UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

SEMANA N° 4

TEMA: CRECIMIENTO MICROBIANO

CURSO : Biotecnología

CICLO : IX

GRUPO DE PRÁCTICAS : Lunes – martes (1:20 a 2:00) p.m.

DOCENTE DE PRÁCTICA : QF. Dr. Robert Almonacid

Q.F. Dr. Nelson Bautista

ELABORADO POR : Avalos Champa, Angie

Cayo Llufire, Carmen

Granados Conde, Linsay

Soto Soto, Katherine

A. Introducción
En microbiología, la palabra “crecimiento” se define como un incremento en el número
de células o de masa celular por unidad de tiempo de una población microbiana. 1
La siguiente figura muestra una curva típica de crecimiento de una población bacteriana
en un sistema de crecimiento cerrado (sin aporte continuo de nutrientes) y con un medio
de cultivo que aporta todos los nutrientes necesarios. Esta curva se divide en varias
partes: fase de latencia, fase de crecimiento exponencial, fase estacionaria y fase de
muerte. 2

Figura 1: curva de crecimiento bacteriano

Fase de latencia: es el tiempo que tarda una bacteria determinada en adaptarse al

medio de cultivo y las nuevas condiciones ambientales.
Fase exponencial: la población crece al ritmo máximo de forma que cada célula se
divide originando dos células, estas dos darán cuatro, y así sucesivamente,
duplicándose la población en cada período divisional o tiempo de generación (o tiempo
de duplicación), típico de cada cepa bacteriana para unas condiciones de cultivo dadas.
Al representar el logaritmo del número de células viables respecto al tiempo, se obtiene
una línea recta.
Fase estacionaria: en un cultivo donde no hay renovación del medio de cultivo, los
nutrientes se agotan y se acumulan productos metabólicos tóxicos, con lo que el
crecimiento de la población se ralentiza e incluso se detiene.
Fase de muerte: si se prolonga el cultivo, se llega a una situación en que las células
mueren, disminuyendo el número de células viables. 1
Finalidad de la curva de crecimiento.3

 Analizar cómo crecen los cultivos bacterianos es crucial para poder

trabajar con estos microorganismos.
 Determinar la velocidad de crecimiento para obtener la mayor cantidad
de biomasa.
 Definir el tiempo de crecimiento de los microrganismos.
B. Marco teórico

Adaptabilidad y variabilidad de respuestas microbianas. Implicaciones

sobre la microbiología predictiva

El proceso de adaptación de los microorganismos a las condiciones del

medio en que se encuentran depende de varios factores como es el caso de
la composición del medio mismo o del estado fisiológico de la cepa, entre
otros. Por eso, la variabilidad de las respuestas microbianas influye de
manera distinta en la predicción de la cinética de los microorganismos.

Dichas respuestas de los microorganismos a las condiciones de crecimiento

pueden ser evidenciadas a través de sus parámetros de crecimiento como
son el tiempo de latencia, tiempo de generación y la velocidad de
crecimiento.1

Influencia de los factores ambientales sobre el crecimiento bacteriano

Los alimentos son ecosistemas complejos. Los ecosistemas están

constituidos por el medio ambiente y los organismos que viven en él. El
ambiente de un alimento está constituido por factores intrínsecos inherentes
al alimento (por ejemplo, el pH, la actividad de agua y los nutrientes) y
factores extrínsecos a él (por ejemplo, la temperatura, la composición del
aire, o la presencia de otras bacterias).4

C. Objetivos
Objetivo principal
 Analizar las fases del crecimiento microbiano

Objetivo secundarios
 Analizar las fases del crecimiento microbiano de E. coli en el
birreactor.
 Determinar las absorbancias en diferentes tiempos.

D. Metodología
Para obtener la curva de crecimiento de E. coli.
 Inocular E.coli en caldo TSB llevar al biorreactor de laboratorio.
 Controlar los siguientes parámetros:
Velocidad de agitación
Temperatura: 37°C
pH: 5.17
  Para realizar la curva de crecimiento se necesitan de las absorbancias
y los tiempos.
 Dejar crecer y tomar un volumen cada minuto y llevar a leer al
espectrofotómetro a 550nm.

E. Resultados

Hora Tiempo( horas) Absorbancia

10:45 00 0.24
11:45 1 0.253
01:45 2 0.795
02:05 2:20 0.906
03:15 3:30 1.079
03:30 3:45 1.117
03:45 4:00 1.1
04:00 4:15 1.094

Figura 2: curva de crecimiento de E coli.

F. Discusión

Los resultados muestran en la figura 2 que al tiempo de (4:15 horas) del

estudio se logró obtener las tres primeras fases de crecimiento de
Escherichia coli. En la fase I, la bacteria metaboliza, pero no se multiplica, en
la fase II la bacteria muestra un crecimiento exponencial o logarítmico,
mientras que en la fase III (fase estacionaria) la concentración celular se
mantiene relativamente constante.5 La fase IV (de muerte) no se aprecia pues
las bacterias muertas y los desechos de su metabolismo quedan
suspendidos en el medio, manteniendo el grado de turbidez y por ende no se
produce una variación perceptible de la respuesta en tensión.5
Los resultados obtenidos en la práctica muestran que la fase Lag se
intensifica a los 120 minutos; la fase “lag” representa el tiempo necesario para
reiniciar el ciclo celular después de un periodo de ayuno nutrimental. Un
cultivo bacteriano generalmente se inicia al inocular el medio de cultivo con
un número pequeño de bacterias en FS. En los primeros minutos posteriores
al inicio del cultivo, se recupera el nivel normal de tensión helicoidal del DNA
e incrementa la expresión de los genes importantes para el crecimiento.
Posteriormente, entre los 30 y 40 minutos, se reinicia la replicación del
cromosoma y a los 80-120 minutos se presenta la primera división de la
mayoría de las células.6
Los parámetros como temperatura, pH, velocidad de agitación y la
concentración de oxígenos son muy importantes a la hora de realizar el
crecimiento, ya que si no se controlan estos el tiempo de crecimiento puede
extenderse.

G. Conclusión

 El ensayo permitió obtener una curva de crecimiento similar a las que

han sido reportadas, observándose, las tres fases del crecimiento
detectables con el método espectrofotométrico de microorganismo E.
coli.

H. Referencias bibliográficas

1. Eduardo, A. J. D. S. Estudio del comportamiento cinético de microorganismos

de interés en seguridad alimentaria con modelos matemáticos.2008
2. Zwietering, M., Jongenburger, I., Rombouts, F., & Van Riet, K. Modeling of the
Bacterial Growth Curve. Applied and Enviromental Microbiology, 1990: 56(6),
1875–1881.
3. Nester, E. W., Anderson, D. G., Roberts, E. C., Pearsall, N. N., & Nester, M.
T. Microbiology: A Human Perspective (4th ed.).2004
4. Montville, T. J. Principios que influyen en el crecimiento, la supervivencia y la
muerte microbiana en los alimentos. In: Doyle, M. P.; Beuchat, L.R.; and
Montville, T. J. (2000). Microbiología de los Alimentos. Fundamentos and
Fronteras. Editorial Acribia, S.A. Zaragoza (España).2000:13 – 30.
5. Riverón-Rodríguez, E., Ramírez-Frómeta, N., & Regueiro-Gómez, Á.Sistema
Multisensor para el diagnóstico de la calidad de productos
lácteos. Sistema.2010: 41.
6. Santos, A. R., Ferrat, G. C., & Eichelmann, M. La fase estacionaria en la bacteria
Escherichia coli. Rev. Latinoamericana Microbiología, 2005:47, 92-101.