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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA


PRACTICA #9 PATOGENICIDAD Y VIRULENCIA

Objetivo
Observar y comprender los mecanismos de patogenicidad y virulencia de un grupo de
bacterias.

Diagramas de flujo:
 Catalasa
Sobre un portaobjetos
Sobre la gota de peróxido de
INICIO (limpio) se coloca una gota
hidrogeno colocar (con ayuda de
de peróxido de hidrogeno.
un asa estéril) un inoculo de la cepa

Cepas: Se coloca una muestra


S. aureus de cada una de las cepas.
S. pyogenes
K. pneumoniae
E. coli
P. aeruginasa  Reactivos : Observar si
M. lisodeikticus Peróxido de hidrogeno. existe
P. vulgaris  Material:
reacción.
B. subtilis Portaobjetos.
C. equi Asa bacteriológica.
S. typhi

 Coagulasa

Catalasa libre y ligada: agregar 0.5 Esterilizar el asa bacteriológica


INICIO mL de plasma en un vial. tomar una muestra de la cepa
S. aureus y suspender en el
plasma.
Catalasa ligada: colocar una gota de plasma
Cepa: en un portaobjetos y con un asa estéril
S. aureus agregar un inoculo de S. aureus y mezclar.

Mezclar e incubar a 37ºC por 2


Material: horas. (Revisar cada 15 minutos)
Tubo de ensaye. Observar si existe la
Cubreobjetos. formación de
Asa bacteriológica. coagulo o no en la
prueba.

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PALACIOS OSORIO MARIA FERANANDA GRUPO:2651 EQUIPO: 4
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 Hemolisinas
En su respectiva caja, sembrar
Preparar 2 cajas con ASC por estría y cuadrante las cepas S.
INICIO 5% pyogenes (Cubrir alrededor con
maskin) y S. aureus.

Cepas: Leer el tipo de


S. pyogenes Incubar a 37º C por 24
hemolisis.
S. aureus horas.

Material:
Placa de agar sangre.
Asa bacteriológica.

RESULTADOS Se genero al agregar peróxido


-Prueba de la Catalasa de hidrogeno a la muestra de
cepa contenida en el
ORDEN MICROORGANISMO Catalasa portaobjetos, es decir, si al
1 Klebsiella pneumoniae + agregar peróxido de
2 Staphylococcus aureus + hidrogeno se observó
3 Streptococcus pyogenes - burbujeo o efervescencia se
4 Bacillus subtilis + estableció como prueba
5 Micrococcus lysodeikticus + positiva. Y si por el contrario
6 Corynebacterium equi + esta no presento dicha
7 Salmonella typhi + característica se reportó como
8 Escherichia coli + prueba negativa.
9 Pseudomonas aeruginosa +
10 Proteus vulgaris +
NEGATIVO

POSITIVO

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-Prueba de la Coagulasa:
La determinación de
ORDEN MICROORGANISMO Coagulasa
coagulasa libre y ligada se
1 Staphylococcus aureus positiva evidencio mediante la
aparición de un coágulo en el
substrato empleado para la
identificación

-Prueba de la Hemolisis
ORDEN MICROORGANISMO Hemolisis La prueba de hemolisis se
1 Staphylococcus aureus Α-hemolisis realizó con la finalidad de
2 Streptococcus pyogenes β-hemolisis identificar en
Streptococcus pyogenes y
S. pyogenes
Staphylococcus aureus, la
producción de hemolisina,
enzima que lisa a los
eritrocitos. Por esta razón
se utilizo una placa de
Agar sangre.

S. aeureus

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ANALISIS DE RESULTADOS:
CATALASA:

ORDEN MICROORGANISMO Catalasa TIPO

1 Klebsiella pneumoniae + anaerobio


facultativo
La cepa de Streptococcus
aerobio y
2 Staphylococcus aureus + anaerobio pyogenes dio resultado negativo
facultativo a la prueba de catalasa, este
anaerobio
resultado puede atribuirse a la
3 Streptococcus pyogenes -
facultativo nula producción de la enzima
catalasa como mecanismo de
anaerobio
4 Bacillus subtilis + defensa de dicha bacteria. Esto
facultativo
no hace referencia a que la
5 Micrococcus lysodeikticus + anaerobio bacteria se encuentre
facultativo
desprotegida o no genere
6 Corynebacterium equi + aerobio mecanismos de defensa que le
7 Salmonella typhi + anaerobio den un grado de patogenicidad
facultativo y virulencia, si no que produce
anaerobio otras enzimas que le confieran
8 Escherichia coli +
facultativo dichas características, tal como
9 Pseudomonas aeruginosa + aerobio la hialuronidasa.

10 Proteus vulgaris + anaerobio


facultativo

La catalasa descompone el peróxido de


hidrogeno en agua + oxigeno

Bacterias que viven en ambientes aerobios requieren de catalasa (se encuentra en la mayoría de las
bacterias aerobias y anaerobias facultativas que contienen citocromo) para convertir el peróxido de
hidrógeno (Si se deja acumular, éste es letal para las células bacterianas) en agua y oxígeno
molecular.
También los neutrófilos y macrófagos utilizan el peróxido para destruir a los microorganismos
patógenos invasores, por lo que también les sirve a las bacterias la catalasa como factor de
virulencia.

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COAGULASA:

Se realizo prueba de coagulasa (libre y ligada) con Staphylococcus aureus. Se llevo


a cabo de dos maneras diferentes; en vial (para determinar ambas coagulasas) y
en placa (para determinar coagulasa ligada).

En cuanto a la determinación en placa de la coagulasa ligada, constituyo una forma


rápida de identificación del S. aureus, puesto que se observó aglutinación en el
sustrato. A pesar de ser más rápida, presenta inconvenientes como: dar un resultado
falso negativo o aparecer resultados falsos positivos por no leerse rápidamente.

Coagulasa libre: procoagulasa (enzima extracelular bacteriana) reacciona con


un factor activador presente en el plasma sanguíneo similar a la protrombina, dando
lugar a un complejo análogo a la trombina que reacciona con fibrinógeno formando
un coágulo de fibrina en ausencia de Ca2+. La fibrina se puede también depositar
en la superficie de los estafilococos, para protegerlos de la destrucción por las células
fagocitarias.

PRUEBA DE LA HEMOLISIS:
La hemolisina es una proteína de bajo peso molecular que
produce lisis de los eritrocitos, leucocitos y plaquetas
mediante la producción de poros en la membrana
citoplasmática.

La estreptolisina S es una hemolisina estable en presencia


de oxígeno, no inmunogénica y ligada a la célula que puede
lisar hematíes, leucocitos y plaquetas. se produce en
presencia de suero y es la responsable de la β-hemólisis
característica que se observa en el medio de agar sangre
La estreptolisina O es una hemolisina lábil al oxígeno,
capaz de lisar hematíes, leucocitos, plaquetas y células
cultivadas. Se forman con facilidad anticuerpos frente a la
estreptolisina O, una característica que la distingue de la
estreptolisina S, y son útiles para demostrar una infección
reciente por estreptococos.

La hemolisina α ataca las membranas de los eritrocitos, perforándolas y dejándolas porosas


permitiendo la
salida de iones potasio y la entrada de iones sodio y calcio lo que provoca la tumefacción y lisis de
la célula además de la reducción de la hemoglobina, a la globina y al grupo Hemo que así vez se
reduce en hierro y biliverdina, lo que da origen a un halo verde alrededor de las colonias, siendo
responsable así del origen de la hemolisis alfa.

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Conclusión:
Las enfermedades infecciosas tienen su origen en diferentes agentes como virus,
bacterias, hongos, etc.; los mecanismos por los que se transmiten y su
objetico(multiplicarse)son los mismos. Por esta misma razón son conocidos como
microorganismos patógenos. Cualquier bacteria puede ser patógena, aunque cabe
destacar que no todos los microorganismos que colonizan una superficie corporal
son capaces de invadir y dañar al hospedero. Así surgen dos términos importantes:
•Patogenicidad: Capacidad de un agente infeccioso de producir enfermedad en un
huésped susceptible.
•Virulencia: Grado de Patogenicidad de un agente infeccioso.
Algunos factores de Patogenicidad y virulencia de los principales microorganismos
analizados en esta práctica (Staphylococcus aureus y Streptococcus pyogenes):

Con respecto a la catalasa, los microorganismos que requieren la presencia de


oxígeno para llevar a cabo sus reacciones metabólicas es decir como aceptor final
de electrones, invariablemente se encontraran, con productos tóxicos derivados del
oxígeno, como radicales superóxido y peróxido cuya acumulación es fatal en
estos microorganismos, sin mencionar además de que neutrófilos y macrófagos
tienen estas mismas sustancias toxicas para lisar y destruir a los microorganismos
patógenos.
En cuanto a la coagulasa se sabe que el hospedador genera coágulos de fibrina
en una región invadida por microorganismos y rodea al microorganismo para así
evitar su propagación por el cuerpo; pero algunos microorganismos son capaces
de generar enzimas fibrinolíticas para disolver los coágulos, como, por ejemplo
Streptococcus pyogenes que produce estreptoquinasa.
Por otra parte, hay microorganismos que producen enzimas que estimulan la
coagulación de la fibrina (coagulasa), haciendo que se deposite sobre ellos fibrina
protegiéndolos del ataque de las células del hospedador uno ejemplo de esto es
Staphylococcus aureus.

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Las hemolisinas constituyen un factor tanto de Patogenicidad como virulencia


para muchas cepas de microorganismos, además de que es un carácter distintivo y
que ayuda a la identificación de las cepas. Cabe destacar que las hemolisinas no
solo atacan la membrana de los eritrocitos sino cualquier membrana por lo que
fomenta aún más su virulencia. Para concluir finalmente los factores de
patogenicidad y virulencia ya sean inherentes en la bacteria o que les hayan sido
transmitidos por plásmidos o bacteriófagos; permiten la identificación de bacteria y
grupos de microorganismos así mismo representan un foco de alarma ante la
capacidad que tienen estos microorganismos de causar enfermedades que lleven
un alto riego para la salud o la vida.
Referencias:
 Murray. Microbiología medica. HARCOURT BRACE. Barcelona. 1997.
 Levinson. Microbiología e inmunología medicas. Editorial El manual moderno, S.A. de C.V. México D.F.
1992.
 PATOGENICIDAD BACTERIANA. Available
at:http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/bacteriologia/patogenicidad.php[Accedido
5 de marzo de 2019].
 Benson H. Microbiological applications : laboratory manual in general microbiology : complete
version. 8º ed. Boston [etc.]: McGraw-Hill; 2002

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