Práctica 17

ITESM Campus Puebla

Equipo 8 Sesión 16
Integrantes:
Juan Carlos López Medina A01324506
Arturo Tlelo Reyes A01099697
Carla María Barceló Chong A01099195
Iván Eduardo Teáhulos Castillo A01324895

Responsables del laboratorio:

Mtro. Victor Hugo Blanco Lozano

Dr. Isaac Monroy

Pruebas generales para lípidos

Objetivo: Experimentalmente analizar las propiedades de los lípidos así como la

reacción que presentan ante ciertos reactivos.

Introducción:
-Los aceites y grasas son parte muy importante de la dieta humana ya que fungen como
fuente de energía. Los ácidos grasos que contienen determinaran las características
funcionales que tendrán las grasas y los aceites que determinan su aceptación en el
sector alimentario. Se puede determinar estas características por medio de la medición
de distintos índices:

-> Índice de Yodo: es el peso total de yodo absorbido por la muestra, ya que los
glicéridos que se encuentran en los ácidos grasos insaturados tienden a unirse al
halógeno, por lo tanto esto determina el gado de insaturación.

X = ml de tiosulfato utilizados en titulación de muestra

Y = ml de tiosulfato utilizados en titulación de testigo.
N = Normalidad de la disolución de tiosulfato de sodio.
M = la muestra en gramos

Índice de Peróxido: Se determina volumétricamente y esta volumetría es directamente proporcional del

yoduro de potasio liberado con tiosulfato de sodio, utilizando como disolvente el cloroformo.

Y = ml de tiosulfato de sodio gastados en la titulación de testigo.

X = ml de tiosulfato de sodio gastados en la titulación de problema.
N = normalidad de tiosulfato de sodio.
Muestra = gr

-Índice de acidez: la cantidad de ácidos grasos determina la edad de una grasa o aceite, y estos deben
equivaler al número de mg de KOH que se necesite para neutralizar el ácido graso que se encuentre en 1
gr. de grasa. Esto nos indica la escala de descomposición de los glicéridos del aceite que se produce por la
lipasa u otras causas.

ml= mililitro de hidróxido de potasio.

N = normalidad del hidróxido de potasio.
0.0561 = miliequivalente del hidróxido de potasio.
Muestra = en gramos pesados.

-Índice de saponificación de una grasa: los grupos gliceril-ésteres al pasar por un proceso de reflujo de
álcali se hidrolizan, y éste índice se determina con el número de miligramos de KOH necesario para poder
neutralizar a los ácidos grasos resultantes de dicha hidrólisis en un gramo de grasa.

Índice saponificación: (ml HCL consumidos)- (ml HCL consumidos por muestra)= V*

*dicho volumen se multiplica por la concentración de KOH utilizado y se obtienen los miliequivalentes
de KOH utilizado en la reacción y estos últimos se multiplican por el peso equivalente del KOH
así obteniendo los mg de KOH que se requerirán.

Experimento 1: Determinación del índice del yodo

1. Se pesaron 200 mg de aceite en un frasco de boca esmerilada.

0.2 grs de grasa

2. Se añadieron 10 ml de cloroformo para disolver la muestra y se agitó.

3. Se adicionaron con bureta 25 ml de reactivo de Hanus, se mezcló y se dejó reposar con el

frasco tapado en la oscuridad durante media hora.
4. Luego se agregaron 10 ml de la solución de yoduro de potasio al 15 % y 100 ml de agua
destilada.
Se tituló con una solución de tiosulfato de sodio 0.1N.
* Se utilizaron 8 ml.
* Al momento de caer las gotas, pasó de un color rojizo a uno amarillo (tenue).

Sin embargo, no detuvimos la titulación al momento de obtener este color. Ésto influyó para
que no se obtuviera el color deseado.
Se agitó la solución y se obtuvo el color amarillo deseado.

Ya que el color del líquido pasó de café rojizo a amarillo paja, se le agregaron cerca de 25 ml
de almidón al 1% y se tornó de un color azul obscuro.

Se volvió a hacer la titulación con 27 ml de tiosulfato, hasta que el color desapareciera.

El color del fondo pasó a un color blancuzco y el líquido se puso de color blanco opaco
por el exceso de almidón.
5. Se hizo una solución testigo usando los reactivos a la par que el problema.

* Índice de yodo = [( ml - 27ml)(0.1N)(0.127)(100)] / 0.2 gr

* No se anotaron cuántos ml se utilizaron para la titulación del testigo.

Experimento 2: Determinación del índice de peróxido

1. Se pesaron 10 g de aceite en un frasco de boca esmerilada.

2. Se añadieron 25 ml de mezcla de ácido acético-cloroformo 3:2 (15 ml de ácido acético, 10 ml

de cloroformo al 3%) para disolver el aceite.

3. Se agregaron 2g de bicarbonato de sodio, se agitó y se guardó en un locker durante 10

minutos para que la luz no la afectara, y con el tapón mal ajustado para que se pudiera desalojar
el aire y el exceso de dióxido de carbono.

4. Después se añadieron 2 ml de KI al 15%, se agitó y se guardó de nuevo en el locker de la

misma manera por una hora.

5. Terminado el periodo de reposo, se añadieron 50 ml de agua destilada.

* La solución empezó a burbujear y quedó dividida en dos fases.

6. Se tituló el yodo liberado con tiosulfato de sodio 0.2 N.

* La solución era amarillenta al principio, y después quedó transparente con el aceite en el
fondo.
 7. Se hizo una prueba testigo con todos los reactivos en ésta.
* Se utilizaron 9.1 ml de tiosulfato pentahidratado para la titulación del primero con aceite.
* Se utilizaron 12.5 ml de tiosulfato pentahidratado para la titulación del testigo.

* Miliequivalentes de tiosulfato de sodio:

meq = [(9.1 ml de tiosulfato en problema – 12.5 ml utilizados para testigo)(0.2N)(1000)] / 10

grs muestra (aceite) = -68

Experimento 3: Índice de acidez

· Con grasa:

- Se pesaron 10g de grasa (mantequilla) y se suspendió en 50 mL del solvente de alcohol+éter

(alcohol al 95% + éter, 1:1).
 - Se añadió 1 ml de solución de fenolftaleína y se mezcló.
- Posteriormente se tituló con KOH 0.1N hasta que el color rosa pálido persistió por 10
segundos.

* Se utilizaron 3 ml de álcali estándar (KOH 0.1 N).

* Valor de ácido de la grasa:

Índice de acidez = [(3ml)(0.1N)(0.0561)(100)] / 10 grs (muestra) = 0.1683


Con aceite:

- Se realizó el mismo procedimiento pero ahora utilizando 10 g de aceite.

* Se utilizaron 2.8 ml de álcali estándar (KOH 0.1 N).

* Valor de ácido de la grasa:

Índice de acidez = [(2.8ml)(0.1N)(0.0561)(100)] / 10 grs (muestra) = 0.15708

Experimento 4: Índice de saponificación de una grasa

- Se pesó 1 gramo de grasa (mantequilla) y se disolvió en 3mL de solvente.

- Se transfirió el contenido del frasco a un matraz de Erlenmeyer de 250mL y se le añadieron

25mL de KOH alcohólico 0.5N.
* Al prepararlo tuvo lugar reacción exotérmica.

- Se conectó un condensador a reflujo y se calentó el matraz sobre un baño de agua hirviente

durante 30 minutos.

* La mufla que utilizamos en el laboratorio no superaba los 100°C por lo que el agua
nunca llegó a su estado de ebullición, afectando nuestros resultados.

- Se dejó el matraz a temperatura ambiente y posteriormente se tituló con HCl 0.5N.

* Antes de la titulación, la consistencia era densa y de un color amarillo claro opaco.

* Se utilizaron 20 ml de HCl 0.5 N.

- Se realizó un testigo (se utilizaron 25.5 ml aprox).

* Se utilizó fenolftaleína como indicador.

* Reacción:

Triacil- glicérido + KOH (exceso) --------> 3 (Sales de K) + Glicerol + KOH

(remanente)

KOH (remanente) --------> KCl + Agua

* Así, los moles de HCl gastados durante la titulación ácido-base, son iguales a los
moles de KOH añadidos en exceso. Como se conocen las moles de KOH añadido en
exceso, es posible calcular la cantidad de triacilglicéridos (un mol de triacilglicérido
consume 3 moles de KOH). Al testigo se le restan los mililitros de HCl consumidos por
la muestra problema.

CUESTIONARIO

1. ¿Por qué se enrancia una grasa?

Esto se debe a que los dobles enlaces de las moléculas de los ácidos grasos al entrar en contacto con
moléculas de oxígeno se rompen y la molécula pasa a formar aldehídos.
2. ¿Qué son los métodos volumétricos?
Son métodos que nos permiten determinar la concentración de una concentración en la sustancia
problema mediante una disolución de concentración conocida.

3. ¿Para qué sirven las titulaciones ácido-base?

Para poder saber la cantidad de concentración de ácido que se encuentra en la

muestra problema a partir del volumen de titulante, en este caso una base, que se
utilizó. Esto tiene sus bases en la siguiente fórmula:

Para este tipo de titulación es preferible utilizar la concentración en Normalidad debido a

que un mol de H+ reaccionará con un mol de OH-, ya que para la normalidad se sabe que
los iones H+ y los iones OH- nos dirán que cantidades de gramos nos aportaran para el peso
equivalente del ácido o base.

4. ¿Por qué es necesario un la titulación de un testigo en las titulaciones de muestras?

A diferencia de la muestra control que es la que tiene una concentración conocida o un

componente conocido y nos ayuda a poder llevar un control en cuánto al resultado de los
experimentos, en cambio la muestra testigo tanto puede, como no, llegar a contener el reactivo
que se está buscando analizar. Esto se debe a que se quiere observar que efecto tiene esta
reacción sin el reactivo a analizar para comparar los resultados respecto a la muestra problema.
P.e: en esta práctica si se realizaba un experimento que utilizara un lípido la muestra testigo
debía realizarse exactamente igual pero sin el lípido.

5. ¿Qué son los ácidos grasos saturados y ácidos grasos insaturados?

Para empezar los ácidos grasos son ácidos orgánicos, son prácticamente ácidos carboxílicos
unidos a una larga cadena hidrocarbonada.
Podremos diferenciar entre ácidos grasos saturados e insaturados por la presencia de doble
enlaces. Los saturados son los que no poseen dobles enlaces porque están saturados de
hidrógenos mientras que los que tienen dobles enlaces son considerados insaturados. Éstos
últimos presentan isomería del tipo -cis debido a que sus hidrógenos se acomodan en un mismo
plano lo que hace que éstos ocupen más espacio lo que les confiere una característica líquida y
les permite ser procesados más fácilmente por el organismo.

6. ¿Qué son los triacilglicéridos?

Están conformados por una molécula de glicerol que está triesterificada, sirve más que nada
para el almacenamiento de energía.
 Siendo las R's los ácidos grasos

Conclusión:
El análisis de las pruebas para conocer las propiedades de los lípidos es de suma importancia
ya que los aceites y grasas son parte muy importante de la dieta humana. Se corroboró que los ácidos
grasos que contiene cierto tipo de grasa o aceite, son los que determinarán las características funcionales
de dicha grasa o aceite. El conocer las propiedades de los lípidos es relevante en el área de nutrición para
el sector alimentario así como en la bioquímica.

Referencias:
- Anónimo. (30 de Abril de 2008). Los átomos de Demócrito . Recuperado el 8 de Abril de 2013, de
http://labquimica.wordpress.com/2008/04/30/titulacion-acido-base/
- Universidad de Huelva. (2005). Lípidos . Recuperado el 10 de Abril de 2013, de
http://www.uhu.es/08007/documentos%20de%20texto/apuntes/2005/pdf/tema_03_lipidos.pdf
-Edgar, C.-V. (15 de Octubre de 2003). Bioquímica y Biología Molecular en Línea . Recuperado el 10 de
Abril de 2013, de http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/triacilgliceridos.html