Agen kontras nanopartikel untuk computed tomography:

fokus pada misel

Abstrak
Computed tomography (CT) adalah teknik pencitraan seluruh tubuh berbasis sinar-X yang banyak digunakan dalam
kedokteran. Agen kontras yang disetujui secara klinis untuk CT adalah molekul kecil beryodium atau suspensi barium. Selama tujuh
tahun terakhir telah terjadi peningkatan besar dalam pengembangan nanopartikel sebagai agen kontras CT. Nanopartikel memiliki
beberapa keunggulan dibandingkan dengan agen kontras CT molekul kecil, seperti waktu tinggal genangan darah yang lama dan potensi
untuk pelacakan sel dan aplikasi pencitraan yang ditargetkan. Selain itu, ada kebutuhan untuk agen kontras CT baru, karena populasi
pasien dengan gangguan ginjal dan pasien hipersensitif terhadap kontras iodinasi. Misel dan lipoprotein, kelas nanopartikel yang
berhubungan dengan misel, telah diadaptasi sebagai agen kontras CT. Dalam ulasan ini kami membahas prinsip-prinsip pembentukan
gambar CT dan generasi kontras CT. Kami membahas kemajuan dalam mengembangkan agen kontras CT nanopartikel nontargeted,
bertarget dan pelacakan sel. Kami menampilkan agen berdasarkan misel dan digunakan bersama CT spektral. Dosis agen kontras besar
yang dibutuhkan akan memerlukan studi toksikologi yang cermat sebelum terjemahan klinis. Namun, bidang ini telah mengalami
kemajuan luar biasa dalam dekade terakhir dan kami berharap lebih banyak kemajuan akan terjadi dalam dekade berikutnya.

Pendahuluan
Agen kontras computed tomography (CT) yang disetujui saat ini untuk injeksi intravena adalah molekul kecil beryodium (1).
Sebagai contoh, iohexol memiliki inti benzena dengan tiga atom yodium untuk kontras CT dan tiga amida dan enam kelompok alkohol
untuk kelarutan air dan osmolalitas rendah (Gbr. 1A). Zat kontras yodium ini memiliki paruh darah pendek, tetapi sangat baik untuk
sejumlah aplikasi klinis seperti pencitraan vaskular, karena kecepatan pemindaian CT yang cepat (2). Namun demikian, berbagai elemen
memberikan kontras CT yang baik (3) dan sejumlah jenis formulasi telah diusulkan sebagai agen kontras CT alternatif selama bertahun-
tahun seperti chelate gadolinium atau cluster tungsten (4,5). Agen kontras nanopartikel untuk CT dikembangkan sedini 1980-an (6-10),
tetapi laporan tersebut jarang dan daerah tidak tumbuh (11). Khususnya, dua agen ini diujicobakan di klinik, tetapi tidak dilanjutkan
karena efek samping yang tidak dapat ditoleransi (12). Namun demikian, dalam lima tahun terakhir bidang ini sekali lagi menarik minat
yang signifikan, sebagaimana dibuktikan oleh pertumbuhan pesat dalam jumlah publikasi dan kutipan pada agen kontras partikel nano
untuk CT, dengan lebih dari 100 publikasi dan 2500 kutipan pada topik dari 2012 saja (Gbr. 1B, C).
Nanopartikel adalah partikel kecil yang memiliki satu atau lebih dimensi dalam skala nano, yaitu, dari 1 hingga 100 nm. Mereka
sering berbentuk bola, tetapi dapat memiliki banyak bentuk lain, seperti batang, kandang atau bintang (13-15). Nanopartikel sekarang
banyak digunakan dalam aplikasi medis, bidang yang dikenal sebagai pengobatan nano (16). Mereka dapat digunakan sebagai terapi:
Doxil adalah formula liposom doxorubicin yang disetujui oleh Badan Pengawas Obat dan Makanan AS (FDA) untuk pengobatan kanker
tertentu, misalnya (17). Aplikasi terapi lain untuk nanopartikel termasuk pengiriman siRNA atau ablasi termal (18,19). Partikel nano
juga digunakan sebagai pelacak atau agen kontras untuk berbagai metode pencitraan medis, seperti PET, MRI, photoacoustics dan
pencitraan fluoresensi. Nanopartikel oksida besi telah disetujui FDA untuk MRI sejak pertengahan 1990-an (20). Ada beberapa alasan
minat ini pada nanopartikel. Secara umum, partikel nano membawa muatan tinggi dari bahan yang menghasilkan kontras dibandingkan
dengan molekul kecil (21). Juga, beberapa nanopartikel, seperti besi oksida atau titik kuantum, menghasilkan kontras yang tidak dapat
diproduksi oleh molekul kecil (20,22). Tergantung pada sifat-sifat bahan pelapis mereka, nanopartikel dapat memiliki waktu paruh
sirkulasi darah yang panjang (23). Akhirnya, beberapa sifat / komponen dapat diintegrasikan ke dalam nanopartikel dengan relatif mudah
(24). Sebagai contoh, untuk beberapa jenis nanopartikel, penggabungan fungsi tambahan hanya membutuhkan penambahan mereka ke
bahan baku sintesis, tanpa diperlukan langkah-langkah tambahan (25)
Pengetahuan yang diperoleh dari menerapkan nanopartikel dalam pengaturan biomedis lainnya sekarang sedang diterapkan
pada pengembangan agen kontras untuk computed tomography (26). Skema agen kontras nanopartikel yang dirancang untuk CT
digambarkan pada Gambar. 1 (D). Bahan yang digunakan untuk menghasilkan kontras untuk CT biasanya di inti partikel. Elemen
penghasil kontras yang digunakan paling sering adalah yodium (27), emas (28) atau bismut (29), tetapi penggunaan berbagai elemen
seperti bromin (30) tantalum (31), platinum (32), ytterbium (33), yttrium (34), gadolinum (35,36), tungsten (1) dan lainnya telah
dilaporkan. Inti dilapisi dengan polimer, lipid, protein, silika atau senyawa lain yang menghasilkan kelarutan dalam media biologis dan
biokompatibilitas. Pelapisan dapat dimodifikasi dengan berbagai cara untuk memasukkan gugus penargetan (antibodi, protein, peptida,
aptamers dan sebagainya) (37-40). Sumber kontras untuk teknik pencitraan lain, seperti fluorofor untuk pencitraan neon atau kelat
gadolinium untuk kontras MR, juga dapat dimuat ke dalam nanopartikel (28,41). Akhirnya, lapisan atau inti juga dapat diisi dengan
obat-obatan atau asam nukleat untuk membuat apa yang disebut nanopartikel 'theranostic' (keduanya aktif secara terapi dan diagnostik)
(42,43). Berbagai jenis nanopartikel telah digunakan sebagai agen kontras untuk CT, seperti emulsi, liposom, misel, lipoprotein,
nanopartikel polimer dan nanopartikel logam padat. Misel dan lipoprotein, yang dapat dianggap sebagai bentuk misel, telah
menghasilkan hasil yang sangat baik sebagai agen kontras CT (28,44-48)
Agen kontras nanopartikel untuk CT memiliki beberapa aplikasi yang menarik. Seperti disebutkan di atas, fitur nanopartikel
adalah bahwa waktu paruh sirkulasi mereka telah dilaporkan selama 15 jam, sedangkan molekul iodinasi hanya beberapa menit (49).
Agen kontras CT yang beredar untuk waktu yang lama (50) dapat digunakan dalam aplikasi di mana injeksi berulang agen kontras
yodium diperlukan, seperti untuk penempatan stent. Partikelnano dapat digunakan untuk memungkinkan pelacakan sel in vivo (51).
Agen kontras nanoparikel CT target dapat mendeteksi ekspresi protein atau tipe sel dalam jaringan, misalnya mendeteksi kandungan
makrofag dari plak aterosklerotik (44). Nanopartikel juga dapat digunakan dengan teknik CT yang baru muncul, seperti CT spektral,
yang secara spesifik dapat mendeteksi agen kontras eksogen (52). Selain itu, nanopartikel dapat bersifat multifungsi sehingga dapat
memberikan kontras untuk beberapa modalitas pencitraan, misalnya, CT, MRI dan fluoresensi (28) atau memberikan efek terapi serta
kontras CT (19). Akhirnya, nanopartikel mungkin kompatibel dengan pasien yang media kontras iodinasi konvensional
dikontraindikasikan karena insufisiensi ginjal atau respons alergi (53)
Pada bagian berikut ini kami akan menguraikan proses CT-scan, pembentukan usia dan fisika kontras CT, dan memberikan
rekomendasi untuk evaluasi kontras yang dihasilkan oleh media baru. Kami akan membahas struktur / tipe nanopartikel dan
pengembangan agen kontras CT nanopartikel selama 30 tahun terakhir. Kami akan fokus pada contoh-contoh agen sirkulasi lama, agen
target, pelacakan sel dan agen yang digunakan bersama dengan CT spektral, dan akan menawarkan perspektif untuk masa depan
lapangan. Secara khusus kami akan menyoroti hasil dari agen kontras nanopartikel CT berbasis mikopark dan lipoprotein.

Formasi Gambar CT
Computed tomography dikembangkan pada 1960-an dan awal 1970-an oleh Godfrey Hounsfield dan Allan McLeod Cormack
(54). Komponen utama pemindai CT adalah sumber sinar-X dan array detektor. Sinar-X dipancarkan dari sumber sinar-X ke pasien, di
mana beberapa dari mereka diserap. Sinar-X yang melewati pasien kemudian menemukan susunan detektor, yang merekam fluks sinar-
X. Dalam salah satu konfigurasi yang lebih umum, sumber dan detektor berputar di sekitar pasien dengan cara yang disinkronkan
sehingga dapat membangun dataset 360 ° di mana penyerapan sinar-X oleh pasien dari semua sudut diketahui
Gambar 1 (A) Struktur kimia iohexol. Grafik peningkatan (B) publikasi dan (C) kutipan di bidang computed tomography (CT) dan nanopartikel selama 17
tahun terakhir. Data diperoleh dari pencarian 'computed tomography' yang disempurnakan oleh 'nanopartikel' di database Web of Science. Data direproduksi
dengan izin dari Thomson Reuters. (D) Penggambaran skematik umum dari agen kontras nanopartikel CT.

(Gbr. 2A) Gambar CT direkonstruksi dari dataset ini oleh komputer menggunakan algoritma. Rekonstruksi berbasis proyeksi belakang
yang difilter saat ini mendominasi; namun, saat ini, metode rekonstruksi berbasis model iteratif dan iteratif sedang diperkenalkan (55).
rekonstruksi memakan waktu berjam-jam (54). Pemindai modern memiliki sebanyak 320 baris detektor (56) dan memindai dengan cara
yang dikenal sebagai heliks, yaitu, sumber dan detektor terus berputar dan pasien terus-menerus dipindahkan keluar dari pemindai.
Pemindai baris 64 dapat memindai 14 cm di bawah 5 detik, sehingga memungkinkan jantung untuk dicitrakan saat ini (59).

Gambar 2 (A) Skema pemindai CT. (B) Gambar skala abu-abu dari jantung pasien yang telah disuntik dengan agen kontras beryodium. (C) Gambar jantung
pasien yang dibuat dengan warna palsu. Gambar direproduksi dengan izin dari Gottlieb dan Lima (57) dan Kramer (58).

Rekonstruksi set gambar membutuhkan waktu <1 menit. Gambar biasanya ditampilkan dalam skala abu-abu, yang tergantung
pada atenuasi jaringan / zat yang berbeda di bidang pandang (atenuasi adalah hilangnya intensitas sinar-X melalui interaksi dengan
materi). Zat pelemah sinar X yang lebih kuat tampak putih atau abu-abu terang, sedangkan zat pelemah lemah tampak abu-abu gelap
atau hitam. Misalnya, gambar CT jantung pasien muncul pada Gambar. 2 (B). Tulang-tulang, seperti tulang belakang di sebelah kanan
gambar, dan agen kontras di kolam darah melemahkan sinar-X dengan kuat dan berwarna abu-abu muda. Udara, yang secara lemah
melemahkan sinar-X, di depan dada pasien berwarna hitam, sedangkan jaringan, seperti otot jantung, berwarna abu-abu gelap. Tampilan
gambar sangat tergantung pada windowing yang digunakan, dengan nilai maksimum dan minimum ditampilkan dalam gambar yang
dapat disesuaikan secara bebas. Gambar juga dapat diproses menjadi rendering 3D dan ditampilkan dalam warna yang salah seperti pada
Gambar. 2 (C). Pada 2007 diperkirakan ada 10.460 pemindai CT yang dipasang di AS dan 69,5 juta pemindaian CT dilakukan (60).
Pada tahun 2008, 50,6% pemindaian dilakukan pada perut, 5,1% untuk sistem kardiovaskular, 13,1% untuk dada, 24,4% untuk otak,
3,4% untuk tulang belakang dan 3,4% untuk bagian lain dari anatomi (61).

Prinsip Generasi Kontras CT Sinar-X

Redaman sinar-X dan karenanya kontras gambar dihasilkan dari absorpsi diferensial atau hamburan sinar-X oleh jaringan.

Gambar 3 (A) koefisien atenuasi massa dari berbagai elemen. Data diunduh dari (66). (B) Distribusi energi foton dihasilkan dari tabung
sinar-X dari pemindai CT yang dijalankan pada 80 atau 140 kV. Diadaptasi dengan izin dari Galper et al. (63).
Sebagai Kontras yang disebutkan di atas, udara menyerap sinar-X sangat lemah, jaringan menyerap sinar-X sedikit dan tulang
menyerap sinar-X dengan kuat. Di klinik, agen kontras seperti molekul kecil beryodium disuntikkan secara intravena untuk melakukan
angiografi, misalnya, dan suspensi barium digunakan untuk pencitraan saluran pencernaan. Penyerapan dan hamburan sinar-X dikenal
bersama sebagai pelemahan, yaitu pengurangan fluks sinar-X atau jumlah foton sinar-X dalam berkas. Redaman sinar-X dalam CT
didefinisikan pada skala Hounsfield, di mana atenuasi zat apa pun diberikan dalam Unit Hounsfield dengan persamaan berikut:
attenuation (HU) = 1000 * (μx - μwater) / (μwater - μair)
Pada skala ini, redaman udara adalah -1000 HU, air adalah 0 HU, jaringan lunak berkisar antara -100 hingga 100 HU dan tulang
berkisar antara 400 hingga 1000 HU. Setiap elemen yang diberikan memiliki karakteristik, profil redaman sinar-X yang bergantung
pada energi, seperti yang ditunjukkan pada Gambar. 3 (A). Bahan menipiskan sinar-X melalui dua mekanisme utama, efek fotolistrik
dan efek Compton (62). Dalam efek fotolistrik, foton bertabrakan dengan dan mentransfer energinya ke elektron K-shell, biasanya.
Elektron kemudian dikeluarkan dari cangkangnya dan menempuh jarak pendek sebelum kehilangan energinya. Untuk energi foton yang
diberikan, efek foto-elektrik berskala dengan Z3 (Z menjadi nomor atom), yang dapat dihargai pada Gambar. 3 (A) di bawah 33 keV
atau di atas 90 keV. Ini akan menyiratkan bahwa elemen Z tinggi seperti emas (Z = 79) akan membuat kontras CT 3,3 kali lebih besar
daripada yodium (Z = 53). Namun, ini bukan masalahnya. Ini karena efek foto-elektrik juga sangat dipengaruhi oleh energi cangkang
elektron pada elemen. Jika energi foton sinar-X lebih kecil dari pada kulit elektron, interaksi fotolistrik tidak dapat terjadi; energi sinar-
X harus lebih dari energi kulit elektron. Probabilitas peristiwa fotolistrik maksimal pada energi kulit elektron dan menurun dengan
meningkatnya energi, berbanding terbalik dengan energi foton yang dikupas (1 / E3). Energi cangkang elektron K untuk yodium adalah
33,2 keV, sedangkan untuk emas berada pada 80,7 keV, menghasilkan atenuasi yang kuat untuk protein sinar-X lebih dari 33,2 keV
dalam energi, seperti dapat dilihat pada Gambar. 3 (A ). Fitur ini dikenal sebagai K-edge. Karena banyak pemindaian klinis dilakukan
pada tegangan tabung 80 kV, tepi-K yodium sangat berpengaruh pada atenuasi dan keuntungan atenuasi emas yang lebih besar dari nilai
Z-nya yang lebih tinggi dihapus, dengan atenuasi yang hampir sama dari dua elemen yang diamati dalam praktik (63,64).
Dalam efek Compton, foton sinar-X berinteraksi dengan yang lemah elektron terikat. Elektron menyerap sebagian energi foton
dan foton bergerak menjauh dari situs interaksi ke arah yang berbeda dan dengan energi yang berkurang, melemahkan berkas dalam
garis antara sumber dan detektor. Semua elektron dalam elemen nomor atom rendah terikat lemah, seperti juga sebagian besar elektron
dalam elemen nomor atom tinggi. Efek utama dari suatu elemen pada hamburan Compton, oleh karena itu, adalah kerapatan elektron.
Karena jumlah elektron sebanding dengan massa atom, kerapatan elektron dan karenanya skala hamburan Compton terkait dengan
kerapatan massa dan karenanya lebih tinggi untuk emas (d = 19,3 g / cm^3), misalnya, daripada untuk air (d = 1g / cm^3).
Udara dan jaringan terdiri dari unsur-unsur Z dan K-edge yang serupa (hidrogen, karbon, oksigen, dan nitrogen), tetapi udara
jauh lebih sedikit padat daripada jaringan, sehingga memiliki atenuasi yang sangat rendah, yang berasal dari efek kompton yang rendah.
Tulang kaya akan unsur Z yang relatif tinggi untuk bahan organik, yaitu kalsium dan fosfor (Z = 20 dan 15, masing-masing). Karena itu
atenuasi tulang tinggi. Media kontras CT menggunakan elemen yang memiliki nilai Z jauh lebih tinggi daripada yang ditemukan dalam
tubuh, seperti yodium, emas barium, bismut, dan sebagainya. Keterbatasan CT adalah sensitivitasnya yang rendah terhadap kontras
dibandingkan dengan teknik pencitraan lainnya. Batas deteksi untuk CT adalah sekitar 10 ^ -3 M (63), sedangkan untuk MRI adalah
sekitar 10 ^ -5 M untuk chelates gadolinium dan untuk teknik nuklir sekitar 10 ^ -9 M (65). Ini karena, untuk CT, agen kontras sedang
dideteksi secara langsung terhadap sinyal latar belakang yang tinggi. Untuk MRI, agen kontras meningkatkan sinyal yang diamati dari
air secara katalitik, sedangkan untuk teknik nuklir tidak ada latar belakang. Sensitivitas rendah ini merupakan faktor utama dalam
pengembangan nanopartikel muatan sangat tinggi dan padat untuk CT.
Penting untuk mencatat karakteristik sinar-X yang dikirim ke pasien dalam pencitraan CT. Tegangan tabung sinar-X yang
digunakan berkisar antara 80 hingga 140 kV. Tegangan ini mendefinisikan energi maksimum dari foton sinar-X yang dipancarkan;
Namun, sinar ini terdiri dari kisaran sinar-X, dari sekitar 25 keV ke energi maksimum. Misalnya, spektrum sinar-X yang dipancarkan
ketika pemindai dijalankan pada 80 dan 140 kV digambarkan pada Gambar. 3 (B). Generator tabung sinar-X benar-benar memancarkan
sinar-X dari 0 keV hingga energi maksimum; Namun, sinar-X berenergi rendah sangat kuat diserap di kulit dan jaringan superfisial dari
pasien dan pada dasarnya tidak ada yang mencapai detektor, menghasilkan dosis radiasi yang tidak perlu kepada pasien. Oleh karena
itu filter Teflon atau aluminium ditempatkan di antara generator tabung sinar-X dan pasien yang menyerap sinar-X energi rendah dan
menghasilkan spektrum sinar-X yang ditunjukkan.
Kontras CT yang akan dihasilkan oleh suatu elemen karenanya tergantung pada karakteristik atenuasi dari 25 keV hingga energi
maksimum. Profil atenuasi elemen X-ray dapat diakses secara bebas online dari database NIST (66), dan profil atenuasi beberapa elemen
ditampilkan pada Gambar. 3 (A). Perbandingan, atau simulasi yang dijalankan pada distribusi sinar-X dan profil atenuasi akan
memberikan gagasan yang masuk akal tentang kinerja agen kontras pada energi yang berbeda. Sebagai contoh, tepi-K dari yodium
berada pada 33,2 keV, sehingga yodium memberikan kontras yang lebih kuat ketika dipindai pada 80 kV dari 120 kV, seperti dalam
kasus terakhir lebih banyak sinar-X berada di wilayah spektrum di mana yodium menyerap dengan buruk (63,64). Di sisi lain, K-edge
emas berada pada 80,7 keV, yang berarti ia menyerap sinar-X dengan kuat di wilayah 80-120 keV dan karenanya memberikan kontras
yang lebih kuat ketika dipindai pada 120 kV daripada di 80 kV. Emas menghasilkan sekitar 2,1 kali kontras iodin saat dipindai pada 120
kV (63).
Namun demikian, satu hal yang lebih penting untuk dicatat adalah bahwa sifat pembangkitan kontras suatu agen berbeda ketika
dipindai di udara dibandingkan dengan pada pasien. Ini karena jaringan dan tulang pasien menyerap sebagian dari sinar-X berenergi
lebih rendah dalam berkas, dalam proses yang disebut pengerasan berkas, dan oleh karena itu rata-rata energi sinar-X yang digunakan
agen kontras ditempatkan di dalam pasien meningkat. Untuk memungkinkan evaluasi agen kontras CT baru yang berhubungan dengan
situasi klinis, dan untuk membakukan perbandingan agen kontras, kami merekomendasikan langkah-langkah berikut (63-67):
• penggunaan pemindai klinis, yang bertentangan dengan CT mikro atau sistem sinkronisasi;
• menempatkan sampel dalam volume air yang kira-kira meniru ukuran dan bentuk pasien, tidak hanya memindai sampel di udara;
• menghitung ukuran yang disebut tingkat pelemahan, yang merupakan pelemahan dalam HU dibagi dengan konsentrasi agen dalam
mili molar, ditentukan dari pemindaian berbagai konsentrasi.
Mengingat redaman tergantung energi yang ditunjukkan oleh sinar-X, media kontras, dan perkembangan CT spektral, Hurrell
et al. baru-baru ini mengusulkan bentuk baru unit untuk kontras CT, yaitu unit spektral Hounsfield (68). Dalam unit-unit ini, energi rata-
rata sinar-X (dalam keV) dilambangkan dengan subskrip, misalnya, HU90, ketika energi rata-rata balok adalah 90 keV. Kami setuju
secara prinsip dengan unit-unit ini dan telah menyarankan modifikasi di mana rentang energi diberikan sebagai subskrip, misalnya,
HU25–140. Oleh karena itu tingkat atenuasi harus diberikan dalam satuan spektral Hounsfield, dalam bentuk HUXX-YY / mM (67).

Jenis dan struktur nanopartikel

Berbagai jenis nanopartikel telah dilaporkan untuk aplikasi biomedis, seperti liposom, emulsi, misel, lipoprotein, virus,
nanopartikel polimer, nanopartikel logam padat, silika, oksida logam atau garam lain, nanotube karbon, lembaran karbon graphene dan
sebagainya (21,25, 69–73). Untuk CT nanopartikel yang telah dipelajari terutama adalah struktur berbasis lipid (liposom, emulsi, misel
atau lipoprotein) (7,9,46,50,74,75), berbasis inti padat (logam, paduan logam atau garam logam) (29,32,49) atau kombinasi keduanya
(28,44,48). Struktur berbasis lipid sangat menarik sebagai nanopartikel untuk aplikasi biomedis karena kemudahan sintesis dan
dimasukkannya beberapa zat fungsional, serta biokompatibilitas umum (25). Ringkasan jenis nanopartikel berbasis lipid ditunjukkan
pada Gambar. 4. Liposom adalah agregat lipid yang dibentuk menjadi bilayer yang membungkus inti berair. Kargo fungsional dapat
dimuat di inti atau di lapisan lipid nanopartikel ini. Emulsi adalah tetesan kecil zat hidrofobik, seperti minyak, yang dienkapsulasi dalam
lapisan lipid. Emisi dapat dimuat dengan muatan dalam inti hidrofobik, lapisan lipid, atau inti itu sendiri mungkin fungsional.

Gambar 4 Penggambaran skematis sejumlah jenis nanopartikel yang terbentuk dari agregat lipid. Direproduksi dengan izin dari Mulder et al. (76).
Misel adalah lapisan tunggal lipid tertutup dengan lemak hidrofobik inti asam dan permukaan kutub hidrofilik. Lipid dalam larutan
dapat berubah menjadi misel ketika konsentrasinya melebihi konsentrasi misel kritis dari lipid yang dimaksud. Perbedaan antara lipid
yang membentuk misel dan lipid yang membentuk liposom terletak pada ukuran relatif dari ekor hidrofobik dan kelompok hidrofilik.
Jika headgroup jauh lebih luas daripada ekor maka molekul akan memiliki bentuk seperti kerucut dan akan membentuk misel. Di sisi
lain, jika headgroup dan ekornya memiliki lebar yang sama, maka bentuknya akan berbentuk silinder dan pembentukan liposom akan
disukai. Sebagai contoh, fosfolipid dengan ekor kecil, seperti rantai hidrokarbon tunggal, lebih cenderung membentuk sel mikro,
sedangkan fosfolipid dengan dua rantai hidrokarbon lebih cenderung membentuk liposom (77). Lipoprotein, khususnya lipoprotein
densitas tinggi, adalah nanopartikel alami yang mengangkut kolesterol dalam aliran darah (78). Mereka dapat dianggap sebagai bentuk
misel, yang terdiri dari lapisan lipid tunggal, ke mana tertanam protein amphipathic, dan dengan inti hidrofobik (71). Baik misel dan
lipoprotein telah dipelajari sebagai platform pengiriman obat / gen (79-82) serta agen atau pelacak kontruksi untuk MRI, PET dan
fluoresensi (25,83). Misel dan lipoprotein dapat difungsikan sebagai agen kontras CT dengan cara membentuknya dari lipid yang
mengandung atom-atom yang menghasilkan kontras, seperti iodin (46), atau dengan merangkum inti logam / garam logam yang dilapisi
secara hidrofobik, seperti emas atau bismut sulfida (28) , 48). Pada bagian berikut kami akan meninjau berbagai jenis nanopartikel yang
telah digunakan sebagai agen kontras CT dan akan menyoroti nanopartikel berbasis misel pada khususnya.

Nanopartikel Nontarget Untuk Pencitraan CT

5.1. Agen berbasis yodium
Nanopartikel pertama yang dilaporkan untuk pencitraan CT berbasiskan yodium, berdasarkan pada agen molekul kecil yang
disetujui secara klinis (7,84). Nanopartikel ini terutama emulsi minyak ethiodized atau liposom yang merangkum molekul kecil
teriodinasi (6,8,85-87). Vermess et al. melaporkan emulsi minyak biji poppy ethiodized (Ethiodol) sedini 1979 (8). Partikel-partikel ini
dibentuk oleh homogenisasi minyak dengan lipid seperti Tween atau lesitin, menghasilkan struktur seperti IV pada Gambar. 4. Partikel-
partikel ini berada dalam kisaran ukuran 1-5 μm, dan terlalu besar untuk menjadi nanopartikel. Agen cepat diambil oleh hati. Itu
diterjemahkan ke klinik, di mana kemanjuran untuk pencitraan tumor hati diamati (6), tetapi pengembangan lebih lanjut dihentikan
karena efek samping yang disebabkan oleh aktivasi makrofag yang tidak dapat diterima untuk agen diagnostik. Pekerjaan ini,
bagaimanapun, meletakkan dasar untuk pengembangan formulasi nanopartikel berikutnya (6,85) dan, pada kenyataannya, beberapa
formulasi yang baru-baru ini dilaporkan didasarkan pada teknologi yang sama, meskipun disintesis dengan teknik yang disempurnakan
dan pelapisan lipid yang ditingkatkan (88- 92). Misalnya, Bakan et al. menggunakan pemrosesan mikrofluida dan dioleoilfosfatidilkolin
untuk membuat emulsi dari trigliserida poliiodinasi berdiameter 200-300 nm (85). Dimasukkannya kolesterol dalam kolesterol 0,4: 1:
dioleoylphosphatidylcholine menghasilkan formulasi yang jauh lebih stabil daripada tanpa kolesterol. Diskusi yang lebih luas tentang
formulasi yang lebih lama ini dapat ditemukan di artikel ulasan oleh Krause (11)
Pada 2013, Ding et al. melaporkan emulsi minyak iodinasi dengan polietilen glikol (PEG) monostearat sebagai lipid (90). Titik
kuantum yang dilapisi secara hidrofobik dimasukkan dalam inti minyak untuk memberikan kontras fluoresensi. Emulsi dapat dipekatkan
hingga 240 mg I / ml dan menghasilkan kontras CT yang kuat. Nanopartikel ini terbukti diambil oleh makrofag in vitro dan terakumulasi
dalam plak kelinci aterosklerotik pada 2 jam pasca injeksi oleh CT dan pencitraan fluoresensi. De Vries et al. melaporkan nanoemulsi
ukuran kecil (> 100 nm) yang terbentuk dari minyak ester triiodo-benzena (88). Nanoemulsi ini disintesis oleh emulsifikasi minyak
dengan fosfolipid PEGylated atau blok ko-polimer amfil melalui penggunaan mikrofluidizer. Formulasi terkecil dan paling stabil
digunakan in vivo. Kontras yang ditandai (hingga 190 HU) diamati di jantung dan pembuluh darah segera setelah injeksi. Kontras juga
diamati di hati dan limpa, tetapi telah hilang setelah satu minggu, menunjukkan ekskresi yang luas. Paruh sirkulasi nanoemulsion hingga
2,7 jam ditemukan. Selain formulasi eksperimental, nanoemulsi yang dimuat dengan minyak iodinasi tersedia secara komersial untuk
percobaan praklinis (93).
Liposom merangkum kontras iodinasi yang disetujui secara klinis media telah dipelajari sejak 1980-an (94-96). Seperti
disebutkan di atas, liposom terdiri dari lapisan ganda lipid yang mengandung inti berair. Inti berair ini biasanya mengandung muatan
seperti obat atau agen kontras salah satu nanopartikel yang disetujui secara klinis adalah Doxil, formulasi doxorubicin liposomal (17).
Keuntungan menggunakan liposom untuk CT adalah relatif mudah untuk mensintesisnya dari komponen yang disetujui secara klinis,
yaitu, campuran lipid dan media kontras iodinasi yang disetujui secara klinis, meskipun sulit untuk mencapai muatan / konsentrasi
yodium tinggi. Formulasi semacam itu menghasilkan kontras CT yang tahan lama (50) dan, menurut teori, terbukti sesuai dengan pasien
yang fungsi ginjalnya buruk karena pelepasan lambat dari muatan yang dienkapsulasi. Bahkan, sebuah perusahaan (97) saat ini sedang
mengembangkan agen kontras CT liposom dan bertujuan untuk memulai uji klinis dalam dua tahun ke depan (Ketan Ghaghada,
wawancara telepon, 16 Agustus 2012). Liposom semacam itu biasanya dibentuk oleh hidrasi film alipid atau larutan organik lipid dengan
larutan berair yang mengandung zat kontras beryodium (50,95). Proses tambahan seperti ekstrusi menggunakan membran ukuran ~ 200
nmpore menghasilkan liposom unilamellar kecil dengan distribusi ukuran yang sempit (50). Zat kontras yang tidak berkapsul
dihilangkan dengan dialisis dan formulasi terkonsentrasi. Mungkin karena farmakokinetik yang buruk, beberapa formulasi liposomal
yang lebih tua tidak dilaporkan sebagai agen pengumpul darah, tetapi diamati terakumulasi di hati dan limpa (94). Tumor hati dapat
divisualisasikan sebagai daerah yang lebih gelap, karena akumulasi yang buruk dari liposom dalam tumor dibandingkan dengan hati.
Formulasi selanjutnya menunjukkan pengenalan surfaktan PEGylated pada campuran lipid, yang menghasilkan waktu sirkulasi darah
yang lebih lama (87). Pengembangan baru-baru ini termasuk liposom yang co-encapsulate molekul iodinasi dan chelating gadolinium,
memberikan kontras MRI dan CT (98). Selanjutnya, Miyata et al. melaporkan liposom yang mengandung natrium borokaptat yang
terkapsulasi dan agen kontras beryodium (99). Tujuan dari sodiumborocaptate adalah untuk memfasilitasi terapi penangkapan neutron
boron, sehingga liposom memiliki fungsi diagnostik dan terapeutik, atau dikenal sebagai theranostics. Liposom ditargetkan dengan
transferrin, yang reseptornya diekspresikan berlebih pada kanker tertentu, seperti glioma. Liposom yang ditargetkan ditemukan
menumpuk pada tumor glioma pada otak tikus ke tingkat yang lebih besar (82,2 vs 22,5 μg B / g) daripada liposom nontargeted.
Keuntungan pencitraan CT dari distribusi lipo adalah bahwa hal itu akan memungkinkan perencanaan terapi neutron yang lebih efektif.
Pendekatan alternatif untuk mengembangkan struktur lipid yang mendukungDuce contrast untuk CT adalah mensintesisnya
dari lipid yang diberi label yodium atau elemen penghasil kontras lainnya. Salah satu contoh pertama ini diterbitkan oleh Caride et al.,
Di mana fosfolipid brominasi dibentuk menjadi liposom dan diberikan kepada anjing (30). Peningkatan kontras hingga 40 HU diamati
di hati dan limpa. Khususnya, kelompok Torchilin telah mengembangkan misel polimerik teriodinasi sebagai agen kontras CT (100).
Rantai PEG hidrofilik 12 kDa dikonjugasikan ke polimer pollysin 12 unit berulang. Gugus amina bebas dari polimer direaksikan dengan
asam 2,4,6-triiodobenzoic untuk mensintesis lipid iodinasi, yang digunakan untuk membentuk misel (Gambar 5A, B) (47). Kandungan
yodium dari misel adalah 17,7% berat. Tikus dipindai menggunakan CT pada 80 kV sebelum dan sesudah injeksi dengan misel dengan
dosis 170 mg yodium per kg. Seperti dapat dilihat pada Gambar. 5 (C), pada 2 jam setelah injeksi, kontras kuat (150 HU) masih dapat
diamati di jantung, dan dengan kontras di hati dan limpa masing-masing 57 dan 90 HU, masing-masing (46). Agen ini jelas efektif untuk
memberikan kontras genangan darah yang tahan lama dan juga pencitraan hati dan limpa. Baru-baru ini, kelompok Conyers telah
mengembangkan liposom yang terdiri dari lipid yang mengandung yodium, sebagai agen kontras CT potensial (101).
Dendrimer adalah molekul polimer bercabang yang bebas segera digunakan sebagai perancah untuk berkembang menjadi agen
kontras. Salah satu jenis dendrimer yang paling sering digunakan adalah poli (amidoamin) atau PAMAM, yang memiliki beberapa
kelompok amina, memungkinkan modifikasi yang mudah dengan berbagai fungsi. Kelompok Brechbiel pertama kali mengusulkan
dendrimer teryodium sebagai agen kontras CT (27). Mereka bereaksi turunan asam triiodobenzenepropanoic dengan dendrimer PAM
untuk membuat zat yang mengandung 33% yodium bymass. Agen terbukti menghasilkan atenuasi CT (102). Fu et al. melaporkan
beberapa PEG-core, dendrimer polylysine yang telah digabungkan dengan agen kontras yang disetujui secara klinis, iobitridol (103).
Sifat fisikokimia, seperti kelarutan, hidrofisi, viskositas dan osmolalitas, dievaluasi dengan cermat. Sementara kelarutannya adalah>
440mg yodium / ml dan dendrimer sangat hidrofilik, sayangnya viskositas dan osmolalitas lebih tinggi dari agen komersial, ketika
disesuaikan dengan konsentrasi (103). Kontras yang kuat diamati pada pembuluh darah tikus pada 2 menit setelah injeksi salah satu
dendrimers ini. Sementara kontras yang dihasilkan lebih tahan lama dibandingkan dengan agen molekul kecil, sebagian besar
menghilang setelah 32 menit.
Salah satu fitur menarik dari dendrimers adalah kemudahannya menambahkan grup penghasil kontras tambahan. Misalnya,
Guo et al. dendrimer disintesis yang memerangkap partikel nano emas dan selanjutnya bereaksi dengan asam diatrizoat (104). Pelabelan
ganda ini menghasilkan kontras yang ditingkatkan dibandingkan dengan dendrim yang diberi label dengan partikel nano emas saja.
Untuk membuat agen kontras modalitas ganda, Criscione et al. diberi label dendrimer dengan asam triiodobenzoic dan technicium,
memberikan kontras untuk tomografi emisi foton tunggal serta CT (105).

Gambar 5 (A) struktur kimia lipid polimer iodinasi. (B) Penggambaran skematis misel yang terbentuk dari lipid polimer iodinasi. (C) Gambar CT tikus pada
tingkat jantung, hati dan limpa sebelum dan sesudah injeksi dengan misel beryodium. Gambar direproduksi dengan izin dari Torchilin et al. (46)

5.2. Agen berbasis Emas

Nanopartikel emas telah diusulkan untuk berbagai aplikasi biomedis (106), seperti pencitraan fotoakustik, ablasi fototermal
dan deteksi DNA, untuk menyebutkan beberapa (19.107.108). Pendekatan sintetis untuk nanopartikel emas dikembangkan dengan baik,
dalam hal kontrol atas ukuran, morfologi dan kimia permukaannya (109-112). Mereka umumnya dianggap sebagai biokompatibel (113)
dan sedang menjalani evaluasi sebagai agen terapi dalam sejumlah uji klinis (43.114-116). Dalam publikasi 2006 Hainfeld melaporkan
formulasi nanopartikel emas 1,9 nm sebagai agen kontras untuk pencitraan sinar-X (117). Tikus disuntik dengan nanopartikel ini dengan
dosis 2,7 g emas / kg. Perbandingan gambar rontgen sebelum dan 2 menit setelah injeksi mengungkapkan bahwa zat tersebut sangat
mengaburkan pembuluh darah tikus, meskipun dosis tinggi seperti itu mungkin tidak ekonomis untuk digunakan dalam praktek. Gambar
yang diperoleh pada titik waktu berikutnya menunjukkan agen yang akan diekskresikan melalui ginjal dan urin selama sekitar satu jam.
Tidak ada toksisitas yang diamati dari hematologi, kimia darah atau histologi.
Didorong oleh hasil ini, dua kelompok menyelidiki besar, nanopartikel emas bersirkulasi besar sebagai agen kontras CT,
keduanya menerbitkan hasil mereka pada tahun 2007 (26,49). Cai et al. disintesis nanopartikel emas diameter inti 10 nm dilapisi dengan
PEG-2000, menghasilkan diameter hidrodinamik 38 nm (49). Eksperimen in vitro, serta pengamatan, hematologi, kimia darah atau
histologi lagi-lagi tidak menunjukkan tanda-tanda toksisitas, meskipun mikroskop elektron trans-misi dan pengukuran spektrometri
massa plasma ditambah secara induktif menunjukkan retensi hati yang luas pada 3 hari pasca injeksi. Dari percobaan dengan tikus
dengan dosis 493 mg emas / kg, waktu paruh sirkulasi ditemukan menjadi 14,6 jam dan kontras> 100 HU terlihat di aorta hingga 24
jam. Dengan demikian agen ini memberikan kontras darah yang luar biasa, yang memungkinkan tumor neovaskularisasi untuk
diselesaikan (49). Perbedaan dalam ekskresi antara agen ini dan yang dilaporkan oleh Hainfeld adalah karena diameter partikel nano.
Diperkirakan bahwa nanopartikel sub-5 nm kecil dapat dengan cepat diekskresikan oleh ginjal, sedangkan nanopartikel yang lebih besar
terlalu besar untuk melewati ginjal dan disimpan dalam aliran darah (118). Sejumlah platform nanopartikel emas lainnya telah
dikembangkan, menggunakan stabilisator seperti dendrimers (119-122), asam tioctic (123), gum Arab (124.125), PLGA (126) dan
heparin (127).
Beberapa kelompok telah mengejar emas multifungsi nanopartikel, yaitu, formulasi yang memiliki fungsi diagnostik atau terapi
tambahan. Dalam contoh yang menarik, von Maltzahn et al. menggunakan nanorods emas sebagai agen kontras CT dan untuk nanorods
disuntikkan ke dalam tumor yang mengandung tikus. Terapi tumor fototermal CT imaging (19) 13? 47 nm Emas PEGylated digunakan
untuk memvisualisasikan akumulasi nanorod emas dalam tumor dan merencanakan iradiasi laser yang diperlukan untuk perawatan.
Nanorod emas yang digunakan menyerap cahaya dengan kuat pada jendela near-infrared (NIR), sebuah wilayah spektrum
elektromagnetik tempat jaringan menyerap dengan lemah. Penyerapan cahaya menghasilkan pemanasan lokal dan kematian sel.
Perlakuan seperti tumor bantalan tikus menghasilkan penghapusan tumor dan kelangsungan hidup dari mereka selama 50 hari (19).
Kelat yang mengandung Gadolinium dapat ditambahkan ke permukaan partikel nano emas untuk menghasilkan zat kontras
yang aktif baik untuk CT dan MRI (28,41,128-130). Contoh pertama dari jenis partikel nano ini diterbitkan oleh Alric et al. (41) Molekul
asam chelate diethylene triamine pentaacetic acid (DTPA) difungsikan dengan kelompok tiol digunakan sebagai ligan penutup selama
sintesis nanopartikel emas. Kompleksasi dengan ion gadolinium menghasilkan produk akhir. Pencitraan phantom CT dan MRI
menunjukkan sifat penghasil kontras nanopartikel ini. Sun et al. membentuk CT / MRI nanorod emas aktif dalam pendekatan berbasis
misel (130). Para penulis menyiapkan nanorod emas dengan lapisan hidrofobik, dodecanethiol. Nanorod ini dienkapsulasi dalam inti
misel yang terbentuk dari lipid yang headgroup-nya adalah chelate gadolinium-DTPA. Potensi penghasil nanorod ditunjukkan melalui
CT dan MRI phantom imaging. Meskipun tidak ditunjukkan dalam makalah, batang juga harus memberikan kontras fluoresen (131).
Van Schooneveld et al. melaporkan trimodality berbasis misel agen kontras nanopartikel emas untuk CT, MRI dan kontras
fluoresensi (28); Nanopartikel emas 66 nm disintesis dan kemudian dilapisi dengan lapisan silika 11 nm. Nanopartikel ini dibuat
hidrofobik dengan penyerapan octadecanol pada permukaan. Nanopartikel yang dihasilkan kemudian disuspensikan dalam inti misel
yang terdiri dari campuran lipid (Gambar 6A, B). Headgroup lipid mengandung Gd-DTPA, PEG atau N5 fluorophore Cy5.5. Potensi
penghasil kontras dari nanopartikel ini ditunjukkan melalui pencitraan phantom dan dengan pencitraan sel makrofag yang telah
diinkubasi dengan nanopartikel. Selanjutnya, tikus dipindai sebelum dan 24 jam setelah injeksi dengan nanopartikel ini dengan CT dan
MRI (Gambar 6C, D). Kontras diamati pada hati hewan-hewan ini setelah injeksi. Akhirnya, hati tikus yang disuntik dengan misel
nanopartikel emas berfluoresensi dan nonfluoresen; Kontras juga dapat diamati dengan jelas (Gbr. 6E).

Gambar 6 (A) Penggambaran skematis agen kontras nanopartikel emas CT / MRI / fluoresensi aktif. (B) Transmisi karakterisasi mikroskopi elektron dari
nanopartikel. (C) Gambar CT dan (D) MR dari hati tikus sebelum dan 24 jam setelah injeksi dengan nanopartikel emas. (E) Pencitraan fluoresensi hati tikus
yang diinjeksi dengan nanopartikel emas berfluoresensi (kiri) atau nonfluoresen (kanan). Gambar diadaptasi dengan izin dari van Schooneveld et al. (28)

5.3. Agen berbasis bismuth

Bismuth juga merupakan elemen yang menarik yang menjadi dasar agen kontras CT. Ini memiliki Z mirip dengan emas dan
juga menghasilkan kontras yang sedikit bervariasi dengan tegangan tabung sinar-X (Brown AL, Naha PC, Cormode DP, Goforth AM,
informasi yang tidak dipublikasikan). Ini dianggap sebagai salah satu yang paling biokompatibel dari unsur-unsur berat, meskipun
bentuk ioniknya beracun pada 0,2 M (132) dan jauh lebih murah daripada emas. Namun, dibandingkan dengan nanopartikel emas, ada
banyak yang kurang diketahui tentang sintesis mereka, dalam hal kontrol atas ukuran, bentuk dan kimia permukaan. Selain itu, bismut
setengah padat seperti emas dan mensintesis partikel nano bismut elektronik menantang (133); ion lain, seperti sulfur, sering dibutuhkan
(29,40,48,134,135). Kedua faktor ini berarti bahwa nanopartikel bismut biasanya memiliki muatan yang lebih rendah daripada
nanopartikel emas yang sebanding.
Rabin dkk. Pertama-tama melaporkan partikel nano bismut sebagai agen kontras CT (29). Para penulis membentuk nanopartikel
bismut sulfida dari ko-presipitasi bismut sitrat dan natrium sulfida dengan adanya asam 3-mercaptopropionik, yang bertindak sebagai
surfaktan. Nanopartikel selanjutnya dilapisi dengan polyvinylpyrrolidone (PVP). Ini menghasilkan partikel nano berbentuk piring.
Dalam uji sitotoksisitas, tidak ada efek pada viabilitas makrofag atau hepatosit diamati di bawah 20 mM Bi, tetapi pengurangan viabilitas
diamati pada konsentrasi di atas 20mM. Eksperimen pencitraan CT yang dilakukan pada tikus mengungkapkan agen untuk bekerja
dengan baik sebagai agen pengumpulan darah, dengan peningkatan maksimum 557 HU dan waktu paruh darah 140 menit, ketika
disuntikkan dengan dosis 477 mg Bi / kg. Selain itu, injeksi subkutan agen dialirkan ke kelenjar getah bening, yang dapat divisualisasikan
dengan CT, sehingga menunjukkan potensi untuk pencitraan kelenjar getah bening.
Beberapa pendekatan lain untuk mensintesis partikel nano bismut sebagai agen kontras CT telah dilaporkan. Perera et al.
nanopartikel dilapisi PVT disintesis terdiri dari polimer koordinasi anorganik bismut-besi, meskipun penggunaan sianida
mempertanyakan biokompatibilitas mereka (135). Sintesis skala besar nanopartikel Bi2S3 dilaporkan oleh Ai et al. (134). Thioacetamide
dilarutkan dalam oleylamine disuntikkan ke dalam larutan neodecanoate bismut panas dalam octadecene, menghasilkan nanopartikel
dalam reaksi dekomposisi termal. Sekali lagi, PVT digunakan untuk melapisi partikel nano. Inti yang dihasilkan berdiameter 2-3 nm;
Namun, partikel nano diamati terakumulasi di hati tikus dalam gambar CT. Nanopartikel bismut elemental telah disintesis oleh Brown
dan Goforth, melalui reduksi bismut nitrat dengan natrium borohidrida dengan adanya dekstran (133). Hal ini menghasilkan inti bismut
dengan diameter rata-rata 19,5 nm dan diameter hidrodinamik 130 nm karena adanya lapisan. Menariknya, Andreś-Vergeś et al.
melaporkan pengendapan bersama bismut nitrat dan besi (II) sulfat untuk membentuk nanopartikel besi oksida dengan cangkang bismut
oksida (136). Karena inti oksida besi, nanopartikel ini memiliki potensi untuk gabungan CT dan pencitraan MR.

5.4. Agen berbasis elemen lain

Seperti disebutkan di atas, beberapa nanopartikel pertama yang dikembangkan sebagai agen kontras CT didasarkan pada
bromin, seperti liposom yang terbentuk dari fosfolipid brominasi (30). Selanjutnya, nanoemulsi perfluorooctylbromide secara ekstensif
dipelajari sebagai agen kontras untuk CT, serta MRI dan ultrasound, pada 1980-an dan 1990-an (12,73137). Perfluorooctylbromide
adalah rantai delapan karbon dengan satu substituen brom dan substituen lainnya adalah fluor. Ini sangat biokompatibel, tanpa respon
yang merugikan diamati pada anjing dengan dosis injeksi 1 g / kg atau pada manusia dengan dosis oral hingga 12 ml / kg (75). Emulsi
perfluorooctylbromide yang dibentuk dengan lesitin ditemukan efektif sebagai gen darah dan agen pencitraan hati (138). Pencitraan hati
memungkinkan identifikasi tumor dan abses (10.136). Selanjutnya, agen ini ditemukan efektif untuk mendeteksi tumor hati dengan CT
dalam uji klinis (12). Namun, agen tidak berkembang karena gejala seperti flu yang disebabkan oleh aktivasi makrofag (12). Selain itu,
brom dibatasi oleh kontras yang relatif lemah yang dihasilkannya dan densitas pembebanannya yang rendah (hanya satu atom brom per
perfluorooctylbromide).
Berbagai elemen lain telah digunakan untuk membentuk agen kontras CT partikel nano, seperti platinum (32), gadolinium
(34.140), ytterbium (141), yttrium (34) dan tantalum (31.142–144), meskipun ada kekhawatiran mengenai penggunaan dari gadolinium,
karena potensinya untuk toksisitas (145). Namun demikian, gadolinium telah digunakan untuk membuat beberapa nanopartikel
multifungsi yang menarik yang menghasilkan kontras untuk CT, MRI dan fluoresensi (34.140). Pekerjaan baru-baru ini pada
nanopartikel tantalum adalah minat khusus karena sebagian besar publikasi berasal dari upaya terfokus oleh karyawan General Electric,
menunjukkan investasi besar dari industri. Nanopartikel ini telah dikarakterisasi untuk sifat kontras CT-nya, efikasi pencitraan in vivo,
farmakokinetik, biodistribusi dan sifat-sifat fisiokimia (142–144). Selanjutnya, lebih lanjut, sintesis skala besar (hingga 500 g) dari
nanopartikel ini telah dirancang (143). Tantalum adalah elemen yang relatif murah dan berlimpah dan perusahaan berharap untuk
memasukkan formulasi ke dalam uji klinis (Peter Bonitatibus, wawancara telepon, 11 September 2012).

Nanopartikel untuk pelacakan sel CT

Pelacakan sel adalah proses pencitraan pengiriman dan pergerakan sel in vivo. Ini sering dicapai dengan memberi label sel ex
vivo, menyuntikkannya ke subjek dan menggunakan teknik pencitraan untuk melacak sel dari waktu ke waktu. Ini pertama kali dilakukan
menggunakan pencitraan nuklir dalam kombinasi dengan pelabelan indium-111 (143). Pelacakan sel telah banyak dilakukan untuk MRI
dengan memuat sel dengan oksida besi dan telah digunakan untuk mempelajari terapi sel induk dan perilaku monosit, misalnya (147-
149). Topik ini baru mulai dieksplorasi untuk CT. Kelompok Bulte telah menerbitkan beberapa laporan tentang pelacakan sel pulau
pankreas yang dikemas dalam alginat (150). Kapsul ini dapat dibuat secara inheren radiopak dengan menggunakan ion barium atau
bismut untuk mengikat silang alginat, dan pencitraan CT telah digunakan untuk melacak kapsul tersebut (151). Kelompok ini juga telah
mengeksplorasi memuat kapsul alginat dengan nanopartikel emas berlabel gadolinium yang dikembangkan oleh Alric et al., Yang
disebutkan di atas (51). Kapsul-kapsul ini dapat dideteksi dengan CT, M1-weighted MRI dan ultrasound dan co-enkapsulasi sel dengan
nanopartikel tidak berpengaruh pada viabilitas sel (resolusi CT 83 μm). Selanjutnya, nanoemulsi perfluorooctylbromide juga telah
dimasukkan dalam kapsul ini, yang memungkinkan pendeteksiannya oleh CT, 19F MRI dan ultrasound (152). Resolusi percobaan
pencitraan in vivo dalam penelitian ini adalah 353 μm. Menk et al. menggunakan nanopartikel emas yang dilapisi dengan protein serum
kuda untuk melabeli sel kanker (153). Sel-sel ini disuntikkan ke otak tikus dan distribusinya dicitrakan dengan sistem CT hewan kecil
(resolusi 30 μm). Penerapan CT pada pelacakan sel sedang dalam masa pertumbuhan, dan kemajuan mungkin akan menjadi tantangan
karena sensitivitas CT yang rendah dan toleransi oleh sel-sel dengan tingkat pemuatan media kontras yang sangat tinggi. Namun
demikian, kami mengantisipasi lebih banyak laporan tentang topik ini di tahun-tahun mendatang.

Nanopartikel Yang Disarankan Untuk Pencitraan CT

Pencitraan yang ditargetkan dengan CT merupakan tantangan khusus karena sensitivitasnya yang rendah terhadap media
kontras. Krause mendefinisikan perubahan sinyal minimum yang terdeteksi dalam CT menjadi 30 HU (11). Dengan tingkat pelemahan
emas menjadi 5,1 HU25-120 / mM (63), ini menyiratkan bahwa perbedaan konsentrasi minimum yang dapat dideteksi antara target dan
latar belakang adalah 5,9 mM. Terlepas dari sifat-sifat yang menghasilkan kontras berbeda dari media kontras CT, konsentrasi yang
diperlukan dari setiap agen lain akan cukup dekat dengan nilai ini. Mengumpulkan konsentrasi media kontras seperti itu di situs target
sulit. Namun demikian, menggunakan nanopartikel yang padat dengan media kontras CT dan menerapkannya pada target yang sangat
diekspresikan, pencitraan yang ditargetkan dengan CT telah terbukti layak (154). Selanjutnya, dalam pengaturan klinis tertentu, seperti
pencitraan aterosklerosis di arteri koroner, CT lebih disukai daripada metode pencitraan alternatif (MRI, PET). Oleh karena itu,
mengembangkan pencitraan molekuler aterosklerosis untuk CT, misalnya, akan sangat menarik.
Akibatnya, agen kontras CT target pertama dilaporkan untuk pencitraan thrombi, yang kejadiannya di arteri adalah sumber
serangan jantung, stroke dan kejadian kardiovaskular yang merugikan lainnya. Trombi sebagian besar terdiri dari fibrin padat,
memungkinkan deteksi mereka dengan CT melalui penargetan fibrin. Nanoemulsi yang dimuat dengan perfluorooctylbromide atau
minyak beryodium disintesis dan dimodifikasi untuk memiliki antibodi anti-fibrin yang melekat pada permukaannya (154). Gumpalan
terbentuk dari plasma manusia in vitro dan diinkubasi dengan nanopartikel yang ditargetkan. Redaman yang kuat diamati di gumpalan
in vitro. Penargetan ini dibuktikan oleh eksperimen penghambatan kompetitif di mana inkubasi dengan kelebihan antibodi anti-fibrin
bebas menyebabkan penurunan 5 kali lipat pada rasio kontras-terhadap-kebisingan di gumpalan. Selanjutnya kelompok yang sama
melaporkan nanopartikel yang dimuat dengan minyak Ethiodol atau kompleks bismuth neodecanoate, dengan pelapis co-polimer blok
cross-linked (155). Strategi penargetan anti-fibrin yang serupa diupayakan untuk melakukan pencitraan in vitro dari gumpalan.
Contoh nanopartikel bertarget berbasis misel dilaporkan oleh Kinsella et al. (48) Nanopartikel Bismut sulfida disintesis melalui
penambahan larutan unsur sulfur ke dalam bismut asetat dan asam oleat dalam oktadesena mendidih. Hal ini menghasilkan dilapisi
hidrofobik (asam oleat), nanopartikel inti 10 nm. Nanopartikel ini dibuat biokompatibel dengan pencampuran dengan PEG-fosfolipid
dan membentuk film lipid, yang terhidrasi dengan PBS. Beberapa PEG-fosfolipid yang digunakan difungsikan dengan maleimide dan
amina di ujung distal, yang digunakan untuk melekatkan peptida LyP-1 atau NIR fluorophore Cy7, masing-masing (Gambar 7A).
Peptida LyP-1 dikembangkan dalam metodologi tampilan fag untuk secara istimewa menargetkan sel kanker payudara (156). Tes in
vitro dan analisis biodistribusi menunjukkan bahwa nanopartikel yang ditargetkan lebih luas diambil dalam sel kanker daripada
nanopartikel nontargeted (Gambar 7B). Perbandingan gambar CT yang diperoleh segera setelah dan 24 jam pasca-injeksi nanopartikel
yang ditargetkan LyP-1 mengungkapkan perbedaan yang signifikan pada tumor (Gambar 7C, D).
Seperti disebutkan di atas, lipoprotein dapat dianggap sebagai bentuk misel. Cormode et al. melaporkan inti emas high-density
lipoprotein nanopartikel yang ditargetkan untuk makrofag dalam plak aterosklerotik, dan yang akumulasi dalam aorta model tikus dapat
dideteksi dengan pencitraan mikroCT (45). Hyafil et al. juga menargetkan makrofag dengan nanopartikel polimer beryodium (157).
Eksperimen ini dilakukan dalam model kelinci aterosklerosis menggunakan pemindai CT klinis.
Beberapa kelompok lain telah menerbitkan studi tentang agen kontras CT nanopartikel yang ditargetkan untuk kanker. Pada
2008, Popovtzer et al. melaporkan nanorod emas yang telah terkonjugasi dengan anti-antigen A9, yang diekspresikan secara berlebihan
pada karsinoma sel skuamosa (158).
Gambar 7 (A) Penggambaran skematis dari struktur nanopartikel inti bismut yang ditargetkan berdasarkan misel. (B) Biodistribusi formulasi partikel nano
yang ditargetkan dan tidak ditargetkan pada 24 jam pasca injeksi. T, tumor; Sp, limpa; Li, hati; K, ginjal; Lu, paru-paru; H, hati; Br, otak; M, otot. Gambar
CT diperoleh (C) segera dan (D) 24 jam pasca injeksi nanopartikel yang ditargetkan. Gambar diadaptasi dengan izin dari Kinsella et al. (48)

Hasil analisis gambar dari gambar CT pelet sel menunjukkan penargetan berhasil. Kelompok Montet menargetkan liposom
yang mengandung yodium dengan peptida spesifik E-selectin (159). E-selectin diekspresikan secara berlebihan dalam pembuluh darah
tumor, sehingga injeksi dari formulasi yang ditargetkan ini menghasilkan peningkatan dan akumulasi spesifik E-selectin pada tikus yang
mengandung tumor. Hill et al. mengembangkan nanopartikel lipoprotein seperti densitas rendah sarat dengan trigliserida iodinasi yang
terbukti diambil dalam sel kanker HepG2, yang mengekspres reseptor lirrotein densitas rendah (74). Nanopartikel paduan besi-platinum
ditargetkan dengan antibodi terhadap reseptor Her2 (32). Percobaan in vitro menunjukkan nanopartikel ini secara istimewa diambil oleh
sel-sel kanker yang diekspresikan berlebihan pada reseptor Her2. Eck et al. antibodi terkonjugasi terhadap reseptor CD4 menjadi 38 nm
nanopartikel emas (160). Pencitraan CT menunjukkan nanopartikel ini secara istimewa menumpuk di kelenjar getah bening bila
dibandingkan dengan nanopartikel kontrol yang ditargetkan IgG.

Nanopartikel Digunakan Dengan CT Spektral

Pada tahun 2008 Schlomka et al. melaporkan perkembangan tipe baru pemindai CT, yang disebut CT spektral atau multicolor,
oleh Philips (52). Pemindai prototipe ini dapat membedakan bahan yang berbeda dalam bidang pandang, seperti emas, yodium, bismut,
ytterbium, gadolinium, jaringan terkalsifikasi dan jaringan lunak, menampilkan distribusi bahan-bahan ini dalam berbagai warna, oleh
karena itu namanya multicolor CT (33,40 , 44.161). Perbedaan utama antara pemindai ini dan pemindai CT konvensional terletak pada
detektor (52.162–164). Pemindai CT spektral memiliki detektor yang bahan sensornya adalah cadmium telluride, memungkinkan deteksi
energi sinar-X yang terjadi. Ketika sinar-X memukul detektor semacam ini, pulsa saat ini dihasilkan. Besarnya arus sebanding dengan
energi sinar-X, dan setiap kemunculan pulsa saat ini dicatat di salah satu dari beberapa saluran data, tergantung pada besarnya. Batas-
batas saluran disesuaikan secara bebas dan dapat diubah agar sesuai dengan tepi-K dari agen kontras yang digunakan dalam setiap
percobaan. Sebagai contoh, kami telah menggunakan 25–34, 34–51, 51–83, 83–94, 94–113, dan 113–133 keV saat pencitraan agen
kontras berbasis yodium dan emas dalam percobaan yang sama. Batas energi pertama dan ketiga cocok dengan K-edge dari yodium dan
emas, masing-masing, untuk memudahkan deteksi elemen-elemen ini. Perhitungan yang dilakukan pada enam set data yang dihasilkan
memungkinkan distribusi spasial dan konsentrasi bahan di bidang pandang yang akan ditentukan dan diberikan sebagai gambar
(165.166).
Kami telah menggunakan CT spektral dalam hubungannya dengan nanopartikel dalam model tikus aterosklerosis (44). Dalam
pencitraan koroner dengan CT konvensional, agen kontras klinis beryodium digunakan untuk menggambarkan area penyempitan
luminal, atau steose, yang mungkin memerlukan penempatan stent (167). Selain itu, deteksi simpanan kalsium, yang juga dikenal sebagai
penskoran kalsium, adalah metode penting lainnya untuk memperkirakan risiko kardiovaskular pasien (168). Akhirnya, seperti yang
disebutkan sebelumnya, konten makrofag dari plak aterosklerotik telah ditetapkan sebagai penanda kerentanan terhadap pecah (169).
Dalam penelitian ini kami menggunakan nanopartikel emas, yang lapisannya mirip dengan lipoprotein densitas tinggi, yang sebelumnya
kami tunjukkan spesifik untuk makrofag pada aterosklerosis (Gambar 8A, B) (45). Oleh karena itu kami mencoba menggunakan CT
spektral untuk mengkarakterisasi tiga parameter plak aterosklerotik secara bersamaan, yaitu stenosis, kalsifikasi, dan konten makrofag.
Pencitraan phantom membuktikan bahwa CT spektral dapat membedakan bahan yodium, emas dan kalsifikasi dalam bidang
pandang yang sama (Gambar 8C). Nanopartikel emas disuntikkan ke tikus aterosklerik. Setelah 24 jam, tikus yang sama diinjeksi dengan
agen kontras nanopartikel yodium yang bersirkulasi lama. Tikus dicitrakan dengan sistem CT spektral. Seperti dapat dilihat pada
Gambar. 8 (D), lumen aorta tikus disorot dengan agen yodium dan plak yang kaya makrofag terdekat telah mengambil nanopartikel
emas. Sementara tidak ada kalsifikasi yang diamati pada plak tikus-tikus ini, tulang-tulangnya terdeteksi dengan jelas, menunjukkan
bahwa kalsifikasi, jika ada, dapat diidentifikasi oleh sistem.
Pan et al. telah menggunakan nanopartikel bismut yang ditargetkan trombus bersama dengan spektral CT (40). Trombi
terbentuk dalam arteri ketika plak aterosklerotik pecah dan trombi yang lebih kecil juga merupakan penanda plak yang tidak stabil, oleh
karena itu pencitraannya sangat menarik dalam penyakit kardiovaskular. Nanopartikel bismut ini terbentuk dari kompleks asam lemak
bismut dalam matriks sesquioleat sorbitan yang dilapisi dengan fosfolipid untuk memberikan biokompatibilitas. Biotin fosfolipid
termasuk dalam pelapisan dan inkubasi dengan antibodi spesifik fibrin yang ditandai avidin menghasilkan nanopartikel bismut yang
ditargetkan trombus. Inkubasi nanopartikel ini dengan gumpalan in vitro dan juga gumpalan yang terbentuk di arteri iliac kelinci,
menghasilkan akumulasi nanopartikel dalam gumpalan yang dapat dideteksi oleh pemindai CT spektral. Kelompok yang sama baru-
baru ini melaporkan nanopartikel berbasis ytterbium yang ditargetkan untuk thrombi dengan cara yang sama (33). Manfaat
menggunakan nanopartikel berbasis ytterbium adalah sensitivitas deteksi mereka lebih tinggi daripada bismut, karena diskontinuitas
yang lebih besar dalam pelemahan pada K-edge (170).

Ringkasan dan Pandangan

Seperti yang telah kami jelaskan di atas, ada kemajuan luar biasa dalam agen kontras nanopartikel untuk CT dalam dekade
terakhir. Agen pengumpulan darah yang lebih baik telah dikembangkan, elemen baru telah diperkenalkan (emas, bismut, tantalum, dll.),
Agen target dan pelacakan sel telah dilaporkan dan deteksi spesifik dengan CT spektral sekarang dimungkinkan. Beberapa agen
pengumpul darah lanjut, seperti lipo-sodium yodium yang bersirkulasi lama dan kecil, nanopartikel emas atau tantalum oksida yang
diekskresikan secara biologis mendekati uji klinis (50.117.143). Formasi ini dapat bermanfaat bagi pasien dengan fungsi ginjal yang
terganggu, serta pasien dengan hipersensitif terhadap agen kontras yodium. Lebih lanjut, sifat farmakokinetik mereka yang berbeda
dengan agen molekul kecil dapat memungkinkan pencitraan pada rentang waktu yang lebih luas dan peningkatan pencitraan perfusi.
Perkembangan dalam teknologi CT, seperti CT energi ganda atau CT spektral, yang memungkinkan pendeteksian khusus media kontras,
sangat bermanfaat.
Terlepas dari pandangan positif ini, sejumlah bidang tambahan perlu ditangani. Kemajuan lebih lanjut dalam pendekatan
sintetik diperlukan untuk mengembangkan nanopartikel densitas tinggi yang dapat disintesis dalam skala besar. Agen target perlu
divalidasi lebih lanjut dalam model hewan tambahan dan dipelajari dan dioptimalkan untuk sifat fisikokimia mereka. Evaluasi sifat
kontras CT harus distandarisasi (63). Lapangan akan mendapat manfaat dari interaksi yang lebih besar antara ahli kimia yang
mengembangkan agen baru dan ahli radiologi dan dokter lain yang pada akhirnya mungkin menggunakannya. Akhirnya, penggunaan
agen kontras untuk CT mensyaratkan penggunaan sejumlah besar unsur-unsur berat, yang akan selalu menimbulkan risiko toksisitas.
Evaluasi toksikologis menyeluruh akan diperlukan untuk menilai masalah efek samping yang mencegah terjemahan klinis nanopartikel
pada 1980-an (12). Namun demikian, bidang ini telah mengalami kemajuan pesat dalam dekade terakhir dan kami berharap akan melihat
kemajuan serupa yang terjadi pada dekade mendatang.