BIOQUÍMICA

TOMA DE MUESTRA SANGUÍNEA

ASELAS PÉREZ ERIKA, ÁVILA CERVANTES SANDRA, CASTRO SUÁREZ

KAROLAIN, DAZA LINERO KIMBERLY, DE LEÓN GARCÍA GERALDINE.

ENFERMERÍA, UNIVERSIDAD DEL MAGDALENA.

RESUMEN

Laboratorio III. El presente informe de laboratorio tiene como finalidad mostrar de

manera clara los procedimientos, técnicas y resultados del laboratorio realizado el día 12
de marzo de 2019, en el cual se tomaron muestras sanguíneas de la vena cubital media
del brazo izquierdo de dos voluntarias presentes en el laboratorio para analizar en las
muestras sanguíneas la presencia y cantidad de células sanguíneas, plasma, suero
sanguíneo etc, también se tomó muestra sanguínea de capilar en el dedo anular de
voluntaria. Este procedimiento se realizó con las técnicas y metodologías descritas en
guía de laboratorio con el objetivo de que los estudiantes conozcamos el significado y
utilidad de la sangre como muestra biológica en estudios clínicos, obtengamos
conocimiento de cómo es la forma correcta de realizar análisis de hematocrito en muestra
sanguínea y no menos importante utilizar las técnicas de bioseguridad indispensables para
el buen manejo del laboratorio y seguridad de los que en ellos realizamos las actividades.

Palabras claves:

ABSTRACT

Laboratory III. The purpose of this laboratory report is, in a clear manner, the procedures,
techniques and results of the laboratory performed on March 12, 2019, in which the blood
samples were taken from the vein cubic media of the left arm of the volunteer present in
the laboratory of analysis in the blood samples presence and quantity of blood cells,
plasma, blood serum, etc. This procedure has been published with the techniques and
methodologies described in the laboratory guide with the objective that the students know
the meaning and usefulness of the blood in the sample in the clinical study, obtain the
knowledge of how is the correct form of perform the analysis of the hematocrit in the best
way to use the biosecurity techniques essential for the good management of the laboratory
and the safety of them.

Keyword:
INTRODUCCIÓN
La sangre es el fluido más abundante en
el cuerpo humano, vital para el
funcionamiento de los distintos órganos,
el transporte de oxígeno, el transporte de
hormonas, función inmunológica, entre
otros. Está conformada por plasma,
suero sanguíneo, glóbulos rojos,
glóbulos blancos y plaquetas.
El plasma es el componente liquido de la
sangre; tiene 90% de agua y un 10% de
iones, proteínas, nutrientes, desechos,
gases disueltos y otras moléculas
importantes para el mantenimiento del
Ph de esta. El suero sanguíneo no es más
que plasma sin factores de coagulación
por lo cual al observarla se puede
apreciar su similitud con el plasma.
Los glóbulos rojos (eritrocitos) son las
células especializadas en el transporte de
oxígeno, a través de la hemoglobina, a
todo el organismo, éstos no tienen núcleo
y constituyen el 99% de los elementos de
la sangre. Los glóbulos blancos
(leucocitos) se clasifican en:
granulocitos y agranulocitos y
representan la defensa del organismo
ante agentes potencialmente peligrosos,
conforman menos del 1% de las células
sanguíneas. Las plaquetas son los
agentes responsables de la coagulación
de la sangre, también llamadas
trombocitos, son fragmentos de células y
conviertes al fibrógeno en fibrina para
formar la especie de red que refuerza el
tampón de plaquetas.
OBJECTIVOS
1. conocer el significado y la utilidad de
la sangre como muestra biológica en
estudios clínicos.
2. entrenar en el procedimiento para la
extracción de sangre venosa y la
separación de sus componentes: plasma,
suero y células.
3. Realizar un análisis de hematocrito en
la muestra de sangre extraída.
4. Aplicar las normas de bioseguridad
para extracción y manipulación de las
muestras de sangre.
METODOLOGÍA Y MATERIALES
 Tubos de ensayo pequeños.
 Gradilla para tubos de ensayo.
 Jeringa 5 cc.
 Agujas apropiadas.
 Guantes desechables.
 Torniquete.
 Algodón.
 Pipetas graduadas de 1 ml.
 Pipeteador manual.
 Lancetas
 Centrifuga.
 Micro centrifuga.
 Alcohol antiséptico.
 Tubo seco.
 Tubo tapa morada.
 Tubo tapa azul (con anticoagulante).
Primera parte: Extracción de sangre
venosa.
1. La persona encargada de la toma de
muestra utilizó la técnica correcta de
lavado de manos, secándoselas de
inmediato con toalla desechable, se
colocó los guantes desechables.
2. Se prepararon todos los implementos
para la extracción sanguínea y que
estos estuvieran al alcance para no
tener accidentes al momento de la
punción.
3. Se realizaron las técnicas correctas
de toma de muestra, realizando la
asepsia del sitio de punción con un
algodón empapado de alcohol,
teniendo en cuenta lo descrito en la
guía de laboratorio, que el brazo del
voluntario no estuviera edematizado
y las venas no estuvieran tortuosas,
se tomó la muestra sanguínea.
Segunda parte: separación del suero y
las células sanguíneas.
1. Inmediatamente extraída la sangre,
se introdujo la muestra sanguínea en
un tubo seco, se desechó el material
utilizado para la toma de muestra y
se dejó la muestra en reposo 15
minutos hasta que la muestra
coaguló.
2. Se llevó el tubo a la centrifuga por
10 minutos a velocidad de 3000
r.p.m.
3. Finalizada la centrifugación, se
retiró el tubo de la centrifuga con
cuidado y con ayuda de una pipeta
se extrajo el suero sanguíneo, sin
tocar las células que se encontraban
en la parte inferior del tubo.
Tercera parte: Obtención del plasma
sanguíneo.
1. Para realizar esta parte del
laboratorio se introdujo en un tubo
con anticoagulante (EDTA,
heparina, oxalato o citrato) la
cantidad necesaria de sangre descrita
en el tubo, se mezcló suavemente la
sangre dentro del tubo teniendo
precaución al momento de realizar
esto ya que lis movimientos bruscos
pueden causar la ruptura de la
membrana celular de los glóbulos
rojos.
2. Se centrifugó la muestra de sangre
por 10 minutos a 3000 r.p.m.
3. Finalizada la centrifugación se retiró
el tubo de la centrifuga con cuidado
y se separó el plasma del tubo con
ayuda de una pipeta.
Cuarta parte: Determinación del
Hematocrito en una muestra de sangre.
1. Se realizó la asepsia del dedo anular
de un voluntario con una torunda de
algodón empapada de alcohol y se
punzó con una lanceta estéril,
aplicando una presión suave en el
dedo se hizo salir una gota gruesa de
sangre del dedo.
2. Se llenó por capilaridad una
micropipeta por arriba de la marca
del aforo de 25 µL, se limpió el
exceso de sangre en la micropipeta
con un papel absorbente.
3. Se introdujo la micropipeta con la
muestra de capilaridad en una
microcentrífuga para hematocrito y
se puso a funcionar a velocidad de
2500 r.p.m.
4. Cuando la microcentrífuga se
detuvo, se bajó la muestra y se anotó
el porcentaje de hematocrito que
muestra la escala de la centrifuga.
RESULTADOS:
DISCUSIÓN Y CONCLUSIÓN:
 PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. ¿Cuál es la diferencia entre y plasma sanguíneo?

R// La principal diferencia entre plasma y suero se encuentra en sus factores de

coagulación. Una sustancia llamada fibrinógeno es esencial en la coagulación de la
sangre. El plasma sanguíneo contiene este fibrinógeno. Básicamente, cuando se separan
el suero y plasma de la sangre, el plasma aún conserva el fibrinógeno que ayuda a la
coagulación, mientras que el suero es la parte de la sangre que queda después de quitar
este fibrinógeno. ¿Qué queda de la sangre una vez que se han quitado los glóbulos rojos,
glóbulos blancos y factores de coagulación? El suero sanguíneo es principalmente agua
que se disuelve con proteínas, hormonas, minerales y dióxido de carbono. Es una fuente
muy importante de electrolitos.

El plasma es un líquido amarillento, también se encuentra en las linfas o en fluidos

intramusculares. Esta es la parte de la sangre que contiene fibrina y otros factores de
coagulación. El plasma hace el 55% del volumen total de sangre. El principal componente
del plasma sanguíneo es el agua, en resumen:
El plasma es la parte de la sangre que contiene ambas, el suero y los factores de
coagulación.
El suero es la parte de la sangre que queda una vez que se han eliminado los factores de
coagulación como fibrina.
El plasma contiene los factores de coagulación y agua, mientras que el suero contiene
proteínas como la albúmina y las globulinas.

2. ¿Explique el fundamento de las pruebas de TPT y TP y porque estas no deben

realizarse en el suero sanguíneo?

R// TPT: El tiempo parcial de tromboplastina (TPT) es una prueba para evaluar el tiempo
que tarda la sangre en coagularse. Puede ayudar a establecer si una persona tiene
problemas de sangrado o de coagulación. Usted puede necesitar este examen si tiene
problemas de sangrado o si su sangre no coagula correctamente. Cuando se sangra, se
desencadenan una serie de acciones en las que participan muchas proteínas diferentes
(factores de coagulación) que ayudan a la coagulación de la sangre. Esto se conoce como
cascada de coagulación. El examen de TPT examina algunas de las proteínas o factores
que intervienen en este proceso y mide su capacidad para ayudar a coagular la sangre.

Preparación para el examen:

Su proveedor de atención médica le puede solicitar que deje de tomar temporalmente
ciertos medicamentos que pueden afectar los resultados del examen. Asegúrese de
informarle a su proveedor sobre todos los medicamentos que esté tomando. También
dígale a su proveedor si está tomando medicamentos herbales.
El examen también se puede utilizar para vigilar pacientes que estén tomando heparina,
un anticoagulante.

Un resultado anormal de TPT (demasiado largo) también puede deberse a:

 Trastornos hemorrágicos.
 Trastorno en el cual las proteínas que controlan la coagulación se vuelven hiperactivas
 Enfermedad hepatica
 Dificultad para absorber nutrientes de los alimentos
 Deficiencia de vitamina K

Riesgos: Esta prueba se hace a menudo en personas que pueden tener problemas de
sangrado:
 Desmayo o sensación de mareo
 Hematoma (acumulación de sangre debajo de la piel)
 Infección (un riesgo leve en cualquier momento que se presente ruptura de la piel)
 Punciones múltiples para localizar las venas

TP: La prueba del tiempo de protrombina (TP) mide el tiempo que tarda en formarse un
coágulo en una muestra de sangre. La capacidad de coagulación es importante para
impedir el sangrado excesivo. Hay algunas proteínas (llamadas factores de coagulación)
que son fundamentales para que la sangre coagule bien. Si no hay una cantidad suficiente
de factores de coagulación o si alguno de ellos no funciona como debería funcionar, la
formación del coágulo puede tardar más tiempo del habitual.

¿Por qué se hace esta prueba?

El TP se hace para evaluar los problemas hemorrágicos. Al niño le pueden hacer esta
prueba si ha sangrado mucho o le han salido muchos moretones, si tiene una afección
médica que puede generar problemas relacionados con la coagulación, si lo van a operar
o si se va a someter a un procedimiento que puede causar sangrado. La prueba del TP
también se hace para determinar el nivel de coagulación en niños que están tomando
medicamentos anticoagulantes.

Riesgo: La prueba del tiempo de protrombina se considera un procedimiento seguro y se

asocia a riesgos mínimos. Algunos niños se marean o se desmayan cuando les sacan
sangre. Es habitual que aparezca un pequeño hematoma y/o un dolor muscular leve en la
zona del pinchazo, que puede durar unos pocos días.

3. ¿Cuál es el mecanismo de acción de los anticoagulantes EDRA, heparina, oxalato

y citrato?

R// En hematología el uso de estos agentes es muy importante ya que nos permiten
realizar diversos análisis en los cuales es necesario trabajar con muestras no coaguladas.
Se encuentran diversos modelos de anticoagulantes y cada uno de ellos con función y
mecanismo de acción característico:

EDTA: (ácido etilendiaminotetracético)

Sal disódica o tripotásica del ácido etilendaimintetracético, siendo esta última más
soluble. Este anticoagulante actúa como agente quemante del Calcio, lo que impide su
activación y no deja producir la coagulación sanguínea, dado que al PH que se lo trabaja,
el EDTA tiene una acción complejante muy potente.
Es uno de los anticoagulantes exógenos por excelencia, ya que cumple con varios
parámetros para ser un buen anticoagulante no alterar la morfología eritrocitaria ni
leucocitaria, inhibe la aglutinación de plaquetas, asegura la conservación de elementos
formes durante 24 horas si las muestras son conservadas a 4°C-.

 Es utilizado en una concentración de 0.342 mol/L a un PH= 7.20

 Una gota de EDTA (50 µL) impide la coagulación de hasta 6 ml de sangre, puede ser
empleado directamente en fase liquida o bien colocando un gota en un tubo y secado
en estufa a 37°C-50°C.

HEPARINA:
Puede darse sódica o de litio. Esta tiene la acción de evitar la formación de trombina a
partir de protrombina, interrumpiendo así el ciclo hemostático.

 Se utiliza a razón de 0.1 - 0.2mg por 1mL de sangre; debe de ser agitado rápidamente
con la sangre dado a que pueden llegar a formarse microcoágulos.

CITRATO DE SODIO:
Compuesto por sal trisódica, es el anticoagulante por excelencia para pruebas de
hemostasia y velocidad de sedimentación globular.
Este actúa de manera tal que no permite que el calcio se ionice, haciendo que el mismo
no intervenga en la coagulación.

 Es utilizado al 3,8% (3,8g de citrato de sodio en 100mL de agua destilada), y PH=

7.20
 Hemostasia: es usado en proporción 1/9 (1 volumen de anticoagulante para 9
volúmenes de sangre).
 Eritrosedimentación (VSG): En proporción 1/4 (1 volumen de anticoagulante para 4
volúmenes de sangre).

OXALATO:
Se da por una mezcla de sales, oxalato de amonio y oxalato de potasio. Actúa por
precipitación del calcio. No afecta el volumen globular medio y puede utilizarse para
determinaciones de hemoglobina, hematocrito, recuento globular, eritrosedimentación
según wintrobe.
Preparación:
Oxalato de Amonio............................... 1.2g
Oxalato de Potasio................................ 0.8g
Agua destilada.......................................100mL

Esta cantidad de anticoagulante sirve para recoger 5mL de sangre. Agitar con suavidad
por rotación. Evitar la agitación violenta que destruye las células.

4. ¿Cuál es el valor normal de hematocrito en un adulto sano? Sus resultados están

acordó con este valor.

R// Los siguientes son resultados normales de un hemograma completo en adultos:

Recuento de eritrocitos Hombre: 4.35-5.65 billones de células/L*

(4.32-5.72 millones de células/mcL**)
Mujer: 3.92-5.13 billones de células/L
(3.90-5.03 millones de células/mcL)

Hemoglobina Hombre: 13.2-16.6 gramos/dL***

(132-166 gramos/L)
Mujer: 11.6-15 gramos/dL
(116-150 gramos/L)

Hematocritos Hombre: 38.3-48.6 %

Mujer: 35.5-44.9 %

Recuento de glóbulos blancos 3.4-9.6 billones de células/L

(De 3,400 a 9,600 células/mcL)

Recuento de plaquetas Hombre: 135-317 billones/L

(De 135,000 a 317,000/mcL)
Mujer: 157-371 billones/L
(157,000-371,000/mcL)

Habitualmente, un hemograma completo no es un análisis de diagnóstico definitivo. Por

ejemplo, si eres una persona sana y no tienes signos ni síntomas de enfermedad, los
resultados que son ligeramente inferiores o superiores a los valores normales en un
hemograma completo pueden no ser un motivo de preocupación, y tal vez no sea
necesario realizar un seguimiento.

5. Explique el fundamento de la determinación de hematocrito y cuál es su utilidad

diagnostica.

R// La prueba del hematocrito es un tipo de análisis de sangre. Los glóbulos y las
plaquetas están suspendidos en un líquido llamado plasma. El hematocrito mide la
cantidad de sangre compuesta por glóbulos rojos. Los glóbulos rojos contienen una
proteína llamada hemoglobina que transporta oxígeno de los pulmones al resto del
cuerpo. Tener niveles del hematocrito demasiado altos o bajos puede indicar un problema
de la sangre, deshidratación u otras condiciones médicas.

¿Para qué se usa?

El hematocrito suele ser parte del conteo sanguíneo completo, que mide muchos
componentes de la sangre. También se usa para diagnosticar trastornos de la sangre
como anemia, en que no hay suficientes glóbulos rojos, o policitemia vera, un problema
poco común en el que la sangre tiene demasiados glóbulos rojos.

¿Qué significan los resultados?

Si los resultados muestran que sus niveles de hematocrito están demasiado bajos, eso
podría indicar:
 Anemia
 Deficiencia nutricional de hierro, vitamina B-12 o folato
 Enfermedades de los riñones
 Enfermedades de la médula ósea
 Ciertos tipos de cáncer como leucemia, linfoma o mieloma múltiple
Si los resultados muestran que sus niveles de hematocrito están demasiado altos, eso
podría indicar:
 Deshidratación, la causa más común de niveles de hematocrito altos. Beber más
líquido generalmente vuelve los niveles a la normalidad
 Enfermedades pulmonares
 Enfermedades congénitas del corazón
 Policitemia vera
Si sus resultados no están dentro de los límites normales, eso no significa necesariamente
que usted tenga un problema médico que requiere tratamiento.
 BIBLIOGRAFIA

1.https://es.khanacademy.org/science/biology/human-biology/circulatory-
pulmonary/a/components-of-the-blood

2. Diferencia entre plasma y suero sanguíneo, disponible y tomado

de http://www.diferenciaentre.net/la-diferencia-entre-plasma-y-suero/

3. Fundamento de las pruebas de TPT y TP.

Chernecky CC, Berger BJ. Activated partial thromboplastin substitution test - diagnostic.
In: Chernecky CC, Berger BJ, eds. Laboratory Tests and Diagnostic Procedures. 6th ed.
St Louis, MO: Elsevier Saunders; 2013:101-103.

4. Ortel TL. Antithrombotic therapy. McPherson RA, Pincus MR, eds. Henry's Clinical
Diagnosis and Management by Laboratory Methods. 23rd ed. St Louis, MO: Elsevier;
2017:chap 42.
Ultima revisión 2/7/2017

5. Versión en inglés revisada por: Todd Gersten, MD, Hematology/Oncology, Florida

Cancer Specialists & Research Institute, Wellington, FL. Review provided by VeriMed
Healthcare Network. Also reviewed by David Zieve, MD, MHA, Medical Director,
Brenda Conaway, Editorial Director, and the A.D.A.M. Editorial team.
Traducción y localización realizada por: DrTango, Inc.

6. TPT y TP Revisado por: Larissa Hirsch, MD Fecha de revisión: noviembre de 2017

https://kidshealth.org/es/parents/test-pt-esp.html

7. Mecanismo de acción de los anticoagulantes. Henry, R., Clinical Chemistry. Principles

and Technics (1964), IÓVINE Enrique; SELVA Alejandro: El laboratorio en la clínica.
Tercera edición. Buenos Aires: Panamericana, 1985. Publicado por BioQ en 18:26

8. Valores normales de hematocrito Escrito por el personal de Mayo Clinic