Laboratorio de Biología

Prof. Seir Antonio Salazar Mercado

RECONOCIMIENTO CUALITATIVO DE BIOCOMPUESTOS

MARCO CONCEPTUAL

Todos los organismos vivos, procariotas y eucariotas, están conformados por compuestos inorgánicos y orgánicos que
interactúan en múltiples procesos físicos y químicos para constituir el denominado metabolismo.

Los principales compuestos orgánicos que intervienen en la composición y metabolismo del ser vivo son los
carbohidratos, proteínas, ácidos nucleicos, lípidos, vitaminas, hormonas y pigmentos, en el caso de las plantas
fotosintéticas. El agua es el componente inorgánico más abundante, constituye aproximadamente el 85% de las células
vivientes.

Los carbohidratos o hidratos de carbono, como azúcares y almidones, se usan para suministrar energía. Los lípidos como
las grasas se pueden utilizar directamente como fuente de energía o se pueden almacenar como futura provisión
energética.

Las proteínas se utilizan en las reacciones metabólicas como bloques de construcción para fabricar células nuevas o
reparar las usadas, o se convierten en grasa o glucosa para suministrar energía adicional.

Los ácidos nucleicos son moléculas complejas en donde está codificada la información que dicta las estructuras de la
enorme variedad de moléculas de proteínas que se encuentran en los organismos.

En el laboratorio se puede determinar cualitativamente la presencia de algunos compuestos orgánicos en muestras

seleccionadas.

OBJETIVOS

-Reconocer algunos biocompuestos mediante reacciones específicas.

- Demostrar, por medio de pruebas químicas, la presencia de azúcares, almidón, lípidos y proteínas en sustancias patrón.

- Realizar un análisis cualitativo de la presencia o ausencia de los biocompuestos mencionados en muestras de alimentos
de consumo cotidiano.

IMPLEMENTOS

EQUIPOS Y REACTIVOS MATERAIL BIOLÓGICO

Implementos personales Porción de leche (5 c.c.)
Baño serológico Porción de aceite de cocina (5 c.c.)
Gradillas, pinzas y tubos de ensayo Porción de clara de huevo (5 c.c.)
Mortero y pistilo Porción de orina de persona normal y otra con
diabetes (5 c.c.)
Goteros Trozo (aproximadamente 5g) de carne cruda
(res, pescado, cerdo)
Pipetas de 5 ml Trozo (aproximadamente 5g) de pan de tajada
Mechero de alcohol Trozo (aproximadamente 5g) de fruta
(aguacate, mango, manzana)
Reactivos de: Benedict, Biuret, Lugol Porción de harina (5g) de maíz, trigo.
Soluciones de: glucosa 10%, almidón 1%,
albúmina de huevo
Ácido clorhídrico diluido
PROCEDIMIENTO

PRIMERA PARTE. RECONOCIMIENTO DE BIOCOMPUESTOS EN MUESTRAS PATRÓN

Inicialmente el profesor y el asistente de laboratorio proceden a realizar pruebas bioquímicas para determinar azúcares,
almidones, lípidos y proteínas en sustancias patrón.

- Reconocimiento de glucosa. Prueba Benedict

En dos tubos de ensayo se colocan:

Tubo 1. 1 ml de agua y 2 ml de solución de Benedict.

Tubo 2. 1 ml de solución de glucosa al 10% y 2 ml de solución de Benedict.

Calentar a 80ºC durante 2 minutos en un baño serológico. Registrar el cambio de coloración ocurrido en el tubo 2 en
comparación con el color de la solución del tubo 1. Conservar el tubo 2 para usarlo como control en la determinación de
glucosa en las sustancias problema.

- Reconocimiento de almidón. Prueba de Lugol

En dos tubos de ensayo se colocan:

Tubo 1. 1 ml de agua y 2 gotas de disolución de Lugol.

Tubo 2. 1 ml de almidón al 1% y 2 gotas de solución de Lugol.

Registrar la coloración que toma la solución que contiene el tubo 2 y conservarla como control en la determinación de
almidón en las sustancias problema.

- Reconocimiento de proteínas. Reacción de Biuret

En dos tubos de ensayo se colocan:

Tubo 1. 2 ml de agua, 2 ml de hidróxido de sodio (NaOH) 10%, mezclar y luego agregar sulfato de cobre (CuSO4) 0.5%
gota a gota.

Tubo 2. 2 ml de solución de albúmina de huevo, 2 ml de hidróxido de sodio (NaOH) 10%, mezclar y luego agregar sulfato
de cobre (CuSO4) 5% gota a gota.

No añadir más sulfato de cobre cuando se presente un cambio de color en la solución. La aparición de un color violeta,
púrpura o rosado se considera resultado positivo. Conservar el tubo 2 para usarlo como control en la determinación de
proteínas en las sustancias problema.

- Reconocimiento de proteínas. Reacción Xantoprotéica

En dos tubos de ensayo se colocan:

Tubo 1. 2 ml de agua y 3 gotas de ácido clorhídrico diluido.

Tubo 2. 2 ml de solución de albúmina al 1% y 3 gotas de ácido clorhídrico diluido.

Evitar el contacto con este ácido.

- Reconocimiento de lípidos. Reacción con Sudam III

En dos tubos de ensayo colocan:

Tubo 1. 2 ml de agua más 4-5 gotas de Sudam III

Tubo 2. 2 ml de agua más 1 ml de aceite de cocina, más 4-5 gotas de Sudam III. Agitar ambos tubos y dejar en reposo.

SEGUNDA PARTE. RECONOCIMEINTO DE BIOCOMPUESTOS EN SUSTANCIAS PROBLEMA

- Seleccionar mínimo seis (6) muestras del material biológico traído a la práctica. Preferiblemente mitad sólido y
mitad líquido.
- En un momento triturar las muestras sólidas y mezclar con 5 ml de agua. Depositar cada muestra en un tubo de
ensayo diferente.
- Depositar en cada tubo de ensayo de 5-10 c.c. de la muestra problema y proceder a determinar la presencia o
ausencia de los biocompuestos en estudio.
- Consignar los resultados obtenidos en la tabla adjunta.

ANÁLISIS DE LAS EXPERIENCIAS DESARROLLADAS

CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA
 GLUCOSA (*) ALMIDÓN (*) PROTEÍNAS (*) LÍPIDOS (*)
Sustancia (Bendeict) (Lugol) (Sdudam III)
(Biuret) (Xantoprotéica)
problema Coloración Coloración Coloración
Coloración COloración
Antes Después Antes Después Antes Después Antes Después Antes Después

(*) Coloque + si es positivo y – si es negativo