Facultad de Ciencias Biológicas

Escuela Profesional de Ingeniería Pesquera

PRACTICA N°2: CULTIVO DE CHLORELLA

Docentes:
Ing. Olger Acosta
Ing. Karina Nina

Perteneciente a: Erla Doreli Tanco Vásquez

Turno: Martes de 07:00 a 8:40 a.m.

Arequipa 2018
 PRACTICA N°2
CULTIVO DE CHLORELLA
1. INTRODUCCION
La importancia del micro algas es variada debido a sus altos contenidos de
nutrientes que tienen, pero a principal importancia de que los micros algas son una
fuente de alimento para las especies que se pueden cultivar mediante la maricultura.
La Chlorella es un alga unicelular que existe desde hace más de dos mil
quinientos millones de años sobre la tierras, cual ha soportado los diversos cambios
climáticos y las catástrofes natura para no desaparecer. La Chlorella, un auténtico
campeón del a supervivencia, forma parte de las primeras formas de vida aparecidas
sobre la tierra fue identificada por el biológico holandés M.W. Beijerinck, en el año
de 1980.
La Chlorella necesita para su desarrollo, un eterno con un medio ambiente
adecuado y óptimo; luz solar intensa y buenas condiciones climáticas, lugares con
condiciones favorables y baja contaminación ambiental. Por lo tanto el presente
informe tiene como objeto fundamental mostrar los métodos de cultivos de la
microalga Chlorella y su bendición en el cultivo como alimento para las especies
marinas y de agua dulce.

2. OBJETIVO

 Conocer los métodos de cultivo de la microalga Chlorella y sus beneficios en

el cultivo para especies marinas y de agua dulce.

3. Marco Teórico
3.1. Antecedentes
Lopez et al. (2015) Se evaluó la producción de biomasa y pigmentos, de
una cepa autóctona de Chlorella vulgaris aislada de una laguna de altura del NOA
y cultivada en dos medios diferentes: Tratamiento B: medio sintético de Bold y
Tratamiento G: gallinaza de codorniz diluida en agua destilada. Obteniéndose
que la producción de biomasa de la cepa nativa de C. vulgaris fue
significativamente superior al utilizar como fuente de nutrientes el tratamiento de
gallinaza de codorniz
 Infante et al. (2012) Estudio el crecimiento de Chlorella sp., un alga
microscópica, ampliamente distribuida en aguas marinas, con el fin de
observar su comportamiento en cultivo por lote. Obteniéndose
información acerca de la reproducibilidad de los ensayos realizados,
estableciéndose que se trata de un microorganismo de fácil propagación
posibilitando la aplicación de la microalga a diferentes estrategias para la
remoción de sustancias nocivas presentes en los ecosistemas.

Ortiz et al. (2011) identifico el medio de cultivo que permitiera un

máximo crecimiento de C. sorokiniana para su producción masiva,
evaluándose los medios de cultivo Sueoka, Guillard y Remital (fertilizante
NPK: 1, 2, 3, 4, 5g/L), que ofrecen nutrientes en condiciones autotróficas
y lixiviado de gallinaza en concentraciones del 30, 50 y 80%, en régimen
mixotrófico. Obteniéndose como resultado que Remital fue el mejor medio
de cultivo y las condiciones autotróficas fueron ideales para el crecimiento
de C. sorokiniana.

Vera et al. (2002) evaluó el crecimiento mixotrófico de Chlorella

sp. En medios enriquecidos con el exudado gomoso de Acacia tortuosa
utilizando cultivos discontinuos. Obteniendo como resultado que el
exudado gomoso de Acacia tortuosa constituye una alternativa viable, no
convencional, en la preparación de medios de cultivo, en presencia de
fosfato, para el crecimiento de Chlorella sp siendo de alcance importante
puesto que es fácil obtención y económico.

3.2. Informacion Complementaria

3.2.1. Generalidades sobre la Chlorella
La Chlorella sp. es un alga unicelular de color verde, de forma
esférica, con un diámetro que es entre 100 y 1.000 veces menor a 1 mm. El
color verde lo obtiene de los cloroplastos, que son las estructuras encargadas
de realizar la fotosíntesis. Esta característica le da nombre Chlorella al
género, que significa pequeña verde (CEIBAL, s.f.).
 Gracias a la fotosíntesis, forma parte de la base de la cadena
alimenticia. Se reproduce muy rápidamente y de forma asexual. Para eso
precisa el carbono que obtiene de la fotosíntesis, agua, luz y pequeñas
cantidades de minerales. Debido a su rápido crecimiento, se estudia la
posibilidad de que sea utilizada para producir biodiesel. Contiene grandes
cantidades de proteínas, vitamina C, betacaroteno y vitaminas B (B1, B2, B6
y B12). Es utilizada para fabricar suplementos alimenticios, productos
cosméticos contra el envejecimiento, para estimular el sistema inmune y para
la desintoxicación de metales pesados (CEIBAL, s.f.) .

3.2.1.1. Taxonomía de la Chlorella sp.

Orden: Chlorococcales
Familia: Oocytaceae
Género: Chlorella

3.2.2. Parámetros a Considerar en un Sistema de cultivo

3.2.2.1. Luz
La intensidad lumínica es uno de los principales parámetros
a considerar en un cultivo puesto que en ausencia de limitación por
nutrientes, la fotosíntesis se incrementa con el aumento de la
intensidad lumínica, hasta alcanzar la máxima tasa de crecimiento
específica para cada especie en el punto de saturación por luz. Sin
embargo si se alcanza el punto de fotoinhibición, se puede obtener
resultados perjudiciales para la misma célula e incluso la muerte,
implicando pérdida de eficiencia fotosintética y productividad del
cultivo (Hernandez & Labbe, 2014)

3.2.2.2. Temperatura
La producción algal aumenta proporcionalmente con la
temperatura hasta alcanzar la temperatura óptima de cada especie.
Por encima de esta, aumenta la respiración y la fotorrespiración
reduce la productividad global. La temperatura óptima varía entre
las especies, pero en general está entre 28° y 35°C (Hernandez &
Labbe, 2014).
3.2.2.3. pH y CO2
El pH del cultivo está influenciado por varios factores como
la productividad algal, la respiración, la alcalinidad y composición
iónica del medio de cultivo, la actividad microbiana autotrófica y
heterotrófica y la eficiencia del sistema de adición de CO2.
Cada especie necesita un rango determinado de pH que
permita un crecimiento óptimo, siendo pH 8 el más indicado para
especies dulceacuícolas. Por encima o debajo de éste, presentan un
descenso en la productividad, que no solo afecta el crecimiento
algal, sino también la capacidad de remover el nitrógeno en
sistemas de tratamientos de aguas (Hernandez & Labbe, 2014).

3.2.2.4. Nutrientes
El nitrógeno es el nutriente más importante para los micros
algas (después del carbono) y se incorpora como nitrato (NO3-) o
como amonio (NH4+). Es también un factor crítico para regular el
contenido de lípidos de los micros algas, cuando el nitrógeno se
convierte en el factor limitante del crecimiento, la acumulación de
los niveles de lípidos aumenta en más de 40%. Sin embargo,
usando la limitación de nitrógeno para estimular la acumulación de
lípidos en las células de algas, a menudo reduce la producción de
algas, lo que sugiere que alto contenido en lípidos y alta
productividad, pueden ser mutuamente excluyentes (Hernandez &
Labbe, 2014).
El fósforo es fundamental en muchos procesos celulares,
tales como la formación de ácidos nucleicos y transferencia de
energía. Aunque el contenido en fósforo de los micros algas es
menor al 1%, su deficiencia en el medio de cultivo es una de las
mayores limitaciones al crecimiento. En los medios de cultivo
2-
suele incorporarse en forma de HPO4 o HPO4 (Hernandez &
Labbe, 2014).
 3.2.2.5. Oxígeno Disuelto
La intensa fotosíntesis realizada durante el día en sistemas
de cultivo puede aumentar los niveles de oxígeno disuelto a
saturación > 200%. Se cree que una elevada saturación podría
afectar la productividad de algas (Hernandez & Labbe, 2014).

4. DESARROLLO
4.1. Medios de cultivo de Microalgas
4.1.1. Medio de cultivo “Sueoka”
El medio Sueoka se compone de los siguientes elementos (Ver Tabla
1). Siendo este medio de cultivo conocido también como Medio
Mínimo para el cultivo de Chlorella en cámara, además de ser más
económico que el Medio de Cultivo TAP o Tris Minimal
(ChlamyCollection, s.f.).
4.1.1.1. Soluciones
Sal Sol. Madre Dilución
(g/L) ml/L
Solución 1
NH4Cl 16.00 25
CaCl2 2H2O 2.04
MgSO4 4.00
Solución 2
K2HPO4 37.42 25
KH2PO4 14.52
Solución Trazas
EDTA 1
ZnSO4 7H2O 50.00
H3BO3 22.00
MnCl2 4H2O 11.40
FeSO4 7H2O 5.06
CoCl2 6H2O 4.99
CuSO4 5H2O 1.61
(NH4)6Mo7O24 1.57
1.10
Tabla 1. Medio Mínimo (Sueoka, 1960) para el cultivo en cámara de
Chlorella.
Fuente: Manual de Maricultura Vegetal.

4.1.1.2. Procedimiento
Según ChlamyCollection (s.f.) para realizar el medio final,
se mezcla los compuestos de acuerdo a lo siguiente:
 5 ml de la primera solución (sales)
 5 ml de la segunda solución (fosfatos)
 1.0 ml de la tercera solución (elementos de traza) en un
1 litro de agua.
El acetato de Sodio puede ser añadido a 1.2 g/litro
(anhídrido) o 2.0 g/litro (hidrato). Para un medio sólido, añadir 15
g de agar por litro. Además el extracto de levadura puede ser
 añadido al medio solido en 4.0 g/litro. Todos estos ingredientes
pueden ser añadidos antes a la autoclave.
No es recomendable añadir el extracto de levadura al medio
líquido, ya que alienta el crecimiento excesivo de bacterias
contaminantes.

4.1.2. Medio de Cultivo “F/2 de Guillar”

El medio F/2 de Guillar se compone de los siguientes elementos (Ver
Tabla 2).

4.1.2.1. Soluciones
Sal Sol. Madre
(g/L)
Solución 1
NaNO3 75.00
Solución 2
NaH2PO4.H2O 5.00
Solución 3
Na2SiO3.9H2O 30.00
Solución Trazas
Na2SiO3.9H2O 3.50
Na2EDTA 4.36
Tabla 2. Medio de cultivo F/2 de Guillard utilizado para el cultivo de
algas en criaderos de bivalvos (1975)
Fuente: Cultivo de Bivalvos en criadero. FAO (2006)

4.1.2.2. Procedimiento:
Según Helm & Bourne (2006) disuelva en 900 ml de H2O destilada.
Añada 1 ml de cada una de las siguientes soluciones de metales
traza:
 CuSO4.5H2O - 0,98 g por 100 ml
 ZnSO4.7H2O - 2,20 g por 100 ml
 CoCl2.6H2O - 1,00 g por 100 ml
  MnCl2.4H2O - 18,00 g por 100 ml
 Na2MoO4.2H2O - 0,63 g por 100 ml

Prepare 1 l con H2O destilada (pH ca. 2,0).

Añada 1 ml por litro FSW de las soluciones anteriores

4.2. Beneficios del cultivo de Chlorella

Según Infante et al. (2012) y Ortiz et al. (2011) los beneficios del cultivo
de Chlorella son los siguientes:
 Facilidad en su cultivo, su alto valor nutricional, y sus amplios
rangos de tolerancia a niveles de ph, salinidad, temperatura y
luminosidad
 Es capaz de desarrollarse heterotróficamente, como también de
forma mixotrófico y bajo condiciones adecuadas de cultivo alcanza
una elevada tasa de crecimiento.
 Aplicado al tratamiento biológico de aguas residuales, probando su
efectividad en la remoción de nitrógeno, fósforo, demanda química
de oxígeno y metales
 Su uso como biosorbente, resaltan su abundancia, facilidad de
cultivo, presencia de sitios ligantes para iones metálicos

5. CONCLUSIONES
 Se conoció los métodos de cultivo de la microalga Chlorella y sus
beneficios en el cultivo para especies marinas y de agua dulce.

6. BIBLIOGRAFIA
CEIBAL. (s.f.). Biblioteca Plac. Ceibal. Uruguay.
ChlamyCollection. (s.f.). ChlamyCollection. Recuperado el 08 de Abril de
2019, de https://www.chlamycollection.org/Sueoka.html
Helm, M., & Bourne, N. (2006). Cultivo de bivalvos en criadero. Roma.
Hernandez, A., & Labbe, J. (2014). Microalgas, cultivos y beneficios.
Revista de Biología Marina y Oceanografía, 157-173.
 Infante, C., Angulo, E., Zarate, A., Flores, J., Barrios, F., & Zapata, C.
(2012). Propagacion de la Microalga Chlorella sp. en cultivo por lote: Cinetica del
Crecimiento Celular. Avances en Ciencias e Ingenierias, 159-164.
Lopez, F., Moraña, L., & Salusso, M. (2015). Aislamiento, identificacion
y cultivo de Chlorella vulgaris con potencial para suplemento nutricional de
peces. Salta.
Ortiz, M., Cortes, C., Sanchez, J., Padilla, J., & Otero, A. (2011).
Evaluacion del crecimiento de la microalga Chlorella sorokiniana en diferentes
medios de cultivo en condiciones autotroficas y mixotroficas.
Vera, A., Yepez, M., Martinez, M., & Leon de Pinto, G. (2002). Crecimiento
mixotrofico de Chlorella sp. cultivada en medios enriquecidos con el exudado
gomoso de Acacia tortuosa. CENIC Ciencias Biologicas, 33(1), 19-22.