Animales de Estudio en Hipertensión

REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.
org/revistas/redvet
2013 Volumen 14 Nº 11B - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n11113B.html
REDVET - Revista electrónica de Veterinaria - ISSN 1695-7504
Manejo reproductivo de las colonia de Rata Espontáneamente

Hipertensa (SHR) y su control Normotenso Wistar Kyoto (WKY) en el
bioterio del Instituto de Fisiología Celular de la Universidad Nacional
Autónoma de México - Reproductive management of colonies to
spontaneously hypertensive rat (SHR) and normotensive Wistar Kyoto
(WKY) in the Institute of Cellular Physiology , National Autonomus University
of Mexico.
Claudia Rivera C.1* Jefe Unidad Académica Bioterio
Rafael Hernández G.2 Jefe de Bioterio
Haidé Marin S.1 Médico Veterinario Zootecnista
1
Instituto de Fisiología Celular, Universidad Nacional Autónoma de México.
2
Instituto Nacional de la Nutrición y Ciencias Básicas Salvador Zubirán.
Email: crivera@ifc.unam.mx
RESUMEN
La Rata Espontáneamente Hipertensa SHR (del inglés Spontaneously Hypertensive Rat),

es una de las cepas endogámicas más utilizadas como modelo animal en el estudio de la
hipertensión esencial humana junto con su control normotenso, la rata Wistar Kyoto
(WKY). La reproducción de estas cepas endogámicas resulta muy difícil, siendo los
principales problemas el canibalismo de las crías y el abandono de las camadas,
asociado a su hipertensión, nerviosismo y consanguinidad. Sin embargo; en el Bioterio
del instituto de fisiología celular (IFC) este problema se ha reducido de manera
importante de tal forma que no representa un obstáculo para su reproducción. En el
presente trabajo se describe el manejo reproductivo con estas cepas de ratas, las
estrategias utilizadas como el uso de diferentes tipos de enriquecimiento ambiental (EA),
que ayudaron a tener éxito en su reproducción.
Es necesario tener un manejo que se adecue a las necesidades de la colonia que se

desea producir como es el caso de estas colonias de ratas donde las diferentes
estrategias utilizadas ayudaron a minimizarlos. Para reducir aún más las conductas
indeseables se propone: proporcionar un lugar tranquilo con el mínimo de variaciones
ambientales, evitar cambios frecuente de cajas en hembras próximas a parir y con crías
recién nacidas. Así como manipular diariamente crías demasiado pequeñas con el fin de
que presenten un mayor desarrollo corporal, se habitúen al contacto humano y hacerlas
mas dóciles.
Palabras clave: Endogamia, enriquecimiento ambiental, hipertenso, normotenso.
Keywords: environmental enrichment, hypertensive, Inbreeding, normotensive.
Manejo reproductivo de las colonia de Rata Espontáneamente Hipertensa (SHR) y su control Normotenso 1
Wistar Kyoto (WKY) en el bioterio del Instituto de Fisiología Celular de la Universidad Nacional Autónoma
de México
http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n111113B/111302B.pdf
REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet
1. INTRODUCCIÓN:
La hipertensión arterial es definida como un aumento en la presión arterial por encima de

140/90 mm Hg (la presión arterial normal es 120/ 80 mm Hg). Es una de las principales
causas de muerte en el mundo, afecta al 38% de la población mexicana, siendo una de
las primeras causas de muerte en el país, junto con la diabetes, obesidad y sobrepeso
forma parte de las principales enfermedades crónicas no transmisibles lo que refleja su
importancia en la salud pública.(1,2)
Imagen 1.
Rata en la caja de
termostato con el
manguito pletismógrafo
en la cola para proceder
a medir la presión
arterial.
Con el fin de encontrar posibles mecanismos y nuevos fármacos para esta patología, se
han desarrollado varios modelos animales tanto genéticos como inducidos (métodos
quirúrgicos, farmacológicos y por estrés).
Los modelos genéticos de hipertensión incluyen el uso de ratas endogámicas entre las
cuales están varias cepas: las SHR, Dahl sensibles y resistentes a la sal, Lyon, Praga,
SHR-SP*, SOHR*, recientemente se ha desarrollado una subcepa de SHR sensible a la
sal, aunque estas líneas consanguíneas pueden diferir en la genética, en condiciones
adecuadas las alteraciones celulares o mecanismos neurohumorales permiten el
desarrollo de hipertensión de manera espontánea en los animales adultos. (3) La rata
SHR es uno de los modelos genéticos que más se usan, de este modelo se ha obtenido
mucha información y los resultados pueden ser fácilmente reproducibles.
La cepa de ratas espontáneamente hipertensas o SHR por sus siglas en inglés

(Spontaneously Hypertensive Rat), comenzó a crearse en el año de 1963, en la
Universidad de Kyoto, por Okamoto y Aoki; quienes tras medir la presión sanguínea de
una colonia de ratas Wistar (en las ratas Wistar es en promedio de 120/84 mm Hg), por
medio de una técnica de pletismógrafo sin anestesia, encontraron un macho con
presión sistólica de entre 145-175 mm Hg y una hembra con presión de entre 130-140
mm Hg, fue seleccionada para el apareamiento con este macho; su descendencia fue
examinada para futuros apareamientos entre hermanos que presentaron de manera
sostenida presión sanguínea elevada, de este modo la presión arterial se incrementó
rápidamente con una meseta cerca de la sexta generación. Estas ratas presentaron
lesiones típicas de la hipertensión esencial humana, Okamoto y Aoki pensaron que
de México
podrían ser un buen modelo para el estudio de esta patología y los animales fueron
llamados ratas espontáneamente hipertensas (SHR). Finalmente la cepa fue obtenida en
Octubre de 1969, después de varias generaciones de apareamientos entre hermanos
seleccionados por haber presentado su presión sanguínea por encima de 150 mm Hg. (4)
Su control había sido mantenido por exogamia y la creencia de que una cepa
endogámica de ratas normotensas serían un control más adecuado para las SHR obligó
al desarrollo de la cepa Wistar Kyoto (WKY), misma que se consiguió en 1971 en
Japón.(5)
La rata SHR presenta muchas similitudes con la hipertensión esencial humana; en

ambos casos la hipertensión parece ser de carácter poligénico, los niveles plasmáticos
de catecolaminas están elevados en plasma lo que sugiere que la hipertensión puede ser
por alteraciones del eje simpático y médula adrenal, la presión sanguínea tiende a
elevarse con la edad, las mismas complicaciones observadas en el hombre como la
hipertrofia ventricular izquierda, dilatación y falla cardiaca congestiva, hemorragias
cerebrales, nefroesclerosis con deterioro de la función renal, fármacos antihipertensivos
de uso humano (reserpina, hidralazina, clorotiazida) han resultado ser útiles para el
control de la presión sanguínea en estas ratas, inicialmente no hay perturbaciones
patológicas en las primeras etapas de vida, ambos parecen tener parámetros normales
en todos los aspectos; excepto en la resistencia periférica total. (4,6)
La rata SHR también se utiliza en la investigación biomédica como modelo animal para
la ateroesclerosis, evaluación de fármacos antihipertensivos, TDAH* y toxicología,
resistencia a la insulina. (4,7,8)
Recientemente Saito et al; han encontrado que desarrolla trastornos inmunológicos

relacionados con la edad, además de lesiones similares a la poliarteriris nodosa humana,
haciéndola un posible modelo para el estudio de esta patología para la cual se
desconoce la causa. (9)
*SHR-SP: Rata espontáneamente hipertensa propensa a accidentes cerebrovasculares.

*SOHR: Rata espontáneamente hipertensa obesa.
* Trastorno de Déficit de Atención e Hiperactividad.
CARACTERÍSTICAS DE LAS CEPAS SHR Y WKY:
Son ratas albinas, en las SHR después de la tercera semana de edad la presión arterial
sistólica aumenta y se asocia a un engrosamiento de la pared de los vasos sanguíneos,
a partir de las 10 semanas su presión esta por encima de 150 mm Hg y es más severa
en machos que en las hembras. La hipertensión alcanza valores máximos (arriba de 180
mm HG) y se estabiliza alrededor de las 12 semanas de edad. (4,10)
En ratas SHR menores de 16 semanas de edad, el creciente estímulo baroreceptor

inhibe la actividad nerviosa simpática con la misma sensibilidad que se encuentra en las
ratas WKY, las ratas SHR viejas parece que pierden la capacidad de inhibir
completamente la actividad del nervio simpático. (10)
Lesiones observadas en la hipertensión esencial humana (hipertrofia cardiaca, vasos

sanguíneos, hemorragias, infartos cerebrales, nefroesclerosis), se presentan en la rata
SHR. Estas lesiones no se observan antes de los 3 meses de edad. Debido a estas
de México
complicaciones el promedio de vida de las ratas macho SHR en condiciones

convencionales es de 1-2 años, mientras que el de la WKY su control normotenso es por
lo menos de 2.5-3 años. La hipertensión se presenta de manera espontánea a partir de la
quinta semana de edad y se incrementa con la edad llegando a alcanzar valores
superiores a los 200 mm Hg (1,10)
Se ha encontrado que hay un déficit en la agudeza visual a los 40-66 días antes de la
aparición de la hipertensión. (11)
Aunque anatómicamente los glomérulos de ambas cepas son similares, la SHR tiene un
menor número de glomérulos, lo que resulta en una filtración glomerular reducida, esto
es consistente con la hipótesis de que el riñón desempeña un papel importante en la
hipertensión. (12)
Presentan resistencia a la insulina a partir de las 12 semanas de edad, así como una
elevada cantidad de ácidos grasos libres, asociado con una disfunción endotelial
caracterizada por un desequilibrio entre el Oxido Nítrico y la producción del
vasoconstrictor endotelina (ET-1). (13)
PROBLEMAS PARA SU PRODUCCIÓN:
Los problemas principales parecen ser un excesivo índice de canibalismo de madres

jóvenes de colonias de reciente creación hacia sus crías. Por lo que el estrés del
transporte y la adaptación al nuevo ambiente puede alterar el comportamiento normal de
la rata, lo que se refleja en respuestas anormales de la madre.
Este comportamiento de las ratas SHR también es consecuencia de una alta presión
sanguínea, sin embargo; se ha observado en otras cepas de ratas endogámicas como la
WKY por lo que el problema no es exclusivo de la cepa de ratas SHR.(4)
Los problemas observados en la reproducción de la cepa SHR y WKY en el Bioterio del

IFC desde su adquisición son:
• Canibalismo de las crías.

• Abandono de camadas.
• Baja prolificidad.
• Baja producción láctea.
• Bajo peso al destete.
CANIBALISMO EN RATAS:
El canibalismo (acto de comer a miembros de su propia especie) es una conducta que en

los animales domésticos no es necesariamente anormal, se produce en la naturaleza
bajo condiciones de adversidad, cuando se eliminan competidores de un área y hay
beneficios nutricionales, puede desarrollarse cuando los animales viven en hacinamiento
o en pobres sistemas de alojamiento. En los mamíferos tiene una baja incidencia y varía
con la especie animal, se ha descrito con mayor frecuencia en roedores y lagomorfos por
parte de los padres hacia las crías. En roedores se ha observado mayor predisposición
por cepas, lo que apunta a un factor genético, se piensa que puede ser debido al estrés,
las causas parecen ser multifactoriales. (14,15)
de México
Factores ambientales: ruidos de alta frecuencia, manipulación brusca, cambios

frecuentes de cajas, escasez de agua y alimentos o una dieta inadecuada pueden
predisponer a que las hembras ataquen y devoren a sus crías. Cuando en la madre se
provoca una reacción de urgencia, miedo y necesidad de escapar por un manejo brusco
o ruidos excesivos se causa la ruptura de el patrón entre madre-hijo ocurriendo el
abandono de las crías con el consiguiente canibalismo antes de ordenar el nido. También
puede desarrollarse como un vicio; por ejemplo: en los ratones el arrancarse los bigotes
puede ir acompañado de masticar las orejas o el pie y de ahí al total canibalismo. (15)
Factores propios de las crías pueden favorecer conductas caníbales, Schardein et al;
encontraron que ratas con malformaciones (falta de viabilidad) fueron preferentemente
víctimas de canibalismo en las primeras 24 hrs de vida, en comparación con las crías de
apariencia normal, parece que las madres tienen cierta capacidad de discriminar a las
crías sanas de las enfermas debido a señales táctiles, visuales y olfativas, aunque aún
no se comprende porqué crías normales aunque en menor medida fueron también
víctimas de canibalismo. El 86% del canibalismo ocurre después del parto y solo el 7%
de las crías fueron canibalizadas en los 2 o 3 días de edad. (16)
En roedores y otros mamíferos, la ingesta de la placenta es importante en la estimulación

de la conducta materna y cualquier interferencia con este acto podría dar lugar a la
alteración de la conducta materna. Otra explicación es que este comportamiento se deba
a desequilibrios hormonales por cambios bioquímicos intrínsecos de la madre. (16)
Burn et al; encontraron que la limpieza frecuente de cajas especialmente de hembras

recién paridas aumenta las probabilidades de canibalismo, debido al estrés causado por
el ruido, hay transferencia de olores entre cajas, se eliminan olores propios de las crías y
la madre, incluso pueden inducir partos prematuros.(17)
REPRODUCCIÓN EN RATAS:
La rata alcanza la madurez sexual en promedio a la edad de 2 - 3 meses, las hembras

son poliestricas continuas, con un estro de 4-5 días, un período de gestación de 20 - 21
días y el tamaño de la camada varía dependiendo de si las ratas son endogámicas (< 6
crías) o exogámicas (promedio 6-10 crías). (18, 19)
DEFICIENCIAS REPRODUCTIVAS DE LA CEPA SHR:
Las ratas SHR presentan muchos trastornos reproductivos, en las hembras SHR el
primer estro se retrasa, hay un menor número de óvulos liberados, retraso en la apertura
vaginal (46+/- 1 contra su control WKY 40+/- 1), disminución en el porcentaje de
gestaciones exitosas (69% contra 86% en WKY), mayor duración de la gestación y
menor tamaño de la camada (7.83 contra 10.4), mortalidad de 50% durante el primer
mes comparada al 24% del control, incluso presentan bajas concentraciones plasmáticas
de progesterona, LH y FSH. Los machos presentan reducciones en la fertilidad y
actividad copulatoria además de espermatozoides anormales. (20)
de México
CONDUCTA MATERNA EN RATAS:
La rata generalmente es muy buena madre, al nacimiento esta muy al pendiente de sus
crías, las lame para retirar membranas placentarias, estimular su respiración y otros
reflejos (micción y defecación).
La conducta maternal de la hembra es provocada por cambios hormonales (estrógeno,

progesterona, oxitocina y prolactina) y factores ambientales pueden alterar o inhibir esta
conducta por lo que no es típico de la madre matar a sus crías. (21)
Hembras que desde los primeros días de nacidas fueron artificialmente separadas de sus
madres por cortos o prolongados períodos de tiempo presentan deficiencias de atención
materna y estas conductas tienen influencia en el cuidado materno de las generaciones
posteriores. Esto puede ser por sensibilidad a las hormonas que normalmente sirven
para regular la expresión de genes y promover aspectos fisiológicos y de
comportamiento de atención maternal.(22)
CONDUCTA MATERNA EN RATAS SHR Y WKY:
Las crías SHR tienen un menor desarrollo físico (incluso la apertura de ojos y oídos se
retrasa un día comparado a su control) esto puede deberse a la pobre calidad de la
leche además no realizan una adecuada succión para su bajada. Se cree que para
compensar estos déficits las madres SHR pasan más tiempo con sus crías; el lamido
continúo hacia estas; tiene la función de estimular una mayor duración de la succión de
leche. Las madres WKY por el contrario pasan más tiempo lejos de sus crías. (23)
EFECTOS DE LA CONDUCTA MATERNA DE LAS SHR EN EL DESARROLLO DE

LAS CRÍAS:
Las madres SHR ejercen cierta influencia en el desarrollo de la hipertensión que

depende de predisposición genética y el medio ambiente materno neonatal
(hiperactividad de la madre). La estimulación táctil entre la madre y las crías puede
cambiar el desarrollo del sistema cardiovascular provocando cambios en la liberación de
la hormona del crecimiento y la enzima ornitina descarboxilasa de los tejidos, siendo
estas importantes reguladores del crecimiento y diferenciación celular en muchos
sistemas fisiológicos. (24, 25,26)
La leche materna de ratas SHR contiene nutrientes con acciones en la regulación de la

frecuencia cardiaca y el tono vasomotor de los animales jóvenes; presenta una mayor
cantidad de sodio que de potasio, menor cantidad de calorías y proteínas, lo que puede
contribuir a un menor desarrollo físico provocando diferencias en el peso y que su
descendencia presente hipertensión. (27,28)
Como se describe en párrafos anteriores, la reproducción de la SHR es muy difícil en

menor medida la de su control WKY.
Por lo que el objetivo del presente trabajo es describir el manejo reproductivo de ambas
cepas, así como las diferentes estrategias utilizadas que permitieron disminuir muchos
de estos problemas (conductas indeseables) lo que ayudo a su reproducción en el
de México
Bioterio del Instituto de Fisiología Celular de la Universidad Nacional Autónoma de

México.
DESCRIPCIÓN:
Antes de mencionar el manejo reproductivo y estrategias utilizadas en las colonias de

ratas se hará una breve mención sobre la medición de la presión arterial en ambas
cepas de ratas (SHR y WKY) así como; de las condiciones y rutinas de limpieza que se
utilizan en el Bioterio del IFC.
MEDICIÓN DE LA PRESIÓN ARTERIAL:
Para tener la certeza de que los animales utilizados en los experimentos presentan el
patrón de hipertensos es necesario realizar la medición de la presión arterial.
TIPOS DE MEDICIÓN:
Existen dos técnicas para medir la presión arterial, estas son la directa e indirecta.
TÉCNICA DIRECTA:
Requiere de una cirugía para la canulación de la arteria femoral. La cánula es conectada

a un transductor de presión que ha sido calibrado a un dispositivo de grabación. Esta
técnica es la medida más precisa de la presión sistólica y diastólica sin embargo tiene
varias desventajas en experimentos fisiológicos y no es particularmente útil para los
criaderos que deseen monitorear la presión sanguínea de los animales que están en
reproducción. La anestesia puede alterar la presión arterial y existe el riesgo de
infección. (4)
Imagen 1.
Rata en la caja de
termostato con el
manguito pletismógrafo
en la cola para proceder
a medir la presión
arterial.
de México
TÉCNICA INDIRECTA:
Esta técnica permite mediciones repetidas en varios animales, se pueden realizar

mediciones fiables si las condiciones durante la medición son estrictamente controladas.
Todos los sistemas indirectos requieren el uso de un brazalete o manguito de presión
para ocluir el flujo sanguíneo en un apéndice, en el caso de la rata la cola es el apéndice
más conveniente para ocluir el flujo sanguíneo arterial. Se coloca el manguito inflable en
la porción proximal de la cola y la presión en el manguito neumático que está conectado
a un manómetro de mercurio, se eleva por encima de la presión sistólica y luego se libera
lentamente (4)
Cabe señalar que es absolutamente esencial un sistema de calentamiento que favorezca

la vasodilatación periférica de las ratas, antes de realizar la medición.
Imagen 2.
Generación de señal en
el transductor para
realizar la medición.
La técnica indirecta es la que se usa en el Bioterio del IFC para monitorizar la presión
sanguínea de las ratas SHR y su control normotenso WKY. Se utiliza un medidor de
Presión LE 5007, Marca Pb Panlab s.I. Fabricado en España. El aparato tiene una
pantalla en la que se muestra el número de medición que se esta realizando, latidos por
minuto, valor sistólico y diastólico, el promedio de los dos valores, además nos indica el
momento exacto para presionar el Botón de Inicio para medir la presión sanguínea.
Contiene un portal para conectarlo a una PC. Cuenta con una memoria de 6000 datos y
esto nos permite poder consultar valores de mediciones anteriores, además si la
medición y la amplitud no es la correcta el aparato nos lo indica.
En promedio se hacen 2-3 mediciones por semana en machos de 7- 12 semanas.

Generalmente se toman como referencia 5 valores por medición, los cuales han sido
obtenidos después de haber eliminado el mínimo y máximo. Véase imágenes 1 y 2.
Para realizar esta técnica se requiere:
• Una almohadilla térmica.

• Un dispositivo de restricción para la rata.
• Una caja de termostato para calentar a las ratas.
• Un manguito pletismógrafo que se aplica en la cola de la rata.
de México
• Un transductor para detectar y medir la presión de oclusión.
CARACTERÍSTICAS PARTICULARES DE LA COLONIA IFC:
Solamente dos machos de todos los analizados han sido normotensos.
Edad en que desarrollan el cuadro clínico de hipertensión: 3 meses en adelante. Véase

imágenes 3,4, y 5.
Imágenes 3 y 4.
Hermanos SHR (macho y
hembra) con 3 meses de edad
que comienzan a desarrollar
anasarca y cianosis
Imagen 5.
Aspecto a la necropsia
comparado a una rata
Wistar exogámica (al
centro) de la misma edad,
ambos hermanos
presentaron congestión
hepática y cardiomegalia, la
hembra (señalada con la
tijera) presenta
cardiomegalia más
pronunciada.
de México
En el Bioterio del IFC se presentó un caso de un macho reproductor SHR que solamente
vivió 12 meses debido a todas las complicaciones derivadas de esta patología. Véase
imagen 6.
Imagen 6.
Aspecto a la necropsia de
un macho reproductor de 13
meses, se observa
congestión hepática,
hidropericardio e hidrotórax.
CONDICIONES DE ALOJAMIENTO:
El Bioterio del Instituto de Fisiología Celular de la UNAM se ubica en un edificio de dos

niveles, con un piso técnico en la parte superior y es de tipo convencional.
Cuenta con un diseño de doble pasillo en las áreas de producción cumpliendo con todas
las especificaciones técnicas que marca la NOM-062-ZOO-1999.
La colonia de ratas SHR y WKY se encuentra ubicada en la planta alta del Bioterio. Para
acceder a esta área es necesaria la autorización del personal académico responsable.
El sistema de control empieza desde las puertas de acceso principal que cuentan con
un sistema de cortinas de aire que funcionan como una primera barrera para evitar la
entrada de insectos o agentes contaminantes al interior de las instalaciones. Por la
puerta principal se tiene acceso a la recepción, área administrativa y bodegas y servicios
generales.
Existe una puerta exclusa que permite al acceso al cuarto de procedimientos y

congeladores para el almacenaje temporal de Residuos Biológico Infecciosos. La
eliminación de cadáveres es por medio de incineración siguiendo la NOM-087-
SEMARNAT-SSA1-2002. Pasando de esta puerta se tiene acceso al laboratorio, áreas
de baños y vestidores, cuartos de especies acuáticas, animales de entrega para
investigación, colonias de ratones transgénicos, conejos, área de lavado de planta baja,
montacargas, salida de emergencia y autoclaves. Una vez que el personal pasa esta
puerta tiene que dirigirse a la zona de baños para realizar el cambio de ropa y portar la
indumentaria requerida, que consta de pijama quirúrgica, escafandra y zapatos con suela
de hule antiderrapante.
La planta alta del edificio es un área restringida para el personal autorizado, alumnos de
servicio social o de estancia que ingresarán a los cuartos de producción de animales. En
de México
esta planta se ubica el transfer que funge como vestidor donde el personal debe retirarse
la indumentaria convencional y sobre su ropa interior colocarse el uniforme blanco que
consiste en pijama quirúrgica y zapatos blancos, limpiar sus manos con gel sanitizante y
colocarse zapatones, gorro, cubrebocas y guantes desechables (este material está
previamente esterilizado). En estas áreas no se permite llevar perfume, cadenas ni
accesorios de ningún tipo excepto anteojos. A partir de este punto ya se puede ingresar
al pasillo blanco y a las áreas de producción de animales.
Las colonias de producción de ratas SHR y WKY se ubican en el cuarto No. 2.
Limpieza de las cajas: el cambio del material de cama se realiza de dos a tres veces por
semana (lunes, miércoles y viernes) con el fin de mantener a los animales con la mejor
higiene. El cambio se realiza de la siguiente manera:
1. Con ayuda de un carro transportador se traen pilas de cajas, rejas, tarjeteros y

botellas de agua limpia del cuarto de irradiación al cuarto de reproducción.
2. Durante el cambio y después de este; el cuarto debe de mantenerse con las puertas
cerradas.
3. La mesa de trabajo se limpiar con desinfectante antes y después de trabajar con
animales.
4. Las jaulas de los animales que se van a cambiar se colocan y reemplazan una a
una sobre la mesa de trabajo.
5. Antes de iniciar el cambio de las jaulas el operador coloca gel sanitizante sobre sus
guantes, quita la rejilla y la pone sobre la caja limpia. Checa si los tapones están
sucios para cambiarlos por otros limpios.
6. Los animales se cambian sujetándolos de la base de la cola o con ambas manos en
el caso de crías y hembras gestantes.
7. Se les pone alimento y botellas de agua limpia.
Terminado el cambio de cama se procede a sacar las cajas, rejas y botellas sucias al
pasillo gris para que el personal del área de preparación de material las lleve al área de
lavado.
Las cajas que están hechas de plástico; son lavadas en cada cambio de manera manual
con agua corriente y utilizando una dilución de un limpiador desengrasante soluble en
agua y biodegradable (Power Plus) y enjuagadas con abundante agua.
Una vez limpias las jaulas, rejas y filtros se pasan por la pileta de inmersión y se dejan
escurrir para después colocar el material de cama previamente autoclaveado. La viruta
que se utiliza como encamado para estos animales es de origen nacional, libre de polvo,
marcas Cama Premium (Crigamex) y Cama Sanitaria (Bioinvert). Ya colocada la viruta
en la jaula se colocan en el pasillo de irradiación para que durante la noche reciban rayos
Ultravioleta.
La cama sucia y otros residuos no infecciosos son depositados en contenedores que se

encuentran en el exterior del Bioterio, Al abrir la puerta de salida se debe activar una
cortina de aire y se apaga hasta que la puerta sea cerrada.
Los cuartos del banco genético de ratas SHR y WKY se desinfectan mensualmente con
soluciones a base de fenoles (pisos, paredes, puertas y techos). Cuentan con
de México
recubrimientos en paredes y techos de pintura epóxica con productos biocidas para

evitar contaminaciones por el subsuelo, curvas sanitarias en paredes pisos y techos.
Están provistas de filtros para purificación del aire en los equipos de inyección y
extracción. Se cuenta con un sistema automatizado integral de Ventilación (Aire
Acondicionado, humidificación y calefacción) que mantiene la temperatura y la humedad
constante durante todo el año. Diariamente se monitorea la temperatura y la humedad
de cada área mediante la lectura de los termohigrómetros electrónicos en cada cuarto.
La temperatura se debe de mantener a 22°C +/- 2 con una humedad de 40 a 60%, estos
parámetros se imprimen en registros mensuales. En todos los cuartos de animales se
realizan de 10 a 15 cambios de volumen total del aire y existe presión positiva.
Se controla el fotoperíodo de los animales con luz artificial, de manera automática por
medio de controladores de horarios programados desde el tablero eléctrico se
proporciona 12 hrs luz/ 12 hrs obscuridad.
El agua proporcionada es filtrada y purificada con ozono para evitar que los animales se
contaminen con agentes infecciosos. A las ratas se les suministra un alimento comercial
de mantenimiento Marca PMI Lab Diet 5008 (se utiliza en colonias en reproducción) y
5001 a libre acceso. Ambas fórmulas cumplen con los requerimientos nutricionales
necesarios para el ciclo de vida de las ratas.
MANEJO Y CRÍA DE LAS COLONIAS SHR Y WKY:
Escenarios donde las madres matan a sus propias crías, se presentan tanto en hembras
jóvenes como experimentadas en colonias de reciente creación.
No parece haber una solución radical a este problema, la alternativa sugerida en la

literatura es la eliminación de las hembras que presentan este comportamiento, la
reducción de los ruidos fuertes y evitar la manipulación brusca de los animales así como
evitar cambiar al personal que atiende a los animales. En sucesivas generaciones este
problema tiende a reducirse.(4)
MÉTODOS DE CRUZAMIENTO:
Para su reproducción en el Bioterio del IFC se utiliza el sistema de apareamientos

hermanos con hermanas; es un sistema intensivo en el que las hembras están con el
macho durante el apareamiento y hasta que se diagnostica su gestación, después del
destete se les da un descanso de 8 días para volver a entrar en apareamiento.
Para formar una Unidad Reproductora (UR) se seleccionan animales de 2.5 a 3 meses
de edad, previo examen físico general. La Unidad Reproductora se conforma de un
macho y 2 a 3 de sus hermanas. Cada reproductor es identificado mediante el método de
muescas y perforaciones en las orejas, siguiendo un código numérico ya establecido.
Una vez identificados los animales se dejan en una caja jumbo con su respectivo
tarjetero que contiene varias tarjetas de identificación:
Una tarjeta es para identificar a los miembros de la UR y contiene la información de la

cepa (SHR o WKY), datos de la UR como fecha de nacimiento de los animales que la
integran así como el número que corresponde a cada una de las hembras.
de México
Se coloca en el tarjetero una tarjeta de identificación para cada una de las hembras que
contiene la siguiente información: cepa (SHR o WKY), número de hembra y fechas de
apareamiento, fechas de parto. Esta tarjeta se utiliza cada que una hembra queda
gestante como su método de identificación particular.
Generalmente a las hembras se les permite un ciclo productivo de 5 partos.
Ya que las cepas SHR y WKY son albinas se les asignó un código de color en las
tarjetas de identificación para localizaras fácilmente. Esto es: a las SHR les corresponde
una tarjeta verde y a las WKY una tarjeta azul. Véase imágenes 7 y 8.
Toda esta información también es anotada en la libreta de registros: UR, fecha de

apareamiento, fecha de nacimiento, número de parto, fecha de destete y observaciones,
quedando de la siguiente forma:
Unidad Apareamiento Fecha No. Fecha Observaciones

Reproductora Nacimiento parto destete
UR-1 16 JUNIO 09 22 JUL 09 01 Caníbal.
(1*1)
FN: 0309
Hembra:1
* (1*1) indica que se cruza la hembra número uno con el macho uno.
*FN: Fecha de nacimiento.
DIAGNOSTICO DE GESTACIÓN:
El diagnóstico de gestación se realiza por palpación abdominal a partir de los 14-16 días
después del apareamiento. Antes de proceder a realizarla se verifica la fecha de
apareamiento en la tarjeta de identificación de la hembra. Si quedó gestante, se saca de
la caja de reproducción que comparte con el macho y se coloca en una caja individual
con su respectiva tarjeta de identificación; se debe de estar al pendiente para que una
vez que haya parido se le coloque inmediatamente algodón dentro de la caja para que
formen su nido, la fecha de nacimiento se anota en la tarjeta de identificación de la
hembra así como en la libreta de registros.
TAMAÑO DE LA CAMADA:
En promedio el número de crías es de 5.51 para las SHR y de 5.47 para las WKY.
DESTETE:
Para el destete se deben de considerar: la edad y tamaño de las crías (que son muy
pequeñas comparadas a las Wistar exogámicas) esto plantea un dilema ya que
generalmente el destete se realiza a los 21 días; pero en ocasiones hay camadas en las
que las crías son muy pequeñas especialmente las SHR debido a la pobre calidad de la
leche y difícilmente sobreviven al destete; por lo que se dejan unos días más con la
madre (hasta que alcancen un mayor desarrollo).
Al momento del destete la madre se coloca en una caja limpia con su respectiva tarjeta
de identificación. Anotándose en la libreta de registros el total de crías así como el
de México
número de hembras y machos. Si la hembra es caníbal se anota en la columna de

observaciones (se le da un descanso de 2 días) de la libreta de registros y una segunda
oportunidad para que vuelva a entrar en apareamiento pero si repite esta conducta se
elimina.
Imágenes 7 y 8.
Cajas reproductoras con
su tarjeta de
identificación por código
de colores.
A la madre se le da un descanso de 8 días (se le pone una nota en su tarjetero que

indica la fecha de inicio del descanso). Una vez que ha transcurrido el descanso se mete
a apareamiento anotando la fecha en su tarjeta de identificación y la libreta de registros.
Al destete las crías se quedan en la caja que compartían con su madre y que contiene el
algodón del nido. También se les pone alimento en el piso, porque como son muy
pequeñas no alcanzan todavía el alimento que esta sobre la rejilla, el bebedero debe de
tener una pipeta larga para que las crías puedan beber agua fácilmente, se les hace un
tarjetero donde se anota la cepa a la que pertenecen, el número total de crías, así como
de machos y hembras, que se anota en fracción quedando como numerador el número
de hembras y como denominador el de machos, también se anota la fecha de nacimiento
de México
y la información correspondiente a los padres esto es; número de Unidad Reproductora

y el número de madre. En las cepas endogámicas esta información es muy importante y
se requiere para formar una nueva UR ya que permite saber que animales son
hermanos y por lo tanto candidatos para futuros reproductores. Véase imagen 9. La
información también se anota en la libreta de registros: fecha de destete y número total
de crías (machos y hembras).
Imagen 9.
Crías destetadas con
su tarjeta de
identificación y EA.
ESTRATEGIAS UTILIZADAS AL DESTETE:
Para evitar complicaciones al destete fue muy importante conocer la fisiología y el

comportamiento de las crías que se rige principalmente por la madre y compañeros de
camada, desde pequeños se forman vínculos sociales con apego a sus compañeros. Al
momento de disolver el grupo, las ratas muestran angustia de separación, que se
caracteriza por presencia de taquicardia, polipnea, la liberación de corticosterona y
vocalizaciones ultrasónicas. Los efectos de la separación se pueden prevenir mediante la
colocación de las crías en una cámara de calentamiento (una de las razones para usar
tubos de cartón) o con el contacto táctil con la misma especie. (18) Por lo que en el
Bioterio del IFC con estas colonias al momento del destete se deja la camada completa y
son separados por sexo hasta que tienen un mes y medio de edad.
Los dominios sensoriales termotáctiles pueden mediar las respuestas de las crías
durante la separación, el olfato es otro importante dominio sensorial que afecta el
comportamiento de las crías pues tienen preferencias de olores asociados con su madre
y el nido (razón para dejar a las crías en la caja que compartían con su madre y que
contiene el nido del algodón disminuyendo el estrés al destete), los componentes
fisiológicos de estos dominios sensoriales en ratas infantes incluyen opioides endógenos,
oxitocina y norepinefrina. (18)
Después del destete, se presenta un período crítico muy conocido en el desarrollo de la

rata llamado juego social. El juego social se caracteriza por comportamientos como
olerse, morderse, perseguirse, asearse se arrastran por encima o por debajo, boxean,
luchan. El "Pin" es considerado como la postura característica en el juego social en
de México
ratas: uno de los animales se establece con su superficie dorsal en el suelo con el otro
animal que se encuentra sobre el. El juego parece facilitar el desarrollo social de las
crías de rata, ya que ayuda a establecer la organización social del grupo, desarrolla la
capacidad de los animales para expresar y comprender las señales de comunicación y
facilita hacer frente a los conflictos sociales. Las ratas macho juegan más que las
hembras, mientras que las hembras parecen participar más en la preparación social.(18)
Esta reportado que la manipulación frecuente de las crías tiene consecuencias

favorables sobre su desarrollo. Hay una maduración más rápida del sistema nervioso
central, crecen más deprisa y muestran una coordinación motora antes que los animales
control que no son manipulados y al llegara a la edad adulta, los animales manipulados
muestran una menor respuesta de miedo al ser colocados en un ambiente desconocido y
por si fuera poco la manipulación aumenta la capacidad de aprendizaje, en comparación
con animales control, los animales manipulados muestran toda su vida una respuesta de
estrés más flexible y adaptada a la intensidad del factor estresante que la desencadena.
Por lo tanto el manejo de las crías tiene efectos positivos en los animales adultos. (18,29)
Como se menciona en párrafos anteriores estas cepas presentan un bajo desarrollo y

debido a que algunas de las crías son muy pequeñas al destete; buscando un mayor
desarrollo físico, se decidió implementar también una estimulación temprana (a partir de
septiembre del 2010) donde las crías son manipuladas diariamente durante 10 minutos
esto se hace hasta que tienen en promedio de 1.5 a 2 meses.
SEPARACIÓN POR SEXOS:
Cuando las crías tienen de 1 a1.5 meses de edad se separan (machos y hembras) en
cajas diferentes y se les hace una nueva tarjeta de identificación anotando los siguientes
datos: cepa, número de hembras o machos, fecha de nacimiento, UR y número de
hembra. La separación de machos y hembras es muy importante realizarla con el fin de
evitar gestaciones no controladas. Véase imagen 10.
Imagen 10.
Caja de machos SHR con
su tarjeta de identificación
después de separarlos
(1.5 meses) por sexos.
de México
ENRIQUECIMIENTO AMBIENTAL EN ROEDORES:
El EA consiste en introducir materiales en el medio ambiente de los animales con la

finalidad de estimular conductas lo más naturales posibles, mejorando su salud y
bienestar.
Ya que el ambiente de un animal consiste en una amplia gama de estímulos, incluyendo

el entorno social, de sus congéneres, humanos y medio ambiente físico tales como la
caja y su contenido; se recomienda que el EA debe satisfacer necesidades como
descanso, aseo y explorar, esconderse, buscar alimento y roer. Los seres humanos son
parte del entorno social de los animales de laboratorio y el manejo de los animales es un
aspecto muy importante en las rutinas de cuidado diario. El brindar material para formar
nido permite a los roedores llevar a cabo el comportamiento de construcción de nido.
Además el EA reduce los comportamientos estereotipados. (30)
El EA ejerce una variedad de efectos neuroquímicos, neuroanatómicos y conductuales

a largo plazo, aumenta el tamaño de la corteza cerebral incrementa las ramificaciones
dendríticas, mejora capacidades cognoscitivas y esto se ve funcionalmente ya que tienen
una mejor memoria, capacidad de aprendizaje y resolución de problemas, aumenta las
conductas exploratorias, disminuye la ansiedad. El enriquecimiento afecta de forma
diferente a machos y hembras, aumentando la exploración y reconocimiento social en
machos, más que en las hembras estas últimas tienen mayor actividad motora. (29, 31)
USO DEL ENRIQUECIMIENTO AMBIENTAL EN RATAS SHR Y WKY:
En el Bioterio del IFC las colonias de ratas SHR y WKY fueron fundadas en Abril del
2009 con pie de cría adquirido a Charles River Laboratories. Desde su fundación, la
MVZ encargada comenta que los problemas con los que se encontró para reproducir
estas cepas fueron el canibalismo de las crías, las madres las dejaban dispersas y
algunas crías morían de hipotermia por el abandono de la madre, también se presento
baja prolificidad, bajo peso de las crías al destete asociado a una baja producción láctea
principalmente en la rata SHR y en menor medida en la WKY.
Debido a la falta de éxito en la reproducción de estos animales y buscando resolver estos

problemas; observando el comportamiento de ambas cepas y conociendo los beneficios
del EA decidió utilizarlo en sus diferentes formas (físico, social, sensorial, nutricional), a
partir de enero del 2010.
El enriquecimiento físico consistió en el uso de algodón para hembras recién paridas que
les permite hacer nido, además de que mantiene juntas a la camada conservando mejor
su temperatura (véase imágenes 11 y 12), en crías recién destetadas el enriquecimiento
físico y nutricional consistió en usar tubos de cartón que simulan madrigueras para
esconderse, les permite roer, además de que mantiene mejor su temperatura, también
les sirven como un entrenamiento previo para que aprendan a introducirse en los
contenedores que se usan para medir la presión arterial, el enriquecimiento nutricional
consistió en esconder dos a tres pellets dentro de los tubos para estimular conductas de
búsqueda de alimentos. (véase imágenes 13 y 14), el enriquecimiento de tipo social
consistió en que al destete las crías no son separadas por sexos si no que la camada
completa se queda junta y es separada después del mes y medio, el enriquecimiento
sensorial consistió en que al destete se deja a la camada en la caja que compartían con
de México
su madre junto con el algodón del nido provocando que el olor se quede impregnado en
la caja y así disminuir el estrés.
Lo que se observo después de dichas estrategias fue que el ponerles algodón para que
formen nido disminuyó la muerte de recién nacidos por hipotermia, las madres al hacer
nido están más al pendiente de sus crías evitando el abandono de camadas, también
disminuyó la conducta caníbal de las madres, así como la mortalidad de las crías al
destete. En el caso de las crías recién destetadas los tubos de cartón actuaron como
aislantes térmicos, además de servir como un entrenamiento que prepara a las ratas
macho desde pequeñas para que aprendan a introducirse al contenedor que se utiliza
para realizar la medición arterial (a los 7-12 semanas).
Imagen 11.
La madre al hacer nido
presenta más atención con
el cuidado de sus crías.
Imagen 12.
Rata que ha formado nido con el
algodón.
de México
Imágenes 13 y 14.
Las crías usan los tubos
como madrigueras y para
roerlos.
DISCUSIÓN:
Durante mi estancia en la TP y al trabajar con estas cepas pude corroborar que el EA en

las ratas SHR y WKY favoreció la expresión de conductas maternas. Ocasionalmente se
siguieron presentando casos de canibalismo con mayor frecuencia en hembras
primerizas y de manera esporádica en hembras experimentadas (más común en la cepa
SHR) después de varios partos (cuarto o quinto). Sin embargo varios factores pudieron
haber influido en la presentación de dichas conductas hay que considerar que este
puede ser un comportamiento cepa-dependiente y que el canibalismo puede presentarse
después de que las crías han muerto, no necesariamente implica que la madre mate a
las crías para comérselas.
El hecho de que conductas caníbales se presenten con mayor frecuencia en hembras

primerizas y en partos subsecuentes desaparezca indica que se necesita que las
hembras adquieran experiencia.
CONCLUSIONES:
Es necesario tener un manejo y cría adecuados para una colonia de producción,

especialmente en cepas endogámicas donde hay baja prolificidad y por lo tanto las crías
son muy valiosas.
de México
De igual modo el analizar detalladamente los problemas que se estén presentando para
reproducir alguna colonia y tomar decisiones que ayuden a resolverlos.
Las estrategias implementadas con estas cepas en el Bioterio del IFC y el éxito obtenido,
pueden servir de ayuda para otros Bioterios que tengan los mismos problemas para
reproducirlas.
RECOMENDACIONES:
Se proponen otras soluciones para reducir aún más las conductas indeseables: evitar en
la medida de lo posible perturbar a la madre durante los últimos días de la gestación y
durante la lactancia con ruidos fuertes y cambios frecuentes de cajas.
Una vez que la hembra ha parido se recomienda asear la caja de alojamiento una vez a
la semana para conservar el olor del nido.
Evitar ruidos y no impregnar a los críos con olores humanos ya que el canibalismo ocurre
con mayor frecuencia en las primeras tres semanas de vida de las crías. Cuando se
manipula a la madre o a las crías durante la lactancia se recomienda frotarlas con el
material de cama sucio para que vuelvan a adquirir el olor del nido y evitar que la madre
los rechace.
Al momento de seleccionar futuras reproductoras con el fin de evitar problemas a futuro

se sugiere escoger hijas de hembras que hayan sido buenas madres; pues como se
menciona anteriormente el comportamiento materno influye en generaciones posteriores.
Para resolver el problema de crías demasiado pequeñas se sugiere seguir con la
manipulación diaria después del destete con el fin de que presenten un mayor desarrollo
corporal.
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REDVET: 2013, Vol. 14 Nº 11B

Este artículo fue presentado en PANVET 2012 y ahora está disponible en
http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n111113B.html
concretamente en http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n111113B./111302B.pdf
REDVET® Revista Electrónica de Veterinaria está editada por Veterinaria Organización®.
Se autoriza la difusión y reenvío siempre que enlace con Veterinaria.org® http://www.veterinaria.org y con
REDVET®- http://www.veterinaria.org/revistas/redvet
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Animales de Estudio en Hipertensión

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REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.

REDVET - Revista electrónica de Veterinaria - ISSN 1695-7504

Manejo reproductivo de las colonia de Rata Espontáneamente

La Rata Espontáneamente Hipertensa SHR (del inglés Spontaneously Hypertensive Rat),

Es necesario tener un manejo que se adecue a las necesidades de la colonia que se

Palabras clave: Endogamia, enriquecimiento ambiental, hipertenso, normotenso.

Keywords: environmental enrichment, hypertensive, Inbreeding, normotensive.

La hipertensión arterial es definida como un aumento en la presión arterial por encima de

La cepa de ratas espontáneamente hipertensas o SHR por sus siglas en inglés

La rata SHR presenta muchas similitudes con la hipertensión esencial humana; en

Recientemente Saito et al; han encontrado que desarrolla trastornos inmunológicos

*SHR-SP: Rata espontáneamente hipertensa propensa a accidentes cerebrovasculares.

CARACTERÍSTICAS DE LAS CEPAS SHR Y WKY:

En ratas SHR menores de 16 semanas de edad, el creciente estímulo baroreceptor

Lesiones observadas en la hipertensión esencial humana (hipertrofia cardiaca, vasos

complicaciones el promedio de vida de las ratas macho SHR en condiciones

PROBLEMAS PARA SU PRODUCCIÓN:

Los problemas principales parecen ser un excesivo índice de canibalismo de madres

Los problemas observados en la reproducción de la cepa SHR y WKY en el Bioterio del

• Canibalismo de las crías.

El canibalismo (acto de comer a miembros de su propia especie) es una conducta que en

Factores ambientales: ruidos de alta frecuencia, manipulación brusca, cambios

En roedores y otros mamíferos, la ingesta de la placenta es importante en la estimulación

Burn et al; encontraron que la limpieza frecuente de cajas especialmente de hembras

La rata alcanza la madurez sexual en promedio a la edad de 2 - 3 meses, las hembras

DEFICIENCIAS REPRODUCTIVAS DE LA CEPA SHR:

CONDUCTA MATERNA EN RATAS:

La conducta maternal de la hembra es provocada por cambios hormonales (estrógeno,

CONDUCTA MATERNA EN RATAS SHR Y WKY:

EFECTOS DE LA CONDUCTA MATERNA DE LAS SHR EN EL DESARROLLO DE

Las madres SHR ejercen cierta influencia en el desarrollo de la hipertensión que

La leche materna de ratas SHR contiene nutrientes con acciones en la regulación de la

Como se describe en párrafos anteriores, la reproducción de la SHR es muy difícil en

Bioterio del Instituto de Fisiología Celular de la Universidad Nacional Autónoma de

Antes de mencionar el manejo reproductivo y estrategias utilizadas en las colonias de

MEDICIÓN DE LA PRESIÓN ARTERIAL:

Requiere de una cirugía para la canulación de la arteria femoral. La cánula es conectada

Esta técnica permite mediciones repetidas en varios animales, se pueden realizar

Cabe señalar que es absolutamente esencial un sistema de calentamiento que favorezca

En promedio se hacen 2-3 mediciones por semana en machos de 7- 12 semanas.

• Una almohadilla térmica.

• Un transductor para detectar y medir la presión de oclusión.

CARACTERÍSTICAS PARTICULARES DE LA COLONIA IFC:

Solamente dos machos de todos los analizados han sido normotensos.

Edad en que desarrollan el cuadro clínico de hipertensión: 3 meses en adelante. Véase

El Bioterio del Instituto de Fisiología Celular de la UNAM se ubica en un edificio de dos

Existe una puerta exclusa que permite al acceso al cuarto de procedimientos y

Las colonias de producción de ratas SHR y WKY se ubican en el cuarto No. 2.

1. Con ayuda de un carro transportador se traen pilas de cajas, rejas, tarjeteros y

La cama sucia y otros residuos no infecciosos son depositados en contenedores que se

recubrimientos en paredes y techos de pintura epóxica con productos biocidas para

MANEJO Y CRÍA DE LAS COLONIAS SHR Y WKY:

No parece haber una solución radical a este problema, la alternativa sugerida en la

Para su reproducción en el Bioterio del IFC se utiliza el sistema de apareamientos

Una tarjeta es para identificar a los miembros de la UR y contiene la información de la

Generalmente a las hembras se les permite un ciclo productivo de 5 partos.

Toda esta información también es anotada en la libreta de registros: UR, fecha de

Unidad Apareamiento Fecha No. Fecha Observaciones

número de hembras y machos. Si la hembra es caníbal se anota en la columna de

A la madre se le da un descanso de 8 días (se le pone una nota en su tarjetero que

y la información correspondiente a los padres esto es; número de Unidad Reproductora

ESTRATEGIAS UTILIZADAS AL DESTETE:

Para evitar complicaciones al destete fue muy importante conocer la fisiología y el