PRÁCTICA N°1

PH Y ACIDEZ GÁSTRICA

Docente:
Dr. Wilson Becerra Llempen

Alumnas:
Rojas Soto Romina
Vargas Tineo Luz

Grupo horario:
8:00-9:30am

Fecha de la práctica:
09/03/2018
 Práctica N°1
PH Y ACIDEZ GÁSTRICA

EXPERIMENTO N° 3: Sofware Physio Ex 6.0. Digestión del almidón por

amilasas salivales.

Objetivo:
Enumerar las enzimas del sistema digestivo involucradas en la digestión de
proteínas, grasas y carbohidratos; para indicar su lugar de origen; y para
resumir las condiciones ambientales que promueven su funcionamiento óptimo.

Actividad 1: Efecto de Amilasa salival sobre el almidón

PRESENTACIÓN DE RESULTADOS

1. Arrastre individualmente siete tubos de ensayo a los soportes de los tubos de ensayo
en la unidad de incubación.

2. Preparar los tubos 1 a 7 con las sustancias Indicadas.

4. Haga clic en Hervir para hervir el tubo 1. Después de hervir por unos momentos, el
tubo se elevará automáticamente.

5.Colocar los 7 tubos a incubar.

6. Ver los resultados de IKI Y Benedic en relación a la temperatura y pH.
ANALISIS DE LOS RESULTADOS

TUBO Reactivo1 Reactivo Reactivo Tratamient Tiemp Temp IKI Benedicts

2 3 o o e
ratura

1 amilasa almidón Buffer Hervir 60 min. 37 °C marrón Azul

ph 7

2 amilasa almidón Buffer 60 min. 37 °C amarillo anaranja

ph 7 do

3 amilasa Agua des Buffer 60 min. 37 °C amarillo Azul

hionizad ph 7
a

4 Agua des almidón Buffer 60 min. 37 °C marrón Azul

 hionizada ph 7

5 Agua des Maltosa Buffer 60 min. 37 °C amarillo anaranja

hionizada ph 7 do

6 amilasa almidón Buffer 60 min. 37 °C marrón Verde

ph 2

7 amilasa almidón Buffer 60 min. 37 °C marrón Verde

ph 9

En los tubos uno, tres y cuatro se observa un color azul, que se demuestra que hay
presencia de almidón según el ensayo IKI.
En los tubos dos, cinco se observa un color marrón rojizo que indica la presencia de
grandes cantidades azúcares reducidos según el ensayo de Benedict.
En los tubos seis y siete se observa un color verde que indica la presencia de azúcares
reducidos pero en menor cantidad que de los tubos dos y cinco según el ensayo de
Benedict.

CONCLUSIONES

En los ensayos enzimáticos realizados pudimos identificar la presencia o ausencia de

los sustratos y productos de dos reacciones enzimáticas de hidrólisis (Hidrólisis del
almidón por la amilasa salival);así como la importancia de la influencia del pH y la
Temperatura en la digestión el cual tiene que ser óptimo para que la reacción química se
lleve en condiciones óptimas y la enzima pueda actuar más efectivamente.
En comparación los tubos 2 y 5 presentan una mayor cantidad de azúcares reducidos
debido a una degradación más efectiva y óptima del almidón que los tubos 6 y 7 pero
todos son resultados positivos por la coloración.

CUESTIONARIO
¿Qué efecto crees que tendrá la ebullición y congelamiento sobre la actividad de
la enzima amilasa?
Las enzimas actúan a una temperatura determinada; si hay una variación en esta puede
probocar:

a) Ebullición: cuando los valores de temperatura son muy altos desnaturalizan la

enzima en este caso la amilasa, no hay producción de hidrólisis y es irreversible.
2.Describe cómo averiguar el pH óptimo para la actividad de la amilasa

La influencia del pH del medio en la actividad enzimática de la α-amilasa, podemos decir

que a pH extremos (es decir, muy ácidos o muy básicos) la enzima no funciona, o al
menos disminuye notablemente su actividad.
Todas las enzimas tienen un pH óptimo, en donde tienen mayor actividad, y a medida
que se alejan de ese pH (para ambos lados) disminuyen su actividad. Esto se debe a que
algunos restos aminoacídicos de las enzimas (en el caso de que sean proteínas) tienen
cargas y pueden ser los responsables tanto de mantener la estructura tridimensional de
la proteína como de interaccionar con el sustrato. El pH del medio (es decir, la presencia
de iones H+ u OH- ) puede modificar las cargas de estos aminoácidos y de este modo
incluso desnaturalizar a la enzima.
Debemos aclarar que aunque la enzima tenga actividad al pH salival de cada persona
(siempre entre 6 y 8) esto no quiere decir que éste sea su pH óptimo. Para determinarlo
experimentalmente, deberíamos haber medido la actividad enzimática a diferentes pH
para realizar una curva, pero no podemos determinar el pH óptimo de la α-amilasa a
partir de los resultados de este TP.

Actividad 2: Efecto de la lipasa y las sales biliares sobre la digestión de

lípidos.

PRESENTACIÓN DE RESULTADOS

1. Colocamos las sustancias indicadas en cada tubo.

2. Incubamos los tubos

3. Esperamos los resultados y medimos el pH de cada tubo

ANALISI DE LOS RESULTADOS

Tubo n° 1 2 3 4 5 6

Reactivos Lipasa Lipasa Lipasa Agua des Lipasa Lipasa

Aceite Aceite vegetal Agua des hionizad Aceite Aceite
vegetal Agua des hionizad a vegetal vegetal
Sales hionizada a Aceite Sales Sales
Biliares Buffer 7 Sales vegetal Biliares Biliares
Buffer 7 Biliares Sales Buffer 2 Buffer 9
Buffer 9 Biliares
Buffer 7

Condicione 37°C 37°C 37°C 37°C 37°C 37°C

s 60 min. 60 min. 60 min. 60 min. 60 min. 60 min.
Incubación

Ph 6,21 6,72 9,00 7,00 2,00 8,97

Color Morado Amarrillomor Azul Morado Rojo Azul

ado
(Interfase)

TUBO IKI Benedicts

1 + Positivo a la prueba del -Negativo a la prueba de azúcares

almidón reductores

2 - Negativo a la prueba del +Positivo a la prueba de azúcares

almidón reductores

3 - Negativo a la prueba del -Negativo a la prueba de azúcares

almidón reductores

4 + Positivo a la prueba del -Negativo a la prueba de azúcares

almidón reductores

5 - Negativo a la prueba del +Positivo a la prueba de azúcares

almidón reductores

6 + Positivo a la prueba del +Positivo a la prueba de azúcares

almidón reductores

7 + Positivo a la prueba del +Positivo a la prueba de azúcares

almidón reductores
 Obtuvimos 5 mezclas homogéneas y 1 mezcla en interfase(tubo2).

La digestión del aceite vegetal por la lipasa liberará ácidos grasos, que disminuirán el
pH de la solución. Para determinar si existe actividad lipasa se utilizó
un medidor de pH que ayudó a detectar la presencia de acidos grasos que evidencia la
digestión.

CONCLUSIONES

Los productos finales de la digestión serían los ácidos grasos.

La bilis (ácidos biliares)se encarga de emulsificar las grasas permitiendo que la lipasa
tenga mayor superficie de acción y más sustrato disponible
La lipasa tiene un ph óptimo en 7 (duodeno) siendo menos activa en otros nivles de ph
del medio e teóricamente activa en la boca.

CUESTIONARIO

1. Describe cómo se mide la actividad de la lipasa en la simulación.

En el experimento se ha medido la actividad de la lipasa de acuerdo a los resultados de

ph debido a que la lipasa actúa a un pH óptimo de 2-6.
El incremento de la acidez del medio, indica actividad de la lipasa debido a que los
productos de su degradación son ácidos.

2. Se puede determinar si se produjo hidrólisis de las grasas en el tubo 5.

La hidrólisis de grasas se da en la optimas condiciones del pH, a diferencia del tubo 5

que realizó una hidrólisis parcialmente , debido a que el pH no era el óptimo.

REFERENCIAS :

Hall,J.(2016).Tratado de Fisiología Médica.España: ELSEVIER.