Universidad Nacional de Colombia

Proyecto de Laboratorio de Microbiología

Cultivo de Orellanas: Pleurotus ostreatus

Introducción

Pleurotus ostreatus, es un hongo perteneciente al filo de los Basidiomicota, orden de los

Agaricales y al género Pleurotus. Es reconocido por ser una seta comestible y su interés económico
ha sido muy importante a nivel industrial. Al ser un hongo comestible se han reconocido
propiedades nutricionales como el aporte de aminoácidos esenciales entre los cuales se
encuentran leucina y lisina, ausente en la mayoría de cereales. También se ha reportado que
presentan el doble de proteínas que los vegetales y se ha enfatizado en su bajo aporte de calorías y
carbohidratos (Corredor y López, s.f).

A nivel económico, ha sido utilizado en preparaciones de comida gourmet, razón por la cual su
cultivo es altamente apetecido mundialmente. Colombia, posee las condiciones climáticas
adecuadas para su cultivo y además al ser un país agrícola genera desechos orgánicos que pueden
ser aprovechados como sustratos en la producción de orellanas a nivel industrial (Corredor y
López, s.f).

Objetivos

 Establecer un cultivo de orellanas casero con Pleurotus ostreatus.

 Manipular adecuadamente los microorganismos y técnicas de trabajo aséptico.

Materiales

 Autoclave
 Inoculo de Pleurotus ostreatus.
 Frascos de compota o mermelada sin tapa.
 Papel aluminio.
 Semillas de sorgo, trigo o quinua.
 Mecheros.
 Marcador.
 Tubo de PVC de 5 cm de largo y 1,5 pulgadas de diámetro.
 Cal 1% de la mezcla total
 1 Bolsa de polipropileno, calibre 2. Tamaño para 2,5 kilos.

 Sustrato:
 o Fuente de Carbono (79%): Pasto seco 5%, Hojas de Maíz 5%, Aserrín 69%.
o Fuente de Nitrógeno (20 %): Salvado de trigo o mogolla de trigo.

Procedimiento

 Preparación del sustrato

a. Cuantificar la cantidad total que se desea preparar.

b. Para preparar la fuente de carbono se pueden utilizar los sustratos que aparecen
reportados en los materiales o solo uno de ellos. Se debe tener en cuenta que el
porcentaje de esta fuente nutricional debe representar el 79 % del peso total de la
mezcla.

c. Es importante que la fuente de nitrógeno represente el 20 % del peso total de la

mezcla.

d. Homogenizar todo el material y adicionar el 1% de cal o carbonato de calcio del

peso total de la mezcla. Adicionar 60% de agua preferiblemente de una fuente no
contaminada (Acueducto, Agua de riego garantizada). Verificar la humedad
apretando con la mano un puñado de sustrato, de manera que este no escurra
agua al apretarlo y solamente este humedecido.

e. Empacar en una bolsa de polipropileno, calibre 2. Tamaño para 2,5 kilos y llevar a
autoclavar por 20 minutos.

 Preparación de Inoculo

a. Realizar el preinoculo de Pleurotus ostreatus en una caja de PDA (monitor).

b. Realizar un lavado con agua de semillas sorgo, trigo o quinua. Colarlo para eliminar
las impurezas. Adicionar 1 % de Cal y 2 % de yeso del peso total del cereal
escogido. Dejar en remojo por una noche.

c. Empacar en 1 frasco de vidrio, llenando ¾ partes del frasco y taparlo con papel
aluminio y llevar a autoclavar por 20 minutos.

d. Una vez se tenga el medio de cultivo inoculado por el monitor, se procede a tomar
una muestra del hongo e inocularlo en el frasco con las semillas, taparlo con papel
aluminio y luego con vinipel, dejándolo en la oscuridad por 3 días. Hacerlo cerca al
mechero para garantizar la inocuidad.
  Inoculación e Incubación

a. Una vez se vea el frasco con las semillas de cereal completamente colonizado por
el hongo, se procede a inocular el sustrato de la bolsa con las semillas colonizadas;
cerrando la parte superior de la bolsa y ajustándolo con el tubo de PVC, se debe
rellenar con algodón para permitir el intercambio gaseoso. Se debe marcar con la
fecha de inicio del cultivo

b. Se debe incubar de 13 a 18 días en la oscuridad a temperatura ambiente.

 Fructificación

a. Transcurrido el tiempo de incubación, se procede a realizar choque mecánico en la

bolsa para estimular el crecimiento del hongo.

b. Se deben poner las bolsas elevadas y amarradas con una cuerda.

c. Esperar al momento de la fructificación. Se deben cosechar todas las orellanas.

Bibliografía

 Corredor, R y López, C. (s.f). Evaluación del crecimiento y producción de Pleurotus

ostreatus sobre diferentes residuos agroindustriales del departamento de Cundinamarca.
Tesis de grado para obtener el título de Microbiólogo Industrial. Pontifica Universidad
Javeriana. Bogotá. Colombia.

 Brock, T. D and Madigan, M. 1991. Microbiology Prentice Hall México. P 136-137.

 Prescott L., Harley, J. and Klein D. 1999 Microbiología 4 Edición. McGraw-Hill.