DETERMINACION DE HIERRO TOTAL EN UNA MUESTRA DE AGUA.

METODO DE
FENANTROLINA.

RESUMEN: En esta práctica aprenderemos a realizar el proceso de pre-muestreo, teniendo

en cuenta los diferentes requerimientos que se necesitan para desarrollar un correcto
análisis sobre el contenido de hierro en diferentes tipos de aguas. El objetivo de la práctica
es realizar el análisis a una muestra de agua usando como método cuantitativo la
espectrofotometría. Se logró obtener que la muestra de agua analizada tiene un valor dentro
de los estándares permitidos por el Estado
PALABRAS CLAVE: Espectrofotometría, espectrofotómetro, absorbancia, transmitancia,
Ley de Lambert-Beer.
ABSTRACT: In these practice we are going to make the pre-sampling process taking into
account the different requirements that we need to develop a right analysis about the
percentage of iron in different samples of water. The objective of these practice is to make
the analysis of a water sample using spectrophotometry as our quantitative method. We
obtained that the analyzed water sample had an accepted value between the stablished
parameters by the State,
KEYWORDS: Spectrophotometry, spectrophotometer, absorbance, transmittance,
Lambert-Beer’s Law.

INTRODUCCCIÓN para determinar la precisión y exactitud

del método utilizado.
La espectrofotometría es un
procedimiento de análisis químico
cuantitativo basado en la absorción de la
OBJETIVOS
energía radiante por parte de la muestra.
En la práctica realizada se usó la
espectrofotometría para determinar la
cantidad de hierro en una muestra de
agua residual, tomada con ocho días de
anticipación siguiendo el protocolo de pre-
muestreo estipulado en las guías de
laboratorio. Se desarrolló esta práctica
con el objetivo de evaluar si la muestra
tomada de una planta petrolera se
encuentra dentro de los parámetros
establecidos por la ley.
A partir de la práctica realizada se
comprendió la importancia del protocolo
de pre-muestreo y muestreo en el
momento de elaborar el análisis de
cualquier muestra. Por último se
desarrolló el debido análisis estadístico
- Objetivo general
Conocer el proceso de pre-muestreo
según los diferentes requerimientos
para realizar un correcto análisis
sobre el contenido de hierro en
diferentes tipos de aguas.
- Objetivos específicos
1. Preparar una solución stock y
patrones de trabajo.
2. Aplicar protocolos de tratamientos
de recipientes de muestreo y
recipientes de trabajo y aprender
sobre su importancia en el
procesamiento de muestras.
 3. Manejar el espectrofotómetro
mediante el estudio previo del
manual de funcionamiento.
4. Conocer la concentración de
hierro de una muestra de agua
mediante espectrofotometría.
5. Ejercer los conocimientos teóricos
de forma práctica para realizar de
forma adecuada lo propuesto por
la docente.
MARCO TEORICO
El marco teórico que se encuentra a
continuación nos permitirá conocer a
fondo los diferentes conceptos necesarios
para el desarrollo de la práctica.
MUESTREO: Material del que se toman
porciones para la preparación de un
sistema susceptible de mediciones que
determinen la cantidad de un
constituyente deseado. Es la cantidad de
sustancia sometida a diversos análisis,
con el propósito de encontrar su
identidad, su pureza, por métodos
cualitativos y/o cuantitativos.
MONITOREO: Proceso sistemático de
recolectar, analizar y utilizar información
para hacer seguimiento al progreso de
un proceso.
MUESTREO DE SÓLIDOS.
Si el material para analizar es
homogéneo, basta con tomar una
muestra suficiente para poder efectuar las
determinaciones necesarias y para
conservar una parte con la que se pueda
comprobar un dato, en caso de duda o de
inconformidad con los resultados
originales.
Si el material es homogéneo, el tamaño
de la muestra dependerá de la cantidad
de dicho material y de la variación del
tamaño de sus partículas; cuanto mayor
sea el numero de masas individuales,
más grande debe de ser la muestra. Para
preparar la muestra se toman pequeñas
porciones de diferentes secciones
horizontales y verticales del material, que
se trituran y se mezclan; por el método de
cuarteo.
MUESTREO DE LIQUIDOS
Cuando se trata de líquidos homogéneos,
cualquier porción que se tome es
representativa, pero si se trata de
emulsiones y suspensiones es necesario
agitar perfectamente antes de tomar la
muestra. Si la cantidad de material es muy
grande y no se puede agitar fácilmente se
puede tomar la muestra a varias
profundidades del recipiente.
MUESTREO DE GASES
Para muestrear un gas se emplea pipetas
especiales.
Antes de introducir la muestra en la
pipeta, es necesario hacer un vacío de
aproximadamente de 1 mm de mercurio
para evitar contaminación del gas con el
aire.
A continuación se llena el recipiente
dejando una presión superior a la
atmósfera.
Muestreo de aceptación (Control),
muestreo de caracterización (Analítico),
muestreo de atributos (Correcto o
incorrecto), muestreo por variables
(densidad, pH).
TIPOS DE MUESTRA
MUESTRA SIMPLE O PUNTUAL: Una
muestra representa la composición del
cuerpo de agua original para el lugar,
tiempo y circunstancias particulares en las
que se realizó su captación.
MUESTRAS COMPUESTAS: En la
mayoría de los casos, el término "muestra
compuesta" se refiere a una combinación
de muestras sencillas o puntuales
tomadas en el mismo sitio durante
diferentes tiempos
MUESTRAS INTEGRADAS: Para ciertos
propósitos, es mejor analizar mezclas de
muestras puntuales tomadas
simultáneamente en diferentes puntos, o
lo más cercanas posible.
ESPECTROFOTOMETRÍA: Métodos de
análisis más usados, y se basa en la
relación que existe entre la absorción de
luz por parte de un compuesto y su
concentración
ESPECTROFOTÓMETRO: Un
instrumento que tiene la capacidad de
manejar un haz de radiación
electromagnética comúnmente
denominado luz, separándolo en facilitar
la identificación, clasificación y
cuantificación de su energía.
LEY DE LAMBERT. : Esta ley establece
que cuando pasa luz monocromática por
un medio homogéneo, la disminución de
la intensidad del haz de luz incidente es
proporcional al espesor del medio, lo que
equivale a decir que la intensidad de la luz
transmitida disminuye exponencialmente
al aumentar aritméticamente el espesor
del medio absorbente.
TRANSMITANCIA (T): Es la razón entre
la luz monocromática transmitida (P) por
una muestra y la energía o luz incidente
(Po) sobre ella. Se acostumbra a
considerar la transmitida como la razón de
la luz transmitida por la muestra y la luz
transmitida por un estándar arbitrario
ABSORBANCIA(A): Se define como la
cantidad de energía radiante absorbida
por una sustancia pura o en solución.
SOLUCIONES STOCK: Se denomina
solución madre o stock a composiciones
concentradas de nutrientes las cuales
están formuladas por sales minerales que
se emplean en un medio particular.
SOLUCIÓN PATRÓN: Es la disolución de
una sustancia utilizada como referencia al
momento de hacer una valoración o
estandarización.
EXACTITUD: Se refiere a cuán cerca del
valor real se encuentra el valor medido.
En términos estadísticos, la exactitud está
relacionada con el sesgo (desviación,
inclinación) de una estimación. Cuanto
menor es el sesgo más exacto es una
estimación.
PRECISIÓN: Se refiere a la dispersión del
conjunto de valores obtenidos de
mediciones repetidas de una magnitud.
Cuanto menor es la dispersión mayor la
precisión.
CURVA DE CALIBRACIÓN: Uno de los
métodos más utilizados para determinar
la concentración de una muestra
problema, es el método de la curva de
calibración. Esta curva de calibración es
una gráfica que relaciona la concentración
de al menos cinco soluciones de estándar
de concentraciones conocidas, con la
absorbancia de cada uno de ellos a la
longitud de onda máxima.
LÍMITE DE DETECCIÓN (LDD): Se define
habitualmente como la cantidad o
concentración mínima de sustancia que
puede ser detectada con fiabilidad por un
método analítico determinado.
Intuitivamente, el LDD sería la
concentración mínima obtenida a partir de
la medida de una muestra (que contiene
el analito) que seríamos capaces de
discriminar de la concentración obtenida a
partir de la medida de un blanco, es decir,
de una muestra sin analito presente.
METODOLOGIA
 RESULTADOS
TABLA 1
Los datos que se encuentran a GRÁFICA 1
continuación fueron tomados a partir del
análisis de una solución patrón, en Curva Espectral.
diferentes longitudes de onda para
determinar el valor con mejor 1.4
1.3
absorbancia. En adición se realizó la 1.2
1.1
gráfica de curva espectral. La longitud de 1
0.9

Absorbancia
onda esta medida en nanómetros. 0.8
0.7
0.6
Todos los resultados que se describen a 0.5
continuación fueron realizados mediante 0.4
0.3
el uso de fórmulas de Microsoft Excel 0.2
0.1
2010. 0
400 430 460 490 520 550 580

Longitud de onda (nm)

Tabla 1.1 Datos construcción curva espectral (20 en 20
nm y 5 en 5)
Longitud de onda Absorbancia Transmitancia.
TABLA 2
400 0,411 38,80%
420 0,667 21,50% La siguiente tabla muestra los datos de
440 0,854 14,00% absorbancia obtenidos a partir de las
soluciones patrón y fueron usados para
460 0,988 10,30%
encontrar la concentración en partes por
480 1,159 6,90%
millón (ppm) de cada uno de los datos.
495 1,207 6,20%
500 1,217 6,10% TIPO DE MUESTRA ABSORBANCIA
505 1,258 5,50% P1 0
510 1,283 5,20% P2 0,022
515 1,274 5,30% P3 0,136
520 1,204 6,30% P4 0,262
525 1,121 7,60% P5 0,438
530 0,997 10,11% P6 0,55
540 0,697 20,10% P7 0,685
560 0,234 58,40% P8 1,318
BM1 0,038
Como podemos observar en la tabla la M1 0,086
transmitancia es inversamente M1-BM1 0,048
proporcional a la absorbancia.
TABLA 2.1
A continuación podemos observar la tabla
que contiene los datos de absorbancia de
lata tabla 2 y adicionalmente los datos de
su respectiva concentración. Los datos de GRÁFICA 2
la concentración se encontraron a partir
de la siguiente ecuación: CURVA DE CALIBRACIÓN.
𝑽𝟏 ∗ 𝑪𝟏 = 𝑽𝟐 ∗ 𝑪𝟐 1.6

(𝑽𝟏 ∗ 𝑪𝟏) 1.4 y = 0.2659x + 0.0084

𝑪𝟐 = R² = 0.9985

Absorbancia(nm)
1.2
𝑽𝟐
1
Donde V1 es el volumen en mililitros de la 0.8
solución stock (Variable), C1 es la 0.6
concentración en partes por millón de la
0.4
solución stock (9,98ppm), V2 el volumen
0.2
en mL del balón aforado (100mL) y C2 la
0
concentración en partes por millón de los
0 2 4 6
diferentes analito.
Concentración(ppm)
También podemos observar su respectiva
gráfica que es nuestra curva de
Utilizando Microsoft Excel se realizó la
calibración.
regresión lineal por mínimos cuadrados
Volumen1( Absorban Concentración( para obtener la ecuación con la que se
mL) cia (nm) ppm) realizaron los cálculos estadísticos de la
0 0 0 tabla a continuación.
1 0,022 0,099 Utilizando la ecuación de forma de
5 0,136 0,499 general obtenemos que:
10 0,262 0,99
𝑦 = 0,2659𝑥 + 0,0084
15 0,438 1,497 𝑅² = 0,9985
20 0,55 1,996
Dónde y es la absorbancia en
25 0,685 2,495
nanómetros, 0,2659 es la pendiente de la
50 1,318 4,99 recta, X la concentración en partes por
Muestra 0,048 0,14 millón, y 0,0084 el punto de corte con el
Diferenia eje y.
Absorbanci 0.086-
a muestra 0.038 𝐴 = 𝑚𝐶 + 𝑏
Si se despeja C:
𝐶 = (𝐴 − 𝑏)/𝑚
Utilizando esta fórmula obtuvimos que la
concentración de hierro en nuestra
muestra de agua residual es de 0.14ppm
y las respectivas concentraciones de los
datos tomados por diez estudiantes de la
tabla a continuación.
TABLA 3
 Concentra
Estudiant Absorbancia( ción
e nm) Real(ppm)
1 0,273 0,995
2 0,274 0,999
3 0,272 0,991
4 0,265 0,965
5 0,261 0,950
6 0,249 0,905
7 0,252 0,916
8 0,249 0,905
9 0,255 0,927
10 0,26 0,946

La tabla presentada nos muestra los

datos tomados a una misma muestra por
diez estudiantes. Utilizando las
ecuaciones anteriores y el uso de
Microsoft Excel obtuvimos los valores
presentados.
TABLA 4
A partir de los datos obtenidos mediante
el uso del espectrofotómetro y el ajuste
lineal de la ecuación se realizaron los
siguientes cálculos presentes en la tabla 4
y unos adicionales que serán explicados a
continuación. En el formato de anexos se
encontraran los datos en un formato de
excel.
PROMEDIO:
𝑛
𝑋𝑖 + 𝑋2 + 𝑋3 + 𝑋𝑛
∑
𝑛
𝑖=1

Al utilizar esta fórmula en Excel obtuvimos

que el promedio de la absorbancia y el
promedio de la concentración fue:
Promedio Absorbancia = 0,261nm
Promedio Concentración: = 0,950ppm
DESVIACIÓN ESTANDAR 𝐸𝑟𝑥 = 3,17%

𝒏 COEFICIENTE DE VARIACIÓN
𝑿𝒊 − 𝑿𝒄
𝑺 = √∑ 𝑺
𝑵−𝟏 𝑽=
𝒊=𝟏 𝑿𝒄

Donde Xc es el promedio de la Realizando los cálculos respectivos y la

concentración. ecuación anterior se obtuvo que nuestro
coeficiente de variación es de 0,0386.
S= 0,0367
𝟎,𝟎𝟑𝟔𝟕
𝑽= 𝟎,𝟗𝟓𝟎
=0,0386.
DESVIACION ESTADAR RELATIVA
𝑺 EXACTITUD
𝑺𝒓 =
𝑿𝒄 𝑬 = 𝟏𝟎𝟎 − 𝑬𝒓
Sr= 3,86% Mediante esta ecuación encontramos que
Tuvimos una desviación estándar del la exactitud de nuestro método de análisis
3,86%, es decir una desviación fue del 96.833% debido a errores que se
relativamente pequeña con un buen grado discutirán en el análisis de resultados.
precisión. PRECISIÓN
ERROR ABSOLUTO 𝑷 = 𝟏𝟎𝟎 − (𝑺 ∗ 𝟏𝟎𝟎)
𝑬𝒂 = |𝑪 − 𝑿𝒄| La precisión del método usado para el
Donde C es la concentración obtenida análisis de hierro en la muestra de agua
mediante el despeje de esta variable de la residual fue del 96.33%.
ecuación lineal. ANÁLISIS DE RESULTADOS
El error absoluto promedio es la media De acuerdo con los datos obtenidos
entre todos los errores absolutos mediante el método de la
obtenidos en la tabla. espectrofotometría podemos observar
𝑬𝒂𝒙 = 𝟎, 𝟎𝟑𝟎𝟎𝟖𝟔 que nuestra muestra de agua residual
tiene una concentración de hierro de
Donde Eax es el error absoluto promedio. 0,14ppm. Según la resolución 0631 de
2015 la concentración máxima de hierro
permitida en ppm de vertimiento de aguas
ERROR RELATIVO residuales para una planta petrolera es de
3 partes por millón (3 ppm). Se encontró
𝑬𝒂
𝑬𝒓 = ∗ 𝟏𝟎𝟎 que en la muestra tomada la
𝑿𝒄 concentración de hierro es de 0,14 partes
Utilizando la fórmula presentada por millón (0,14 ppm) aproximadamente.
encontramos el error relativo en cada uno Esto quiere decir que la planta petrolera
de la toma de datos que se evidencian en cumple con los parámetros establecidos
la Tabla 4. por la ley Colombiana ya que no está
cerca de exceder, ni excede los límites de
El error relativo promedio es la media concentración de hierro permitidos en el
entre todos los errores relativos obtenidos vertimiento de aguas residuales. Al
en la Tabla 4. realizar el análisis estadístico
encontramos que el método usado tuvo antes de tomar como válido
una precisión del 96.33% y una exactitud cualquier dato.
del 96.83%. Es un valor correcto para
REFERENCIAS
poder hacer una comparación efectiva y
real con la normatividad ya que está - Centro de Gestión Ambiental
dentro de los límites de confianza. Al (http://es.scribd.com/doc/4693337
realizar el análisis de la concentración de /ANALISIS-DE-MUESTRAS-
hierro en la muestra se cometieron QUIMICAS#scribd)
errores de tipo instrumental y personales. - Química Analítica Seamus edición
Al medir las cantidades de reactivos al 1, páginas 22-44,2010)
preparar las soluciones patrón se
cometieron errores tales como no medir la
cantidad exacta de reactivos necesarios,
en adición podemos encontrar que el
espectrofotómetro tiene una
incertidumbre en el momento de realizar
la calibración con el blanco, es decir, un
error de carácter aleatorio. Para terminar,
nuestros datos se vieron afectados en su
mayoría por el mal uso del
espectrofotómetro debido a que no se
realizó la correcta calibración del
instrumento.
CONCLUSIONES
- Se obtuvo que la concentración de
hierro en partes por millón (ppm)
de la muestra de agua residual
está dentro de los parámetros
establecidos por la ley.
- Se encontró que el método
espectrofotométrico realizado
para el análisis cuantitativo de la
muestra de agua residual es de
alta precisión y exactitud.
- Se aprendió la importancia del
protocolo de pre-muestreo y
muestreo en el momento de
realizar un análisis sobre la
muestra.
- Al aumentar la concentración de
una muestra se obtendrá una
mayor absorbancia por parte de la
misma.
- Se aprendió que es importante
realizar una correcta calibración