UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIÁS

NÚCLEO LIVER
DISCIPLINA BIOTECNOLOGIA INDUSTRIAL

CINÉTICA MICROBIANA

Profa. Dra. Luciana Reis Fontinelle Souto

Goiânia, abril 2019

 Relembrando...

 Microrganismos

◦ Modos de obtenção

 Isolamento a partir de recursos naturais

 Compra em coleções de culturas
 Obtenção de mutantes naturais
 Obtenção de mutantes induzidos por métodos convencionais
 Obtenção de microrganismos recombinantes por técnicas de
engenharia genética
 Relembrando...

 Características desejáveis de microrganismos

 Elevada eficiência na conversão do S em P

 Permitir o acúmulo do P no meio
 Não produzir substâncias incompatíveis com o P
 Apresentar constância quanto ao comportamento fisiológico
 Não ser patogênico
 Não exigir condições de processo muito complexas
 Não exigir meios de cultura dispendiosos
 Permitir a rápida liberação do P para o meio
 Relembrando...

 Características desejáveis de meio de cultivo

 Ser o mais barato possível

 Auxiliar no controle do processo
 Não provocar problemas na recuperação do produto
 Os componentes devem permitir algum tempo de
armazenagem
 Ter composição razoavelmente fixa
 Atender as necessidades nutricionais
 Não causar dificuldades no tratamento final do efluente
 Cinética microbiana:
INTRODUÇÃO

Calor

Produtos
Substrato metabólitos
Célula
(S) (P)

Novas células
 Cinética microbiana:
INTRODUÇÃO

 Estequiometria da Reação Microbiana

◦ Equação geral

SUBSTRATO MICRORGANISMOS + PRODUTOS + Calor

Fonte de C, Metabólitos
N, O2, P, S, Enzimas
Minerais...
 Cinética microbiana:
FASES DE CRESCIMENTO

 Cinética de crescimento
◦ Fases:

1 Fase de Latência
2 Fase de Transição
3 Fase Exponencial
4 Fase de Crescimento Linear
5 Fase de Desaceleração
6 Fase Estacionária
7 Fase de Declínio
 ATIVIDADE

 Descreva cada fase do crescimento

microbiano
 Cinética microbiana:
VELOCIDADES DE CRESCIMENTO

 Cinética de crescimento
◦ Velocidades de crescimento

𝑑𝑋 velocidade de crescimento
𝑟′′′𝑋 = por unidade de volume de meio (g/Lh)
𝑑𝑡

1 𝑑𝑋 𝑟′′′𝑋 velocidade específica de crescimento (h-1)

𝜇= =
𝑋 𝑑𝑡 𝑋
 D

X C

(g/L)

1 dX
dX =
r =
x
' ''
C X dt
dt B C
(h-1)
(g/L h)

D
D
B A
A
Tempo Tempo
 Cinética microbiana:
VELOCIDADES DE CRESCIMENTO

 Velocidade específica de crescimento µ

◦ Linearização

lnX

t
 Cinética microbiana:
FATOR DE CONVERSÃO

 Fator de conversão de substrato em biomassa

𝑔𝑏𝑖𝑜𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑑𝑎 𝑋 − 𝑋0
𝑌𝑋/𝑆 = =
𝑔𝑠𝑢𝑏𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑜 𝑆0 − 𝑆

 Fator de conversão de substrato em produto

𝑔𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑡𝑜 𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑑𝑜 𝑃 − 𝑃0
𝑌𝑃/𝑆 = =
𝑔𝑠𝑢𝑏𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑜 𝑆0 − 𝑆
 Cinética microbiana:
EXERCÍCIO (1)
 1) O estudo em batelada da produção de etanol por
Zymomonas mobilis, apresentou os seguintes resultados:
Tempo (h) Conc. Celular Glicose Etanol (g/L)
(g/L) (g/L)
5 0,05 247 1,5
9 0,15 240 5,0
14 0,45 225 12
18 1,20 195 22
22 2,80 130 47
26 3,80 75 74
30 4,15 40 90
35 4,20 25 100

a) A velocidade específica de crescimento;

b) Os fatores de conversão de glicose em biomassa e glicose em etanol.
 Cinética microbiana:
EXERCÍCIO (1)

3
y = 0,1545x - 3,1068
2 R² = 0,8892

0
ln X

0 10 20 30 40 ln X
-1
Linear (ln X)
-2

-3

-4
tempo (h)
 Cinética microbiana:
EXERCÍCIO (1)

3
y = 0,1545x - 3,1068
2 R² = 0,8892

0
ln X

0 10 20 30 40 ln X
-1
Linear (ln X)
-2

-3

-4
tempo (h)

µ=0,1545 h -1
YX/S = 0,0203 gX/gS
YP/S = 0,4437 gP/gS
 Cinética de formação de
produtos

 Produto associado ao crescimento

 Cinética de formação de
produtos

 Produto não associado ao crescimento

 Cinética de formação de
produtos

 Produto associado e não associado (caso

geral)
 Velocidades Específicas

1 𝑑𝑋
 𝜇𝑋 = . Velocidade específica de crescimento
𝑋 𝑑𝑡

1 𝑑𝑃
 𝜇𝑃 = . Velocidade específica de formação de
𝑋 𝑑𝑡
produto

1 𝑑𝑆
 𝜇𝑆 = − . Velocidade específica de consumo
𝑋 𝑑𝑡
de substrato
 Relação entre Velocidades
Específicas e Fatores de Conversão

 Outra forma de calcular o fator de conversão

𝜇𝑋
𝑌𝑋/𝑆 =
𝜇𝑆

𝜇𝑃
𝑌𝑃/𝑆 =
𝜇𝑆
 Tempo de Geração e
Produtividade
 Tempo de Geração
◦ É o tempo necessário para dobrar a população
microbiana
 Em fase exponencial

ln 2
td =


 Produtividade
XF − X0 X0= Biomassa inicial;
P= XF= Biomassa final;
TF
TF= Tempo total de cultivo.
 Resolução de Exercícios

 Exercício 2) Em uma fermentação batelada a

volume constante foram obtidos os seguintes
dados experimentais:

Pede-se:
a) O tempo que o microrganismo leva para duplicar a sua
massa na fase exponencial de crescimento;
b) A produtividade máxima em células que pode ser obtida
desse processo.
 Influência da
concentração de substrato
 Lei de Monod

µmáx
(h-1)

S
 = m
KS + S

Ks = concentração pela qual a taxa de crescimento chega à metade de seu

valor máximo. Dá uma ideia da afinidade do microrganismo com o
substrato.

µmáx = velocidade específica de crescimento máximo.

 Influência da
concentração de substrato
 Lei de Monod

S
 = m
KS + S

 Outras Leis
◦ Lei de Teisser
 =  m (1 − e − S / k )

◦ Lei de Contois
S
 = m
K .X + S
 Inibição pelo substrato

 Lei de Andrews

S
 = m 2
S
KS + S +
KI

µ (h-1) Substrato inibidor

S (g/L)
 Inibição pelo substrato

 Limitações por dois ou mais substratos

 S1  S2 
 =  m   (...)
K + S  K + S 
 S 1  S 2 

Ex.: glicose e oxigênio

 Inibição pelos metabólitos

 Ex.: etanol, butanol, ácidos

  m .S  1 
 =  
 1 + P / K 

 K S + S  P 

  m .S  − K1P
 =  .e

 K S + S 

  m .S 
 =  .(1 − a.P)

 K S + S 