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TESIS:
PARA OPTAR EL TÍTULO DE:
QUÍMICO FARMACÉUTICO
PRESENTADO POR:
Bach. ANICAMA RAMOS DIANA JULISSA
Bach. GUERRA GALINDO SANTAANITA
ASESORA:
Mg. JESSICA YOLANDA HUARCAYA ROJAS
ICA- PERU
2014
"Año de la promoción de la industria responsable y del compromiso climático"
CONSTANCIA
Las Bachilleres: Anicama Ramos Diana Julissa y Guerra Galindo Santa Anita
Atentamente
···~S>f·"~···
Mg. Jessica Y. Huarcaya Rojas
Asesora
2
.JI. (])ios por áanne fa sa6üfuría, {uz y
Ju/issa
3
(})eau:atoria
}fnita
4
Las autoras de este traBajo eJ(JJresan sus agradecimientos a:
}l. todos Cos docentes de (a facuCtad de Parmacia y (Bioquímica, quienes contriBuyeron con
}l. nuestra asesora 9dag. Jessica Jfuarcaya fíW}as por su va(ioso aporte y asesoramiento y
}l. todos nuestros amiiJos y compañeros por sus concejos, apoyo y cotaBoración.
'Y a todas aquetlizs personas que de una u otra forma contriBuyeron en e( fooro de esta
meta.
Jufusa y )lnita
5
ÍNDICE GENERAL
RESUMEN
ABSTRACT
CAPÍTULO 1: INTRODUCCIÓN 10
2.2.1. Fundamento 18
6
2.3.4. Determinación microbiológica 26
CAPITULO IV :RESULTADOS 51
4.1 DISCUSIÓN 57
4.2 CONCLUSIONES 59
4.3 RECOMENDACIONES 60
4.4 BIBLIOGRAF[A 61
4.5 ANEXOS 64
7
RESUMEN
leguminosas. Cuenta con una gran capacidad para vivir en el desierto debido a su
Prosopis Pallida.
farmacognósticas.
8
ABSTRACT
The algarrobo is a long lived tree, which belongs to the family to the order of the
legumes. Account with a great capacity to live in the desert because of its ability to
The objective of this research is to perform the phytochemical screening and the
Prosopis pallida.
The phytochemical screening carried out, leaves fruits and seeds of Prosopis
tests of residual moisture, total ash, water soluble ash, ash insoluble in
hydrochloric acid, and foreign matter, comply with the parameters established for
Microbiological Analysis of the crude drug of leaves, fruits and seeds was
9
l. INTRODUCCIÓN
encuentra en peligro de extinción. Esta especie arbórea es, sin duda, la más
no hubieran alcanzado el· alto desarrollo artístico, agrícola, manejo de las aguas de
riego ni minería.(1 ).
chacras, caminos, es por ello que se consideró hacer este estudio para conocer
sus principios activos, lo que nos permitírá deáucir las bondaáes terapéuticas der
Prosopis pallida.
10
la investigación con la única finalidad de conocer más a esta emblemática
utilizada de la especie en mención son las hojas, frutos y corteza del tallo.
Ciudad de lea.
11
CAPÍTULO 11: GENERALIDADES
• Reino: Plantae
• División : Magnoliopsidas
• Orden: Fabales
• Familia: Fabaceae
• Género : Prosopis
lea).
12
2.1.2 Sinónimia botánica:
reducidas de bosques.
13
2 .1.4 Descripción morfológica <2•4·7)
14
b. Las raíces laterales se extienden hasta por 60 metros por encima
de la superficie.
taninos.
• SEMILLAS: azucares
};;- Laxante:
};;- Diurético:
15
);> Hemostático:
);> Astringente:
degradación.
16
FRUTOS: Se obtiene algarrobina, champús, vinos, chicha, harina
carbohidratos.
en fibra.
17
construcciones rurales, cercos de los predios agrícolas, puertas,
productor obtenido.
18
carnosos) o bien cuando están completamente maduros (frutos
en estudio.
19
desarrollen microorganismos que puedan alterarlas y conseguir que
alimañas.
algunos que se degradan con mucha más facilidad que otros, por
cual debe cumplir con una series de exigencias que incluyen los
determinación microbiológica.
vegetales.
20
• Macromoñología.- Permite describir la moñología y características
minerales.
21
Los limites para las materias extrañas, se establecen en las
particular.
• Determinación de Cenizas.-
Dónde:
22
Fórmula de Cenizas Solubles en agua:
M2-Ma
Ca = Ml _ M x 100
Dónde:
M2-M
B = Ml-M x100
Dónde:
23
• Determinación de la Humedad Residual.-
tallos y raíces.
desecación)
H = MZ-Ml X 100 ]
[...___B_M2--M1____..
Dónde:
24
• Determinación de Sustancias Solubles .-
R.SOO.lOO
Ss =M (100- H)
Dónde:
25
2.3.4 Determinación Microbiológica.- <9>
bacteriano.
26
CAPiTULO 111: PARTE EXPERIMENTAL
• Probeta
• Baguetas
• Micropipeta
• Pipetas 1,5, 1O m l.
• Pro pipeta
• Placa Petri
• Tubos de ensayo
• Gradillas
• Luna de reloj
• "Espátula
• Bagueta
• Mortero y Pilón
• Cápsula de porcelana
• Crisol de porcelana
• Desecadora
• Molino manual
27
MATERIAL BIOLÓGICO:
EQUIPOS DE LABORATORIO:
• Baño maría
• Estufa
• Balanza analítica
• Balanza de precisión
• Mufla
OTROS MATERIALES:
• Papel de filtro
• Papel platino
• Papel Kraff
• Etiquetas
• Tijera
SOLVENTES Y REACTIVOS
• Diclorometano
• Etanol
• Agua destilada
• H2S040.P
• HCI Q.P.
28
• NaOH 5%
• Anhídrido acético
• Reactivo de Dragendorff
• Reactivo de Mayer
• Reactivo de Wagner
• Reactivo de Fehling
• Limaduras de magnesio
29
Flujograma No 1: Tratamiento y almacenamiento de la muestra
Í\
------------------------l
PROSOPIS PALLIDA "ALGARROBO"
(HoJ.4s~-~uTos-v---,l
l._ SEMILLAS J
--------------l
-1 ( Identificación
:--- 1
'-../
[--PULVERIZACióN--]
' 1
-~
(-------------------------- --------.,
!\ALMACENAMIENTO J
30
3.2 CARACTERÍSTICAS FARMACOGNÓSTICAS.- (s,a.9>
buen estado.
Ciencias Biológicas.
material vegetai.-
absorbente.
31
a.- Secado bajo Sombra:
diariamente
a. Secado a Estufa :
de recolección
Miranda Martínez M. & Cuellar Cuellar A., cada muestra fue sometida
32
Se llevó a concentrar en 35 ml. de diclorometano y se dejó en
se secó y pesó.
33
Flujograma N° 2: Marcha Fitoquímica
[ 5 g MATERIAL VEGETAL
1
J
Extraer con 35 m l. de Diclorometano por maceración durante 48 horas a
temperatura ambiente
FIL~RAR
í
- - - - - - - - - - - - -• - · ,'
! EXTRACTO DICLOROMETANO . RESIDUO SÓLIDO
'·'------------------------J 1
Extraer con 3 veces el peso del residuo en
volumen con etanol por maceracir durante 48 h
[FILTRAR )
1
r Secar y pesar
1
Medir volumen y calcular concentración
l FILTRAR 1
1
_1 1
RESIDUO SÓLIDO EXTRACTO ACUOSO
Secar y pesar y desechar Medir volumen y calcular concentración
34
3.3.2 Identificación de metabolitos secundarios <8•7>
EXTRACTO DICLOROMETÁNICO
grasos en un extracto.
ensayo.
DRAGENDORFF.
35
Ensayo de Mayer: El ensayo es positivo si aparece un precipitado
de color blanco.
acuosa.
de triterpenos y esteroides.
naranja.
36
Flujograma.N°3: Reacciones de identificación en extracto de
Diclorometánico
,--~------ ------------.
i \ Ir-·--.--~--- - - - -
¡ 5 mL.
! 5mL
! 1
ENSAYO DE SUDAN l
l ENSAYO DE LIEBERMAN-
(Aceites y Grasas) : BUCHARD
( --------------------l
15 mL
(Triterpenos y Esteroides)
\ '==---~--~~-=--~
! ENSAYO
DRAGENDORFF,MAYER Y
WAGNER
\
'
37
EXTRACTO ETANÓLICO
buchard, saponinas.
verde.
38
Ensayo para determinar Alcaloides.-
DRAGENDORFF.
de color blanco.
quinonas.
39
Ensayo para determinar Triterpenos y Esteroides.-
triterpenos y esteroides.
naranja.
40
Flujograma.N°3: Reacciones de identificación en extracto de etanólico
EXTRACTO ETANÓLICO
1
\
{2mL 2ml 2ml
2ml
1
,
E~SAYODE
CLORURO
ENSAYO
1 r
ENSAYO DE ENSAYO DE
.
FERRICO
DRAGENDORFF,
1 BORTRAGER ESPUMA
MAYERY
WAGNER (Quinonas) (Saooninas) ..1
(Fenoles/taninos)
(Alcaloides)
2ml
( 2ml \
1
ENSAYO DE LIEBERMAN
ENSAYO DE 1
BUCHARD
SHINODA l
'
l (Shinoda) l (Triterpenos y esteroides)
41
EXTRACTO ACUOSO
DRAGENDORFr.
de color blanco.
...;·
-·.·~
42
Tomar 1 mL del extracto etanólico, añadir 2-3 gotas de sorucíón
43
Solución B: Se pesan 150 g de tartrato de sodio y potasio y 40 g de
1000 ml.
la alícuota a evaluar.
Ensayo de mucilagos.-
Ensayo de saponinas.-
44
Flujograma.N°4: Reacciones de identificación en extracto de acuoso
EXTRACTO ACUOSO
1
2ml
r-2ml 2ml 2ml
ENSAYO DE
ENSAYO : ENSAYO DE ENSAYO DE
CLORURO
DRAGENDORFF, FEHLING SAPONINAS
FÉRRICO MAYERY
1 WAGNER (Azucares (Espuma)
\ (Taninos)
reductores) ../
(Alcaloides)
/
r¡ 10 ml
ENSAYO DE MUCÍLAGOS
,
(Fiavonoides)
45
3.3.3 Determinación de los Parámetros de calidad <8·9·10>
• Macro morfología.-
tamaño y condición.
fórmula: P= X.lOO
M
46
• Detección de Cenizas Totales.-
47
• Detecci-ón de Cenizas insolubles en Acido Clorhídñco.-
lavó el residuo con agua caliente hasta que el filtrado acidulado con
hora más y se filtró por papel. Se tomó una alícuota de 20ml que se
48
desecó en estufa a 1oso C durante 3h, se enfrió y se pesó. Se realiza
• Detección Microbiológica.-
levaduras.
en el Anexo N°2.
49
4
Escherichia coli por gramo máximo 10
No salmonella.
No· salmonella
50
CAPITULO IV: RESULTADOS
51
TABLA N°2: RESULTADOS DEL TAMIZAJE FITOQUÍMICO DEL EXTRACTO
DICLOROMETÁNICO DE LAS HOJAS, FRUTOS Y SEMILLAS DE PROSOPIS
PALLIDA (ALGARROBO)
Alcaloides Opalescente
(M ayer) + Opalescente - +
Alcaloides
(Wagner) - - -
Alcaloides Precipitado
( Dragendorff) + Precipitado - + anaranjado
anaranjado
Triterpenos y/o
estero id es + Coloración + Coloración Coloración
(liebermann- verde verde + verde
buchard) intensa Intensa
Quinonas
(Bomtrager) - - -
Leyenda: Presencia(+)
Ausencia (.::}
52
TABLA N°3: RESULTACOS DEL TAMIZAJE FITOQUÍMICO DEL EXTRACTO
ETANÓLICO DE LAS HOJAS, FRUTOS Y SEMILLAS DE PROSOPIS PALLIDA
(ALGARROBO)
Alcaloides + Opalescente - -
(Wagner)
Alcaloides + Precipitado - + Precipitado
( Dragendorff) anaranjado anaranjado
Triterpenos y/o
asteroides + Coloración Precipitado + Precipitado
(Lieberrnann- verde + verde verde
buchard) intensa
Flavonoides
(Shinoda) - - -
Quino nas
(Borntrager) - - - -
Taninos
Compuestos Coloración Coloración + Coloración
fenólicos + verde + verde verde
(Cloruro Férrico negruzca negruzca
5%)
..,..,...r• ·-
Saponinas
(Prueba - - -
Espuma)
Leyenda: Presencia(+)
Ausencia {-)
53
TABLA N°4: RESULTADOS DEL TAMIZAJE FITOQUÍMICO DEL EXTRACTO ACUOSO
DE LAS HOJAS, FRUTOS Y SEMILLAS DE PROSOPIS PALLIDA (ALGARROBO)
·'
Flavonoides + Coloración - -
(S hin oda} Amarillo
Azucares Precipitado Precipitado
reductores - - + verde + verde
(Feeling}
·Taninos
Compuestos Turbidez Turbidez + Verde olivo
fenólicos + +
· '(Cloruro Férrico
5%)
Saponinas espuma
(Prueba - - +
Espuma}
Mucilagos Consistencia Consistencia Consistencia
(Prueba de + gelatinosa + gelatinosa + gel atino~~
t·.
niucilagos} .,
Leyenda: Presencia(+}
Ausencia (-)
54
TABLA N°5: RESULTADOS DE LA CARACTERIZACIÓN DE LA DROGA CRUDA DE
RESULTADOS
ENSAYOS
Etanol-· ·~ ..
,__.-
·,J ~
.•'1"-·.
55
TABLA N°6: RESULTADOS DEL ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LA HOJAS FRUTOS Y
SEMILLAS DE PROSOPIS PALLIDA "ALGARROBO"
RESULTADOS
ANÁLISIS
Recuento de
Mohos y 104 UFC/g 45 X 103 UFC/g 16 x 102 UFC/g 1 X 102 UFC/g
levaduras
Leyenda:
56
DISCUSIÓN
57
En esta rnvestigaci6n se procedió ar lavado en primer lUgar con abundante agua
tenido sumo cuidado en todos los procesos tales como: recolección, desecación,
almacenamiento de la droga.
58
CONCLUSIONES
59
RECOMENDACIONES
60
BIBLIOGRAFÍA
Perú, 2006.
España.pp: 136-267
España.2000.
61
10. Miranda, M. Métodos de análisis de drogas y extractos. Instituto de Farmacia
http://www.fao.org/docrep/006/ad314s/AD314S01.htm
http://www.quimicaviva.qb.fcen.uba.ar/v8n3/pereiracabrera.pdf
alba y prosopis pallida *Fac. Agr. lnd., Univ-NAc. Nordeste, Cte. Fernández
15. Dra. C. Lérida Acosta de la Luz, Téc. Caridad Carballo Guerra, Téc. Raúl
01
62
17. Sánchez E, Fuentes L, Chávez D. Estudio fi:umacognóstieo de Justicia
pectoralis Jacq. var. stenophylla Leonard. Rev Cubana Plant Med. 2003,
8{3)
http://www.sanacea.es/blog/propiedades-nutritivas-medicinales-de-la-
algarroba/.
63
ANEXO N°1: CERTIFICACION BOTANICA
CE.RTIFICACIÓN BOTÁNICA
El Biólogo que suscribe certifica que la muestra VEGETAL, traída por las
señoritas: ANICAMA RAMOS DIANA JULISSA con DNI N° 45775014 y
GUERRA GALINDO SANTA ANITA con DÑI N° 43906554, pertenece a
la especie conocida con el nombre técÍi:ico de Prosopis pa/lida Humb & Bonpl
ex Willd "Huarango" o "Algarrobo" según clasificación sistemática de
Arthur Cronquist 1993. Por tanto se extiende la presente certificación a
pedido de las interesadas.
Reino: Plantae
División: Magnoliophytas
Clase: Magnoliopsidas
Orden: Fabales
Familia: Fabaceae
Género: Prospis
64
ANEXO N°2: DETERMINACIÓN MICROBIOLÓGICA DE HOJAS DE PROSOP/S
PALLIDA
ANALISIS RESULTADOS
OBSERVACIONES:
• La muestra analizada fue tomada por la persona que solicito en análisis
• El resultado se refiere únicamente a la muestra analizada
• Cualquier enmendadura anula el presente resultado.
65
ANEXO N°3: DETERMINACIÓN MICROBIOLÓGICA DE FRUTOS DE PROSOPIS PALLIDA
-. /:#"o""'-:a.._~
M ......
,,
F
Universidad Nacionai"San Luis Gonzaga" de lea
.
'
ANALISIS RESULTADOS
OBSERVACIONES:
• La muestra analizada fue tomada por la persona que solicito en análisis
• El resultado se refiere únicamente a la muestra analizada
• Cualquier enmendadura anula el presente resultado.
66
ANEXO N°4: DETERMINACIÓN MICROBIOLÓGICA DE SEMILLAS DE PROSOPIS PALLIDA
, ~owu.·....,,
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Universidad Nacional "San Luis Gonzaga" de lea
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
ANALISIS RESULTADOS
OBSERVACIONES:
La muestra analizada fue tomada por la persona que solicito en análisis
El resultado se refiere únicamente a la muestra analizada
Cualquier enmendadura anula el presente resultado.
Responsable
67