COLECCIÓN DE SEMEN

OBJETIVOS
- Adquirir destreza en el armado y uso de todos los materiales y equipos
necesarios para la colecta y evaluación del semen bovino.
- Llevar a cabo los protocolos necesarios para el desarrollo de la práctica.
- Determinar el momento exacto de la colecta para evitar la
contaminación del semen con presencia de orina u otros materiales
ajenos.
MARCO TEORICO
El electroeyaculador hace parte de los métodos utilizados para la
recolección de semen, este método es utilizado cuando el toro es
renuente al contacto sexual y/o para aprovechar al máximo el potencial
reproductivo del macho.
La presente técnica, está basado en la estimulación de las glándulas
accesorias sexuales por medio de descargas eléctricas posteriores a la
introducción del electroeyaculador en el recto del toro, con las cuales se
puede obtener una erección y posteriormente un eyaculado. La
estimulación no se extenderá a más de cinco minutos, ya que puede
causar ciertos traumatismos en el toro.
Se debe tener preparado con anticipación el material a utilizar para la
recolecta del semen (un embudo recolector que conducirá el semen a un
tubo de ensayo). El semen recolectado debe ser manipulado teniendo en
cuenta ciertas técnicas para su conservación y posterior uso
En este método se hace uso de un electroeyaculador que consta un
electrodo conectado a una batería que genera estimulaciones rítmicas
provocadas por corriente no mayores a 20 voltios, las descargas pueden
ser automáticas o manuales.
MATERIALES
- Toro
- Electroeyaculador
- Baño maría
- Mango de colecta
- Toallas absorbentes
 - Agua
- Jeringa
PROCEDIMIENTO

1. ALISTAMIENTO DEL TORO: Para esta técnica utilizaremos un toro puro

de raza ABERDEEN ANGUS NEGRO llamado apolo.
- Se procede a traer el toro del corral de residencia (CR) y ubicarlo en los
corrales de manejo en el cual se deja descansar por un periodo de 10 a 15
minutos.
- Si por algún motivo el toro fue maltratado en el camino o si se hizo
correr éste se debe dejar descansar durante un periodo más prolongado.
2. ALISTAMIENTO DEL BAÑO MARIA: previo a la colecta del semen se
debe alistar el baño maría.
- Se realiza el llenado con agua del baño maría hasta el nivel indicado.
- Se ubica la gradilla dentro del baño maría.
- Se procede a encender el baño maría.
- Con los botones de regulación de temperatura se lleva el agua a una
temperatura de 36 a 37 °C, con lo cual se busca evitar un choque
térmico a los espermatozoides.
3. DIRECCIONAMIENTO DEL TORO AL BRETE:
- Se procede a llevar el toro del corral de manejo (CM)al breteo
apretadero.
- Luego se realiza una sujeción parcial para facilitar la práctica de
colecta.
4. TRASLADO DEL LIQUIDO SEMINAL A LABORATORIO
- Inmediatamente se colecta el semen se procede a retirar el tubo de
colecta del embudo y se tapa, rápidamente debe ser llevado al
laboratorio.
- Se debe empuñar el tubo de colecta con el fin de mantener la
temperatura y evitar que los rayos UV disminuyan la calidad del semen.
DESAMARRAR EL TORO:
 - Se procede a retirar todo el material de sujeción utilizado para
inmovilizar parcialmente el toro.
- Al igual que en el momento de la llegada del toro este debe ser
tratado de la misma forma, lo que quiere decir que no se debe
maltratar el animal se debe brindar un adecuado bienestar animal.
- Se ubica en el corral de manejo con el fin de dejarlo descansar.

La obtención del semen se puede realizar por tres métodos, dependiendo

de la especie:
a) ELECTROEYACULACIÓN: En toros y carneros, en toros de lidia, en toros
que sufren de algún trauma en una de las extremidades, o que no tienen
libido.
b) MANUAL: En cerdos, aves y peces.
c) VAGINA ARTIFICIAL: Es el más práctico y el que da mejores resultados
en toros, carneros y potros.
VAGINA ARTIFICIAL
Aparato formado por las siguientes partes:
- Cuerpo de caucho rígido
- Funda de látex
- Cono de látex
- Tubo de colección graduado
El espacio entre el cuerpo y la funda se llena con agua
caliente a una T°(42 y 45ºC) a fin de simular la
temperatura de vagina de la hembra.
 VAGINA ARTIFICIAL PARA EL TORO

COLECCIÓN DE SEMEN
Debe reunir las siguientes exigencias:
- El eyaculado debe ser completo y libre de contaminaciones.
- Los espermatozoides no deben sufrir trastornos de ninguna índole,
especialmente cambios de temperatura
- No debe alterar la salud ni el vigor sexual del reproductor, por mal
manejo del toro.
- El técnico que maneja el toro debe ser el mismo, de carácter reposado,
tiene que estimar al animal, para que el toro no tenga ningún temor al ser
manejado.

DILUCIÓN
Evaluación Microscópica
 Motilidad
 Concentración espermática
 Vivos y muertos
 Anormalidades espermáticas
MOTILIDAD
 CONCENTRACIÓN ESPERMÁTICA

VIVOS Y MUERTOS: TENSIÓN EOSINA – NIGROSINA

 VIVOS Y MUERTOS

PRINCIPALES ANORMALIDADES MORFOLOGICAS DE ESPERMATOZOIDES

DE MAMIFEROS
 ESPERMATOZOIDES BOVINOS NORMALES

PROCESO DE CONGELACION
Evaluar la motilidad el semen después de diluir
 Envasar en pajillas y sellar con alcohol polivinílico.
 Colocar el semen envasado en una cubeta de plástico con
agua a temperatura ambiente y llevar a refrigeración por 6 a
18 horas, la temperatura debe llegar en la cubeta a 4 °C ó 5
ºC.
 En una caja de tecnopor de 40 x 30 x 30 cm., depositar
nitrógeno líquido a una altura de 5 a 8 cm.
 Coloca una malla rectangular o rejilla con área ligeramente
menor que la caja, las pajillas que estuvieron en
ambientación a 5ºC, previamente secadas con papel toalla o
franela.
 Los vapores de nitrógeno líquido bajarán la temperatura,
pasando de 4 °C o 5 ºC a 0 ºC en un minuto y luego
rápidamente debe bajar a - 20ºC por cada minuto hasta llegar
a -140ºC en 7 minutos.
 Luego de llegar a -140 ºC, se sumerge rápidamente las pajillas
en el nitrógeno líquido, concluyendo de este modo el proceso
de congelamiento.
 DILUCIÓN
PROTOCOLO DE DILUTOR BIOXCELL EN SEMEN CONGELADO
Preparación del dilutor:
 Poner el frasco de 100 ml de dilutor concentrado en baño maría a
32-34°C por 10 minutos.
 Poner en un erlenmeyer de 500ml, 400ml de agua bidestilada
apirógena en baño maría a 32-34°C por 10 minutos.
 Poner el dilutor concentrado dentro del agua bidestilada apirógena.
 Enjuagar el frasco 2 veces con la solución final.
 Homogenizar la solución; el dilutor está listo para usar.
 Se recomienda usar el dilutor dentro de las 6 horas después de su
preparación.
CONGELACION DE SEMEN EN TOROS
CRIOPRESERVACIÓN DE SEMEN
 Es el depósito, congelamiento y almacenamiento de
espermatozoides en un banco de semen para uso futuro.
 Los espermatozoides mantenidos de esta manera son
posteriormente utilizados en inseminación artificial, fertilización in
Vitro.
 La criopreservación trae las siguientes ventajas:
– Permite almacenar el semen por varios años
– Permite tener dosis de semen de varios toros en un
solo tanque criogénico.
 EMPAJILLADO

CONGELACION
1. Secado de pajillas de semen diluido refrigerado a 5 °C.

2. Caja de congelamiento de semen.

3. Pajillas sometidas a vapores de nitrógeno líquido por 7 minutos hasta

175 °C.
4. Pajillas sumergidas en nitrógeno líquido (-196 °C)

DESCONGELACION DE PAJILLAS
Descongelación en agua temperada a 37-38 °C.

Sumergir la pajilla por espacio de 12-15 segundos

Secar completamente

Cortar del extremo del alcohol polivinilico

 EVALUACIÓN DE MOTILIDAD
Eliminar la primera gota de semen

Colocar una gota de semen en el portaobjeto a 38 °C.

Cubrir con una lámina cubre objeto.

Motilidad progresiva individual mayor de 60%

Motilidad progresiva individual mayor de 60%
ALMACENAMIENTO DEL SEMEN
Almacenamiento de pajillas a granel

Almacenamiento de pajillas en varillas

RESULTADOS
- Conocimiento y puesta en práctica de un protocolo apto para la
colecta de líquido seminal por medio del método de
electroeyaculador.
- Familiarización y uso del equipo de electroeyaculado Bovino.

- Lograr llevar a cabo con éxito todo el procedimiento de recolección

de semen.