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FACULTAD: CIENCIAS
ESCUELA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
CARRERA: BIOQUÍMICA Y FARMACIA
1. DATOS GENERALES:
GRUPO No.: 3
2. OBJETIVO(S):
2.1. GENERAL
2.2. ESPECÍFÍCOS
3. MARCO TEÓRICO:
AGENTES ETIOLÓGICOS
- Escherichia coli
- Klebsiella spp.
- Enterobacter spp.
- Serratia spp.
- Enterococus spp.
- Proteus spp.
- Pseudomonas spp.
- Acinetobacter spp.
- Candida spp.
- Staphylococus spp.
- Estreptococo grupo B (imprescindible en embarazadas)
RECOGIDA DE MUESTRAS
- Mujeres:
Obtención de la orina después de separar los labios vaginales de manera que el
chorro de orina no toque genitales externos.
- Hombres:
Retracción del prepucio de manera que el chorro de orina salga directamente.
CULTIVO
- Cled
- Agar cromogénico de orina o
- Agar sangre + agar MacConkey (Levine)
Incubar a 35-37° C en aerobiosis durante 24-48 horas.
- > 100.000 ó más UFC: Uno o dos patógenos: informar identificación más
antibiograma Más de dos especies: informar “cultivo mixto, probable
contaminación”.
SITUACIONES ESPECIALES
2. Orinas obtenidas por técnica invasiva (punción supra púbica o por cistoscopia):
Sembrar siempre con asa calibrada o con pipeta estéril al menos 10 ml.
Incluyendo una placa de agar sangre. Reincubar hasta 48 horas y tomar como
significativo cualquier crecimiento a partir de 100 UFC /ml. La orina de punción
supra púbica es la muestra adecuada para investigación de Anaerobios o de
mycoplasmas genitales. Si se considera procedente o se solicita por el clínico
en una muestra adecuada estas muestras se trabajarán para detección de
estos microorganismos y se informará el resultado.
- Catéteres de Foley.
- Orina de micción o de catéter para anaerobios.
- Orinas de más de 2 horas de su recogida sin conservación adecuada.
5. METODOLOGÍA
- Medio Sólido: AGAR SANGRE, AGAR MUELLER HINTON, AGAR EMB, AGAR
MANITOL.
Al día siguiente se medirán con una regla los halos de inhibición por la parte
trasera de la placa y se realizará la respectiva interpretación con ayuda de las
tablas, donde se determina si existe Sensibilidad (S) o Resistencia (R) al
antibiótico.
- Crecimiento bacteriano
- Cambio de pH y color
- Presencia de movilidad
- Presencia de fermentación
- Producción de gas
- Presencia de actividad enzimática
- Producción de ácido sulfhídrico, etc.
6. EQUIPOS Y MATERIALES:
OBSERVACIONES DESCRIPCION
Se puede observar el crecimiento
colonias medianas blanquecinas y
redondeadas, algunas de estas cepas
pueden producir halos. Se puede
observar que es mayor a 100000 UFC/
ml por lo que se diagnosticara una
infección y por la caacterisitcas será de
la especie de Escherichia coli
AGAR MACCONKEY
En este medio podemos observar
claramente el cambio de color a un
fucsia no tan intenso por lo que se puede
decir que la especie es Escherichia coli
inactiva que se indica por el color
TINCION GRAM
En la tinción gram se observó
diplococos gram negativos por el color
rosado en una cantidad de abundante
por el campo
PRUEBA DE CATALASA
La prueba de catalasa es positiva por lo
que nos indicara la presencia de
enterobacterias.
PRUEBA DE OXIDASA
La prueba Oxidasa nos dio negativas
descartando la presencia de
pseudomonas
PRUEBA SIM
La prueba de Sim nos dio como
resultado positivo debido a su viraje de
color blanco al negro la presencia de gas
y movilidad positiva
PRUEBA DE CITRATO
PRUEBA DE UREA
ANTIBIOGRAMA
8. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:
8.1 Conclusiones
Se determinó que el urocultivo es una técnica empleada para el análisis de
orina y mediante esta verificar gérmenes patógenos que afecten el tracto
urinario
8.2 Recomendaciones
Explicar al paciente que la toma de muestra de orina se realizara en un
frasco estéril y se deberá tomar del segundo chorro de la micción
9. BIBLIOGRAFÍA:
Ban KM, Easter JS. Selected urologic problems. In: Marx JA, Hockberger
RS, Walls RM, et al, eds.Rosen's Emergency Medicine: Concepts and
Clinical Practice. 7th ed. Philadelphia, PA: Elsevier Mosby; 2009:chap
97.
https://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003751.htm
10. ANEXOS
Cuestionario de evaluación
Fundamento
es un medio de cultivo diferencial para aislar y contar las bacterias presentes en la orina.
Favorece el crecimiento de los patógenos y contaminantes urinarios aunque, debido a la
ausencia de electrolitos, impide la indebida proliferación de especies de Proteus.
PRINCIPIOS Y EXPLICACION DEL PROCEDIMIENTO Método microbiológico. En
1960, Sandys publicó el desarrollo de un nuevo método para prevenir la proliferación de
Proteus en medios sólidos mediante la restricción de electrolitos en un medio de cultivo
que posteriormente se modificó en varias ocasiones para utilizarlo en los cultivos de
orina1-3. Se designó como medio Cystine-Lactose-Electrolyte-Deficient (CLED) y se
proclamó que resultaba ideal para las técnicas de sumersión del inóculo y para la
bacteriología urinaria en general. La gelatina, las peptonas de caseína y el extracto de
carne bovina constituyen los nutrientes del BD CLED Agar. Se incluye lactosa en el
medio con el objeto de proporcionar una fuente de energía para los microorganismos
capaces de utilizarla a través de un mecanismo de fermentación. Como indicador del pH
se utiliza azul de bromotimol, para diferenciar los microorganismos fermentantes de
lactosa y los no fermentantes. Los primeros reducen el pH y modifican el color del
medio, pasando éste de verde a amarillo. La cistina permite el crecimiento de "colonias
enanas" de coliformes3 . Se reducen las fuentes de electrolitos con objeto de minimizar
la proliferación de las especies de Proteus. De este modo, el medio permite la
determinación cuantitativa de los patógenos urinarios, incluido el Proteus, si se emplean
asas calibradas para la inoculación
Composición
Agar-hierro-triple azúcar
Es un medio de cultivo. Gracias a su composición es uno de los medios de cultivo más
empleados para la diferenciación de enterobacterias según:
1. Fermenten o no glucosa.
2. Fermenten o no lactosa o sacarosa.
3. Produzcan o no ácido sulfhídrico.
4. Produzcan o no gas.
Composición
Peptona 15 g
Extracto de levadura 3 g
Extracto de carne 3g
Sacarosa 10 g
Sulfato de hierro 0,20 g
Cloruro sódico 5g
Tiosulfato de sodio 0,30 g
Rojo fenol 0,024 g
Desventajas
Requiere cultivo puro
Se demora 24h
Dosis o tiempo de administración insuficiente o un intervalo de dosis inadecuado.
Fármaco elegido no apropiado para la sepsis. Por ejemplo; penicilina en una sepsis
nosocomial.
Infecciones no producidas por bacterias o procesos no infecciosos como: vasculitis o
linfomas.
Aparición de cepas resistentes.
Déficit en el drenaje de colecciones purulentas o no extracción de cuerpos extraños
presentes.
Caso clínico:
Niña de 12 años que consulta por realizar orinas dolorosas en las últimas 24 horas.
Fiebre de 40°C, abundante sed, presencia de nitritos, leucocitos, en el examen físico.