Mengikat. Data pendinginan Florescence adalah
dianalisis untuk mendapatkan berbagai parameter pengikatan untuk
2.1. Pendinginan Fluoresensi. BSA memiliki dua triptofan aksi Evo dan BSA. Prosedur fluoresensi
residu yang memiliki fluoresensi intrinsik: Trp-134 di quenching pertama kali diasumsikan sebagai quenching dinamis
domain pertama dan Trp-212 di domain kedua. Triptofan proses.
emisi mendominasi spektrum fluoresensi BSA di V Konstanta quenching dinamis sv dan dihitung
yang dengan
tampak
wilayah. [15, 16]. Ketika molekul lain berinteraksi dengan BSA,konstanta laju0 pendinginan bimolekuler
fluoresensi triptofan dapat berubah tergantung pada persamaan Stern-Volmer= 1 + 0 [ ]berikut
= 1 + sv[22]:
[ ],
dampak interaksi tersebut pada konformasi protein.
Intensitas fluoresensi sistem BSA-Evo diukur (1)
dengan pH 7,34 dan dua suhu berbeda 298 0
dan 310 K. efek Evo pada fluoresensi BSA di dimana dan adalah intensitas fluoresensi relatif di
suhu 298 K dan 310 K ditunjukkan pada Gambar 2. e tidak adanya dan kehadiran quencher, [ ] adalah konsentrasi
Intensitas pita emisi luas karakteristik pada 377 nm adalah masa
0quencher, bimolekuler
adalah konstanta
sv adalah rata-rata
laju pendinginan
pendinginan tanpa
dinamis adanya
bimolekuler, dan
Stern-Volmer
menurun tajam dengan meningkatnya konsentrasi konstan,
Evo, menunjukkan bahwa interaksi antara Evo dan BSA 0 / versus
telah terjadi, dan variasi dalam intensitas dapat dihasilkan dari
quencher dievaluasi sekitar 5 ns. Ini adalah plot
perubahan konformasi protein atau pendinginan langsung [ ] memberikan garis 0 /lurus,
versus [dan sv diperoleh
] ditunjukkan dari 4,
pada Gambar
efek oleh Evo [17, 18]. Namun, emisi maksimum kemiringan. Plot tercantum dalam Tabel 1. e
panjang gelombang BSA hampir tidak berubah selama interaksi. 12 L mol −1 s −1 pada 298 K dan
dan sv dan yang dihitung
2,41 ×terutama
10 12 L mol −1 s −1 pada 310 K, yang jauh lebih besar dari
Sebagai hasilnya, kami memperkirakan bahwa poliamin mengikat dengan
dua fluorophores Trp-212 terkubur di dalam dan Trp-134 berada nilai yang diperoleh adalah 4,86 × 10
pada permukaan BSA, menunjukkan bahwa Trp-212 terletak di dalam 10 L mol −1 s −1 , menunjukkan bahwa
kantong pengikat hidrofobik dari protein tidak terpapar konstanta pendinginan hamburan maksimum hamburan dari
untuk setiap perubahan polaritas [19]. Demikian pula, Trp 134 beradaquencher 2,0 × 10
berbagai
di wilayah subdomain ini mungkin akan menempatkannya dikemungkinan mekanisme pendinginan dari fluoresensi intrinsik
interaksi kemasan hidrofobik antara heliks dan dekat BSA tidak diprakarsai oleh proses dinamis tetapi statis
untuk pembukaan "distal" situs IB. Ini menunjukkan bahwa prosedur pendinginan [23].
evodiamine mengikat sisi IB "proksimal", dan Konstan asosiasi yang jelas dan jumlah
mode pengikatan yang sama dari molekul heterosiklik besar situs yang penjilidan 0 -
serupalog dihitung =menggunakan
log + log [ ], [22]
untuk camptothecin dengan HSA dijelaskan dalam publikasi
sastra [20].
(2)
Spektrum fluoresensi sinkron menunjukkan residu Trp dari
BSA hanya pada interval panjang gelombang Δ 60 nm dan Tyr
residu BSA hanya pada Δ dari 15 nm. Fluoreskronik sinkron-di mana dan adalah konstanta asosiasi0yang nampak dan
- / ] dibandingkan log
Spektrum cence dari BSA-Evo ditunjukkan pada Gambar 3. jumlah Jelas situs yang mengikat. Petak log [(
bahwa intensitas residu Trp atau Tyr berkurang dalam [ ] ditunjukkan pada Gambar 5. dan diperoleh dari
Kehadiran Evo. Namun, posisi puncak emisi Trp intersep pada sumbu dan kemiringan, masing-masing. I6
dihitung danhal
atau residu Tyr tidak menunjukkan perubahan signifikan, menunjukkan untuk
itu Evo pada dua suhu tercantum dalam
polaritas di sekitar residu Trp atau Tyr tidak dapat diubah [21].
Tabel 2. konstanta asosiasi sedang (1,61 × 10
Halaman 3
Jurnal Kimia 3
600 500
500 400
400
300
300
200
intensitas
200 rescence intensitas rescence
Fluo 100
Fluo
100
0 0
60 600
480
45
360
30
240
intensitas rescence intensitas rescence
15
Fluo 120
Fluo
0 0
270 285 300 315 330 290 295 300 305 310
Panjang gelombang (nm) Panjang gelombang (nm)
(Sebuah) (b)
F 3: Spektrum fluoresensi sinkron BSA dengan berbagai jumlah Evo, (a) Δ nm, (b) Δ nm . BSA ( M): 10 dan Evo
Evo untuk BSA hanya pada tingkat moderat dibandingkan dengan dengan Evo,(K)adalah koefisien korelasi.
melaporkan konstanta pengikatan 10 4 -10 , di mana Sandip et al.
telah melaporkan bahwa albumin serum memiliki jumlah terbatas (× 10 L / mol)(× 10 L mol s ) 4
situs mengikat untuk ligan endogen dan eksogen yang
12 −1 −1
biasanya terikat secara terbalik [24]. Misalnya, baicalein yangEvo-BSA mana 298 4.96 4.86 0,9874
4 L / mol) [15], sedangkan epicatechin gallate berikatan dengan 310 2.41 2.41 0,9806
terikat ke BSA di hadapan Fe 3+ memiliki afinitas yang lebih rendah
7 L / mol [25]. I
(4. ×
BSA dalam konstanta pengikatan yang lebih tinggi dari . × T 2: Mengikat parameter
(K) (L / mol)untuk interaksi BSA dengan Evo, adalah
nilai adalah 1,31 pada 298 K dan 1,33 pada 310 K, menunjukkan koefisien korelasi.
bahwa 1-2 molekul Evo terikat dengan BSA per protein. ini .×
diindikasikan bahwa jumlah (of) dari ikatan ini tidak tergantung .7 ×
pada konstanta asosiasi ( ). 298 1.31 0,9948
Evo-BSA
310 1.33 0,9938
2.3. Transfer Energi Resonansi Fluoresensi. Tingkat
transfer energi tergantung pada tingkat tumpang tindih
BSA, spektrum emisi donor dengan akseptor dan dipol transisi akseptor, dan jarak antara
spektrum penyerapan, orientasi relatif dari donor molekul-molekul ini [26].
Halaman 4
4 Jurnal Kimia
2.8 0.8
600
2.4 500 (1) 0,6
400
2 0,4
/0F 300
rbance
F bso
200
1.6 SEBUAH 0,2 intensitas rescence
(2)
100 Fluo
0
1.2 0
340 360 380 400 420 440
0 1 2 3 4 Panjang gelombang (nm)
[Q] × 10 5 (mol / L) 0
F M, 2 8 K.6: tumpang tindih antara spektrum emisi fluoresensi
BSA (1) dan spektrum serapan UV Evo (2), BSA Evo
298 K
310 K
F 4: Sterne-Volmer plot pendinginan fluoresensi BSA 0
dengan berbagai jumlah Evo pada 298 K (•) dan 310 K (★). T 3: (cm
calculatede
L mol menghitung
) (%) , dan
nilai
BSAe, , dengan
(nm) Evo,
(nm)
adalah koefisien korelasi.
3 1 0
8,53 × 0 4
Efisiensi transfer energi ( ) dapat digunakan untuk mengevaluasi 2.4. Parameter odyermodinamik. Termodinamika
jarak ( ) antara ligan (akseptor) dan BSA parameter pada suhu yang berbeda dianalisis
(donor) dalam protein oleh teori Förster 6
ciri kekuatan akting mendominasi interaksi.
tentang energi dipol-dipol
transfer sebagai berikut: 0 E entalpi (Δ ), energi bebas (Δ ), dan entropi (Δ )
6 0 , perubahan dihitung 2 berdasarkan Van't Hoff berikut
persamaan: //2
0 +6 (3) di ,
Δ
0 adalah intensitas fluoresensi BSA di
ΔΔΔ,
dimana dan
ada dan tidak adanya akseptor, adalah 0 adalah
jarak
jarak kritis Δ ln , (6)
antara akseptor dan donor,
untuk transfer energi
6
50% yang dapat dihitung dengan menggunakan
berikut:
0 8,8 × 0 25 2 4 Φ , di mana adalah konstanta asosiasi pada suhu dan
(4) konstanta gas. Hasilnya dirangkum dalam Tabel 4. Empat
Halaman 5
Jurnal Kimia 5
Halaman 6
6 Jurnal Kimia
Halaman 7
Jurnal Internasional
Karbohidrat
Kimia Jurnal dari
Kimia Kuantum
Perusahaan Penerbitan
VolumeHindawi
http://www.hindawi.com 2014 Perusahaan Penerbitan
VolumeHindawi
http://www.hindawi.com 2014
Jurnal dari Jurnal Internasional Jurnal Internasional Jurnal dari Kimia Bioinorganik
Spektroskopi Kimia Anorganik Elektrokimia Kimia Terapan dan Aplikasi
Perusahaan Penerbitan
VolumeHindawi
http://www.hindawi.comPerusahaan Penerbitan
VolumeHindawi
http://www.hindawi.com
2014 Perusahaan Penerbitan
VolumeHindawi
http://www.hindawi.com
2014 Perusahaan Penerbitan
VolumeHindawi
http://www.hindawi.com
2014 Perusahaan
2014 Penerbitan
VolumeHindawi
http://www.hindawi.com2014